菌種制作技術(shù)

1、食用菌生產(chǎn)技術(shù)課程組原種和栽培種的生產(chǎn)技術(shù)原種和栽培種的生產(chǎn)技術(shù) 原種和栽培種的生產(chǎn)，無論是培養(yǎng)基成分，原種和栽培種的生產(chǎn)，無論是培養(yǎng)基成分，配制方法和滅菌方法基本上是相同的。配制方法和滅菌方法基本上是相同的。1）原種：是由試管斜面培養(yǎng)基培養(yǎng)的母種作種）原種：是由試管斜面培養(yǎng)基培養(yǎng)的母種作種源接種而成，主要用于繁殖栽培種，源接種而成，主要用于繁殖栽培種，也可直接也可直接用于生產(chǎn)。用于生產(chǎn)。（母種（母種原種）原種）2）栽培種：由原種作種源擴大而成，）栽培種：由原種作種源擴大而成，只能用于只能用于生產(chǎn)生產(chǎn)。（原種（原種栽培種栽培種)配制培養(yǎng)基滅 菌二級菌種培 養(yǎng)接 種培 養(yǎng)接 種滅 菌配制培養(yǎng)基三

2、級菌種一級菌種二級菌種原種、栽培種的制作流程原種、栽培種的制作流程 按配方稱取原料按配方稱取原料拌料拌料裝瓶（袋）裝瓶（袋）打 洞 （ 孔 徑打 洞 （ 孔 徑 1 c m 深 至 瓶 底 ）深 至 瓶 底 ） 滅 菌滅 菌（1.5kgcm2，1.52h）冷卻冷卻接種接種（接入黃豆大小一塊）（接入黃豆大小一塊）培養(yǎng)（培養(yǎng)（25 27）菌絲長滿瓶（袋）菌絲長滿瓶（袋）培養(yǎng)培養(yǎng)7d8d擴大成栽培種。擴大成栽培種。 （一）配制總原則（一）配制總原則 1 1選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì)。選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì)。 2 2營養(yǎng)物質(zhì)間配制的比例要恰當。營養(yǎng)物質(zhì)間配制的比例要恰當。 3 3選擇經(jīng)濟實用、來源廣泛的原料。選擇

3、經(jīng)濟實用、來源廣泛的原料。 4 4適宜的適宜的pHpH值和含水量。值和含水量。 培養(yǎng)基（料）配制原則培養(yǎng)基（料）配制原則掌握碳氮比例掌握碳氮比例 食用菌對碳和氮的需要有一個比例，簡稱碳食用菌對碳和氮的需要有一個比例，簡稱碳氮比（氮比（C）。）。菌絲體生長階段：菌絲體生長階段：C=20 1；子實體形成階段：子實體形成階段：C=3040 1；C 過高，菌絲體生長過旺，而子實體小、過高，菌絲體生長過旺，而子實體小、產(chǎn)量低。產(chǎn)量低。 選好培養(yǎng)材料選好培養(yǎng)材料首先選不含殺菌物質(zhì)的木屑首先選不含殺菌物質(zhì)的木屑 杉、松、樟等樹種，含酚、酯、精油等殺杉、松、樟等樹種，含酚、酯、精油等殺菌物質(zhì)，會抑制食用菌生長

4、。要用必須經(jīng)過菌物質(zhì)，會抑制食用菌生長。要用必須經(jīng)過處理，如：蒸煮、曬等。處理，如：蒸煮、曬等。 根據(jù)食用菌的喜好選木屑根據(jù)食用菌的喜好選木屑 如：培養(yǎng)香菇用樺木屑就比椴木屑好；如：培養(yǎng)香菇用樺木屑就比椴木屑好； 培養(yǎng)金針菇用構(gòu)，楮等木屑就比用榆、槐等培養(yǎng)金針菇用構(gòu)，楮等木屑就比用榆、槐等木屑好。木屑好。 注意物理性狀注意物理性狀 培養(yǎng)原料要注意顆粒粗細、質(zhì)地軟硬程度，培養(yǎng)原料要注意顆粒粗細、質(zhì)地軟硬程度，以及持水性能等物理性狀。以及持水性能等物理性狀。調(diào)節(jié)酸堿度調(diào)節(jié)酸堿度 各種食用菌需要的各種食用菌需要的pH值不同，配制培養(yǎng)料值不同，配制培養(yǎng)料時，應(yīng)選用時，應(yīng)選用NaOH、石灰、鹽酸或過磷酸

5、鈣等、石灰、鹽酸或過磷酸鈣等物質(zhì)調(diào)節(jié)物質(zhì)調(diào)節(jié)pH值。霉菌比食用菌喜歡更低的值。霉菌比食用菌喜歡更低的pH值，生產(chǎn)上有時為了控制這類雜菌的發(fā)生，往值，生產(chǎn)上有時為了控制這類雜菌的發(fā)生，往往將往將pH值適當調(diào)高值適當調(diào)高0.51。原料選擇的注意事項（幾點說明）原料選擇的注意事項（幾點說明）木屑：木屑： 樹種：樹種：除松樹、杉樹、柏樹、樟樹、除松樹、杉樹、柏樹、樟樹、蕓香屬、按屬等樹種之外，絕大多數(shù)闊蕓香屬、按屬等樹種之外，絕大多數(shù)闊葉樹和木屑都可以利用。（因其中含有葉樹和木屑都可以利用。（因其中含有酚、酯、精油等殺菌物質(zhì)）酚、酯、精油等殺菌物質(zhì)） 粗細：粗細：不宜過細，以免培養(yǎng)基過濕或不宜過細，以

6、免培養(yǎng)基過濕或通氣不良。通氣不良。 選擇：選擇：根據(jù)食用菌分解能力選擇，分解能根據(jù)食用菌分解能力選擇，分解能力較強的食用菌采用硬質(zhì)闊葉樹木屑，反之力較強的食用菌采用硬質(zhì)闊葉樹木屑，反之采用軟質(zhì)樹種木屑。采用軟質(zhì)樹種木屑。如：如：金針菇分解能力較弱，以含單寧較少木金針菇分解能力較弱，以含單寧較少木屑為宜，木屑越陳越好；屑為宜，木屑越陳越好；茯苓菌分解能力較強，可采用顆粒粗的松木茯苓菌分解能力較強，可采用顆粒粗的松木屑或松木釘。屑或松木釘。 米糠、麩皮作用米糠、麩皮作用作用：補充氮源和作用：補充氮源和維生素維生素。 稻草、麥秸、木屑、棉籽殼等纖維素原料，稻草、麥秸、木屑、棉籽殼等纖維素原料，含氮量

7、低。如：木屑含氮量含氮量低。如：木屑含氮量0.03%以下。以下。麩皮：麩皮：含氮量比米糠多，但維生素不如米糠。含氮量比米糠多，但維生素不如米糠。米糠：米糠：含氮量比麩皮少。含氮量比麩皮少。用量：一般用量：一般10%20%，過多易引起污染。，過多易引起污染。 加糖的作用加糖的作用初期補充碳源，用量初期補充碳源，用量1%5%。誘導(dǎo)胞外酶的產(chǎn)生。誘導(dǎo)胞外酶的產(chǎn)生。 纖維素原料，食用菌利用緩慢。加入纖維素原料，食用菌利用緩慢。加入少量白糖作為食用菌少量白糖作為食用菌初期補充碳源初期補充碳源，促，促進菌絲快速生長，同時誘導(dǎo)纖維素酶的進菌絲快速生長，同時誘導(dǎo)纖維素酶的產(chǎn)生，更好地利用纖維素。產(chǎn)生，更好地利

8、用纖維素。 Ca2作用作用提供食用菌鈣離子：原料中加石膏、提供食用菌鈣離子：原料中加石膏、CaCO3或過磷酸鈣、骨粉提供食用菌鈣或過磷酸鈣、骨粉提供食用菌鈣離子；離子；鈣不斷中和食用菌產(chǎn)生的有機酸；鈣不斷中和食用菌產(chǎn)生的有機酸；鈣還能中和單寧；鈣還能中和單寧；減少過量減少過量K、Mg對菌絲中毒，促進菌對菌絲中毒，促進菌絲生長。絲生長。 1、常用培養(yǎng)料的配方和配制方法、常用培養(yǎng)料的配方和配制方法 培培養(yǎng)養(yǎng)料料 木屑木屑米糠培養(yǎng)料：米糠培養(yǎng)料：木生菇類木生菇類，如：，如：木耳、銀耳、香菇；木耳、銀耳、香菇；草莖或草糞草莖或草糞廄肥培養(yǎng)料：廄肥培養(yǎng)料：草生菇類草生菇類，如：蘑菇、草菇；如：蘑菇、草菇

9、；棉籽殼棉籽殼米糠培養(yǎng)料米糠培養(yǎng)料：多種菇類。：多種菇類。 糞草培養(yǎng)基（適用于蘑菇）糞草培養(yǎng)基（適用于蘑菇） 稻草或麥秸稻草或麥秸20kg、糞肥（干）、糞肥（干）30kg、石膏、石膏500g、水適量。、水適量。方法：稻草切成方法：稻草切成2cm長糞肥長糞肥混合混合發(fā)酵發(fā)酵石石膏膏調(diào)水調(diào)水裝瓶裝瓶滅菌滅菌1、常用培養(yǎng)料的配方和配制方法、常用培養(yǎng)料的配方和配制方法 w 稻草麩皮培養(yǎng)基（草菇）稻草麩皮培養(yǎng)基（草菇）w 干稻草干稻草78%、麩皮或米糠、麩皮或米糠20%、蔗糖、蔗糖1%、過磷酸鈣、過磷酸鈣1%、水適量、水適量w 方法：稻草切成方法：稻草切成2cm長長發(fā)酵發(fā)酵蔗糖蔗糖麩皮過磷酸鈣麩皮過磷酸

10、鈣 木屑米糠培養(yǎng)基木屑米糠培養(yǎng)基（香菇、木耳、猴頭、平菇香菇、木耳、猴頭、平菇等）等） 木屑木屑78%、麩皮或米糠、麩皮或米糠20%、石膏、石膏1%、蔗糖、蔗糖1%、水適量。、水適量。 木屑、麩皮、黃豆粉培養(yǎng)基（木屑、麩皮、黃豆粉培養(yǎng)基（銀耳銀耳） 木屑木屑50kg、麩皮、麩皮15kg、黃豆粉、黃豆粉1kg、蔗糖、蔗糖0.75kg、MgSO4 0.25kg、水、水7075kg。棉籽殼培養(yǎng)基（棉籽殼培養(yǎng)基（平菇、猴頭、金針菇平菇、猴頭、金針菇） 棉籽殼棉籽殼99.7%、蔗糖、蔗糖0.1%、石膏、石膏0.2%、水適量。、水適量。1、常用培養(yǎng)料的配方和配制方法、常用培養(yǎng)料的配方和配制方法 稱料拌料調(diào)

11、節(jié)pH值分裝培養(yǎng)料清潔（洗或擦）瓶、袋外壁封口1.不溶性主、輔料混拌均勻2.可溶性輔料溶于水后拌入主輔料3.注意檢查含水量（手測法等）比實際要求的pH值調(diào)高1左右容器：菌種瓶菌種瓶、菌種袋菌種袋要求：上緊下松，外緊內(nèi)松，中間一個洞臥式高壓蒸汽滅菌鍋分析原因？三.二、三級菌種的接種概念：菌種移至新培養(yǎng)基上的過程關(guān)鍵：無菌操作無菌操作接種接種環(huán)境消毒滅菌酒精棉球消毒雙手操作器具消毒滅菌開啟的管口、瓶口靠近燈焰拔出的棉塞勿觸及任何地方動作快、準、穩(wěn)無菌操作要點接種方法二級種三級種用接種耙取蠶豆大母種放于瓶中料面上用接種匙（鑷、鏟）取棗大原種放于袋中或瓶中料面上注意：1、嚴格挑選待接的菌種質(zhì)量； 2、

12、勿接入表面老菌絲及老種塊。菌種的培養(yǎng)實際就是對菌絲體的培養(yǎng)培養(yǎng)條件場所清潔空氣清新光線暗溫度約25空氣濕度60%70%培養(yǎng)方法勿堆放過擠及時剔除污染瓶（袋）及時剔除污染瓶（袋）栽培種的菌袋缺氧時可刺孔增氧控制菌齡（菌絲長滿7-10天后使用）菌絲白（或呈該菌種應(yīng)有的顏色）菌絲白（或呈該菌種應(yīng)有的顏色）均勻、粗壯、有菇香味均勻、粗壯、有菇香味接種后萌發(fā)快接種后萌發(fā)快無雜色、無黃水、無結(jié)皮、無原基、無干縮脫壁等現(xiàn)象菌種出售菌種出售必須貼有菌種質(zhì)量合格標簽，必須貼有菌種質(zhì)量合格標簽，標明菌種種類、級別、品種、生產(chǎn)單位和標明菌種種類、級別、品種、生產(chǎn)單位和接種日期。接種日期。合格菌種雜菌檢查（菌種檢查）

13、雜菌檢查（菌種檢查） 接種后的原種，一般在接種后的原種，一般在3d5d左右菌絲恢左右菌絲恢復(fù)生長，應(yīng)每天全面檢查雜菌情況，如有復(fù)生長，應(yīng)每天全面檢查雜菌情況，如有污染及時剔除。（正常為白色，若混有其污染及時剔除。（正常為白色，若混有其它色澤，應(yīng)及時處理）；如發(fā)現(xiàn)接種塊無它色澤，應(yīng)及時處理）；如發(fā)現(xiàn)接種塊無新菌絲萌發(fā)，則認為是死菌，應(yīng)及時補種。新菌絲萌發(fā)，則認為是死菌，應(yīng)及時補種。 正常：菌絲白色正常：菌絲白色 雜菌：黃、紅、綠、黑雜菌：黃、紅、綠、黑 死菌：補種死菌：補種菌種制作過程中，只要做到選擇正確的配方和優(yōu)質(zhì)原料嚴格滅菌優(yōu)良的二、三級菌種優(yōu)良的二、三級菌種嚴格無菌操作科學(xué)培育選擇優(yōu)良菌種

14、選擇優(yōu)良菌種六、制種、保藏中易碰到的問題及處理方法六、制種、保藏中易碰到的問題及處理方法1、母種污染處理、母種污染處理細菌污染細菌污染底部取菌：底部取菌：可根據(jù)細菌只發(fā)生在可根據(jù)細菌只發(fā)生在培養(yǎng)基表面培養(yǎng)基表面，而真菌菌絲能穿透到培養(yǎng)基內(nèi)部的特點，用無而真菌菌絲能穿透到培養(yǎng)基內(nèi)部的特點，用無菌操作法敲破試管取出培養(yǎng)基，在培養(yǎng)基的底菌操作法敲破試管取出培養(yǎng)基，在培養(yǎng)基的底部挑取一小塊帶有菌絲的培養(yǎng)基，移植到另一部挑取一小塊帶有菌絲的培養(yǎng)基，移植到另一試管中培養(yǎng)，可得到純正的母種。試管中培養(yǎng)，可得到純正的母種。1、母種污染處理、母種污染處理細菌污染細菌污染覆蓋培養(yǎng)：覆蓋培養(yǎng)：將熔化培養(yǎng)基冷卻到將熔

15、化培養(yǎng)基冷卻到40，倒在已，倒在已污染細菌的斜面上，使之形成厚約污染細菌的斜面上，使之形成厚約20 cm的覆的覆蓋層，當食用菌菌絲透過培養(yǎng)基形成新的菌落蓋層，當食用菌菌絲透過培養(yǎng)基形成新的菌落時，即可挑取轉(zhuǎn)管純化。時，即可挑取轉(zhuǎn)管純化。1、母種污染處理、母種污染處理真菌污染真菌污染 若污染的是青霉、黃霉、木霉等真菌，只要若污染的是青霉、黃霉、木霉等真菌，只要母種菌絲與這些雜菌沒有相聯(lián)或尚有一部分菌母種菌絲與這些雜菌沒有相聯(lián)或尚有一部分菌絲沒有相聯(lián)，并且這些雜菌的菌絲還絲沒有相聯(lián)，并且這些雜菌的菌絲還沒有產(chǎn)生沒有產(chǎn)生孢子孢子時，可以用無菌方法仔細挑取沒有相聯(lián)的時，可以用無菌方法仔細挑取沒有相聯(lián)的

16、一部分菌絲，移植到另外的試管中繼續(xù)培育，一部分菌絲，移植到另外的試管中繼續(xù)培育，就能得到純正的母種。就能得到純正的母種。 2、原種、栽培種被雜菌污染的原因有哪些？、原種、栽培種被雜菌污染的原因有哪些？怎樣鑒別？怎樣鑒別？ 根據(jù)雜菌開始發(fā)生的部位，大致有以下幾種根據(jù)雜菌開始發(fā)生的部位，大致有以下幾種污染原因：污染原因：若雜菌同時在培養(yǎng)基的若雜菌同時在培養(yǎng)基的上、中、下上、中、下部位發(fā)生，部位發(fā)生，主要是由于主要是由于培養(yǎng)基滅菌不徹底培養(yǎng)基滅菌不徹底造成的。造成的。若雜菌開始發(fā)生在若雜菌開始發(fā)生在接種塊接種塊上，這很可能是母上，這很可能是母種或原種已經(jīng)感染了雜菌；或者是由于種或原種已經(jīng)感染了雜菌；

17、或者是由于接種工接種工具不嚴格具不嚴格（消毒），把雜菌帶入。（消毒），把雜菌帶入。2、原種、栽培種被雜菌污染的原因有哪、原種、栽培種被雜菌污染的原因有哪些？怎樣鑒別？些？怎樣鑒別？若雜菌先在若雜菌先在培養(yǎng)基表面培養(yǎng)基表面發(fā)生，這是由于接種發(fā)生，這是由于接種過程中過程中無菌操作不嚴無菌操作不嚴而引起的。而引起的。若雜菌是在若雜菌是在接種后若干天才接種后若干天才發(fā)生的，而且是發(fā)生的，而且是發(fā)生在瓶口往下掛的，這說明雜菌是從棉花塞發(fā)生在瓶口往下掛的，這說明雜菌是從棉花塞侵入培養(yǎng)基的。引起的原因是侵入培養(yǎng)基的。引起的原因是培養(yǎng)室濕度過大、培養(yǎng)室濕度過大、棉塞受潮，造成霉菌滋生所致棉塞受潮，造成霉菌滋生

18、所致。3、為什么母種不能多次轉(zhuǎn)管移植？、為什么母種不能多次轉(zhuǎn)管移植？ 母種轉(zhuǎn)管次數(shù)多了會削弱菌絲的生活力，降母種轉(zhuǎn)管次數(shù)多了會削弱菌絲的生活力，降低出菇率，甚至造成菌絲不孕而不能形成子實低出菇率，甚至造成菌絲不孕而不能形成子實體。因此母種培育可以體。因此母種培育可以一次多培育幾支試管一次多培育幾支試管，不要反復(fù)多次分離轉(zhuǎn)管，以確保菌絲旺盛的生不要反復(fù)多次分離轉(zhuǎn)管，以確保菌絲旺盛的生活力?；盍Α＃òl(fā)生變異）（發(fā)生變異）4、優(yōu)良菌種的標準是什么？、優(yōu)良菌種的標準是什么？ 各種食用菌菌種，既有特定的質(zhì)量標準，也有各種食用菌菌種，既有特定的質(zhì)量標準，也有共同的質(zhì)量標準。這些共同的質(zhì)量標準主要是共同的質(zhì)量標準。這些共同的質(zhì)量標準