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文檔簡介

1、(一)基因工程1. 基因工程又叫 或。原理是,操作水平是 水平。優(yōu)點: ;定向地改造生物的遺傳性狀。2. “分子手術刀” 一一 ,主要從中分離純化岀來,能使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的 斷開,其特點具有 性。經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式: 、。3. EcoliDNA連接酶和T4-DNA連接酶都縫合 。E coliDNA連接酶只能連接 末端;而T4DNA連接酶能縫合兩種末端,但連接平末端的之間的效率較 。4運載體具備的條件:能夠穩(wěn)定保存并;有一至多個酶切位點含有,便于篩選。對受體細胞無害。最常用的載體是,其它載體:5基因工程的基本操作程序 6.基因文庫包括 、。PCR是

2、的縮寫,原理。此外如果基因比較小,核苷酸序列也已知,可以通過直接人工合成。7基因表達載體的組成 、 、 。標記基因的作用。8將目的基因導入植物細胞:采用最多的方法是 ,其次還有 等。將目的基因導入動物細胞最常用的方法是 。此方法的受 體纟田胞多是。9將目的基因導入微生物細胞, 其轉化方法是:先用處理細胞,使其成為再將重組表達載體 DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合,在一定的溫度下促進感受態(tài)細胞吸收 DNA分子,完成過程。10. 檢測目的基因是否表達,用相應的抗體進行。有時還需進行生物學水平的鑒定。11. 科學家為得到乳腺生物反應器,將藥用蛋白基因與 等調控組件重組在一起,通過等方法導入哺乳

3、動物的受精卵中,然后將受精卵送入母體,使其生長發(fā)育為轉基因 動物,該動物能夠分泌乳汁來生產(chǎn)藥物。12. 基因工程在原則上只能生產(chǎn) 的蛋白質,蛋白質工程師在 的基礎上,延伸岀來的第二代基因工程?;就緩绞牵簭念A期的蛋白質功能岀發(fā)T設計預期的 T推測應有的序列-找到相對應的序列。(二)細胞工程13. 植物組織培養(yǎng)技術(1)原理: (2)過程:的植物器官、組織或細胞經(jīng)過培養(yǎng)岀愈傷組織,愈傷組織在一定的培養(yǎng)條件下 為幼根和芽。常用的植物激素 和14. 植物體細胞雜交去除細胞壁的方法: ,需要的酶有 、;誘導融合的方法:物理法包括等?;瘜W法是用作為誘導劑。15. 動物細胞工程中常用的技術手段有 、,其中

4、是其他技術的基礎。16.動物細胞培養(yǎng)的流程:取動物組織塊-剪碎-用 或處理分散成單個細胞-制成細胞懸液T轉入培養(yǎng)瓶中進行 培養(yǎng)貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)培養(yǎng)。17. 懸液中分散的細胞很快就貼服在瓶壁上,稱為 。細胞數(shù)目不斷增多,當貼壁細胞分裂生長到表面接觸時,細胞就會停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為 。18. 動物細胞培養(yǎng)通常要在培養(yǎng)液中添加一定量的 ,以防培養(yǎng)過程中的污染。培養(yǎng)基成分有糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽等。通常需加 等天然成分。細胞培養(yǎng)所需氣體中02是細胞代謝所必需的,C02的主要作用是。19. 哺乳動物核移植可以分為 核移植(比較容易)和 核移植(比較難)。2

5、0. 動物細胞融合也稱 ,原理是 。誘導動物細胞融合方法與植物原生質體融合方法類似,常用的誘導因素有 、等。動物細胞融合的意義:克服了,成為研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和生物新品種培育的重要手段。21. 單克隆抗體的制備過程:給小鼠注射-分離岀培養(yǎng)骨髓瘤細胞-骨髓瘤細胞()培養(yǎng)基克隆專一抗體檢測陽性細胞體內培養(yǎng)體外培養(yǎng)*單克隆抗體22. 雜交瘤細胞的特點:既能大量 ,又能產(chǎn)生 。單克隆抗體的優(yōu) 占:八、(三)胚胎工程23. 胚胎工程是指對動物 或所進行的多種顯微操作和處理技術,如、等技術。24. 精子的發(fā)生的場所: ,時間: 至生理機能衰退。精子變形過程中 變?yōu)榫拥念^部的主要部分;高爾基體發(fā)

6、育為 ; 演變?yōu)榫拥奈?;線粒體聚集在尾的基部形成,其他物質濃縮為球狀的 ,最后脫落。25. 卵子發(fā)生過程中:減數(shù)第一次分裂發(fā)生在 (時候),減數(shù)第二次分裂發(fā)生在 過程中。26. 受精場所是 。剛排出的精子,不能立即與卵子結合,必須進行 。排出的卵子要在輸卵管內進一步成熟,當達到 時,才具備與精子受精的能力。27. 精子穿越放射冠和 ,進入,形成和配子結合。和是防止多精入卵的兩道屏障。判斷卵子是否受精的標志 是。28. 卵母細胞的采集和培養(yǎng):對實驗動物如小鼠、兔以及家畜豬、羊等,等,用處理,從輸卵管沖取卵子(可直接受精);對大家畜或大型,如牛,從 中采集卵母細胞(要在體外培養(yǎng)成熟)。29. 精

7、子獲能獲能的方法有兩種:對嚙齒動物、家兔和豬等動物的精子,一般采用法;對牛、羊等家畜的精子,常采用法,即將精子放在一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液中,誘導獲能。30. 體外受精:可在 溶液或專用的受精溶液中完成受精過程。31. 早期胚胎培養(yǎng):培養(yǎng)液的成分除一些無機鹽和有機鹽類外,還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分,以及等物質。32. 是胚胎工程其他技術的最后一道“工序”。胚胎移植大大縮短了供體本身的繁殖周期,充分發(fā)揮雌性。33. 胚胎移植的操作程序中要用 進行對受體和供體母牛進行,用對供體母牛做 處理。配種或輸精后第 7天,用特制的沖卵裝置,把供體母牛子宮內的早期胚胎沖洗

8、出來(也叫)。對胚胎進行質量檢查,此時的胚胎應發(fā)育到 階段。34. 胚胎分割使來自同一胚胎的后代具有 的遺傳物質,屬于繁殖。胚胎分割時應選取發(fā)育良好,形態(tài)正常的 或。對囊胚階段的胚胎分割時要注意將 均等分割,否則影響分割后胚胎的進一步發(fā)育。35. 哺乳動物的胚胎干細胞簡稱 細胞,是由 或中分離出來的一類細胞,具有胚胎細胞的特性,在形態(tài)上表現(xiàn)為體積 ,細胞核,核仁明顯;在功能上,具有發(fā)育的 ,可分化為成年動物體內任何一種組織細胞。選修3測試答案1. 基因拼接技術DNA重組技術基因重組分子 打破物種界限2. 限制性核酸內切酶(限制酶)原核生物 磷酸二酯鍵 專一(特異)黏性末端平末端3磷酸二酯鍵黏性

9、低4. 復制 限制酶 標記基因 質粒 入噬菌體的衍生物、動植物病毒5. 目的基因的獲取基因表達載體的構建目的基因導入受體細胞目的基因的檢測與鑒定6. 基因組文庫、cDNA文庫 多聚酶鏈式反應7 目的基因 啟動子 終止子標記基因因的細胞篩選出來8. 農桿菌轉化法基因槍法花粉管通道法9. Ca2+感受態(tài)細胞轉化10. 抗原-抗體雜交個體11. 乳腺蛋白基因的啟動子顯微注射12. 自然界已存在基因工程蛋白質結構13. 植物細胞的全能性離體 脫分化 再分化DNA雙鏈復制化學方法鑒別受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基顯微注射法受精卵氨基酸 脫氧核苷酸生長素細胞分裂素14. 酶解法 纖維素酶 果

10、膠酶離心、振動、電激聚乙二醇(PEG)15. 動物細胞培養(yǎng)、動物細胞核移植、動物細胞融合、生產(chǎn)單克隆抗體等動物細胞培養(yǎng)16. 胰蛋白酶或膠原蛋白酶原代 傳代17.細胞貼壁細胞的接觸抑制18. 抗生素 血清、血漿維持培養(yǎng)液的pH19. 胚胎細胞體細胞20. 細胞雜交細胞膜的流動性PEG、滅活的病毒、電激遠緣雜交的不親和的障礙21特定抗原蛋白B淋巴細胞雜交細胞選擇雜交瘤細胞專一抗體檢測22. 增殖 專一的抗體特異性強,靈敏度高,并能大量制備23. 早期胚胎配子胚胎移植、體外受精、胚胎分割、胚胎干細胞培養(yǎng)24. 睪丸初情期 細胞核 頂體中心體線粒體鞘原生質滴25. 排卵前后受精作用26. 輸卵管精子獲能減數(shù)第二次分裂中期時期27. 透

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