分子生物學簡答題(整理)

1、1闡述操縱子（operon）學說：見課本2、乳糖操縱子的作用機制？/簡述乳糖操縱子的結構及其正、負調(diào)控機制答：A、乳糖操縱子的組成：大腸桿菌乳糖操縱子含Z、Y、A三個結構基因，分別編碼半乳糖苷酶、透酶和半乳糖苷乙酰轉移酶，此外還有一個操縱序列O，一個啟動子P和一個調(diào)節(jié)基因I。B、阻遏蛋白的負性調(diào)節(jié)：沒有乳糖存在時，I基因編碼的阻遏蛋白結合于操縱序列O處，乳糖操縱子處于阻遏狀態(tài)，不能合成分解乳糖的三種酶；有乳糖存在時，乳糖作為誘導物誘導阻遏蛋白變構，不能結合于操縱序列，乳糖操縱子被誘導開放合成分解乳糖的三種酶。所以，乳糖操縱子的這種調(diào)控機制為可誘導的負調(diào)控。C、CAP的正性調(diào)節(jié)：在啟動子上游有C

2、AP結合位點，當大腸桿菌從以葡萄糖為碳源的環(huán)境轉變?yōu)橐匀樘菫樘荚吹沫h(huán)境時，cAMP濃度升高，與CAP結合，使CAP發(fā)生變構，CAP結合于乳糖操縱子啟動序列附近的CAP結合位點，激活RNA聚合酶活性，促進結構基因轉錄，調(diào)節(jié)蛋白結合于操縱子后促進結構基因的轉錄，對乳糖操縱子實行正調(diào)控，加速合成分解乳糖的三種酶。D、協(xié)調(diào)調(diào)節(jié)：乳糖操縱子中的I基因編碼的阻遏蛋白的負調(diào)控與CAP的正調(diào)控兩種機制，互相協(xié)調(diào)、互相制約。3、基因調(diào)控的水平有哪些？基因調(diào)控的意義？答：a、DNA水平的調(diào)控。b、轉錄水平上的調(diào)控。c、轉錄后的調(diào)控。d、翻譯水平的調(diào)控。e、細胞質與基因調(diào)控。意義：適應物理，化學等環(huán)境因素變化，調(diào)節(jié)

3、代謝，維持細胞生長與分裂。4、簡述乳糖操縱子的結構及其正負調(diào)控機制。答：結構：A、Y和Z，以及啟動子、控制子和阻遏子。正調(diào)控機制：CAP分解代謝產(chǎn)物激活蛋白質，直接作用于操縱子區(qū)上與cAMP結合形成CAP-cAMP復合物，轉錄進行。負調(diào)控機制：a、無誘導物時結構基因不轉錄。b、有誘導物時與阻遏基因相結合，形成無活性阻遏物，RNA聚合酶可與啟動子區(qū)相結合，起始基因轉錄。5、簡述Trp操縱子的結構及其調(diào)控機制。答：Trp操縱子由5個結構基因TrpE、TrpD、TrpC、TrpB、TrpA組成一個多順因子的基因簇，在5'端是啟動子、操縱子、前導順序和弱化子區(qū)域。 機制：a、輔阻蛋白參與的負調(diào)

4、控阻遏調(diào)節(jié)。/、trp誘導物含量高，與游離的輔阻遏蛋白相結合，形成有活性阻遏物，與操縱子區(qū)DNA緊密結合，進行轉錄。/、trp誘導物含量 低，不能與輔阻遏物結合，輔阻遏物從O區(qū)上解離，trp操縱子阻遏轉錄進行。 b、弱化作用。/、trp濃度高時，2-3不配對，3、4區(qū)自由配對形成莖環(huán)狀終止結構，轉錄停止。/、trp濃度低時，2,3配對，4區(qū)片段無配對，結構基因轉錄。6、細菌的trp操縱子為什么除需要阻遏體系外還需要弱化系統(tǒng)。答：細菌的trp操縱子通過弱化作用彌補阻遏作用的不足，因為阻遏作用只能使轉錄不起始，而對于已經(jīng)起始的轉錄，只能通過弱化作用使之中途停頓下來，阻遏作用的信號是細胞 內(nèi)trp的

5、多少，弱化作用的信號是細胞內(nèi)載有trp的tRNA的多少，兩種作用相輔相成，體現(xiàn)周密的調(diào)控作用。7、簡述原核生物轉錄后調(diào)控的機制。答：a、mRNA自身結構元件對翻譯起始的調(diào)節(jié)。b、mRNA穩(wěn)定性對轉錄水平的影響。c、調(diào)節(jié)蛋白的調(diào)控作用。d、反義RNA的調(diào)節(jié)作用。e、稀有密碼子對翻譯的影響。f、重疊基因對 翻譯的影響。g、翻譯的阻遏。h、魔斑核苷酸水平對翻譯的影響。8、簡要概括真核生物基因表達調(diào)控的7個層次答：a、轉錄水平的調(diào)控，包括基因的開與關和轉錄效率的高與低。 b、DNA水平上的表達調(diào)控，包括基因丟失、擴增、交換、重排、DNA甲基化。 c、轉錄水平的調(diào)控，順式作用元件 與特異轉錄因子結合影響

6、轉錄，反式作用因子能識別結合于順式作用元件上，參與調(diào)控。 d、反式作用因子的DNA識別域或結合域。e、蛋白質修飾、磷酸化和去磷酸化。f、轉錄后水平的調(diào)控。g、翻譯水平的調(diào)控mRNA的“掃描模式”與蛋白質合成起始mRNA5'端帽子結構及polyA尾巴，mRNA穩(wěn)定性與基因表達調(diào)控，蛋白質的修飾。9、真核基因表達調(diào)控與原核生物有什么異同點。答：同：a、都有轉錄水平上調(diào)控和轉錄水平后調(diào)控，并且都以轉錄水平上的調(diào)控為重要。 b、在結構基因的上下游都存在著許多特異的調(diào)控成分，并依靠特異蛋白因子與這些調(diào)控成分的結合與否，調(diào)控基因的轉錄。 異: a、真核基因表達調(diào)控環(huán)節(jié)多，位點多，區(qū)域大，位置多樣化

7、。 b、真核基因的轉錄與染色質的結構變化相關。 c、無操縱子和衰減子。 d、受環(huán)境影響小。 e、以正性調(diào)控為主。 f、調(diào)控的基因組很大，而原核基因組小。10、簡述DNA水平對真核基因表達的調(diào)控。答：DNA水平的調(diào)控是真核生物發(fā)育調(diào)控的一種形式，包括基因丟失，擴增，重排和移位等方式，通過這些方式可以消除或變換某些基因并改變它們的活性。 主要有：a、染色質狀態(tài)對基因表達調(diào)控。b、修飾作用（乙?；谆┡c染色質狀態(tài)的關系。c、基因丟失，擴增，重排，交換。11、真核基因順式作用元件及各自的特點。答：a、啟動子，位于轉錄起始點附近且為轉錄起始所必需的DNA序列。/、核心啟動子，指保證RNA聚合酶2轉錄

8、正常起始所必需的，最少的DNA序列，包括轉錄起始位點及位點上游-30-負25bp處的TATA區(qū)。/、上游啟動子元件，包括通常位于-70bp附近的CAAT區(qū)和GC區(qū)等能通過TF2D復合物調(diào)節(jié)轉錄起始的頻率，提高轉錄效率。 b、增強子，指能使與之連鎖的基因轉錄頻率明顯增加的DNA序列，位于離轉錄起始點較遠位置上，具有參與激活和增強起始功能的序列元件。 c、絕緣子，負調(diào)控作用元件（與增強子作用相反）。12、反式作用因子的DNA結合域有哪幾種？各自的結構特點？答：a、螺旋-轉折-螺旋結構（HTH）。 b、鋅指結構。 c、堿性-亮氨酸拉鏈。d、堿性-螺旋-環(huán)-螺旋，（BHLH結構）。e、同源域蛋白。13

9、、真核基因轉錄調(diào)控的主要模式答：啟動子、轉錄模板、RNA聚合酶2、RNA聚合酶2基礎轉錄所需的蛋白質因子、增強子及絕緣子對轉錄的影響、反式作用因子對轉錄的影響。14、簡述DNA加工水平對基因表達的調(diào)控答：RNA加工水平：a、rRNA加工成熟，包括分子內(nèi)的切割和化學修飾（主要是核糖甲基化）。b、mRNA加工成熟，包括mRNA5末端加“帽子”，3端加上polyA尾巴。c、tRNA的3 末端CCA-OH，5端加上甲基鳥苷酸。翻譯水平：a、真核生物mRNA“掃描模式”與蛋白質合成的起始。b、mRNA的穩(wěn)定性與基因表達的調(diào)控。c、mRNA5'端帽子結構的識別與蛋白質的合成。d、可溶性蛋白因子的修

10、 飾與翻譯起始調(diào)控15、生物體內(nèi)主要有幾種RNA？m RNA：編碼特定蛋白序列r RNA：直接參與核糖體中蛋白質的合成t RNA：能特異性解讀m RNA中的遺傳信息，將其轉化成相應的氨基酸后加入多肽鏈中Sn RNA：小核RNA，是真核生物轉錄后加工過程中RNA剪接體的主要成分.Hn RNA：指導RNA，核酶RNA16、轉錄包括哪幾個基本過程？1.模板識別：RNA聚合酶與啟動子DNA雙鏈互相作用與之相結合的過程 2.轉錄起始：RNA鏈上第一個核苷酸鏈的產(chǎn)生 3.轉錄延伸：RNA聚合酶釋放因子離開啟動子后，核心酶沿模板DNA鏈移動并使新生RNA鏈不斷伸長 4.轉錄終止：RNADNA雜合物分離，轉錄

11、泡瓦解，DNA恢復成雙鏈狀態(tài)，RNA聚合酶和RNA鏈從模板上釋放出來 17、簡述真核細胞RNA聚合酶的細胞定位及其轉錄產(chǎn)物答：見課本18、簡述原核和真核生物啟動子的結構特點答：原核生物：啟動子在兩段由5個核苷酸組成的共同序列，即位于10bp處的TATA區(qū)（也叫pribnow區(qū)），和35bp處的TTGACA區(qū)，他們是RNA聚合酶與啟動子結合位點，能與因子相互識別而具有很高的親和力 真核生物：啟動子在3025bp處的Hogness區(qū)，類似pribnow區(qū)，在7080bp區(qū)有CAAT區(qū)（與35區(qū)序列相對應），在11080的GC區(qū)（GCCACACCC或GGGCGGG序列）19、什么是SD序列？答：原核

12、生物起始密碼子AUG上游712個核苷酸的保守區(qū)，能與16s rRNA的3端反向互補20、簡述真核生物mRNA的結構與原核生物mRNA的結構的區(qū)別答：、真核生物mRNA具有前體，需要轉錄后加工成成熟RNA才能與蛋白質合成、原核生物mRNA以多順反子形式存在，一個mRNA可編碼幾個多肽；真核生物mRNA最多只能編碼一個多肽、原核生物mRNA的5端無帽子結構，3端沒有或只有較短的polyA；而真核生物mRNA的5端存在帽子結構，絕大多數(shù)正所謂3端有polyA結構、原核生物mRNA起始密碼子AUG上游有SD序列的保守區(qū)、起始密碼子原核生物的有AUG(有時GUG,UUG),真核生物只有AUG21、轉錄終

13、止有幾種機制？各有何特點？答：、依賴因子的終止：因子是一個由6個相同亞基組成的六聚體，具有NTP酶和解螺旋酶活性，能水解各種核苷酸三磷酸，通過催化NTP的水解促使新生RNA鏈從三元轉錄復合物中解離出來，從而終止轉錄、不依賴因子的終止：沒有任何其他因子的參與，核心酶也能在某些位點終止轉錄，因模板DNA上存在終止轉錄的特殊信號終止子1.終止位點上游一般存在一個富含GC堿基的二重對稱區(qū)，由這段DNA轉錄產(chǎn)生的RNA容易形成發(fā)卡式結構 2.在終止位點前有一段48個A組成的序列，所以轉錄產(chǎn)物的3端為寡聚U，這種結構特征的存在決定了轉錄的終止 22、內(nèi)含子的分類及剪接機制(含剪接信號、轉酯反應等），各類內(nèi)

14、含子剪接過程的異同。答：內(nèi)含子的分類：GUAG，AUAC，類內(nèi)含子，類內(nèi)含子，類內(nèi)含子，雙內(nèi)含子，pretRNA中的內(nèi)含子。 類內(nèi)含子的剪接主要是轉酯反應，即剪接反應實際上是發(fā)生了兩次磷酸二酯鍵的轉移； 類內(nèi)含子切除體系中，轉酯反應無需游離鳥苷酸或鳥苷，而是由內(nèi)含子本身的靠近3短的腺苷酸2OH作為親核基因攻擊內(nèi)含子5端的磷酸二酯鍵，從上游切開RNA鏈后形成套索環(huán)結構，再由上游外顯子的自由3OH作為親核基因攻擊內(nèi)含子3端的磷酸二酯鍵，使內(nèi)含子被完全切開，上下游兩個外顯子通過新的磷酸二酯鍵鍵相連。發(fā)生了兩次轉酯反應。 類內(nèi)含子主要依靠Sn RNP發(fā)生2次轉酯反應，在哺乳動物中，mRNA前體上的Sn

15、 RNP是從5向下游“掃描”懸著在分支點富嘧啶區(qū)3下游的第一個AG作為剪接的3位點。 剪接機制：組成型剪接：需要外界能量和各種酶形成復合物剪接；自我剪接：不需外源酶和能量，剪接特征由35s RNA自我催化完成；選擇性剪接：同一前體mRNA中的外顯子通過不同組合形成不同的成熟mRNA分子36.RNA編輯的種類及意答：種類：位點特異性脫氨基作用和引導DNA指導的尿嘧啶的插入或刪除意義：1、能夠改變和補充遺傳信息 2、增加基因產(chǎn)物的多樣性 3、與生物細胞發(fā)育與分化有關 4、校正作用 5、翻譯調(diào)控39）核糖體的組成結構及功能 答：組成結構：由大、小兩個亞基，許多不同的核糖體蛋白質子和核糖體RNA共同組

16、成，有3個tRNA的結合位點（A、P、E位點） 功能：、在多肽合成過程中，不同的tRNA將相應的氨基酸帶到蛋白質合成部位，并與mRNA進行專一性的相互作用，以選擇對信息專一的氨基酸t(yī)RNA、核糖體容納另一種攜帶肽鏈的tRNA，即肽酰tRNA，并使之處于肽鏈容易生成的位置上。、核糖體小亞基負責對mRNA進行序列特異性識別；大亞基負責攜帶氨基酸以及tRNA的功能，包括肽鍵的形成，氨基酸t(yī)RNA，肽酰tRNA的結合等40）蛋白質前體的加工主要內(nèi)容答：1、N端f Met或Met的切除：N端的甲硫氨酸往往在多肽合成完畢之前被切除2、二硫鍵的形成：蛋白質的二硫鍵是蛋白質合成后，通過兩個半胱氨酸的氧化作用生

17、成的，密碼子中沒有胱氨酸的密碼子。3、特定氨基酸的修飾：氨基酸側鏈的修飾包括磷酸化、糖基化、甲基化、已基化、羥基化和羧基化等。4、切除新生肽鏈中的非功能片段：不少肽類激素和酶的前體都要經(jīng)過加工才能變成活性分子41）蛋白質轉運的主要機制答：1、翻譯轉運同步機制：由信號肽介導協(xié)助轉運。 蛋白質其實首先合成信號肽SRP與信號肽結合，翻譯暫停SRP與SRP受體結合，核糖體與膜結合，翻譯重新開始信號肽進入膜結構蛋白質過膜，信號肽被切除，翻譯繼續(xù)進行蛋白質完全過膜，核糖體解離并回復翻譯起始前狀態(tài)。2、翻譯后轉運機制：由前導肽介導協(xié)助轉運，線粒體和葉綠體中的蛋白質。 蛋白質由外膜上的Tom受體復合蛋白識別與

18、分子伴侶相結合形成轉運多肽，通Tom和Tim組成的膜通道進入內(nèi)腔蛋白酶水解前導肽。3、核定位蛋白的轉運機制： 細胞質中的蛋白質通過核孔到達細胞核（裝配）運回細胞質進行轉運。 如：RNA，DNA聚合酶，組蛋白，拓撲異構酶等42）信號肽的結構特征及功能答：結構特征1、一般帶有1015個疏水氨基酸，位于蛋白質的N端；2、在靠近N端有一個或數(shù)個帶正電荷的氨基酸；3、C端有一個能被信號肽識別的位點；4、沒有嚴格的專一性；5、信號肽可能是一種環(huán)狀結構，而非是以一種直線通過雙脂層膜；（6、在C端靠近蛋白酶切點處常有數(shù)個極性氨基酸，離切割位點最近的那個氨基酸往往帶有很短的側鏈；7、廣義上的信號肽是初生蛋白質穿

19、過膜必須的疏水性肽段，它位于蛋白質各部位。）功能：1、保證蛋白質順利轉運；2、延伸功能；3、能和新生的分泌蛋白的信號肽相結合；4、能和位于膜上的蛋白受體相結合。44）原核與真核生物蛋白質合成起始的差別答：1、原核生物的起始tRNA是fMettRNAfMet，真核生物是MettRNAMet。2、原核生物中30s小亞基先與mRNA模板相結合，最后與50s大亞基結合；而在真核生物中，40s小亞基首先與MettRNAfMet結合，再與模板mRNA結合，最后與60s大亞基結合生成80s?mRNA?MettRNAfMet起始復合物。4、正調(diào)控和負調(diào)控的主要不同是什么？答： 負調(diào)控時，調(diào)節(jié)基因的蛋白質產(chǎn)物是

20、基因活性的一種阻遏物，而在正調(diào)控時，調(diào)節(jié)基因的產(chǎn)物是一種激活物。6、解釋為什么操縱子和啟動子是反式隱性、順式顯性的，而編碼阻礙蛋白的基因既是反式顯性又是順式顯性。答： 操縱基因和啟動子突變只影響順式基因的表達(反式隱性的)，這是因為它們是調(diào)控序列，僅僅調(diào)節(jié)相同DNA分子上的相鄰基因的表達。 阻遏物基因編碼可以擴散的基因產(chǎn)物，因此既能影響順式又能影響反式基因的表達。7、哪三個序列對原核生物mRNA的精確轉錄是必不可少的?答： -35(RNA聚合酶結合位點)、-10(RNA榮合酶起始位點)啟動子序列和終止子10、葡萄糖是如何影響涉及糖代謝的操縱子(葡萄糖敏感型操縱子)的表達?答： 在缺乏葡萄糖時，

21、cAMP的水平升高，CAP蛋白同每一個葡萄糖敏感操縱子中啟動子內(nèi)的CAP位點結合，轉錄作用協(xié)同起始。如果有葡萄糖，cAMP的水平下降，CAP蛋白不再結合，轉錄的速率協(xié)同下降。1、闡述原核生物的轉錄終止。 (1)轉錄終止的兩種主要的機制是什么? (2)描述翻譯怎樣能調(diào)節(jié)轉錄終止。 (3)為什么在細菌轉錄終止中很少涉及到Rho因子? (4)怎樣能阻止轉錄的終止?答： 原核生物中的轉錄終止作用概要如下： (1)原核生物中兩種不同的轉錄終止機制：在某一位點不需要其他因子協(xié)助僅依賴于內(nèi)在終止子的終止機制；依賴于肋因子的終止機制。 (2)翻譯可通過弱化作用調(diào)節(jié)轉錄終止，例如發(fā)生在氨基酸生物合成基因的表達中

22、。前導肽的翻譯可以調(diào)節(jié)結構基因下游的轉錄。這種調(diào)節(jié)的重要性充分體現(xiàn)在氨基酸的生物合成中(例如色氨酸)。原核細胞中轉錄和翻譯是同時發(fā)生的，正在翻譯的核糖體就像在追趕正在轉錄的RNA聚合酶。具有所需氨酰tRNA時，核糖體可將前導序列翻譯成前導肽，而在前導開放讀碼框的終止密碼子處終止翻譯。新生的mRNA自由形成3-4莖環(huán)(完全配對)終止結構，所以阻礙了DNA指導的RNA聚合酶的前進，結構基因的下游轉錄終止，即發(fā)生弱化現(xiàn)象。若某種氨基酸短缺，則會導致相應的氨酰tRNA短缺，核糖體終止在前導可讀 框中所短缺的氨基酸密碼子上。 2-3莖環(huán)形成抗終止子，這一莖環(huán)不是聚合酶的終止信號，它可以防止3-4莖環(huán)的形

23、成，使結構基因的轉錄進行下去。(3)在原核生物中、轉錄與翻譯是同時進行的，意味著核糖體追趕著DNA指導的 RNA聚合酶。Rho因子是一個依賴于RNA的ATP水解酶，能夠在轉錄過程中將在轉錄泡中的RNA-DNA雜合體分開。因此它順著轉錄的方向(53)追趕DNA指導的RNA聚合酶。若核糖體正好妨礙了它的前進，則依賴于肋因子的終止反應不會發(fā)生。 （4)最為常見的機制是抗終止(參見噬菌體遺傳學)?？菇K止于是一種能識別終止序列上游抗終止序列(例如噬菌體的nut位點)的蛋白質，它幫助抗終止子所利用的底物(如噬菌體基因表達中的Nus蛋白)與依賴DNA的RNA聚合酶的相互作用，通讀下游的終止子序列。3、區(qū)別可

24、誘導和可阻遏的基因調(diào)控。答： 在可誘導的系統(tǒng)中，操縱子只有在誘導物存在時才開放，沒有誘導物時阻礙物結合 在操縱子上阻止結構基因的轉錄。存在誘導物時，它與阻遏物結合，使之變構不再與操縱子結合，打開操縱子。酶的誘導是分解途徑特有的，誘導物就是酶的底物或者底物的類似物。在可阻礙系統(tǒng)中操縱子被終產(chǎn)物所關閉。不存在終產(chǎn)物時，阻礙物不能結合到操縱子上，因此操縱子開放；存在終產(chǎn)物時，它結合到阻礙物上，改變后者的構象，使其能結合到操縱子上，關閉操縱子。酶阻礙是合成代謝的特點。2、簡述真核生物轉錄水平的調(diào)控機制？答：真核生物在轉錄水平的調(diào)控主要是通過反式作用因子、順式作用元件和RNA聚合酶的相互作用來完成的，主

25、要是反式作用因子結合順式作用元件后影響轉錄起始復合物的形成過程。A、轉錄起始復合物的形成：真核生物RNA聚合酶識別的是由通用轉錄因子與DNA形成的蛋白質-DNA復合物，只有當一個或多個轉錄因子結合到DNA上，形成有功能的啟動子，才能被RNA聚合酶所識別并結合。轉錄起始復合物的形成過程為：TFD結合TATA盒；RNA聚合酶識別并結合TFD-DNA復合物形成一個閉合的復合物；其他轉錄因子與RNA聚合酶結合形成一個開放復合物。在這個過程中，反式作用因子的作用是：促進或抑制TFD與TATA盒結合；促進或抑制RNA聚合酶與TFD-DNA復合物的結合；促進或抑制轉錄起始復合物的形成。B、反式作用因子：一般

26、具有三個功能域（DNA識別結合域、轉錄活性域和結合其他蛋白結合域）；能識別并結合上游調(diào)控區(qū)中的順式作用元件；對基因的表達有正性或負性調(diào)控作用。3、轉錄起始的調(diào)控：反式作用因子的活性調(diào)節(jié)：A.表達式調(diào)節(jié)反式作用因子合成出來就具有活性；B.共價修飾磷酸化和去磷酸化，糖基化；C.配體結合許多激素受體是反式作用因子；D.蛋白質與蛋白質相互作用蛋白質與蛋白質復合物的解離與形成。反式作用因子與順式作用元件的結合：反式作用因子被激活后，即可識別并結合上游啟動子元件和增強子中的保守性序列，對基因轉錄起調(diào)節(jié)作用。反式作用因子的作用方式成環(huán)、扭曲、滑動、Oozing。反式作用因子的組合式調(diào)控作用：每一種反式作用因

27、子結合順式作用元件后雖然可以發(fā)揮促進或抑制作用，但反式作用因子對基因調(diào)控不是由單一因子完成的而是幾種因子組合發(fā)揮特定的作用。3、簡述真核生物轉錄后水平的調(diào)控機制？答：（1）、5，端加帽和3，端多聚腺苷酸化的調(diào)控意義：5，端加帽和3，端多聚腺苷酸化是保持mRNA穩(wěn)定的一個重要因素，它至少保證mRNA在轉錄過程中不被降解。（2）、mRNA選擇性剪接對基因表達調(diào)控的作用（3）、mRNA運輸?shù)目刂?1、PCR的基本原理？、答：PCR是在試管中進行的DNA復制反應，基本原理是依據(jù)細胞內(nèi)DNA半保留復制的機理，以及體外DNA分子于不同溫度下雙鏈和單鏈可以互相轉變的性質，人為地控制體外合成系統(tǒng)的溫度，以促使

28、雙鏈DNA變成單鏈，單鏈DNA與人工合成的引物退火，然后耐熱DNA聚合酶以dNTP為原料使引物沿著單鏈模板延伸為雙鏈DNA。PCR全過程每一步的轉換是通過溫度的改變來控制的。需要重復進行DNA模板解鏈、引物與模板DNA結合、DNA聚合酶催化新生DNA的合成，即高溫變性、低溫退火、中溫延伸3個步驟構成PCR反應的一個循環(huán)，此循環(huán)的反復進行，就可使目的DNA得以迅速擴增。DNA模板變性：模板雙鏈DNA?單鏈DNA，94。退火：引物單鏈DNA?雜交鏈，引物的Tm值。引物的延伸：溫度至70 左右， Taq DNA聚合酶以4種dNTP為原料，以目的DNA為模板，催化以引物3末端為起點的53DNA鏈延伸反應，形成新生DNA鏈。新合成的引物延伸鏈經(jīng)過變性后又可作為下一輪循環(huán)反應的模板PCR，就是如此反復循環(huán)，使目的DNA得到高效快速擴增。1參與蛋白質生物合成體系的組分有哪些?它們具有