(二)血液標(biāo)本的采集和血涂片的制備 - 副本

1、血液一般檢查血液一般檢查血常規(guī)血常規(guī)(RT): 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC)、血紅蛋白、血紅蛋白(Hb)、 白細(xì)胞計(jì)數(shù)白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)、 血小板計(jì)數(shù)血小板計(jì)數(shù)(PLT)。 血涂片白細(xì)胞分類血涂片白細(xì)胞分類(DC)及形態(tài)、紅細(xì)及形態(tài)、紅細(xì)胞形態(tài)及寄生蟲及白血病細(xì)胞。胞形態(tài)及寄生蟲及白血病細(xì)胞。觀察紅細(xì)胞疾病的常用指標(biāo)：觀察紅細(xì)胞疾病的常用指標(biāo)： 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定 紅細(xì)胞形態(tài)：大小、形態(tài)、染色反應(yīng)、紅細(xì)胞形態(tài)：大小、形態(tài)、染色反應(yīng)、結(jié)構(gòu)的異常結(jié)構(gòu)的異常 血細(xì)胞壓積：血細(xì)胞壓積： 紅細(xì)胞平均值紅細(xì)胞平均值(MCV、MCHC、MCH)：網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)：網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)

2、數(shù)：第一節(jié)第一節(jié) 檢驗(yàn)申請(qǐng)單：包括患者和醫(yī)生的信息檢驗(yàn)申請(qǐng)單：包括患者和醫(yī)生的信息及采集運(yùn)送收集者的信息和時(shí)間及采集運(yùn)送收集者的信息和時(shí)間 標(biāo)本采集和處理的具體要求標(biāo)本采集和處理的具體要求 標(biāo)本信息的完整性標(biāo)本信息的完整性 標(biāo)本拒收標(biāo)本拒收 檢驗(yàn)申請(qǐng)單檢驗(yàn)申請(qǐng)單:患者信息患者信息,申請(qǐng)者信息申請(qǐng)者信息,采采樣及送檢信息樣及送檢信息 標(biāo)本采集和處理要求標(biāo)本采集和處理要求 標(biāo)本信息的完整性標(biāo)本信息的完整性 標(biāo)本的拒收標(biāo)本的拒收一、標(biāo)本采集的要求一、標(biāo)本采集的要求血標(biāo)本血標(biāo)本分為全血、血漿和血清等。分為全血、血漿和血清等。全血全血：由血細(xì)胞和血漿組成，主要用于臨由血細(xì)胞和血漿組成，主要用于臨床血液學(xué)

3、檢查，如血細(xì)胞計(jì)數(shù)、分類和形床血液學(xué)檢查，如血細(xì)胞計(jì)數(shù)、分類和形態(tài)學(xué)檢查等態(tài)學(xué)檢查等 . .血漿血漿：為全血除去血細(xì)胞的部分，用于血為全血除去血細(xì)胞的部分，用于血漿生理性和病理性化學(xué)成分的測(cè)定漿生理性和病理性化學(xué)成分的測(cè)定. .血清血清：是離體后的血液自然凝固后析出的是離體后的血液自然凝固后析出的液體部分，除液體部分，除fgfg等已消耗的凝血因子等已消耗的凝血因子 . . 血細(xì)胞：用于成份輸血血細(xì)胞：用于成份輸血TEXT血清血清血漿血漿全血全血是指凝血完成后是指凝血完成后血液未經(jīng)稀釋的血液未經(jīng)稀釋的細(xì)胞外成份細(xì)胞外成份是指含抗凝劑的血液是指含抗凝劑的血液經(jīng)離心后的上清液經(jīng)離心后的上清液例：例：

4、WHO推薦：血糖測(cè)定推薦：血糖測(cè)定使用使用EDTA抗凝全血，抗凝全血，肝素抗凝全血謹(jǐn)慎應(yīng)肝素抗凝全血謹(jǐn)慎應(yīng)用；但明顯指出不宜用；但明顯指出不宜使用血清，否則測(cè)定使用血清，否則測(cè)定值偏低；但鉀相反值偏低；但鉀相反是指使用了抗凝是指使用了抗凝劑的血液劑的血液存在問題：較多的是血漿與血清差別的認(rèn)識(shí)存在問題：較多的是血漿與血清差別的認(rèn)識(shí)( (一一) )靜脈采血法靜脈采血法( (二二) )皮膚采血法皮膚采血法 按采血部位按采血部位( (三三) )動(dòng)脈采血法動(dòng)脈采血法 普通采血普通采血 按采血方式按采血方式真空采血真空采血 真空靜脈采血法真空靜脈采血法 注射器靜脈采血注射器靜脈采血 真空采血法真空采血法(

5、vacuum tube for blood (vacuum tube for blood collection)collection)，又稱為負(fù)壓采血法。，又稱為負(fù)壓采血法。 采用專用真空采血裝置。優(yōu)點(diǎn)：無血液采用專用真空采血裝置。優(yōu)點(diǎn)：無血液外溢和污染，標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)方便外溢和污染，標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)方便, , 減少了溶減少了溶血現(xiàn)象，保護(hù)血液有形成分，標(biāo)本原始血現(xiàn)象，保護(hù)血液有形成分，標(biāo)本原始性狀的完整性。性狀的完整性。靜脈采血部位靜脈采血部位：坐位或臥位坐位或臥位體表的淺靜脈體表的淺靜脈 、肘、肘部靜脈、手背靜脈或內(nèi)踝靜脈、部靜脈、手背靜脈或內(nèi)踝靜脈、股靜脈。頸外靜脈（嬰幼兒）股靜脈。頸外靜脈（嬰幼兒）

6、 試管試管 注射器注射器 消毒器材消毒器材 雙向采血針雙向采血針 血清血清 促凝劑纖維蛋白酶促凝劑纖維蛋白酶 采血量采血量3ml- 5ml 3ml- 5ml 生化免疫生化免疫 生化血庫生化血庫 血分析血分析全血全血 K K2 2EDTA orEDTA orK K3 3EDTA EDTA 1ml-2ml 1ml-2ml 凝血因子凝血因子 血漿和血漿和全血全血 枸櫞酸鈉枸櫞酸鈉 1.8ml 1.8ml 1.6ml1.6ml血沉血沉 GLUGLU血清血清 NaF+NaF+K K2 2C C2 2O O4 4 2ml 2ml 1.1.扎止血帶扎止血帶; ;2.2.皮膚消毒后，將頭皮針刺入靜脈（皮膚消毒

7、后，將頭皮針刺入靜脈（3030o o）；）；3. 3. 回血后，用穿刺針刺穿采血管膠塞，血液回血后，用穿刺針刺穿采血管膠塞，血液自動(dòng)流入試管，解開止血帶；自動(dòng)流入試管，解開止血帶；4.4.血流斷線，達(dá)到采血管的標(biāo)示量，若多管血流斷線，達(dá)到采血管的標(biāo)示量，若多管血樣，拔出穿刺針刺入另一采血管即可；血樣，拔出穿刺針刺入另一采血管即可；5.5.采血完畢后，用棉簽壓采血點(diǎn)采血完畢后，用棉簽壓采血點(diǎn)上端上端，拔出，拔出頭皮針，待血停止后再拔出試管端穿刺針頭皮針，待血停止后再拔出試管端穿刺針并放入消毒液中浸泡。并放入消毒液中浸泡。 微生物標(biāo)本微生物標(biāo)本無添加劑標(biāo)本無添加劑標(biāo)本凝血管凝血管黑黑頭管頭管綠頭管

8、綠頭管血常規(guī)管血常規(guī)管灰頭管灰頭管金黃金黃頭管頭管。 所有采血管所有采血管( (無添加劑除外無添加劑除外)采完血后都要采完血后都要輕微顛倒輕微顛倒1 17 7次，不能振搖。次，不能振搖。 采血前應(yīng)向患者作適當(dāng)解釋，以消除疑慮和恐采血前應(yīng)向患者作適當(dāng)解釋，以消除疑慮和恐懼，了解患者檢查項(xiàng)目。懼，了解患者檢查項(xiàng)目。 采血時(shí)輕采血時(shí)輕 快快 準(zhǔn)。采血時(shí)止血帶壓迫時(shí)間不易準(zhǔn)。采血時(shí)止血帶壓迫時(shí)間不易過長(zhǎng)，最好不超過過長(zhǎng)，最好不超過3030秒。秒。 采血后應(yīng)先拔針頭，然后將血液沿管壁徐徐加采血后應(yīng)先拔針頭，然后將血液沿管壁徐徐加入標(biāo)本容器，否則易于溶血。入標(biāo)本容器，否則易于溶血。 注射器和容器必須干燥，

9、抽血不宜過快，以免注射器和容器必須干燥，抽血不宜過快，以免產(chǎn)生大量泡沫或溶血產(chǎn)生大量泡沫或溶血. . .某些特殊檢查，為避某些特殊檢查，為避免血小板激活，要使用塑料注射器和硅化處理免血小板激活，要使用塑料注射器和硅化處理后的試管或塑料試管。后的試管或塑料試管。注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)1 1溶血溶血 原因：負(fù)壓相對(duì)較大，采血初始，血速度快，原因：負(fù)壓相對(duì)較大，采血初始，血速度快，RBCRBC相互相互撞擊可致破裂撞擊可致破裂措施：采血時(shí)，使血液沿管壁緩緩流下措施：采血時(shí)，使血液沿管壁緩緩流下2 2漏血漏血 原因：采血管乳膠護(hù)套松動(dòng)或針頭刺出乳膠護(hù)套，采血原因：采血管乳膠護(hù)套松動(dòng)或針頭刺出乳膠護(hù)套，采血 針

10、密封針密封 不嚴(yán)。不嚴(yán)。措施：采血前檢查并安緊乳膠護(hù)套，遇有針頭刺出則重新措施：采血前檢查并安緊乳膠護(hù)套，遇有針頭刺出則重新套好針頭，套好針頭， 以保持其密閉性。以保持其密閉性。3 3血流不暢原因：內(nèi)無負(fù)壓或不夠。血流不暢原因：內(nèi)無負(fù)壓或不夠。措施：更換采血管。措施：更換采血管。4 4采血不足或過量采血不足或過量 原因：采血管內(nèi)負(fù)壓不足或過高。原因：采血管內(nèi)負(fù)壓不足或過高。措施：將更換采血管，措施：將更換采血管， 提前撥針。提前撥針。5 5穿刺針頭脫出穿刺針頭脫出 原因：機(jī)械牽拉所致，尤其是用多個(gè)采血管時(shí)。原因：機(jī)械牽拉所致，尤其是用多個(gè)采血管時(shí)。 措施：有效固定；更換采血管時(shí)，動(dòng)作措施：有效

11、固定；更換采血管時(shí)，動(dòng)作 幅幅度要小，以防針頭脫出增加病人痛苦。度要小，以防針頭脫出增加病人痛苦。(1) (1) 一般采血可采用質(zhì)量合格的一次性一般采血可采用質(zhì)量合格的一次性塑料注射器。塑料注射器。(2) (2) 采用注射器采血時(shí)，采用注射器采血時(shí)，7 7號(hào)（號(hào)（22G22G）或）或8 8號(hào)針（號(hào)針（21G21G）為標(biāo)準(zhǔn)抽血用針，針頭過細(xì)）為標(biāo)準(zhǔn)抽血用針，針頭過細(xì)容易產(chǎn)生溶血。容易產(chǎn)生溶血。 (3) (3) 采集抗凝血液標(biāo)本時(shí)，血標(biāo)本管采采集抗凝血液標(biāo)本時(shí)，血標(biāo)本管采用的抗凝劑的種類及濃度、體積必須正用的抗凝劑的種類及濃度、體積必須正確無誤。確無誤。 (1) (1) 用注射器抽血應(yīng)避免大力拉、

12、推針?biāo)悦庋?xì)用注射器抽血應(yīng)避免大力拉、推針?biāo)?，以免血?xì)胞因受過度擠壓而增加溶血。胞因受過度擠壓而增加溶血。 (2) (2) 抽血時(shí)大力抽拉針?biāo)?，還易使血液產(chǎn)生氣泡。氣抽血時(shí)大力抽拉針?biāo)?，還易使血液產(chǎn)生氣泡。氣泡是導(dǎo)致溶血、蛋白酶失活的重要原因之一。泡是導(dǎo)致溶血、蛋白酶失活的重要原因之一。(3) (3) 如果使用注射器抽血，應(yīng)先卸除針頭，再沿試管如果使用注射器抽血，應(yīng)先卸除針頭，再沿試管壁將血液輕緩地注入試管。壁將血液輕緩地注入試管。 (4) (4) 通過針頭將血液推入試管（血液細(xì)胞二次通過針通過針頭將血液推入試管（血液細(xì)胞二次通過針頭），尤其是用力推送，將增加血液細(xì)胞受擠壓而頭），尤其是用

13、力推送，將增加血液細(xì)胞受擠壓而破碎的機(jī)會(huì)，導(dǎo)致溶血。破碎的機(jī)會(huì)，導(dǎo)致溶血。 皮膚采血法（皮膚采血法（skin puncture for blood skin puncture for blood collectioncollection) )曾被稱為毛細(xì)血管采血法，曾被稱為毛細(xì)血管采血法，所采之血實(shí)質(zhì)是微動(dòng)脈、微靜脈和毛所采之血實(shí)質(zhì)是微動(dòng)脈、微靜脈和毛細(xì)血管的混合血，含有細(xì)胞間質(zhì)和細(xì)細(xì)血管的混合血，含有細(xì)胞間質(zhì)和細(xì)胞內(nèi)液。主要用于需血微量的檢查或胞內(nèi)液。主要用于需血微量的檢查或一般常規(guī)檢查。一般常規(guī)檢查。 器材器材 一次性三棱針、專用一次性三棱針、專用“采血采血 針針” ” 試管試管 一次性微

14、量吸管一次性微量吸管 消毒用品消毒用品1.1.手指：左手無名指指端內(nèi)側(cè)（手指：左手無名指指端內(nèi)側(cè)（WHOWHO），），嬰幼兒用大姆趾或足跟。嬰幼兒用大姆趾或足跟。2.2.嚴(yán)重?zé)齻颊?，?yīng)選擇皮膚完整處。嚴(yán)重?zé)齻颊?，?yīng)選擇皮膚完整處。3.3.耳垂：耳垂部，結(jié)果偏高，現(xiàn)不用。耳垂：耳垂部，結(jié)果偏高，現(xiàn)不用。采血部位采血部位 輕按摩患者左手無名指端內(nèi)側(cè)輕按摩患者左手無名指端內(nèi)側(cè), ,消毒消毒, ,消毒液干后用采血針刺入消毒液干后用采血針刺入2-3mm,2-3mm,棄去棄去第一滴血第一滴血,(?),(?)吸血吸血, ,止血止血. .1.1.生物安全防范生物安全防范: :嚴(yán)格一人一針一管嚴(yán)格一人一針一

15、管(采血采血針和針和一次性微量吸管一次性微量吸管)2.采血前后勿用力擠壓采血前后勿用力擠壓3.多項(xiàng)檢查時(shí)采血順序多項(xiàng)檢查時(shí)采血順序:BPC RBC Hb WBC 分類分類 兩種采血方法的優(yōu)缺點(diǎn)比較兩種采血方法的優(yōu)缺點(diǎn)比較毛細(xì)血管毛細(xì)血管靜脈血靜脈血缺點(diǎn)缺點(diǎn)限制了重復(fù)實(shí)驗(yàn)和追限制了重復(fù)實(shí)驗(yàn)和追加實(shí)驗(yàn)，標(biāo)本量少，加實(shí)驗(yàn)，標(biāo)本量少，局部炎癥可得假性結(jié)局部炎癥可得假性結(jié)果，組織液可混入果，組織液可混入不同抗凝劑的使用，不同抗凝劑的使用，改變血液性質(zhì)，影響改變血液性質(zhì)，影響有形成分的形態(tài)有形成分的形態(tài)優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)價(jià)廉、快速、操作簡(jiǎn)價(jià)廉、快速、操作簡(jiǎn)便，標(biāo)本可直接測(cè)定便，標(biāo)本可直接測(cè)定標(biāo)本代表性大，無組標(biāo)本代

16、表性大，無組織液影響，適于臨床織液影響，適于臨床研究，可重復(fù)實(shí)驗(yàn)和研究，可重復(fù)實(shí)驗(yàn)和追加其他實(shí)驗(yàn)追加其他實(shí)驗(yàn) 部位：部位：股動(dòng)脈股動(dòng)脈頸動(dòng)脈頸動(dòng)脈橈動(dòng)脈橈動(dòng)脈足背動(dòng)脈足背動(dòng)脈. . 器材器材: : 1-2ml 1-2ml內(nèi)涂肝素注射器（內(nèi)涂肝素注射器（玻璃注射器為佳，玻璃注射器為佳，可以減少血液中氧氣的彌散）可以減少血液中氧氣的彌散） 、橡皮塞、橡皮塞、 消毒消毒器材器材 檢查項(xiàng)目：檢查項(xiàng)目：血?dú)夥治鲅獨(dú)夥治?扎帶找血管及消毒扎帶找血管及消毒 進(jìn)針（進(jìn)針（3030o o-45-45o o） 抽血至刻度抽血至刻度 拔針及止血拔針及止血(10-15(10-15分分) ) 加塞混勻及送檢加塞混勻及送

17、檢 避免空氣避免空氣 立即送檢（立即送檢（2 2o o-6-6o o不超過不超過2 2小時(shí)）小時(shí)） 防止血腫（止血防止血腫（止血10-1510-15分鐘）分鐘） 從動(dòng)脈采集血?dú)夥治鰳?biāo)本，應(yīng)讓血液從動(dòng)脈采集血?dú)夥治鰳?biāo)本，應(yīng)讓血液自動(dòng)流入針筒，不要用負(fù)壓抽取血液，自動(dòng)流入針筒，不要用負(fù)壓抽取血液，以免增加血液中氣體揮發(fā)及產(chǎn)生溶血以免增加血液中氣體揮發(fā)及產(chǎn)生溶血1 1患者患者: :活動(dòng)情況和精神狀態(tài)、體位、藥物、年活動(dòng)情況和精神狀態(tài)、體位、藥物、年齡、性別、種族、標(biāo)本采集的時(shí)間以及是否吸齡、性別、種族、標(biāo)本采集的時(shí)間以及是否吸煙等煙等 2 2采血采血 規(guī)范操作規(guī)范操作 3 3溶血溶血 ：必要時(shí)重抽：

18、必要時(shí)重抽4 4標(biāo)本處理：采后立即送檢，并盡快檢查標(biāo)本處理：采后立即送檢，并盡快檢查 ；妥；妥善保管善保管 5 5結(jié)果分析：血液標(biāo)本的分析應(yīng)密切結(jié)合臨床結(jié)果分析：血液標(biāo)本的分析應(yīng)密切結(jié)合臨床 抗凝劑或抗凝物質(zhì)抗凝劑或抗凝物質(zhì): :指能夠阻止血液指能夠阻止血液凝固的物質(zhì)。凝固的物質(zhì)?？鼓齽┓N類：抗凝劑種類：化學(xué)抗凝劑和物理抗凝化學(xué)抗凝劑和物理抗凝劑。劑。物理方法抗凝物理方法抗凝脫纖維蛋白法：脫纖維蛋白法： 將血液注入有玻璃珠的器皿中，轉(zhuǎn)將血液注入有玻璃珠的器皿中，轉(zhuǎn)動(dòng)，纖維蛋白纏繞凝固于玻璃球，從而動(dòng)，纖維蛋白纏繞凝固于玻璃球，從而防止血液形成凝塊。適用于免疫學(xué)檢驗(yàn)防止血液形成凝塊。適用于免疫學(xué)

19、檢驗(yàn)和紅斑性狼瘡細(xì)胞檢查（也可用竹簽）。和紅斑性狼瘡細(xì)胞檢查（也可用竹簽）。 1 1乙二胺四乙酸乙二胺四乙酸(ethylenediamine (ethylenediamine tetraacetic acid,EDTA)tetraacetic acid,EDTA)鹽鹽 常用其鈉常用其鈉鹽鹽(EDTANa(EDTANa2 2) )或鉀鹽或鉀鹽(EDTAK(EDTAK2 2) )，能與血液，能與血液中鈣離子結(jié)合成螯合物，而使中鈣離子結(jié)合成螯合物，而使CaCa2+2+失去凝失去凝血作用，從而阻止血液凝固。血作用，從而阻止血液凝固。K K2 2C C1010H Hl4l4O O8 8N N2 2+Ca

20、+Ca2+ 2+ CaCCaC1010H Hl4l4O O8 8N N2 2+2K+2K+ +2H+2H+ + 實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑和使用方法實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑和使用方法 :化學(xué)抗凝化學(xué)抗凝 EDTAEDTA鹽對(duì)血細(xì)胞形態(tài)和血小板計(jì)數(shù)影響鹽對(duì)血細(xì)胞形態(tài)和血小板計(jì)數(shù)影響很小，適用于多項(xiàng)血液學(xué)檢查，尤其是血很小，適用于多項(xiàng)血液學(xué)檢查，尤其是血小板計(jì)數(shù)，小板計(jì)數(shù)，EDTAKEDTAK2 2特別特別適用于全血細(xì)胞分適用于全血細(xì)胞分析及血細(xì)胞比容測(cè)定，析及血細(xì)胞比容測(cè)定，用量為用量為EDTAKEDTAK2 2 1.52.2mg1.52.2mgm1m1血液。血液。EDTAEDTA影響血小板聚影響血小板聚集，

21、集，不適合于作凝血檢查和血小板功能試不適合于作凝血檢查和血小板功能試驗(yàn)驗(yàn) 2草酸鹽草酸鹽(sodium oxalate)：草酸鈉、：草酸鈉、草酸鉀和草酸銨，草酸根與標(biāo)本中的鈣草酸鉀和草酸銨，草酸根與標(biāo)本中的鈣離子形成草酸鈣沉淀，使離子形成草酸鈣沉淀，使Ca2+失去凝血失去凝血功能。功能。 Na2C2O4+Ca2+ CaC2O4 +2Na+ 草酸鹽抗凝的優(yōu)點(diǎn)是溶解度好、價(jià)廉。草酸鹽抗凝的優(yōu)點(diǎn)是溶解度好、價(jià)廉。2mg2mg草酸鹽可抗凝草酸鹽可抗凝lmllml血液。草酸鈉通常血液。草酸鈉通常用用o.1mol/Lo.1mol/L濃度，與血液按濃度，與血液按1:91:9比例使用比例使用. . 草酸鹽草酸

22、鹽高濃度鉀離子或鈉離子高濃度鉀離子或鈉離子易使易使血細(xì)血細(xì)胞脫水皺縮胞脫水皺縮，而，而草酸銨草酸銨則可使則可使血細(xì)胞膨血細(xì)胞膨脹脹，故測(cè)定血細(xì)胞比容時(shí)用草酸銨和草，故測(cè)定血細(xì)胞比容時(shí)用草酸銨和草酸鉀或草酸鈉兩者適當(dāng)比例混合的抗凝酸鉀或草酸鈉兩者適當(dāng)比例混合的抗凝劑，恰好不影響紅細(xì)胞的形態(tài)和體積劑，恰好不影響紅細(xì)胞的形態(tài)和體積。 3肝素肝素(heparin) 存在于肺、肝、脾等幾存在于肺、肝、脾等幾乎所有組織和血管周圍肥大細(xì)胞和嗜堿性乎所有組織和血管周圍肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞的顆粒中。粒細(xì)胞的顆粒中。 它是一種含硫酸基團(tuán)的粘多糖，抗凝機(jī)制它是一種含硫酸基團(tuán)的粘多糖，抗凝機(jī)制較為復(fù)雜，較為復(fù)雜，主

23、要是加強(qiáng)主要是加強(qiáng)抗凝血酶抗凝血酶(antithrombin ，AT)滅活絲氨酸滅活絲氨酸蛋白酶的作用，從而阻止凝血酶的形成，蛋白酶的作用，從而阻止凝血酶的形成，并有阻止血小板聚集等多種抗凝作用。并有阻止血小板聚集等多種抗凝作用。 (152.5)IU/ml血液，所用制劑多為肝素血液，所用制劑多為肝素的鈉鹽或鉀鹽的鈉鹽或鉀鹽. 肝素具有抗凝力強(qiáng)、不影響血細(xì)胞體積、肝素具有抗凝力強(qiáng)、不影響血細(xì)胞體積、不易溶血等優(yōu)點(diǎn)。不易溶血等優(yōu)點(diǎn)。它是紅細(xì)胞透滲脆性試它是紅細(xì)胞透滲脆性試驗(yàn)和血?dú)夥治龅睦硐肟鼓齽?。?yàn)和血?dú)夥治龅睦硐肟鼓齽?。常可引起血?？梢鹧“寰奂⑹寡科诹_氏染色小板聚集，并使血涂片在羅氏

24、染色(Romanowskys staining)(Romanowskys staining)時(shí)產(chǎn)生藍(lán)色背時(shí)產(chǎn)生藍(lán)色背景，因此肝素抗凝血景，因此肝素抗凝血不適合血液學(xué)一般檢不適合血液學(xué)一般檢查。查。 4枸櫞酸鹽枸櫞酸鹽 主要為枸櫞酸三鈉主要為枸櫞酸三鈉(trisodium citrate)，枸櫞酸鹽能與血液中的鈣離子結(jié)，枸櫞酸鹽能與血液中的鈣離子結(jié)合形成螯合物，從而阻止血液凝固。合形成螯合物，從而阻止血液凝固。 2Na3C6H5O7+2Ca2+ 2CaC6H5O7+6Na+ 濃度濃度:0.106mmol/L， ESR(1:4)血沉測(cè)定血沉測(cè)定 凝血功能凝血功能(1:9)測(cè)定。測(cè)定。 輸血保養(yǎng)液的

25、成分，因毒性小輸血保養(yǎng)液的成分，因毒性小 。抗凝劑抗凝劑抗凝原理抗凝原理濃度及與血液配比濃度及與血液配比適用范圍適用范圍枸櫞酸枸櫞酸三鈉三鈉 與血液中的鈣離子與血液中的鈣離子結(jié)合形成螯合物結(jié)合形成螯合物 0.106mol/L0.106mol/LESRESR1:41:4凝血功能凝血功能1:91:9血沉血沉凝血、輸血凝血、輸血EDTAK2EDTAK2與血液中的鈣離子與血液中的鈣離子結(jié)合形成螯合物結(jié)合形成螯合物 1.512.2mg/ml1.512.2mg/ml血液血液1.1.適于適于BRtBRt、BpcBpc計(jì)數(shù)計(jì)數(shù)2.2.不適凝血、不適凝血、BpcBpc功能功能肝素肝素與與ATAT結(jié)合結(jié)合, ,滅

26、活滅活絲絲-aa-aa蛋白酶阻止蛋白酶阻止凝血酶形成凝血酶形成12.517.5IU/ml12.517.5IU/ml血血0.1mg/ml0.1mg/ml血血1.1.適生化免疫血?dú)膺m生化免疫血?dú)? 2不適不適BRt.BRt.血涂片、血血涂片、血凝凝雙草酸鹽雙草酸鹽與血中鈣形成草酸與血中鈣形成草酸鈣沉淀鈣沉淀100ml100ml水草酸鉀與草酸水草酸鉀與草酸銨為銨為0.8g0.8g、1.2g 1.2g ， 0.1ml/ml0.1ml/ml血血草酸鈉與血配比草酸鈉與血配比1:91:91.1.適于適于RBCRBC比積比積2.2.不適：不適：WBCWBC分類計(jì)數(shù)分類計(jì)數(shù)一、采血服務(wù)一、采血服務(wù)（一）環(huán)境要求

27、（一）環(huán)境要求1.1.空間要求空間要求: :人性化（空間人性化（空間. .光線光線. .通風(fēng)通風(fēng). .臺(tái)臺(tái)面面. .座椅）座椅）. .2.2.窗口和采血人員足夠多窗口和采血人員足夠多, ,盡可能讓病人盡可能讓病人少等待少等待. .一、采血服務(wù)一、采血服務(wù)（二）生物安全（二）生物安全1.1.防止交叉感染防止交叉感染: :盡可用一次性衛(wèi)生用品盡可用一次性衛(wèi)生用品（止血帶（止血帶. .紙墊紙墊. .消毒用品消毒用品. .醫(yī)療廢物統(tǒng)一醫(yī)療廢物統(tǒng)一處理）處理）. .2.2.環(huán)境消毒（空氣環(huán)境消毒（空氣. .臺(tái)面臺(tái)面. .周邊）周邊）. .1.1.注意患者生理狀態(tài)和飲食的影響注意患者生理狀態(tài)和飲食的影響A

28、.A.影響反應(yīng)系統(tǒng)待測(cè)成人成份的物理性質(zhì)影響反應(yīng)系統(tǒng)待測(cè)成人成份的物理性質(zhì)B.B.參與檢驗(yàn)化學(xué)反應(yīng)參與檢驗(yàn)化學(xué)反應(yīng)C.C.影響機(jī)體組織器官功能及細(xì)胞中的物質(zhì)影響機(jī)體組織器官功能及細(xì)胞中的物質(zhì)代謝代謝D.D.對(duì)器官的藥理活性和毒性作用對(duì)器官的藥理活性和毒性作用。采血盡可能在上午。采血盡可能在上午7-97-9時(shí)進(jìn)行時(shí)進(jìn)行。采血前病人禁食。采血前病人禁食12h12h（受飲食影響的（受飲食影響的項(xiàng)目）項(xiàng)目）。采血盡可能安排在其它檢查和治療前。采血盡可能安排在其它檢查和治療前進(jìn)行進(jìn)行。藥物監(jiān)測(cè)時(shí)要根據(jù)藥物濃度峰值期和。藥物監(jiān)測(cè)時(shí)要根據(jù)藥物濃度峰值期和標(biāo)定期采血，化驗(yàn)單注明采血時(shí)間標(biāo)定期采血，化驗(yàn)單注明采

29、血時(shí)間三、采血因素的質(zhì)量控制三、采血因素的質(zhì)量控制時(shí)間時(shí)間采血姿勢(shì)和止血帶的影響采血姿勢(shì)和止血帶的影響。臥位、坐位、立位不同姿勢(shì)采集之標(biāo)本，。臥位、坐位、立位不同姿勢(shì)采集之標(biāo)本，檢驗(yàn)結(jié)果不同，正常人立位血漿總量比臥檢驗(yàn)結(jié)果不同，正常人立位血漿總量比臥位減少位減少12%12%左右，引起左右，引起HbHb、WBCWBC、RBCRBC、HCTHCT、脂類、蛋白等值變化。脂類、蛋白等值變化。止血時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)引起凝血系統(tǒng)變化，反。止血時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)引起凝血系統(tǒng)變化，反復(fù)攥拳會(huì)使血鉀升高。復(fù)攥拳會(huì)使血鉀升高。靜坐。靜坐510分鐘后以坐位（從肘靜脈）采分鐘后以坐位（從肘靜脈）采血為最佳。血為最佳。 采血因素的影響

30、與控采血因素的影響與控制制采血姿勢(shì)和止血帶因素的質(zhì)量控制采血姿勢(shì)和止血帶因素的質(zhì)量控制盡量統(tǒng)一采血姿勢(shì)盡量統(tǒng)一采血姿勢(shì)盡量使用止血帶在盡量使用止血帶在1min1min內(nèi)采內(nèi)采血，勿讓患者反復(fù)攥拳運(yùn)動(dòng)血，勿讓患者反復(fù)攥拳運(yùn)動(dòng)當(dāng)需要重復(fù)使用止血帶時(shí)，當(dāng)需要重復(fù)使用止血帶時(shí)，應(yīng)使用另一手臂。應(yīng)使用另一手臂。溶血對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的影響溶血對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的影響k血細(xì)胞成份的釋放對(duì)結(jié)果的影響血細(xì)胞成份的釋放對(duì)結(jié)果的影響k血細(xì)胞成份對(duì)檢驗(yàn)方法的影響血細(xì)胞成份對(duì)檢驗(yàn)方法的影響采血因素的影響與控制采血因素的影響與控制脂血、凝血對(duì)結(jié)果的影響（略）脂血、凝血對(duì)結(jié)果的影響（略）產(chǎn)生溶血的原因產(chǎn)生溶血的原因k采血時(shí)的一些不良習(xí)慣

31、和傳統(tǒng)器具的影響采血時(shí)的一些不良習(xí)慣和傳統(tǒng)器具的影響k混勻含添加劑的試管時(shí)用力過猛或運(yùn)輸動(dòng)混勻含添加劑的試管時(shí)用力過猛或運(yùn)輸動(dòng)作過大作過大k穿刺處酒精未干穿刺處酒精未干k注射器與針頭不緊產(chǎn)生氣泡注射器與針頭不緊產(chǎn)生氣泡k試管質(zhì)量粗糙，運(yùn)輸過程中擠壓血細(xì)胞造試管質(zhì)量粗糙，運(yùn)輸過程中擠壓血細(xì)胞造成溶血成溶血溶血因素造成誤差的控制溶血因素造成誤差的控制1 1。溶血的標(biāo)本不能使用。溶血的標(biāo)本不能使用2 2。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)溶血標(biāo)本要排除體內(nèi)溶血的可能。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)溶血標(biāo)本要排除體內(nèi)溶血的可能3 3。規(guī)范采血步驟，改正不良采血習(xí)慣。規(guī)范采血步驟，改正不良采血習(xí)慣4 4。使用真空采血系統(tǒng)。使用真空采血系統(tǒng)5 5。妥善

32、處理溶血標(biāo)本。妥善處理溶血標(biāo)本采血量的影響采血量的影響采血量與抗凝劑的比例對(duì)凝血實(shí)采血量與抗凝劑的比例對(duì)凝血實(shí)驗(yàn)的影響驗(yàn)的影響采血因素的影響與控制采血因素的影響與控制輸液（稀釋和成份干擾）輸液（稀釋和成份干擾）避免輸液過程中采血，必須采血時(shí)要在異側(cè)避免輸液過程中采血，必須采血時(shí)要在異側(cè)采血采血禁止從輸液三通管采血（輸液成份回流、輸禁止從輸液三通管采血（輸液成份回流、輸液管內(nèi)殘留輸液成份都將極大地影響檢驗(yàn)液管內(nèi)殘留輸液成份都將極大地影響檢驗(yàn)結(jié)果）。結(jié)果）。 血液標(biāo)本的運(yùn)送、保存與處理原則血液標(biāo)本的運(yùn)送、保存與處理原則1。視每一標(biāo)本為不可再得的。視每一標(biāo)本為不可再得的唯一唯一標(biāo)本標(biāo)本2。視每一標(biāo)本

33、為。視每一標(biāo)本為高危高危標(biāo)本標(biāo)本 3。嚴(yán)禁嚴(yán)禁標(biāo)本與皮膚、實(shí)驗(yàn)臺(tái)和器皿外部接觸標(biāo)本與皮膚、實(shí)驗(yàn)臺(tái)和器皿外部接觸4。檢驗(yàn)完畢，標(biāo)本、實(shí)驗(yàn)臺(tái)和器皿。檢驗(yàn)完畢，標(biāo)本、實(shí)驗(yàn)臺(tái)和器皿必須消毒必須消毒處理處理 (1)(1)標(biāo)本具有唯一標(biāo)示如條形碼標(biāo)本具有唯一標(biāo)示如條形碼 (2)(2)生物安全原則：避免劇烈振蕩、血液濺生物安全原則：避免劇烈振蕩、血液濺灑、光線照射、異物混入等情況的發(fā)生。灑、光線照射、異物混入等情況的發(fā)生。 (3)(3)盡快運(yùn)送原則：標(biāo)本應(yīng)從采集地點(diǎn)直接盡快運(yùn)送原則：標(biāo)本應(yīng)從采集地點(diǎn)直接送往檢驗(yàn)科室，不應(yīng)在其他地點(diǎn)放置。送往檢驗(yàn)科室，不應(yīng)在其他地點(diǎn)放置。 (4) (4) 交叉配血的受血者血液

34、樣本，必須由交叉配血的受血者血液樣本，必須由臨床醫(yī)護(hù)人員或?qū)Ｂ氝\(yùn)送人員直接送往檢臨床醫(yī)護(hù)人員或?qū)Ｂ氝\(yùn)送人員直接送往檢驗(yàn)科（血庫）。禁止其他人員（包括受血驗(yàn)科（血庫）。禁止其他人員（包括受血者家屬）執(zhí)行血樣運(yùn)送任務(wù)。者家屬）執(zhí)行血樣運(yùn)送任務(wù)。 (1) (1) 采血后應(yīng)將標(biāo)本管直立、靜置，避免振蕩、摔落。采血后應(yīng)將標(biāo)本管直立、靜置，避免振蕩、摔落。 (2) (2) 所有標(biāo)本最好都采用有蓋容器盛放，防止灰塵、雜所有標(biāo)本最好都采用有蓋容器盛放，防止灰塵、雜物混入，減少水分、氣體蒸發(fā)，避免標(biāo)本濺灑、污染。物混入，減少水分、氣體蒸發(fā)，避免標(biāo)本濺灑、污染。 (3) (3) 標(biāo)本應(yīng)保存于蔭涼處，避免陽光直射。

35、某些檢驗(yàn)項(xiàng)標(biāo)本應(yīng)保存于蔭涼處，避免陽光直射。某些檢驗(yàn)項(xiàng)目要求避光保存血液標(biāo)本。目要求避光保存血液標(biāo)本。 (4) (4) 標(biāo)本一般應(yīng)室溫保存，避免過高或過低溫度影響。標(biāo)本一般應(yīng)室溫保存，避免過高或過低溫度影響。 (5) (5) 特定項(xiàng)目的血液標(biāo)本需要低溫保存（如血?dú)鈽?biāo)本應(yīng)特定項(xiàng)目的血液標(biāo)本需要低溫保存（如血?dú)鈽?biāo)本應(yīng)將封閉的血液立即冷凍至將封閉的血液立即冷凍至44然后送檢）。然后送檢）。 (6) (6) 血液標(biāo)本（全血或血清、血漿）低溫保存，應(yīng)當(dāng)在血液標(biāo)本（全血或血清、血漿）低溫保存，應(yīng)當(dāng)在檢驗(yàn)人員指導(dǎo)下進(jìn)行。檢驗(yàn)人員指導(dǎo)下進(jìn)行。 （7 7）貯存的溫度越低，血樣保存的時(shí)間越長(zhǎng)。有些）貯存的溫度越低

36、，血樣保存的時(shí)間越長(zhǎng)。有些檢驗(yàn)指標(biāo)，血樣不能深冷凍。如：檢驗(yàn)指標(biāo)，血樣不能深冷凍。如：EDTAEDTA抗凝全血，抗凝全血，做脂蛋白電泳的血清或血漿，脂蛋白做脂蛋白電泳的血清或血漿，脂蛋白X X及低度密度脂及低度密度脂蛋白蛋白- -膽固醇的血清或血漿。纖維蛋白單體陽性血漿膽固醇的血清或血漿。纖維蛋白單體陽性血漿等。等。（8 8）惰性分離介質(zhì)能夠提高血清和血漿的產(chǎn)量，而）惰性分離介質(zhì)能夠提高血清和血漿的產(chǎn)量，而且可以讓血清保留在原管中。且可以讓血清保留在原管中。（9 9）推薦貯存期限：生化檢驗(yàn)，免疫學(xué)檢）推薦貯存期限：生化檢驗(yàn)，免疫學(xué)檢驗(yàn)，驗(yàn)，44貯存一周；血液學(xué)檢驗(yàn)，室溫貯存一周；血液學(xué)檢驗(yàn)，室

37、溫1 1天；天；PTPT冰箱冰箱424424小時(shí)，小時(shí)，APTT46hAPTT46h；毒；毒理檢驗(yàn)，冰箱貯存理檢驗(yàn)，冰箱貯存6 6周。周。檢測(cè)項(xiàng)目 -80 -20 4 20 30以上APTT 至少保存1個(gè)月 6h 6h 2h因子 至少保存1個(gè)月 保存24小時(shí) 6h 6h 即刻實(shí)驗(yàn)因子.至少保存1個(gè)月 24h 6h 即刻實(shí)驗(yàn)因子 至少保存1個(gè)月 24h 24hPT至少保存1年至少保存1個(gè)月 24h 6h 4h因子 至少保存1個(gè)月 至少保存1個(gè)月 24h 6h 即刻實(shí)驗(yàn)因子 至少保存1個(gè)月 至少保存1個(gè)月 24h 6h 6h因子 至少保存1個(gè)月 至少保存1個(gè)月 24h 24h 6hAT-至少保存1

38、個(gè)月 至少48h 6h 6hPC，PS 至少保存1個(gè)月 至少48h 6h 2h 2h纖溶酶原至少保存1個(gè)月 48h 24h 6h 6h (1) (1) 血?dú)庋獨(dú)?血氨血氨 血沉血沉: :必須立即送檢，應(yīng)當(dāng)在必須立即送檢，應(yīng)當(dāng)在3030分鐘內(nèi)完成檢驗(yàn)。分鐘內(nèi)完成檢驗(yàn)。 (2) (2) 凝血因子、細(xì)胞因子及激素檢驗(yàn)?zāi)蜃?、?xì)胞因子及激素檢驗(yàn): :必須立即送檢，即刻檢測(cè)必須立即送檢，即刻檢測(cè)或凍存標(biāo)本（不適合采用早晨統(tǒng)一采血、統(tǒng)一送檢的方法）。條或凍存標(biāo)本（不適合采用早晨統(tǒng)一采血、統(tǒng)一送檢的方法）。條件具備時(shí)，應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室采血。件具備時(shí)，應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室采血。 (3) (3) 凝血項(xiàng)目、電解質(zhì)項(xiàng)目、肝功及

39、多數(shù)血液酶類生化項(xiàng)目凝血項(xiàng)目、電解質(zhì)項(xiàng)目、肝功及多數(shù)血液酶類生化項(xiàng)目應(yīng)盡快送檢，在應(yīng)盡快送檢，在2 2小時(shí)內(nèi)檢驗(yàn)。小時(shí)內(nèi)檢驗(yàn)。 (4) (4) 血常規(guī)項(xiàng)目血常規(guī)項(xiàng)目: :在在4 4小時(shí)內(nèi)完成檢驗(yàn)。小時(shí)內(nèi)完成檢驗(yàn)。 (5) (5) 血培養(yǎng)項(xiàng)目血培養(yǎng)項(xiàng)目: :采血后盡快放入采血后盡快放入3535培養(yǎng)箱中，超過培養(yǎng)箱中，超過2 2小時(shí)可能小時(shí)可能降低微生物培養(yǎng)的陽性率。降低微生物培養(yǎng)的陽性率。 (6) (6) 多數(shù)抗原多數(shù)抗原- -抗體檢測(cè)項(xiàng)目抗體檢測(cè)項(xiàng)目全血室溫（全血室溫（44為佳）可保存為佳）可保存2424小時(shí)，或分離血清小時(shí)，或分離血清-20-20保存。保存。 (7) (7) 環(huán)境溫度超過環(huán)境

40、溫度超過3030時(shí)，所有標(biāo)本都應(yīng)盡快送往檢驗(yàn)科室。時(shí)，所有標(biāo)本都應(yīng)盡快送往檢驗(yàn)科室。 (8) (8) 有些臨床科室早晨抽血時(shí)間太早，至送檢時(shí)標(biāo)本已室溫放置有些臨床科室早晨抽血時(shí)間太早，至送檢時(shí)標(biāo)本已室溫放置超過超過2 2小時(shí)，標(biāo)本因細(xì)胞代謝、溶血、蒸發(fā)等原因造成許多項(xiàng)目小時(shí)，標(biāo)本因細(xì)胞代謝、溶血、蒸發(fā)等原因造成許多項(xiàng)目的結(jié)果偏差，如：鉀、乳酸脫氫酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、的結(jié)果偏差，如：鉀、乳酸脫氫酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、血紅蛋白、酸性磷酸酶等升高，鈉、血糖等降低。建議：住院病血紅蛋白、酸性磷酸酶等升高，鈉、血糖等降低。建議：住院病房早晨抽血時(shí)間應(yīng)控制在房早晨抽血時(shí)間應(yīng)控制在6:306:

41、30以后，應(yīng)在以后，應(yīng)在8:008:00左右送至檢驗(yàn)科。左右送至檢驗(yàn)科。 (1) (1) 確保無菌采血，嚴(yán)防標(biāo)本被污染。確保無菌采血，嚴(yán)防標(biāo)本被污染。 (2) (2) 血培養(yǎng)瓶接種的血液量一般為：成人血培養(yǎng)瓶接種的血液量一般為：成人10 10 mlml，兒童，兒童4 ml4 ml，幼兒，幼兒12 ml12 ml。接種的血液過。接種的血液過多易引起假陽性。多易引起假陽性。 (3) (3) 作厭氧培養(yǎng)的血液標(biāo)本，應(yīng)避免接觸空作厭氧培養(yǎng)的血液標(biāo)本，應(yīng)避免接觸空氣，立即注入專用厭氧培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。氣，立即注入專用厭氧培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。 (4) (4) 如果同時(shí)作厭氧培養(yǎng)和需氧培養(yǎng)，應(yīng)先如果同時(shí)作厭氧培養(yǎng)和需氧培養(yǎng)，

42、應(yīng)先將血標(biāo)本接種厭氧培養(yǎng)瓶，然后再接種需氧將血標(biāo)本接種厭氧培養(yǎng)瓶，然后再接種需氧培養(yǎng)瓶。培養(yǎng)瓶。 (1) (1) 檢驗(yàn)科室在核收送檢標(biāo)本時(shí)，對(duì)不合格檢驗(yàn)標(biāo)檢驗(yàn)科室在核收送檢標(biāo)本時(shí)，對(duì)不合格檢驗(yàn)標(biāo)本應(yīng)當(dāng)拒收。本應(yīng)當(dāng)拒收。 (2) (2) 臨床科室在證實(shí)標(biāo)本不合格之后應(yīng)當(dāng)重新采集臨床科室在證實(shí)標(biāo)本不合格之后應(yīng)當(dāng)重新采集標(biāo)本送檢。嚴(yán)禁諸如標(biāo)本送檢。嚴(yán)禁諸如“將因出現(xiàn)凝集而被拒收的血將因出現(xiàn)凝集而被拒收的血常規(guī)標(biāo)本在挑出血凝塊之后重新送檢常規(guī)標(biāo)本在挑出血凝塊之后重新送檢”之類的嚴(yán)重之類的嚴(yán)重錯(cuò)誤發(fā)生。錯(cuò)誤發(fā)生。 (3) (3) 從標(biāo)本管濺灑出來的血液標(biāo)本不能再放回標(biāo)本從標(biāo)本管濺灑出來的血液標(biāo)本不能再放

43、回標(biāo)本管作為標(biāo)本送檢。管作為標(biāo)本送檢。 (4) (4) 嚴(yán)禁將同一個(gè)待檢者含不同抗凝劑的血液標(biāo)本嚴(yán)禁將同一個(gè)待檢者含不同抗凝劑的血液標(biāo)本進(jìn)行混合，嚴(yán)禁將不同待檢者的血液標(biāo)本進(jìn)行混合。進(jìn)行混合，嚴(yán)禁將不同待檢者的血液標(biāo)本進(jìn)行混合。 包括脂血、溶血、抗凝劑用錯(cuò)或未達(dá)抗包括脂血、溶血、抗凝劑用錯(cuò)或未達(dá)抗凝效果凝效果 容器不當(dāng)或量不足、轉(zhuǎn)運(yùn)條件不當(dāng)、申容器不當(dāng)或量不足、轉(zhuǎn)運(yùn)條件不當(dāng)、申請(qǐng)和標(biāo)本標(biāo)簽不一致、標(biāo)本污染、容器請(qǐng)和標(biāo)本標(biāo)簽不一致、標(biāo)本污染、容器破漏破漏等未按血標(biāo)本采集運(yùn)送條件要求等未按血標(biāo)本采集運(yùn)送條件要求的標(biāo)本的標(biāo)本（一）檢驗(yàn)前的處理：無抗凝劑（一）檢驗(yàn)前的處理：無抗凝劑3737O O預(yù)溫預(yù)

44、溫3030分鐘再分鐘再離心離心分離血清（漿），分離血清（漿），30003000轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)/ /分；有抗凝劑和分；有抗凝劑和含凝血酶含凝血酶直接離心直接離心 分離細(xì)胞：分離細(xì)胞：粗分粗分. .細(xì)分細(xì)分 根據(jù)標(biāo)本的性質(zhì)和要求保存一段時(shí)間根據(jù)標(biāo)本的性質(zhì)和要求保存一段時(shí)間后消毒后消毒 信息結(jié)果由信息結(jié)果由LisLis系統(tǒng)保存系統(tǒng)保存薄血片法薄血片法: :1 1、滴一滴血在載玻片的、滴一滴血在載玻片的3/43/4處；處； 2 2、蓋玻片一端緊靠載玻片傾斜、蓋玻片一端緊靠載玻片傾斜30 30 o o40 40 o o與血滴接觸；與血滴接觸；3 3、按箭頭所示方向推動(dòng)蓋玻片。、按箭頭所示方向推動(dòng)蓋玻片。4 4、干

45、燥、干燥血涂片的制作血涂片的制作厚血片法厚血片法: :1 1、滴一滴血在載玻片的中央；、滴一滴血在載玻片的中央； 2 2、用玻片一角將血滴由內(nèi)向外旋轉(zhuǎn)涂、用玻片一角將血滴由內(nèi)向外旋轉(zhuǎn)涂布布, ,制成均勻園形厚血膜制成均勻園形厚血膜, ,干燥后加干燥后加H H2 2O O除除Hb Hb ； 3 3、傾去水干燥后備用、傾去水干燥后備用( (查寄生蟲多用查寄生蟲多用).).血涂片的制作血涂片的制作儀器自動(dòng)送片儀器自動(dòng)送片 取血取血 推片推片標(biāo)記標(biāo)記 染色染色血涂片的制作血涂片的制作血涂片質(zhì)量評(píng)價(jià)血涂片質(zhì)量評(píng)價(jià)： 均勻、厚薄、頭體均勻、厚薄、頭體尾、邊緣、兩側(cè)尾、邊緣、兩側(cè)注意：血滴大，速度快、角度大

46、注意：血滴大，速度快、角度大、 血膜厚血膜厚HCTHCT高時(shí)高時(shí): :血滴小，速度慢、角度小血滴小，速度慢、角度小、 血膜薄血膜薄染料染料-生物學(xué)染色劑：將生物組織細(xì)胞和病生物學(xué)染色劑：將生物組織細(xì)胞和病原體染色，在顯微鏡下觀察結(jié)構(gòu)。原體染色，在顯微鏡下觀察結(jié)構(gòu)。（一）染料（一）染料 （天然和人工）發(fā)色基團(tuán)和助（天然和人工）發(fā)色基團(tuán)和助色基團(tuán)使生物學(xué)染色劑產(chǎn)生顏色和被染組色基團(tuán)使生物學(xué)染色劑產(chǎn)生顏色和被染組織親合。織親合。堿性染料：為陽離子染料，能接受質(zhì)子，染細(xì)胞核堿性染料：為陽離子染料，能接受質(zhì)子，染細(xì)胞核 的染料。如亞甲藍(lán)、天青。的染料。如亞甲藍(lán)、天青。酸性染料：為陰離子染料，能釋放質(zhì)子。

47、主要有熒酸性染料：為陰離子染料，能釋放質(zhì)子。主要有熒 烷烷-氧雜蒽染料和偶氮染料兩類，能氧雜蒽染料和偶氮染料兩類，能結(jié)合結(jié)合 細(xì)胞的堿性成分并染色，如血紅蛋細(xì)胞的堿性成分并染色，如血紅蛋白、白、 嗜酸性顆粒成分等。嗜酸性顆粒成分等。3. 復(fù)合染料：同時(shí)具有陰、陽離子型的染料如瑞氏染料復(fù)合染料：同時(shí)具有陰、陽離子型的染料如瑞氏染料（二）細(xì)胞染色原理：（二）細(xì)胞染色原理： 一般以它們的物理現(xiàn)象和一般以它們的物理現(xiàn)象和/或化學(xué)或化學(xué) 現(xiàn)象為依據(jù)現(xiàn)象為依據(jù)1. 物理作用：毛細(xì)管現(xiàn)象、滲透、吸收、吸附作用等物理作用：毛細(xì)管現(xiàn)象、滲透、吸收、吸附作用等化學(xué)作用：化學(xué)作用： a. 染料的化學(xué)成分：助色基團(tuán)的

48、存在，堿性染料染料的化學(xué)成分：助色基團(tuán)的存在，堿性染料 在溶媒中為陽離子型，易與組織和細(xì)胞內(nèi)帶負(fù)電荷的在溶媒中為陽離子型，易與組織和細(xì)胞內(nèi)帶負(fù)電荷的酸性物質(zhì)結(jié)合；而酸性染料在溶媒中為陰離子型，與酸性物質(zhì)結(jié)合；而酸性染料在溶媒中為陰離子型，與帶正電荷的堿性物質(zhì)結(jié)合。帶正電荷的堿性物質(zhì)結(jié)合。b. 蛋白質(zhì)的化學(xué)性質(zhì)：蛋白質(zhì)中的氨基酸含有不同蛋白質(zhì)的化學(xué)性質(zhì)：蛋白質(zhì)中的氨基酸含有不同數(shù)量的氨基（數(shù)量的氨基（ NH2）和羧基（）和羧基（ COOH），同時(shí)還有其），同時(shí)還有其他活性基團(tuán)。在游離狀態(tài)時(shí)，他活性基團(tuán)。在游離狀態(tài)時(shí)， NH2獲得一個(gè)獲得一個(gè)H+變成帶變成帶正電的正電的 NH3+，而，而COOH失

49、去一個(gè)失去一個(gè)H+變成帶負(fù)電的變成帶負(fù)電的 COO-。分別與不同染料結(jié)合。分別與不同染料結(jié)合。c. 周圍環(huán)境的酸堿度：如環(huán)境周圍環(huán)境的酸堿度：如環(huán)境pHpI（ pI 為等電點(diǎn)），為等電點(diǎn)），則蛋白質(zhì)帶正電，結(jié)合酸性染料；反之，則蛋白質(zhì)帶正電，結(jié)合酸性染料；反之， pHpI，則，則結(jié)合堿性染料。結(jié)合堿性染料。（三）、細(xì)胞染色法的類型（三）、細(xì)胞染色法的類型1. 普通染色法：普通染色法： 經(jīng)物理和經(jīng)物理和/或化學(xué)作用的吸附、結(jié)合或化學(xué)作用的吸附、結(jié)合2. 熒光染色法：熒光染料，熒光顯微鏡熒光染色法：熒光染料，熒光顯微鏡3. 細(xì)胞活體染色法：活體染料如燦爛甲酚藍(lán)等細(xì)胞活體染色法：活體染料如燦爛甲酚藍(lán)

50、等4. 細(xì)胞化學(xué)染色法：用化學(xué)反應(yīng)顯示細(xì)胞內(nèi)某種成分。細(xì)胞化學(xué)染色法：用化學(xué)反應(yīng)顯示細(xì)胞內(nèi)某種成分。細(xì)胞免疫化學(xué)染色法（應(yīng)用單克隆抗體技術(shù)、酶標(biāo)記技術(shù)）細(xì)胞免疫化學(xué)染色法（應(yīng)用單克隆抗體技術(shù)、酶標(biāo)記技術(shù)） 染色原理染色原理酸性伊紅酸性伊紅(eosin，E-) 與堿性物質(zhì)如血紅蛋白、嗜酸性與堿性物質(zhì)如血紅蛋白、嗜酸性顆粒結(jié)合顆粒結(jié)合紅色紅色；堿性染料亞甲藍(lán)；堿性染料亞甲藍(lán)(methylene blueVI+)B與酸性物質(zhì)如核染色質(zhì)、特異中性顆粒、血小板與酸性物質(zhì)如核染色質(zhì)、特異中性顆粒、血小板結(jié)合結(jié)合藍(lán)色藍(lán)色；天青和伊紅結(jié)合形成紫色的天青；天青和伊紅結(jié)合形成紫色的天青B-伊紅伊紅復(fù)合物，使白細(xì)胞

51、核染色質(zhì)復(fù)合物，使白細(xì)胞核染色質(zhì)紫色紫色（瘧原蟲的染色質(zhì)（瘧原蟲的染色質(zhì)成紅色），中性粒細(xì)胞的顆粒及血小板顆粒成紅色），中性粒細(xì)胞的顆粒及血小板顆粒紫色紫色。試劑試劑 1. Wright染液染液 瑞氏染粉瑞氏染粉0.1g,甲醇甲醇60.0ml 甲醇：有強(qiáng)大的甲醇：有強(qiáng)大的脫水脫水力，可將細(xì)胞力，可將細(xì)胞固定固定為一定為一定 形態(tài)，并使蛋白質(zhì)沉淀為顆粒狀、網(wǎng)狀等結(jié)構(gòu)，增形態(tài)，并使蛋白質(zhì)沉淀為顆粒狀、網(wǎng)狀等結(jié)構(gòu)，增 加細(xì)胞與染料接觸表面積，加細(xì)胞與染料接觸表面積，提高對(duì)染料的吸附作用提高對(duì)染料的吸附作用， 增強(qiáng)染色效果。增強(qiáng)染色效果。3.磷酸鹽緩沖液（磷酸鹽緩沖液（PBS）：）：磷酸二氫鉀（無水）

52、磷酸二氫鉀（無水）0.3 g，磷酸氫二鈉（無水），磷酸氫二鈉（無水）0.2g, 蒸餾水加到蒸餾水加到1000ml。 配好后用磷酸鹽溶液校正配好后用磷酸鹽溶液校正pH，塞緊瓶口備用。，塞緊瓶口備用。2.少量甘油少量甘油 防甲醉揮發(fā)、并使細(xì)胞著色清楚防甲醉揮發(fā)、并使細(xì)胞著色清楚 染色液：染色液：1g染料染料+中性甲醇（中性甲醇（AR）600ml研細(xì)研細(xì) +純甘油純甘油15ml . 配法：配法：將將瑞氏染料瑞氏染料放在清潔干燥放在清潔干燥碾缽碾缽中中,加加少量甲醇少量甲醇,充分研磨使染料溶解充分研磨使染料溶解.將已完全溶將已完全溶解的部分倒入棕色試劑瓶中解的部分倒入棕色試劑瓶中, 未溶解部分再未溶解部分再加少量甲醇研磨加少量甲醇研磨,直至染料完全溶解于甲醇直至染料完全溶解于甲醇為止，溶解后過濾裝棕色瓶中，為止，溶解后