離子液體頂空單滴微萃取分析中藥中的高沸點(diǎn)揮發(fā)性成分

1、離子液體頂空單滴微萃取分析中藥中的高沸點(diǎn)揮發(fā)性成分         11-04-22 13:54:00     作者：何小穩(wěn) 蔣曄 劉彥    編輯：studa20【摘要】  建立了分析中藥中高沸點(diǎn)揮發(fā)性成分的離子液體頂空單滴微萃取液相色譜法，并用于復(fù)方鮮竹瀝液中愈創(chuàng)木酚的含量的測(cè)定。采用改進(jìn)的懸滴裝置，增大了液滴與微量進(jìn)樣器針尖處塑料套管的接觸面積，使離子液體的液滴達(dá)12 L，提高了液滴的穩(wěn)定性及方法的靈敏度。考察并優(yōu)化了影

2、響萃取的因素，確定了萃取條件：以12 L 1丁基3甲基咪唑基六氟磷酸鹽(PF6)為懸滴，在5 mL含36%(w/V)NaCl的樣品溶液中，萃取溫度80 、攪拌速度1000 r/min的條件下，頂空萃取30 min，萃取后直接將液滴吸回微量進(jìn)樣器，進(jìn)行HPLC檢測(cè)。愈創(chuàng)木酚在0.051.6 mg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=0.9997); 檢出限為0.39 g/L，愈創(chuàng)木酚的加樣回收率為97.6%，RSD為2.5%。本方法操作簡(jiǎn)單、定量準(zhǔn)確，樣品前處理簡(jiǎn)單，成本低，無(wú)污染。 【關(guān)鍵詞】  離子液體; 頂空單滴微萃取; 高沸點(diǎn)揮發(fā)性成分; 復(fù)方鮮竹瀝液; 愈創(chuàng)木酚1 引 言分析中藥及其制

3、劑中常含有的一些具有重要活性的揮發(fā)性成分，常需采用一定的樣品前處理方法進(jìn)行提取分離及純化，再用色譜法測(cè)定。傳統(tǒng)的提取方法1有溶劑萃取法、水蒸氣蒸餾法、揮發(fā)油提取法和超聲萃取法等。另外還有一些新方法，如頂空氣相色譜法2和固相微萃取技術(shù)3等。但這些方法均存在一些缺點(diǎn)，如揮發(fā)油提取法中有機(jī)溶劑用量大，提取時(shí)間長(zhǎng)，操作步驟繁雜，易造成揮發(fā)性成分的損失等;固相微萃取則存在探頭壽命短，成本較高，交叉污染等問(wèn)題。單滴微萃取(SDME)4是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種萃取裝置簡(jiǎn)單、成本低、溶劑用量少、操作簡(jiǎn)便快速的樣品前處理技術(shù)，與色譜技術(shù)聯(lián)用方便，應(yīng)用廣泛。但SDME也存在如萃取溶劑多為有機(jī)溶劑， 萃取液滴體積小，

4、 易揮發(fā)， 不易高溫萃取， 萃取維持時(shí)間短等缺點(diǎn)。離子液體是一種新型溶劑，具有非揮發(fā)性、熱穩(wěn)定性強(qiáng)、粘度和密度大等特點(diǎn)57，用作SDME的萃取劑，避免了傳統(tǒng)有機(jī)溶劑易揮發(fā)，萃取液滴體積小，不易長(zhǎng)時(shí)間高溫萃取等缺點(diǎn)。Manzoori等8將SDME的微量進(jìn)樣器針頭處的塑料套管下端用熱的銅線燙出4個(gè)凹槽，使離子液體C4MIMPF6液滴增大到7 L，用于水樣和食物中Pb的測(cè)定。本研究進(jìn)一步改進(jìn)了懸滴裝置，將微量進(jìn)樣器下端的塑料套管用火燒制成一端凸起的圓餅狀，增大了懸掛的離子液體與套管的接觸面積，將液滴PF6增加至12 L，提高了液滴的穩(wěn)定性及方法的靈敏度， 頂空單滴微萃取可在高溫下較長(zhǎng)時(shí)間地懸掛較大體

5、積的液滴。利用所建的離子液體頂空單滴微萃取液相色譜法測(cè)定了復(fù)方鮮竹瀝液9中高沸點(diǎn)的有效成分愈創(chuàng)木酚的含量，避免了采用繁瑣費(fèi)時(shí)的揮發(fā)油提取法或傳統(tǒng)的溶劑(乙醚)萃取法1012，操作簡(jiǎn)單快速，可直接進(jìn)樣分析測(cè)定，結(jié)果準(zhǔn)確，環(huán)境友好。改進(jìn)的離子液體頂空單滴微萃取方法有望應(yīng)用于藥物中的高沸點(diǎn)揮發(fā)性成分的測(cè)定。2 實(shí)驗(yàn)部分2.1 儀器與試劑Series 200 LC pump高效液相色譜儀(PERKIN ELMER公司)，UV檢測(cè)器(Applied Biosystems 785A);HW2000色譜工作站(上海千譜軟件有限公司);DF集熱式磁力攪拌器(金坊市富華儀器有限公司);MICROLITER#70

6、2微量進(jìn)樣器(25 L，美國(guó)Hamilton公司);圓柱形樣品瓶(6.4 cm×1.6 cm);圓柱形攪拌子(1.0 cm×0.5 cm)。愈創(chuàng)木酚(批號(hào)：111510200502，中國(guó)藥品生物制品檢定所);復(fù)方鮮竹瀝液(批號(hào)：0901004，0903021，0904029，江西匯仁藥業(yè)有限公司);1丁基3甲基咪唑基六氟磷酸鹽(PF6，上海成捷化學(xué)有限公司);冰醋酸(天津市北宏試劑廠)。甲醇為色譜純，水為重蒸水。2.2 頂空單滴微萃取(HSSDME)頂空單滴微萃取裝置如圖1。微量進(jìn)樣器下端的塑料套管(0.6 mm i.d，1 mm o.d)燒制成一端凸起的圓餅狀(3.5 m

7、m o.d)，以增大懸掛的離子液體與套管的接觸面積，從而增大液滴體積及其穩(wěn)定性。 圖1 頂空單滴微萃取裝置示意圖取1.8 g NaCl，5 mL樣品液及攪拌子放入帶聚四氟乙烯塞的樣品瓶中，用25 L微量進(jìn)樣器精密吸取12 L PF6，穿透聚四氟乙烯塞后，在進(jìn)樣器針頭裝上改進(jìn)后的塑料套管，密封。將離子液體輕輕推出，使其在距液面1 cm處形成液滴，在萃取溫度80 、攪拌速度1000 r/min的條件下，頂空萃取30 min，萃取后直接將液滴吸回，進(jìn)樣HPLC分析檢測(cè)。2.3 色譜條件Kromasil C18色譜柱(150 mm×4.6 mm， 5 m)。流動(dòng)相：1%冰醋酸甲醇(7030,

8、 V/V);流速：1.0 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)：274 nm;柱溫：室溫。2.4 對(duì)照品溶液和供試品溶液的配制準(zhǔn)確稱取愈創(chuàng)木酚對(duì)照品約10 mg于1000 mL容量瓶中，加水溶解并定容，配制成10.08 mg/L愈創(chuàng)木酚的對(duì)照品儲(chǔ)備液。精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液5 mL于10 mL容量瓶中，加水稀釋并定容，得對(duì)照品溶液。準(zhǔn)確移取復(fù)方鮮竹瀝液1 mL于50 mL容量瓶中，加水溶解并定容，得供試品溶液。3 結(jié)果與討論3.1 頂空微萃取條件的優(yōu)化以12 L PF6為萃取劑，在上述條件下，考察了攪拌速度(250，500，750，1000和1250 r/min)對(duì)愈創(chuàng)木酚的萃取效率的影響。結(jié)果表明，隨著攪拌速度的增加，愈創(chuàng)木酚的萃取效率越高，但在1000 r/min已基本達(dá)到萃取平衡，最終選擇1000 r/min為理想的攪拌速度。在上述