燈盞花素口腔崩解片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究

1、質(zhì) 量燈盞花素口腔崩解片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究周毅生1, 翟冬艷2, 段瓊輝2, 秦梅頌2, 咸銀庫(kù)1(1.廣東藥學(xué)院,廣東廣州510006;2.河南中醫(yī)學(xué)院,河南鄭州450008收稿日期:2006209218作者簡(jiǎn)介:周毅生(1957,男,教授,從事藥物制劑和藥物體內(nèi)過(guò)程研究,電話(huà):020*。關(guān)鍵詞:野黃芩苷;口腔崩解片;質(zhì)量評(píng)價(jià)摘要:目的:對(duì)燈盞花素口腔崩解片進(jìn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。方法:用薄層色譜法鑒別燈盞花素口腔崩解片中主要成分野黃芩苷,高效液相法測(cè)定該制劑中野黃芩苷的含量進(jìn)行質(zhì)量檢查;并測(cè)定其崩解時(shí)限、溶出度和片重差異。結(jié)果:燈盞花素口腔崩解片能在30s 內(nèi)崩解完全,且片重差異符合規(guī)定;其溶出速度

2、與市售燈盞花素片比較顯著加快。野黃芩苷在0.0816L g0.4080L g 范圍內(nèi),色譜峰面積與進(jìn)樣量間線(xiàn)性關(guān)系良好,r =0.9999,平均回收率為99.67%,RS D 為0.47%。結(jié)論:建立了該制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),其鑒別與含量測(cè)定方法簡(jiǎn)便、可靠,可作為該制劑的質(zhì)量控制指標(biāo)。中圖分類(lèi)號(hào):R 927.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):100121528(20071021446205Q ua lity standard of B reviscap i ne O ra ll y D isi n tegrati ng Tab letsZ HOU Y i 2sheng 1, Z HA I Dong 2y

3、an 2, D UAN Q i o ng 2hu i 2, Q I N M ei 2Song 2, XI A N Y in 2Ku 1(1.Guangdong Univers it y o f Pharmacy ,Guang z hou 510006,Ch ina; 2.H enan Colle g e of Tri d itional Ch i n es eM e d icine ,Zheng z hou 450008,Ch ina K EY W ORD S :scutellari n ;orally d isintegrati n g tab lets ;qua lity evaluati

4、 o nABSTRACT :A I M :To establish quality contr olm ethod f or Breviscap i n e O rally D isintegrati n g T ablets .M ETH 2ODS :Its m ain i n gredient scute llarin was i d entified by TLC ,the scute llarin i n the tablets was deter m i n ed by上的推廣和使用。本實(shí)驗(yàn)根據(jù)野黃芩苷的理化特性,以及速釋的特點(diǎn)制備口腔崩解片,并對(duì)其質(zhì)量控制方法進(jìn)行了研究。1 材料1

5、.1 儀器UV 22261型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(日本島津;LC 22016A 型高效液相色譜儀(PD A 檢測(cè)器(日本島津;BS110S 型電子分析天平(德國(guó)Satori u s;D 2800型智能藥物溶出儀(天津大學(xué)無(wú)線(xiàn)電廠(chǎng);ZF 26型三用紫外線(xiàn)分析儀(上海嘉鵬科技有限公司;超聲波清洗器(上海超聲波儀器廠(chǎng)。1.2 試劑四氫呋喃(A ct u a lAnalysi s ,Exc l u si v ely D istri b u 21446ted byH ua i y i n Guoda Che m ica lReagent CO.,Ltd.;冰醋酸(Actual Analysis,Exclu

6、sively D istri b uted by H uaiyin Guoda Che m i c al Reagent Co.,L t d.;三乙胺(分析純,上海恒信化學(xué)試劑有限公司;醋酸乙酯(分析純,天津科密歐化學(xué)試劑開(kāi)發(fā)中心出品;甲酸(分析純,天津科密歐化學(xué)試劑開(kāi)發(fā)中心出品;定性毛細(xì)管(US A;微孔濾膜(0.8L m(北京化工學(xué)校附屬工廠(chǎng);硅膠G(青島海洋化工有限公司出品,粒度范圍10L m40L m。野黃芩苷(供含量測(cè)定用,批號(hào):8802200001 (中國(guó)藥品生物制品檢定所;燈盞花素原料(云南玉溪萬(wàn)方天然藥物有限公司,批號(hào)031101,含量以野黃芩苷計(jì)為96.76%;燈盞花素口腔崩

7、解片(自制,含燈盞花素以野黃芩苷計(jì)每片約40mg;燈盞花素片(市售普通片,某藥業(yè)有限公司,批號(hào): 20030701、20040201。2方法與結(jié)果2.1燈盞花素口腔崩解片的鑒別4燈盞花素主要含燈盞花乙素,又稱(chēng)野黃芩苷,化學(xué)名稱(chēng)為5,6,7,4c2四羥基黃酮27202B2D2葡萄糖醛酸苷,屬黃酮類(lèi)化合物,可用鹽酸2鎂粉顯色反應(yīng)進(jìn)行鑒別。另外,還可以野黃芩苷對(duì)照品為對(duì)照進(jìn)行薄層鑒別。鹽酸2鎂粉試驗(yàn)取燈盞花素口腔崩解片的細(xì)粉適量(約相當(dāng)于燈盞花素10mg,加甲醇20mL,振搖使溶解,濾過(guò),取濾液2mL,加鎂粉少量及鹽酸數(shù)滴,加熱數(shù)分鐘。試制的樣品顯橙紅色,呈正反應(yīng);取處方配比相應(yīng)量輔料為空白對(duì)照,同

8、法操作,未顯橙紅色。表明輔料對(duì)主藥鑒別無(wú)影響。2.2檢查精密稱(chēng)取野黃芩苷對(duì)照品適量(約5mg置于100mL量瓶中,以磷酸鹽緩沖液(pH6.8為介質(zhì),超聲30m in使溶解,定容。對(duì)此野黃芩苷對(duì)照品溶液在190nm400nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)測(cè)定紫外吸收,并繪制吸收曲線(xiàn)。測(cè)得在335nm波長(zhǎng)處有最大吸收。按處方比例稱(chēng)取輔料0.21g(為一片所含輔料量,置100mL量瓶中,以磷酸鹽緩沖液(pH6.8為介質(zhì),超聲30m i n,定容,濾過(guò)。取續(xù)濾液在190 nm400nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)測(cè)定紫外吸收,并繪制吸收曲線(xiàn)。結(jié)果表明輔料及溶劑系統(tǒng)對(duì)主藥在335nm 波長(zhǎng)處的最大吸收無(wú)影響。精密稱(chēng)取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥至恒

9、重的野黃芩苷對(duì)照品11.75mg,置250mL量瓶中,用磷酸鹽緩沖液(p H6.8溶解,精密量取此溶液20mL,置50mL量瓶中,加磷酸鹽緩沖液(pH6.8稀釋至刻度,搖勻,精密吸取5mL置10mL量瓶中,以磷酸鹽緩沖液(p H6.8稀釋,定容,振搖,即得(每1mL中含野黃芩苷9.4L g。精密稱(chēng)取野黃芩苷對(duì)照品11.75mg,置250mL 量瓶中,用磷酸鹽緩沖液(p H6.8溶解,定量稀釋得濃度為0.047mg/mL對(duì)照品溶液,精密量取此溶液20mL置50mL量瓶中,加磷酸鹽緩沖液(p H 6.8稀釋至刻度,搖勻,精密吸取此對(duì)照品溶液1, 3,5,7,9mL分別置10mL量瓶中,以上述磷酸鹽

10、緩沖液稀釋,定容,振搖。照分光光度法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄V A,在335nm波長(zhǎng)處測(cè)定各對(duì)照品溶液的吸收度,制備標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。制備標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),為A=51.3512C+0.0072,r =0.9999。表明野黃芩苷濃度在0.00188mg/mL 0.01692mg/mL范圍內(nèi),吸收度與溶液濃度間線(xiàn)性關(guān)系良好。取同一對(duì)照品溶液,按標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制備項(xiàng)下方法連續(xù)測(cè)定5次,吸收度平均值為0.4899,RS D值為0.118%,表明精密度良好。精密稱(chēng)取野黃芩苷對(duì)照品11.75mg,置250mL 量瓶中,用磷酸鹽緩沖液(pH6.8溶解,精密量取此1447溶液20mL,置50mL量瓶中,加磷酸鹽緩沖液(pH

11、6.8稀釋至刻度,搖勻,精密吸取5mL置10mL量瓶中,以磷酸鹽緩沖液(pH6.8稀釋,定容,振搖。在不同時(shí)間內(nèi)分別在335nm的波長(zhǎng)處測(cè)定溶液的吸收度。結(jié)果表明,野黃芩苷在磷酸鹽緩沖液(p H6.8中4h之內(nèi)測(cè)定比較穩(wěn)定。精密稱(chēng)取輔料適量,置250mL量瓶中,精密加入對(duì)照品溶液4mL(0.564mg/mL,加適量磷酸鹽緩沖液(pH6.8,使溶解,再用磷酸鹽緩沖液(pH 6.8稀釋至刻度,搖勻,濾過(guò),得供試品溶液。依次測(cè)定并計(jì)算回收率。結(jié)果見(jiàn)表1。表1回收率試驗(yàn)結(jié)果(n=5加入野黃芩苷量/m g 測(cè)得野黃芩苷量/mg回收率/%平均回收率/%RSD/%取樣品,照溶出度測(cè)定法(中國(guó)藥典2000年版

12、二部附錄XC第一法,以磷酸鹽緩沖液(p H6.8900mL為溶出介質(zhì),轉(zhuǎn)速為每分鐘100轉(zhuǎn),依法操作,經(jīng)3,5,10,20,30,60,90,120m in時(shí),分別取溶液10mL,同時(shí)補(bǔ)加同溫介質(zhì)10mL。溶液濾過(guò),分別精密吸取各時(shí)間點(diǎn)的續(xù)濾液2mL,置小試管中,加磷酸鹽緩沖液(pH6.8稀釋至8mL,搖勻,作為供試品溶液。測(cè)定吸收度,由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算出每片的溶出量。重復(fù)測(cè)定3次。繪制溶出度曲線(xiàn),見(jiàn)圖1 。圖1燈盞花素口腔崩解片溶出度曲線(xiàn)取市售燈盞花素片(某藥業(yè)有限公司兩批,同法測(cè)定,求得平均溶出度,作溶出度曲線(xiàn);與燈盞花素口腔崩解片的平均溶出度進(jìn)行比較。見(jiàn)表2,圖2。表2口腔崩解片與市售普通片

13、的溶出度 20圖2溶出度比較曲線(xiàn)測(cè)定方法:取樣品1片,置事先于37b C?1e的水浴中預(yù)熱的10mL干燥燒杯中,加入溫度為37e ?1e的水2mL靜置,觀(guān)察至完全崩解并能全部通過(guò)2號(hào)篩的時(shí)限,不得超過(guò)1m in。壓制5批樣品,每批分別測(cè)定6片,見(jiàn)表3。參照中國(guó)藥典2000年版一部附錄Ñ制劑通則中片劑項(xiàng)下重量差異的檢查方法檢杳。片重0.25g,重量差異限度為?7.5%。對(duì)所壓制的5批樣品分別檢查,重量差異均合格。表3樣品崩解時(shí)限編號(hào)123456x?s精密稱(chēng)取對(duì)照品約20mg,置250mL量瓶中,加甲醇使溶解,稀釋至刻度,精密量取3mL置10 mL量瓶中,加50%甲醇稀釋至刻度,搖勻。以

14、50%甲醇溶液為空白對(duì)照在分光光度計(jì)上測(cè)定190nm 400nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)的紫外吸收,結(jié)果在335nm 處有最大吸收。1448用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,柱溫30e,以四氫呋喃21%冰醋酸溶液(含0.05%三乙胺(28B72為流動(dòng)相:檢測(cè)波長(zhǎng)為335nm。理論塔板數(shù)按野黃芩苷計(jì)算應(yīng)不低于4000。精密稱(chēng)取野黃芩苷對(duì)照品約20mg,置250mL 量瓶中,加甲醇使溶解,稀釋至刻度,搖勻,得對(duì)照品溶液。取燈盞花素口腔崩解片10片,精密稱(chēng)定,研細(xì),精密稱(chēng)取適量(約相當(dāng)于燈盞花素30mg,置50 mL量瓶中,加甲醇適量,超聲處理30m i n,放冷,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,濾過(guò),精密吸取續(xù)濾液1 m

15、L,置25mL量瓶中,用50%甲醇稀釋至刻度,搖勻,得供試品溶液。按照燈盞花素口腔崩解片的處方配比,精密稱(chēng)取混合均勻的輔料0.158g,置50mL量瓶中,加甲醇適量,超聲處理30m i n,放冷,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,濾過(guò),精密吸取續(xù)濾液1mL,置25mL量瓶中,用50%甲醇稀釋至刻度,搖勻,得空白對(duì)照溶液。精密吸取對(duì)照品溶液1.0,2.0,3.0,4.0, 5.0 mL分別置于10mL量瓶中,加50%甲醇稀釋至刻度,搖勻,分別取10L L注入液相色譜儀,測(cè)定峰面積,以色譜峰面積為因變量Y,進(jìn)樣量為自變量X,進(jìn)行線(xiàn)性回歸,得到回歸方程。Y=2606508.578X+4726.3(r=0.99

16、99表明燈盞花素在0.08160.4080L g范圍內(nèi),色譜峰面積與進(jìn)樣量間線(xiàn)性關(guān)系良好。分別取對(duì)照品溶液、供試品溶液、空白對(duì)照溶液10L L注入液相色譜儀,記錄色譜圖?？瞻讓?duì)照品在與對(duì)照品峰的相應(yīng)位置上未見(jiàn)色譜峰,表明輔料對(duì)主藥測(cè)定無(wú)影響;而供試品溶液的出峰時(shí)間同對(duì)照品一致。見(jiàn)圖35。圖3對(duì)照品色譜圖1 野黃芩苷?qǐng)D4 空白對(duì)照色譜圖圖5供試品色譜圖1野黃芩苷取已知含量的樣品10片,置小研缽中,研細(xì),精密稱(chēng)取藥粉適量(約含燈盞花素15mg,分別精密加入野黃芩苷對(duì)照品約15mg,置50mL量瓶中,加甲醇適量,超聲處理30m i n,放冷,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,濾過(guò),精密吸取續(xù)濾液1mL,置25

17、mL量瓶中,用50%甲醇稀釋至刻度,搖勻,得供試品溶液。取燈盞花素口腔崩解片10片,精密稱(chēng)定,研細(xì),精密稱(chēng)取適量(約相當(dāng)于野黃芩苷30mg,置50 mL量瓶中,加甲醇適量,超聲處理30m i n,放冷,加1449表4回收率試驗(yàn)取樣量/g 樣品含野黃芩苷量/mg加入野黃芩苷量/m g測(cè)得野黃芩苷量/m g回收率/%平均回收率/%RS D/%表5樣品含量測(cè)定結(jié)果(n=55批樣品含量測(cè)定結(jié)果在39.6440.40mg/片之間,考慮到生產(chǎn)過(guò)程中的損失及市售藥廠(chǎng)原料不同等因素,暫定本品每片含燈盞花素以野黃芩苷計(jì)不得低于39.00mg。3討論3.1專(zhuān)屬性燈盞花素口腔崩解片的定性鑒別,采用了鹽酸-鎂粉試驗(yàn),

18、并與各自的陰性對(duì)照液進(jìn)行了對(duì)照試驗(yàn),結(jié)果沒(méi)有干擾。3.2空白試驗(yàn)含量測(cè)定采用了H PLC,方法準(zhǔn)確穩(wěn)定,輔料無(wú)干擾,平均回收率達(dá)到99.67%,RS D為0.47%,可以起到控制產(chǎn)品質(zhì)量的作用。3.3溶出度測(cè)定中,通過(guò)測(cè)定不同介質(zhì)中野黃芩苷的溶解度,為滿(mǎn)足漏槽條件,選擇磷酸鹽緩沖液(p H6.8作為溶出介質(zhì)。溶出結(jié)果較為理想。3.4口腔崩解片崩解時(shí)限的測(cè)定方法尚無(wú)法定標(biāo)準(zhǔn)。本實(shí)驗(yàn)研究中,參照國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局發(fā)布的/口腔崩解片的劑型特點(diǎn)和質(zhì)量控制會(huì)議紀(jì)要0的有關(guān)技術(shù)要求及中國(guó)藥典2000年版二部附錄I制劑通則片劑項(xiàng)下分散片崩解時(shí)限的測(cè)定制定測(cè)定方法,并進(jìn)行了體內(nèi)外相關(guān)性試驗(yàn),結(jié)果表明該測(cè)定方法簡(jiǎn)便易行可控,能較好的反映制劑的實(shí)際崩解時(shí)間。參考文獻(xiàn):1燈盞花素片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),衛(wèi)生部中藥標(biāo)準(zhǔn)S.WS32B22516297.2中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十三冊(cè)S.廣州:廣東科技出版社,1997:176.3華捷,陳超.H PLC法測(cè)定燈盞花素片含量J.海峽藥學(xué),2002,14(1:30231.