四物膠囊水提工藝優(yōu)化研究

1、四物膠囊水提工藝優(yōu)化研究    【摘要】  目的 確定四物膠囊的水提取最佳工藝。方法 采用正交試驗(yàn)法，以浸膏的得量及芍藥苷的提取量為指標(biāo)優(yōu)選提取工藝。結(jié)果 以提取2次，每次用10倍量的水煎煮2 h為最佳提取工藝。結(jié)論 優(yōu)選的工藝穩(wěn)定、可行。 【關(guān)鍵詞】  四物膠囊；浸膏；白芍；芍藥苷；提取工藝；正交設(shè)計(jì)四物膠囊是由熟地黃、當(dāng)歸、白芍藥、川芎4味中藥組成，具有調(diào)經(jīng)養(yǎng)血功能，用于營(yíng)血虛弱，月經(jīng)不調(diào)。論文論文參考網(wǎng)早在仙授理傷續(xù)斷秘方中就將其方稱為“補(bǔ)血之專方，調(diào)經(jīng)之良劑”。方中白芍味苦、酸，性涼，入肝脾二經(jīng)，有養(yǎng)血柔肝，緩中止痛，斂陰收汗

2、之功效1?3。傳統(tǒng)提取工藝參照“四物合劑”的提取方法，制備較為繁瑣，因此，我們?cè)趨⒄赵に嚨幕A(chǔ)上對(duì)水提取工藝中加水倍數(shù)和煎煮時(shí)間進(jìn)行了正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)，以干膏重量和芍藥苷作為指標(biāo)綜合考慮來(lái)選擇處方的最佳提取工藝，報(bào)告如下。1  實(shí)驗(yàn)材料    儀器：LC?10AD高效液相色譜儀，SPD?10A(SHIMADZU)紫外可見(jiàn)分光檢測(cè)器，LC?10AD(SHIMADZU) LIOUID CHROMATOGRAPH，HW?2000色譜工作站(SHIMADZU)；HT?230A柱溫箱(COLUMN HEATER)；C?21色譜數(shù)據(jù)采集單位；島津UV?2401紫外掃描

3、儀；ELECTRONIC BABANCE(AY220，SHIMADZU CORPORATION)；Mettler M3電子天平(精度為0.001 mg)；Mettler AE100電子天平(精度為0.0001 g)；DZF?6050型真空干燥箱(上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司)。藥材：所用藥材均購(gòu)于安徽亳州藥材市場(chǎng)；芍藥苷對(duì)照品：購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所(批號(hào)：110736?200526)；乙腈為色譜純，水為二次重蒸水處方：熟地黃250 g，當(dāng)歸250 g，白芍藥250 g，川芎250 g。2  實(shí)驗(yàn)方法2.1  工藝條件的選擇  分別稱取處方量藥材，共9份。分別

4、加入8、10、12倍水煎煮2次，每次分別為1、2、3 h，合并煎煮液，濾過(guò)，濾液濃縮，減壓(溫度60±2，壓力0.070.095 mPa)干燥得干浸膏，稱重，結(jié)果見(jiàn)表1、表2、表3。2.2  含量測(cè)定2.2.1  對(duì)照品溶液的制備  精密稱取芍藥苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1 mL含60 g的溶液，即得。2.2.2  供試品溶液的制備  取樣品各約0.5 g，精密稱定，置50 mL量瓶中，加甲醇40 mL，超聲提取20 min，放冷，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液。表1  因素水平表（略）表2  L9(34)

5、試驗(yàn)設(shè)計(jì)和計(jì)算表（略）表3  方差分析表（略）注：#P0.05，#P0.012.2.3  檢測(cè)波長(zhǎng)的確定  根據(jù)芍藥苷對(duì)照品的紫外掃描圖譜，并結(jié)合所查閱的相關(guān)文獻(xiàn)，選擇芍藥苷的檢測(cè)波長(zhǎng)為230 nm4?5。2.2.4  色譜條件  色譜柱：Hypersil?C18(200 mm×4.6 mm)，流動(dòng)相：乙腈0.1%磷酸(1486)，流速：1 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)：230 nm。論文參考網(wǎng)2.2.5  標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備  精密稱取芍藥苷對(duì)照品1.67 mg，置25 mL量瓶中，加甲醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別從中

6、精密吸取2、5、10、12、15 L注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以峰面積積分值為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果，回歸方程為Y=786.25X+7.498,r=0.9999(n=5)，且在進(jìn)樣量為0.1341.002 g范圍內(nèi)峰面積與進(jìn)樣量呈良好的線性關(guān)系。2.2.6  精密度試驗(yàn)  精密吸取上述芍藥苷對(duì)照品溶液10 L，按上述色譜條件重復(fù)進(jìn)樣5次，依法測(cè)定芍藥苷峰面積，RSD為0.68%(n=5)，表明儀器的精密度符合要求。2.2.7  穩(wěn)定性試驗(yàn)  分別取上述對(duì)照品溶液和供試品液，置于室溫下，分別于第0，2，6，8，12 h吸取10 L測(cè)定

7、。結(jié)果表明，對(duì)照品和供試品測(cè)定溶液在12 h內(nèi)峰面積值基本一致，對(duì)照品溶液的RSD為0.37%(n=5)，供試品溶液的RSD為0.85%(n=5)，說(shuō)明對(duì)照品和供試品測(cè)定溶液12 h內(nèi)穩(wěn)定。2.2.8  測(cè)定方法 分別精密吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液各10 L，按照上述色譜條件注入液相色譜儀中，記錄峰面積，數(shù)據(jù)及結(jié)果見(jiàn)表2、表3。3  討論3.1  原“四物合劑”的制備工藝中只明確了白芍、熟地黃與川芎、當(dāng)歸的水蒸氣蒸餾后的殘?jiān)逯蟮奶崛〈螖?shù)為3次，甚為費(fèi)時(shí)且不經(jīng)濟(jì)。初步實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示提取2次即能達(dá)到最好的提取效果。因此，我們?cè)诒３衷泄に嚐o(wú)質(zhì)量改變的基礎(chǔ)上，對(duì)原提取

8、工藝進(jìn)行了細(xì)化研究，正交實(shí)驗(yàn)考察了藥材提取的時(shí)間，水的不同用量對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。并且在原標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上增加了芍藥苷的HPLC檢測(cè)作為定性指標(biāo)，使其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)較四物合劑有了較大提高，滿足了安全有效，質(zhì)量可控的要求。3.2  方差分析結(jié)果可以看出，提取時(shí)間(A因素)對(duì)正交試驗(yàn)的結(jié)果影響較大，而水的用量影響不是很顯著。且使用10倍量的水，煎煮2 h芍藥苷得量及干膏得量均較大，所以，選擇最佳提取工藝為A2B2。即提取工藝最終是煎煮提取2次，每次用10倍量的水，煎煮2 h為最佳提取工藝。3.3  芍藥苷的含量測(cè)定方法，我們?cè)趨⒄账幍湟?guī)定的基礎(chǔ)上，優(yōu)化出符合本提取工藝的高效液相色譜條件6?

9、7?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】  1中華人民共和國(guó)國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典S.一部.北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:68,422.2張 東,朱珊梅,李 松.高效液相色譜法測(cè)定消疬()糖漿中芍藥苷含量J.吉林中醫(yī)藥,2008,28(5):364?365.3張軍亞,馮廣平.HPLC法測(cè)定女金膠囊中芍藥苷的含量J.藥品評(píng)價(jià),2004,1(5):368?370.4黃 亮,黃勇斌,張樂(lè)佳.HPLC法測(cè)定四物膠囊中芍藥苷的含量J.中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2008,5(14):31?32.5聶愛(ài)國(guó),郭立瑋.均勻設(shè)計(jì)在白芍提取工藝中的應(yīng)用J.中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志,2005,12(12):51?52.6徐 玉,殷仁亭.延胡索有效部位提取工