血清肌酸激酶測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

1、玉環(huán)縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科文件編號(hào)：JYK-3-SH-032版本/修訂號(hào)：C/0主題內(nèi)容生化室作業(yè)指導(dǎo)書(shū)生效日期：20110701第1頁(yè)共6頁(yè)血清肌酸激酶測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1 檢驗(yàn)申請(qǐng)單獨(dú)檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)：血清肌酸激酶（縮寫(xiě)CK）測(cè)定，各種體液肌酸激酶測(cè)定；組合項(xiàng)目申請(qǐng)：血生化中心肌酶譜項(xiàng)目測(cè)定。臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗(yàn)申請(qǐng)。2標(biāo)本采集與處理2.1 標(biāo)本采集2.1.1 常規(guī)靜脈采血約 2 ml ,不抗凝，置普通試管中?；虿捎煤蛛x膠的真空采血管。檢查體液乳酸脫氫酶的體液標(biāo)本應(yīng)用肝素抗凝。2.1.2 檢驗(yàn)申請(qǐng)單和血標(biāo)本試管標(biāo)上統(tǒng)一且唯一的標(biāo)識(shí)符。2.1.3 急診標(biāo)本采集后，在檢驗(yàn)申請(qǐng)單上填寫(xiě)標(biāo)本采集時(shí)間。2

2、.1.4 標(biāo)本采集后與檢驗(yàn)申請(qǐng)單一起及時(shí)運(yùn)送至檢驗(yàn)科。專(zhuān)人負(fù)責(zé)標(biāo)本的接收并記錄標(biāo)本的狀態(tài)，對(duì)不合格標(biāo)本予以拒收。2.1.5 下列標(biāo)本為不合格標(biāo)本2.1.5.1 標(biāo)本量不足：少于 0.3ml的全血標(biāo)本，或少于 0.1ml的血清或血漿。2.1.5.2 對(duì)反應(yīng)吸光度有干擾的標(biāo)本，包括嚴(yán)重溶血、嚴(yán)重渾濁的標(biāo)本。2.1.5.3 無(wú)法確認(rèn)標(biāo)本與申請(qǐng)單對(duì)應(yīng)關(guān)系的。2.1.5.4 其他如標(biāo)識(shí)涂改、標(biāo)本試管破裂等。2.2 標(biāo)本保存2.2.1 接收標(biāo)本后在30min內(nèi)將標(biāo)本離心分離出血清。2.2.2 標(biāo)本保存時(shí)間：室溫（1525C）下可穩(wěn)定4h,普通冰箱中（28C）穩(wěn)定12h。-20 C保存穩(wěn)定30天。為避免標(biāo)本

3、中水分揮發(fā)使血清濃縮，對(duì)保存時(shí)間超過(guò) 1天的標(biāo)本均加塞密閉或覆蓋濕巾。編寫(xiě)制定日期審核審核日期：核準(zhǔn)執(zhí)行日期李永臣2010-09-15李永臣2011-07-01章林華2011-07-01玉環(huán)縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科文件編號(hào)：JYK-3-SH-032版本/修訂號(hào)：C/0主題內(nèi)容生化室作業(yè)指導(dǎo)書(shū)生效日期：20110701第2頁(yè)共6頁(yè)2.2.3 已完成測(cè)試的標(biāo)本保持完整的識(shí)別號(hào)，置48c冰箱內(nèi)保存7天。2.3 標(biāo)本采集的注意事項(xiàng)2.3.1 采血前使受檢者保持平靜、松弛、避免劇烈活動(dòng)，24h不飲7W和12h以上禁食空腹?fàn)顟B(tài)。2.3.2 注意有無(wú)應(yīng)用影響測(cè)試項(xiàng)目的藥物。2.3.3 可以使用肝素抗凝的血液標(biāo)本。3

4、方法原理通過(guò)下面的3個(gè)反應(yīng)式表示反應(yīng)，在兩個(gè)工具酶的參與下，將 CK的活性與NADPhfc成的量或速率 相聯(lián)系，在340nm波長(zhǎng)處連續(xù)監(jiān)測(cè) NADP瞰光度的增加速率，推算出CK的活性。磷酸肌酸+ADP-CKT肌酸+ATPATP +葡萄糖一生t葡萄糖-6 -磷酸+ADP葡萄糖-6 -磷酸+NADP-G6理t 6 -磷酸葡萄糖酸+NADPH4試劑及其他用品4.1 試劑：肌酸激酶測(cè)定試劑盒，由北京利德曼生化技術(shù)有限公司出品。4.2 試劑盒保存：未開(kāi)瓶的試劑儲(chǔ)存在 28c可穩(wěn)定至有效期。 試劑開(kāi)瓶后，在儀器冰箱試劑倉(cāng)中可 保存28天。開(kāi)蓋后避免污染。當(dāng)試劑變混濁，或者未開(kāi)蓋的液體有沉淀，或起始吸光率&

5、gt;0.8時(shí)，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。4.3 試劑盒準(zhǔn)備：液態(tài)雙試劑型，即開(kāi)即用，無(wú)特殊準(zhǔn)備。4.4 試劑盒主要成分：R1:R2=4:1組 成混合后溶液的濃度咪陛緩沖液：100mmol/L PH=6.7編寫(xiě)制定日期審核審核日期：核準(zhǔn)執(zhí)行日期李永臣2010-09-15李永臣2011-07-01章林華2011-07-01玉環(huán)縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科文件編號(hào)：JYK-3-SH-032版本/修訂號(hào)：C/0主題內(nèi)容生化室作業(yè)指導(dǎo)書(shū)生效日期：20110701第3頁(yè)共6頁(yè)N- 乙酰半胱氨酸（NAC20mmol/LEDTA2mmol/LNADP2mmol/L葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G-6-PDH）>15

6、00U/L己糖激酶（HK>>2500U/L葡萄糖20mmol/L肌酸磷酸30mmol/L二腺昔-5-磷酸10umol/LADP2mmol/L5校準(zhǔn)品與校準(zhǔn)模式校準(zhǔn)品：不使用校準(zhǔn)品，以 NADP的雙波長(zhǎng)（340/380nm）摩爾吸光系數(shù)計(jì)算 C中性6質(zhì)控品與室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則6.1 質(zhì)控品采用由Beckman-Coulter公司提供的兩個(gè)不同水平未定值質(zhì)控血清。6.2 質(zhì)控液重建方法：液態(tài)質(zhì)控血清，即開(kāi)即用，無(wú)需特殊準(zhǔn)備。6.3 質(zhì)控品測(cè)定：在每一批標(biāo)本中測(cè)定兩個(gè)水平質(zhì)控血清各一次。6.4 質(zhì)控規(guī)則：采用 Westgard多規(guī)則質(zhì)控規(guī)則，由計(jì)算機(jī)程序進(jìn)行檢索與判斷。7適用儀器適用AEROS

7、E和C16000全自動(dòng)生化分析儀器全自動(dòng)生化分析儀器。8標(biāo)本檢測(cè)步驟裝載試劑一進(jìn)行校準(zhǔn)一進(jìn)行質(zhì)控一輸入標(biāo)本檢測(cè)項(xiàng)目一加載標(biāo)本一標(biāo)本測(cè)定一結(jié)果復(fù)核一報(bào)告。編寫(xiě)制定日期審核審核日期：核準(zhǔn)執(zhí)行日期李永臣2010-09-15李永臣2011-07-01章林華2011-07-01玉環(huán)縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科文件編號(hào)：JYK-3-SH-032版本/修訂號(hào)：C/0主題內(nèi)容生化室作業(yè)指導(dǎo)書(shū)生效日期：20110701第4頁(yè)共6頁(yè)9.主要分析參數(shù)參見(jiàn)說(shuō)明書(shū)。10結(jié)果計(jì)算計(jì)算公式：CK(U/L) = AA/xK = AA(34060)nm/ 匕V-/min/min vsx1mwm10公式中A A/min即單位時(shí)間中吸光度降低

8、的值，Vt為總反應(yīng)體積ml (試劑總量+標(biāo)本量)，Vs為標(biāo)本體積ml, l為比色皿光徑cm, e為NADP的340/380nm測(cè)定的毫摩爾消光系數(shù)。儀器根據(jù)此公式自動(dòng)給出 每個(gè)標(biāo)本測(cè)定結(jié)果。11檢驗(yàn)結(jié)果的報(bào)告及范圍11.1 結(jié)果的報(bào)告11.1.1 結(jié)果經(jīng)審核后，確認(rèn)準(zhǔn)確無(wú)誤后發(fā)出報(bào)告。11.1.2 報(bào)告單上標(biāo)明結(jié)果的計(jì)量單位、參考區(qū)間、報(bào)告日期、時(shí)間、操作者和審核者簽名，并有與申請(qǐng)單相同的醫(yī)學(xué)信息。11.1.3 如收到標(biāo)本的質(zhì)量可能對(duì)測(cè)定結(jié)果有影響的也在報(bào)告單上指出。11.2 報(bào)告范圍：01200 U/L ,超過(guò)此范圍的結(jié)果報(bào)告時(shí)必須附有證明該結(jié)果準(zhǔn)確可靠的文字說(shuō)明，例如：系根據(jù)標(biāo)本稀釋后重復(fù)

9、測(cè)定的結(jié)果。12操作性能12.1 精密度：CV<0.52%,批間 CV<3.21%12.2 方法的有限性及干擾因素：內(nèi)源性干擾物溶血為1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黃疸30mg/ml、抗壞血酸300mg/ml對(duì)測(cè)試結(jié)果無(wú)明顯影響12.3 靈敏度：肌酸磷酸激酶濃度為：500U/L時(shí)，吸光度變化率 Ann/min為0.1300.15812.4 線性范圍：51200 U/L。編寫(xiě)制定日期審核審核日期：核準(zhǔn)執(zhí)行日期李永臣2010-09-15李永臣2011-07-01章林華2011-07-01玉環(huán)縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科文件編號(hào)：JYK-3-SH-032版本/修訂號(hào)：C/0主題內(nèi)容生化

10、室作業(yè)指導(dǎo)書(shū)生效日期：20110701第5頁(yè)共6頁(yè)13參考范圍及醫(yī)學(xué)決定水平0190U/L14臨床意義14.1 肌酸激酶廣泛分布于骨胳肌、心肌、腦組織中，肝和紅細(xì)胞不含此酶。CK是診斷急性心肌梗死（AMI）的酶學(xué)指標(biāo)之一，但總CK的意義不及CK-MB現(xiàn)在更受重視的 AMI的實(shí)驗(yàn)室診斷指標(biāo)是心肌肌鈣蛋白。14.2 CK也是反映神經(jīng)肌肉損傷的敏感指標(biāo)。各種肌營(yíng)養(yǎng)不良均有血清CK活性增高，腦血管病及腦膜炎、腦炎、急性精神病患者血清CK活性也可升高。15結(jié)果審核以及分析與相關(guān)項(xiàng)目的聯(lián)系15.1 由資深專(zhuān)業(yè)人員負(fù)責(zé)檢驗(yàn)結(jié)果的審核。15.2 認(rèn)真審核每一個(gè)測(cè)定結(jié)果，審核者對(duì)發(fā)出報(bào)告結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性負(fù)責(zé)，并在報(bào)告單的審核者處簽名。15.3 相關(guān)項(xiàng)目：審核與心肌酶譜其他酶的關(guān)系。如出現(xiàn)與臨床不符甚至相悖的情況，應(yīng)分析與查找原因。16無(wú)威脅生命的“緊急值”及報(bào)告規(guī)定17有關(guān)引用程序與文件17.1 Abbott自動(dòng)生化分析儀儀器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。17.2 生化檢驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序。17.3 檢驗(yàn)結(jié)果審核程序。17.4 標(biāo)本送檢和接收程序。18參考文獻(xiàn)18.1 陸永綏，張偉民主編.臨床檢驗(yàn)管理與技術(shù)規(guī)程.杭州：浙江大學(xué)出版社，2004.18.2 北京利德曼生化股份有限公司肌酸激酶測(cè)定試劑盒說(shuō)明書(shū)。編寫(xiě)制定日期審核審核日期：