九聯(lián)檢項目可行性報告

1、WORD格式九項呼吸道感染病原體IgM 抗體檢測試劑盒（間接免疫熒光法）項目推薦書注冊證號：國食藥監(jiān)械（進）字2010 第 3400365號生產(chǎn)廠家：西班牙VIRCELL公司中國獨家代理：鄭州安圖生物工程股份有限公司專業(yè)資料整理WORD格式公司簡介代理公司：安圖生物專業(yè)從事體外診斷產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和銷售的高新技術(shù)企業(yè)體外診斷試劑 GMP 認證（ 2001年， 2003年， 2008年）體外診斷試劑 ISO13485 認證（ 2006 年 UL ， 2009 年）SFDA 認證中心體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量體系考核（2008 年）河南省二類體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量體系考核（2008 年）醫(yī)療檢測儀器（酶標

2、儀/ 發(fā)光儀等） ISO13485/CE/IVDD認證鄭州安圖生物成立于1998 年，是從事體外診斷產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和銷售的高新技術(shù)企業(yè)。安圖生物已經(jīng)通過國家藥品GMP 認證、 ISO13485-2003國際質(zhì)量體系認證、國家體外診斷試劑質(zhì)量體系考核。通過河南省50戶成長型高技術(shù)企業(yè)、河南省體外診斷試劑工程研究中心、河南省級企業(yè)技術(shù)中心、河南省免疫診斷試劑工程技術(shù)研究中心認定。是河南省體外診斷行業(yè)的龍頭企業(yè)，綜合實力國內(nèi)同行業(yè)中名列前茅。公司主營業(yè)務(wù)涵蓋體外診斷試劑、醫(yī)學檢驗儀器、軟件和臨床醫(yī)學檢驗服務(wù)領(lǐng)域。產(chǎn)品品種包括：傳染病檢測系列、腫瘤檢測系列、內(nèi)分泌檢測系列、甲狀腺功能檢測系列、糖尿病

3、檢測系列、細菌和耐藥檢測系列、兒童發(fā)育檢測等七大系列檢測試劑，以及酶標儀、洗板機、發(fā)光儀、免疫自動化系統(tǒng)等四大系列檢測儀器。安圖生物定位于發(fā)展民族產(chǎn)業(yè)：高點起步，打造安圖品牌；定位于專業(yè)性公司：專注免疫和微生物診斷產(chǎn)品；定位于技術(shù)創(chuàng)新型企業(yè)：保證核心競爭力的可持續(xù)性；定位于市場先導型企業(yè)：保證企業(yè)健康、高速發(fā)展。專業(yè)資料整理WORD格式西班牙VIRCEL公司簡介：VIRCELL成立于1991年，專業(yè)從事微生物診斷試劑的開發(fā)和生產(chǎn)。公司目前擁有近 200個品種，涵蓋多種檢測方法：酶聯(lián)免疫分析免疫熒光分析細胞培養(yǎng) 分子生物等，產(chǎn)品在全球范圍銷售，目前已銷往50 多個國家。2008 年銷售分布：VI

4、RCELL 公司相關(guān)質(zhì)量認證：1999年通過 ISO 9002: 1994質(zhì)量認證；2009年更新 ISO 9001: 2008質(zhì)量認證；2003年獲得 CE 認證；2005年獲得 ISO 13485: 2005認證產(chǎn)品銷往全球50多個國家：SouthAmerica2,99%IFA14%ELISA60%Africa0,98%BRUCAPTCELL6%CULTURE20%Asia21,17%NorthAmerica0,19%Oceania0,13%Europe74,55%專業(yè)資料整理WORD格式目錄1、檢驗項目現(xiàn)狀分析2、VIRCELL產(chǎn)品優(yōu)勢及性能分析3、收費標準及效益分析4、產(chǎn)品技術(shù)參數(shù)專業(yè)

5、資料整理WORD格式1、檢驗項目現(xiàn)狀分析目前市面上所見同類項目產(chǎn)品存在著以下幾點缺陷：1、一般產(chǎn)品多為國產(chǎn)酶聯(lián)法，在產(chǎn)品靈敏度、特異性方面不是十分符合臨床診斷；2、沒有一個廠家產(chǎn)品能同時涵括此9 個項目，而且方法學不統(tǒng)一，使用科室在使用的過程中因操作的繁瑣、復雜，難以做好有效的質(zhì)量控制；3、目前國內(nèi)此九個項目文號齊全的廠家只有我公司擁有，其中幾個項目（如肺炎衣原體、副流感病毒等）國內(nèi)除我公司外其他廠家均為無證產(chǎn)品，按照我國目前現(xiàn)行法律，使用單位在使用時無法得到產(chǎn)品質(zhì)量的有效保證，這樣就使得使用單位使用后存在法律風險：如因產(chǎn)品質(zhì)量問題帶來的醫(yī)患糾紛時，使用單位無法得到法律的有效保護；而且面臨著藥

6、監(jiān)部門罰款，這樣的話也使用單位不僅面臨法律的制裁及經(jīng)濟上的損失，而且其專業(yè)地位也會因此而受到影響。2、VIRCELL產(chǎn)品優(yōu)勢、臨床意義及性能分析產(chǎn)品優(yōu)勢：全國獨家九項全部擁有國家批準文號且方法學經(jīng)典、統(tǒng)一，操作專業(yè)資料整理WORD格式簡單，質(zhì)量可靠，既滿足臨床需要又規(guī)避法律風險；性能穩(wěn)定、無交叉反應(yīng)；產(chǎn)品經(jīng) ISO 9002 CE認證，品質(zhì)保證；一卡九項，避免漏檢；有效期長達18個月。臨床意義：呼吸道感染性疾病的早期、快速、準確診斷；對病原體的鑒別診斷提供導向性依據(jù)；指導臨床合理用藥。產(chǎn)品性能：九項呼吸道感染病原IgM抗體檢測試劑盒，采用間接免疫熒光法IFA ），同時體（檢測人血清中呼吸道感染

7、主要病原體IgM 抗體，可檢的病原體包括：嗜肺軍團菌血1的清型、肺炎支原體、Q 熱立克次體、肺炎衣原體、腺病毒、呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒和副流感病毒1、 2和 3型。用于呼吸道感染疾病的輔助診斷。1. 檢測原理間接免疫熒光法（IFA ）（圖 1 ）是基于待測樣本中的抗體與吸附在載玻片上的抗原發(fā)生的反應(yīng)。樣本中存在的特異性抗體和抗原反應(yīng)，未與抗原結(jié)合的免疫球蛋白在洗滌步驟中除去。在下一步驟中，抗原- 抗體復合物與熒光素標記的抗人球蛋白反應(yīng)，用免疫熒光顯微鏡觀察結(jié)果。專業(yè)資料整理WORD格式圖 1 ： 九項呼吸道感染病原體IgM抗體檢測試劑盒檢測原理2. 試劑盒組成及用途組分成分

8、和用途檢測的物理載體，覆有聚四氟乙烯并包被有針對檢測物的特異性抗原，載玻片包裝袋內(nèi)有一袋硅膠以防潮。質(zhì)控品用于證明試劑盒及試驗的有效性，含有人血清及防腐劑。羊抗人 IgG用來吸附人IgG避免干擾IgM檢測，含有防腐吸附劑劑。熒光素標記的抗人免疫球蛋白結(jié)合物，含有染色液、防腐劑和蛋白穩(wěn)定FITC 結(jié)合物劑。和抗原抗體復合物反應(yīng)，并顯色。封閉介質(zhì)甘油緩沖液，便于觀察。磷酸鹽緩沖液用于洗滌步驟，從反應(yīng)介質(zhì)中除去未結(jié)合的免疫球蛋白和結(jié)合物。(PBS)3. 操作步驟3.1實驗前準備1）實驗所需物品準備：1000ml量筒、 1000ml燒杯、離心管、微量移液器、溫育濕盒、洗瓶、水平搖床、恒溫箱、蓋玻片、熒

9、光顯微鏡。2） PBS 洗液的準備：將1 瓶 PBS 粉末倒入燒杯中，加入1L 蒸餾水中，搖勻直至完全溶解，配好后儲存在2-8oC備用。3）使用前，將所有試劑平衡至室溫，將恒溫箱調(diào)至37。3.2實驗步驟1）樣本的稀釋：按1:1比例稀釋血清標本，即25 L 血清加入25 L PBS 中。陰陽性對照不需要稀釋。2）用吸附劑處理稀釋后的血清：將30 L 稀釋后的血清加入150 L 吸附劑中，徹底混勻。陰陽性對照不需吸附劑處理。處理后的血清要離心（ 13000r ， 10min）除去沉淀，以防干擾檢測。3）在載玻片的每孔中加15 L 吸附劑處理過的血清。在一個載玻片的每孔中加入15L 不稀釋的陽性對照

10、，在另一個載玻片的每孔中加入15 L 不稀釋的陰性對照。4）將載玻片放入濕盒中，37溫育90分鐘。5）用PBS洗液的緩慢水流沖洗載玻片（避免直接沖入孔內(nèi)）后，浸泡在PBS 中并放置在專業(yè)資料整理WORD格式水平搖床上輕輕搖動10 分鐘。將載玻片用蒸餾水緩慢水流沖洗（避免直接沖入孔內(nèi)）。6）載玻片自然風干。7）每孔加入15 LFITC 結(jié)合物溶液（不需稀釋）。8）將載玻片放入濕盒，37溫育 30分鐘。9）重復6和 7的洗滌步驟。10）加幾小滴封閉介質(zhì)，小心蓋上蓋玻片。11）盡快用熒光顯微鏡在400倍放大率下觀察結(jié)果。如果不能立即觀察，可將其避光放置于2-8oC 不超過 24小時。簡明操作程序：4

11、結(jié)果判斷4.1有效性判斷每一次試驗都應(yīng)設(shè)立陽性和陰性對照，以確認試驗和試劑盒的有效性。觀察到的熒光模式應(yīng)為：1-15% 細陽性對照：腺病毒、流感病毒、呼吸道合胞病毒或副流感病毒對陽性質(zhì)控的胞出現(xiàn)蘋果綠細胞核、胞漿或胞膜熒光（在副流感病毒和呼吸道合胞病毒中能同時觀察到著色的合胞）；軍團菌、衣原體或立克次體中所有的細菌呈現(xiàn)出蘋果綠熒光；支原體對陽性質(zhì)控在細胞外圍呈現(xiàn)蘋果綠色熒光。專業(yè)資料整理WORD格式陰性對照：軍團菌、肺炎衣原體和立克次體無熒光，支原體、腺病毒、甲型和乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒和副流感病毒的細胞呈現(xiàn)紅色。陽性結(jié)果熒光圖譜：陰性結(jié)的熒光圖譜：4.2樣本結(jié)果判斷陽性結(jié)果：可以觀察到

12、腺病毒、流感病毒、呼吸道合胞病毒或副流感病毒對陽性血清的1-15% 細胞的細胞核、胞漿或胞膜出現(xiàn)蘋果綠色熒光（在副流感病毒和呼吸道合胞病毒中能同時觀察到著色的合胞）；軍團菌、衣原體或立克次體中所有的細菌呈現(xiàn)出蘋果綠色熒光；支原體對陽性血清在細胞外圍呈現(xiàn)蘋果綠色熒光。陰性結(jié)果：可觀察到軍團菌、肺炎衣原體和立克次體無熒光，支原體、腺病毒、甲型和乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒和副流感病毒的細胞呈現(xiàn)紅色1. 性能指標5.1. 靈敏度和特異性采用方法學對比進行陰陽性符合率分析，陽性符合率代表靈敏度，陰性符合率代表特異性，結(jié)果如下：專業(yè)資料整理WORD格式陰性符合病原體對比方法樣本數(shù)量陽性符合率率嗜肺軍團菌

13、IFA8294.4%98.4%肺炎支原體ELISA6296.8%100.0%Q熱立克次體IFA74100.0%97.6%肺炎衣原體IFA61100.0%98.0%腺病毒ELISA7485.7%97.0%呼吸道合胞病毒ELISA9793.8%100.0%甲型流感病毒ELISA4694.1%96.4%乙型流感病毒ELISA40100.0%96.4%副流感病毒ELISA36100.0%96.3%5.2精密度5.2.1分析內(nèi)精密度在相同實驗條件下由同一個操作人員在同一次試驗中對3 份血清（ 2份陽性和1份陰性）分別進行5 組加樣檢測。結(jié)果：滴度變化不超過一個稀釋度。5.2.2 分析間精密度在 5種不同

14、條件下 （不同操作人員或不同試驗日對 3份血清（ 2份陽性期）和 1份陰性）進行檢測。結(jié)果：滴度變化不超過一個稀釋度。5.3交叉反應(yīng)和干擾病原體干擾物質(zhì)樣本例數(shù)結(jié)果肺炎支原體、肺炎衣原體和Q熱立克次體、革蘭氏陰性細菌（布魯氏菌，嗜肺軍團菌沙20門氏菌）和抗核抗體嗜肺軍團菌、肺炎衣原體和Q熱立克肺炎支原體12次體無交叉反應(yīng)或干肺炎支原體、肺炎衣原體和嗜肺軍團擾菌、同種屬的細菌（發(fā)疹傷寒等的病20立克次體原體）和抗核抗體嗜肺軍團菌、 Q 熱立克次體和肺炎支原體，同種屬的細菌（發(fā)疹傷寒等的病20肺炎衣原體原專業(yè)資料整理WORD格式體）和抗核抗體專業(yè)資料整理WORD格式RSV、甲型和乙型流感病毒和副流

15、感病腺病毒毒8呼吸道合胞病腺病毒、甲型和乙型流感病毒和副流毒感病毒或根據(jù)病毒分類（麻疹）10RSV、乙型流感病毒、腺病毒和副流感甲型流感病毒病毒8RSV、甲型流感病毒、腺病毒和副流感乙型流感病毒病毒8副流感病毒RSV、甲型和乙型流感病毒和腺病毒85.4其它干擾研究對 25 份類風濕因子陽性血清進行了2 種病毒和2種細菌抗原IgG和 IgM抗體的檢測。對另外兩份血清進行了每種抗原IgG和 IgM抗體的檢測。在IgM檢測中，用抗IgG抗體對血清進行了吸附處理。結(jié)果顯示，吸附劑可以有效避免類風濕因子的干擾。經(jīng)驗證，吸附劑也可以有效地避免IgG 抗體過量造成的假陰性。3、收費標準及效益分析目前江西省九項收費標準合計為425 元 / 例，該項目無需過多的設(shè)備投資，主要設(shè)備為熒光顯微鏡，此項目不僅能給使用單位帶來可觀的經(jīng)濟效益，更重要的是，規(guī)避了使用單位使用無證產(chǎn)品帶來的法律風險、提高了使用單位的檢測水平也就相應(yīng)的提高了使用單位的專業(yè)地位，這樣的社會效益和經(jīng)濟效益必將給使用單位帶來更美好的發(fā)展前景！贛發(fā)改收費字2005175號項目項目編號三級二級一級套用醫(yī)院醫(yī)院醫(yī)院方法專業(yè)資料整理WORD格式合胞病毒副流感軍團菌Q 熱立克次體肺炎支原體腺病毒甲流乙流250403026呼吸201512道合胞病毒抗體測定250403028副流302520感抗體檢測250403042軍團504030菌