細(xì)胞工程培養(yǎng)基制備技術(shù)

1、作物育種技術(shù)細(xì)胞工程培養(yǎng)基制備技術(shù)教 學(xué) 目 標(biāo)（一）培養(yǎng)基成分培養(yǎng)基是根據(jù)植物營養(yǎng)原理和離體培養(yǎng)的要求而人工配制的營養(yǎng)基質(zhì)。它是植物細(xì)胞和組織培養(yǎng)的物質(zhì)基礎(chǔ)，是決定組織培養(yǎng)成敗的關(guān)鍵因素之一。一、培養(yǎng)基成分與種類培養(yǎng)基成分水無機鹽類有機營養(yǎng)（一）培養(yǎng)基成分1.水水是植物原生質(zhì)體的主要組成成分，也是一切代謝過程的介質(zhì)和溶媒，在植物生命活動過程中不可缺少。配制培養(yǎng)基母液時，應(yīng)采用蒸餾水或去離子水。一、培養(yǎng)基成分與種類蒸餾水器（一）培養(yǎng)基成分2.無機鹽類無機鹽類為培養(yǎng)物提供除C、H、O外的一切必需元素。 一、培養(yǎng)基成分與種類無機鹽類大量元素氮（N）、磷（P）、鉀（K）、鈣（Ca）、鎂（Mg）、硫（

2、S）等微量元素鐵（Fe）、硼（B）、銅（Cu）、錳（Mn）、鉬（Mo）、鋅（Zn）、鈷（Co）等（一）培養(yǎng)基成分3.有機營養(yǎng)一、培養(yǎng)基成分與種類有機成分糖類蔗糖、葡萄糖、麥芽糖維生素VBl、VB6、VB3、VC、VH等氨基酸甘、谷、精、半胱氨酸等肌醇生長調(diào)節(jié)物質(zhì)生長素IAA、IBA、NAA、2,4-D細(xì)胞分裂素6-BA、KT、ZT、2ip天然有機物質(zhì)（二）培養(yǎng)基種類 常用的基本培養(yǎng)基主要有MS、White、B5、N6、KM8p和KM等，其中MS培養(yǎng)基的無機鹽濃度較高、種類齊全，用于多種植物的各類組織培養(yǎng)。一、培養(yǎng)基成分與種類（一）母液的配制與保存母液是培養(yǎng)基各種物質(zhì)的濃縮液，也稱貯備液。1.配

3、制母液的優(yōu)點（1）減少誤差（2）提高效率一次配制多次利用。二、培養(yǎng)基的配制（一）母液的配制與保存2.配制方法有兩種，二者各有優(yōu)缺點。（1）單一化合物母液：單獨配制如生長調(diào)節(jié)物質(zhì)母液，一般單獨配制。（2）混合化合物母液：混合配制基本培養(yǎng)基成分，可以混合配制，如大量元素母液10倍、微量元素母液100倍、鐵鹽母液100倍、有機物母液100倍。二、培養(yǎng)基的配制（一）母液的配制與保存3.配制流程二、培養(yǎng)基的配制（一）母液的配制與保存3.配制流程二、培養(yǎng)基的配制（二）培養(yǎng)基的配制配制培養(yǎng)基一般按如下操作程序進(jìn)行。二、培養(yǎng)基的配制確定配方、配制量計算稱量溶解定容測調(diào)pH分裝封口標(biāo)記 （二）培養(yǎng)基的配制配制培養(yǎng)基各種母液用量計算公式如下：二、培養(yǎng)基的配制（一）培養(yǎng)基高壓蒸汽滅菌三、培養(yǎng)基的滅菌（二）培養(yǎng)基過濾滅菌液體培養(yǎng)基制備，不加瓊脂，其它同上。也可采用液體過濾滅菌法，過濾滅菌器，過