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1、植物營(yíng)養(yǎng)學(xué)實(shí)習(xí)報(bào)告草坪N、P、K的含量測(cè)定 焦志敏 施鵬程 趙娜 馮海燕 陳瑜 梁希07-2一、 草樣的采集1.選定地點(diǎn):根據(jù)本實(shí)驗(yàn)的目的測(cè)定校園內(nèi)草坪中氮磷鉀的含量,以評(píng)定草坪的營(yíng)養(yǎng)狀況,選擇了主樓前的一片草坪,即東起白皮松、青扦,西到香椿、沙地柏所包括的范圍內(nèi)的草坪(如下圖所示)作為實(shí)驗(yàn)草樣。2.采集草樣:由于采集測(cè)定的草樣要具有一定的代表性,故采集時(shí)按照一定路線多點(diǎn)采集(如上圖),在樣地中的四個(gè)頂點(diǎn)和對(duì)角線的中點(diǎn)和交點(diǎn)各取草樣,組成平均樣品。同時(shí),所采集的草樣長(zhǎng)勢(shì)基本一致、未受到病蟲(chóng)害,以及草樣頂端新成熟的健壯葉。由于草坪體內(nèi)各種物質(zhì),特別是活動(dòng)性成分如硝態(tài)氮、氨基態(tài)氮,還原糖等都處于不

2、斷的代謝變化之中,不僅在不同生育期的含量有很大的差別,并且在一日之間也有顯著的周期性變化,因此在采樣時(shí),選取了同一時(shí)間進(jìn)行。二、 樣品的制備、保存1.樣品的洗滌:由于采取的草樣帶有泥土或噴灑的肥料藥劑,為了避免草樣的污染,故樣品先進(jìn)行洗滌,一般用濕布擦凈表面的沾染物即可。2.樣品的殺青與保存:測(cè)定營(yíng)養(yǎng)成分常用干燥樣品,所以洗凈的樣品必須盡快干燥,以減少化學(xué)和生物的變化。如果延遲過(guò)久,細(xì)胞的呼吸和霉菌的分解都會(huì)消耗組織的干物質(zhì)而致改變各成分的百分含量、蛋白質(zhì)也會(huì)裂解成較簡(jiǎn)單的含氮化合物。殺青要有足夠的溫度,但溫度又不能太高,因此,分析用的植物鮮樣要分兩步干燥,先將鮮樣在8090烘箱中烘30分鐘,

3、然后,降溫至6070,逐盡水分,大約要用1224小時(shí)。3.樣品的研磨、過(guò)篩:干燥的樣品要用研缽或帶刀片的磨樣機(jī)粉碎,并全部過(guò)篩。而篩孔的選擇視稱(chēng)樣的大小而定,通常可用圓孔直徑為1mm的篩,但本實(shí)驗(yàn)稱(chēng)樣僅1g左右,故使用0.5mm的篩進(jìn)行篩選。樣品過(guò)篩后充分混勻,然后保存于密封的磨口廣口瓶中,瓶外貼放一樣品標(biāo)簽。三、 樣品的消煮及定容1.樣品的稱(chēng)量:稱(chēng)樣時(shí)將樣品充分混勻后多點(diǎn)勺取,使用電子天平(1/1000)稱(chēng)取1g的樣品,然后裝入100ml開(kāi)氏瓶底部,并在瓶外注明小組名稱(chēng),避免混淆。2.樣品消煮:向裝有測(cè)定樣品的開(kāi)氏瓶中加入1ml水潤(rùn)濕,再加入5ml濃H2SO4(化學(xué)純比重為1.84)搖勻,然

4、后加1滴高氯酸,置于電爐上加熱消煮,使固體物消失成為溶液,待H2SO4發(fā)白煙、溶液成褐色時(shí),拿下來(lái)冷卻,再加1滴高氯酸,繼續(xù)加熱消煮約510分鐘,如此反復(fù)一直至溶液呈無(wú)色或清亮后,取下冷卻,然后用水將消煮液定量地轉(zhuǎn)移到100ml容量瓶中,定容。 四 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果 1 N元素的測(cè)定:(1)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簻y(cè)定草樣中的氮元素含量,以此掌握測(cè)定植物氮含量的方法(2)方法原理: 植物樣品經(jīng)開(kāi)氏消煮、定容后,吸取部分消煮液堿化,使銨鹽轉(zhuǎn)變成氨,經(jīng)蒸餾和擴(kuò)散,用H3BO3吸收,直接用標(biāo)準(zhǔn)酸滴定,以甲基紅溴甲酚綠混合指示劑指示終點(diǎn)。 (3)試劑 40%(m/v)NaOH溶液2%H3BO3指示劑溶液 取標(biāo)準(zhǔn)溶液C

5、(HCl或1/2H2SO4)=0.01mol/L 堿性溶液 (4)操作步驟: 蒸餾法 吸取定容后的消煮液5.0010.00ml,(V2,含NH4N約1ml),用定氮儀蒸餾。(5)結(jié)果計(jì)算 全N%=C(v-v0)×0.014×100/(m×v2/v1) 式中 C酸標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度,mol/L;0.0093 v滴定試樣所用的酸標(biāo)準(zhǔn)液,ml; v0滴定空白所用的酸標(biāo)準(zhǔn)液,ml; 0.014N的毫摩爾質(zhì)量,g/mmol; m稱(chēng)樣量,g; v1消煮液定容體積,ml; v2吸取測(cè)定的消煮液體積ml。 使用凱氏定氮儀: V=17.981mlV0=0.868ml由公式可得:

6、 全氮量=4.97%2 P元素的測(cè)定:(1)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簻y(cè)定草樣中的磷元素含量,以此掌握測(cè)定植物磷含量的方法(2)方法原理: 植物樣品經(jīng)濃H2SO4消煮使各種形態(tài)的磷轉(zhuǎn)變成磷酸鹽。待測(cè)液中的正磷酸和鉬酸能生成藍(lán)色的磷鉬雜多酸,其吸光度與磷濃度成正比,可在波長(zhǎng)700處用吸光光度法測(cè)定磷。實(shí)驗(yàn)步驟:吸取定容、過(guò)濾或澄清后的消煮液5ml放入50ml容量瓶中,加1滴二硝基酚指示劑,調(diào)色,先用堿調(diào)無(wú)色,再用酸調(diào)淡黃色,加5ml鉬銻抗顯色劑,搖勻,定容。顯色30分鐘后,比色。標(biāo)準(zhǔn)曲線或直線回歸方程 準(zhǔn)確吸取5 mg/L標(biāo)準(zhǔn)液0,1,2,4ml分別放入50ml容量瓶中,按上述步驟顯色,即得0,0.1,0.2,

7、0.4 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液,與待測(cè)液一起測(cè)定,讀取吸光度,然后繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線或求直線回歸方程。(3)結(jié)果計(jì)算 標(biāo)準(zhǔn)系列00.10.20.4讀數(shù)00.0450.1060.214P標(biāo)準(zhǔn)曲線00.10.20.300.20.40.6標(biāo)準(zhǔn)系列的濃度吸收值 全P,%(P)×(v/m)×(v3/v2)×104式中C(P)從校準(zhǔn)曲線或回歸方程求得的顯色液中磷濃度,mg/L;v3顯色液體積,ml;v2吸取測(cè)定的消煮液體積,ml;v1消煮液定容體積,ml;m稱(chēng)樣量,g;104將mg/L濃度單位換算為百分含量的換算因數(shù)。數(shù)據(jù)處理分光光度計(jì)上顯示的數(shù)據(jù)為:1.323標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率:0.5

8、35所測(cè)P的濃度為2.47ppm由公式得,速效磷=4940ppm即為0.49%3 K元素的測(cè)定:(1)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簻y(cè)定草樣中的鉀元素含量,以此掌握測(cè)定植物鉀含量的方法(2)實(shí)驗(yàn)原理:使用火焰光度法(3)實(shí)驗(yàn)步驟:首先用空白調(diào)零,用100ppm調(diào)滿度。將待測(cè)液放入火焰光度計(jì)中,可直接用火焰光度法測(cè)定。(4)數(shù)據(jù)處理:讀數(shù)為:20ppm根據(jù)公式:K%讀數(shù)*100/克數(shù)K的含量為2000ppm,即0.2%。五 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析1. 植物N元素的含量:N元素在標(biāo)準(zhǔn)狀況下大約占植物干重0.3%-6%,實(shí)驗(yàn)結(jié)果(4.97%)處于正常值的范圍之內(nèi)。2. 植物P元素的含量:P元素大約占植物干重0.2%-0.55%

9、,實(shí)驗(yàn)的結(jié)果(0.49%)處于正常值的范圍之內(nèi)。3. 植物K元素的含量:K元素大約占植物干重1%-3%,實(shí)驗(yàn)結(jié)果(0.2%)偏低。K元素含量較低的可能原因:1. 測(cè)定儀器存在問(wèn)題:每一個(gè)小組的k元素含量的結(jié)果都普遍偏低。各組都使用同一臺(tái)測(cè)定儀器,所以可能是儀器出現(xiàn)問(wèn)題,導(dǎo)致結(jié)果出現(xiàn)偏差,與標(biāo)準(zhǔn)值不相符合。2. 主動(dòng)運(yùn)輸受到抑制:植物根部對(duì)于K元素的吸收主要通過(guò)主動(dòng)運(yùn)輸,所以,可能是由于此處的灌溉水量較多,同時(shí)地形又比較低洼,導(dǎo)致土壤中通氣狀況下降,根部的呼吸作用受到抑制,致使根部吸收營(yíng)養(yǎng)元素的的主動(dòng)運(yùn)輸受到抑制,而K元素正是通過(guò)這種方式被吸收進(jìn)入植物體中的,所以,植物體中的K元素含量較少。3.

10、 土壤中Ca離子的作用:Ca2+對(duì)多種離子的吸收有協(xié)助作用,一般認(rèn)為是由于它具有穩(wěn)定質(zhì)膜結(jié)構(gòu)的特殊功能,有助于質(zhì)膜的選擇性吸收。這種協(xié)助作用也稱(chēng)“維茨效應(yīng)”。實(shí)驗(yàn)范圍內(nèi)土壤的Ca離子含量可能較低,導(dǎo)致植物對(duì)于K離子的吸收受到了影響,從而使得植物體中的K離子含量較少,偏離正常值。4. 離子間的拮抗作用:指在溶液中某一離子的存在能抑制另一離子吸收的現(xiàn)象,主要表現(xiàn)在對(duì)離子的選擇性吸收上。一般認(rèn)為,化學(xué)性質(zhì)近似的離子在質(zhì)膜上占有同一結(jié)合位點(diǎn)。陽(yáng)離子中,K+,Rb+和Cs+之間發(fā)生節(jié)抗作用,不利于植物對(duì)于K元素的吸收。5. 灌溉流失:采樣處的灌溉進(jìn)行較多,土壤水分充足,由于速效K在土壤中大多是以離子形態(tài)存在

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