細(xì)菌菌落特征

1、G bbbbbbbb 細(xì)菌菌落特征：一般呈現(xiàn)較濕潤、較光滑、較透明、較粘稠、易挑取、質(zhì)地均勻、小而突起或 大而平坦、菌落正反面或邊緣與中央部位的顏色一致、一般有臭味或酸敗味等。 放：干燥、不透明，小而緊密，呈放射狀；菌落初期表面光滑或呈致密的絲絨狀，當(dāng)產(chǎn)生孢子之后，其菌 落表面呈粉狀、顆粒狀；菌落和培養(yǎng)基連接緊密，難以挑取，或者整個菌落被挑起而不致破碎；菌落顏色 多樣，菌落正反面顏色常不一致，在菌落邊緣的瓊脂平面有變形的現(xiàn)象；帶有泥腥味。 酵母狀菌落：這是酵母菌所形成的與細(xì)菌菌落相似的菌落。園形或卵園形，較濕潤、較粘稠、表面較光滑， 易挑取，菌落質(zhì)地均勻，正反面、邊緣和中心顏色一致等。但比細(xì)菌

2、菌落大而厚，較不透明，顏色多呈乳 白色，少數(shù)呈紅色，多帶酒香味。 絲狀菌落：與放線菌的菌落相似。干燥，不透明，表面常呈絨毛狀、棉絮狀，邊緣呈絲狀，不易挑取，菌 落正反面、邊緣與中央的顏色、構(gòu)造常不一致。但大而疏松或大而致密，往往有霉味。毛霉與根霉的比較 相同點(diǎn)：（1）同屬于藻菌綱毛霉目。菌絲體白色，菌絲無隔，單細(xì)胞。無性繁殖產(chǎn)孢囊孢子，有性繁殖產(chǎn) 接合孢子。（2）分布廣泛。（3）均可引起食物腐敗。不同點(diǎn)：（1）毛霉無假根，孢囊梗直接從菌絲長出，單生或分枝；根霉具有假根和匍匐菌絲，由假根向上 長出直立不分枝的叢生孢囊梗。 （2）毛霉分解蛋白質(zhì)能力強(qiáng)，常用于制做豆腐乳等；根霉分解淀粉能力強(qiáng)， 常用

3、于釀酒業(yè)。青霉與曲霉的比較 相同點(diǎn)：（1）均為半知菌類。菌絲有隔，無性繁殖產(chǎn)分生孢子，沒有有性繁殖或未發(fā)現(xiàn)有性繁殖。（ 2）在自然界分布廣泛。 （3）分解有機(jī)物的能力強(qiáng)。 （4）發(fā)酵與釀造工業(yè)中的重要菌種。不同點(diǎn)：（1）曲霉分生孢子梗不分枝；青霉分生孢子梗分枝呈帚狀。 （ 2）曲霉菌絲有足細(xì)胞；青霉菌絲無 足細(xì)胞。（3）曲霉孢子梗頂端有頂囊；青霉無頂囊結(jié)構(gòu) 細(xì)菌酒精發(fā)酵的優(yōu)缺點(diǎn) 優(yōu)點(diǎn)：代謝速率高；產(chǎn)物轉(zhuǎn)化率高；菌體生成少；代謝副產(chǎn)物少；發(fā)酵溫度高；不必定期供氧；細(xì)菌為原 核生物，易于用基因工程改造菌種；厭氧發(fā)酵，設(shè)備簡單。缺點(diǎn)：生長 pH 較高（細(xì)菌約 pH 5，酵母菌為 pH 3 ），較易染

4、菌；細(xì)菌對乙醇的耐受力較酵母菌為低（細(xì) 菌約耐 7%乙醇，酵母菌耐 8-10% 乙醇）；底物范圍窄（葡萄糖、果糖） 。干熱滅菌法 原理：干熱可使細(xì)胞膜破壞、蛋白質(zhì)變性和原生質(zhì)干燥，并可使各種細(xì)胞成分發(fā)生氧化變質(zhì)。濕熱滅菌法通常指用100'C以上的加壓蒸氣進(jìn)行滅菌。在相同溫度和相同作用時間下，濕熱滅菌比干熱滅菌的效力高。 原因：菌體在有水的情況下，蛋白質(zhì)容易凝固；熱蒸汽比熱空氣穿透力強(qiáng)；蒸汽潛熱大，當(dāng)氣體轉(zhuǎn)變?yōu)橐?體時可放出大量熱量，故可迅速提高滅菌物體的溫度。 常壓法巴氏消毒法：采用 6085 C的低溫處理15s30min的消毒方法?？梢猿ヒ簯B(tài)風(fēng)味食品（牛奶、酒等） 或調(diào)料（醬油等）

5、中的無芽孢病原微生物，同時保持其營養(yǎng)和風(fēng)味不變。此法分為兩類：一類是低溫維持法（LTH ）,例如用于牛奶消毒只要在 63C下維持30min ;另一類是高溫瞬 時法（HTST ）,此法用于牛奶消毒只要在 72C下保持15s 間歇滅菌法：又稱分段滅菌法或丁達(dá)爾滅菌法。利用常壓蒸汽反復(fù)幾次進(jìn)行滅菌。主要應(yīng)用于一些不宜高 壓滅菌的培養(yǎng)基，如糖類、明膠、牛奶等。方法是在常壓下加熱到80100C，維持1560min，以殺死微生物營養(yǎng)體，冷卻后，于37C培養(yǎng)一天，誘使其中殘存的芽抱發(fā)芽。 次日再用同法滅菌，如此反復(fù)三次， 即可達(dá)到滅菌的目的。加壓法 常規(guī)加壓蒸汽滅菌法：是一種利用密閉的蒸汽鍋加熱的方法。 優(yōu)

6、點(diǎn)：操作簡便，效果可靠。原理：在密閉系統(tǒng)中，蒸汽壓力增高，溫度也隨著增高，從而提高了殺菌效 力。但必須使密閉系統(tǒng)中充滿純蒸汽，如果蒸汽中混有空氣，則鍋內(nèi)溫度會低于相同壓力下純蒸汽的溫度而降低殺菌效果。條件：一般滅菌時，采用 1公斤/厘米2的壓力，溫度為121C，時間維持1520分鐘，或0.7公斤/厘米2的壓力，溫度為115C，時間維持 35 分鐘。 適用對象：一切微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室、醫(yī)療保健機(jī)構(gòu)或發(fā)酵工廠中對 培養(yǎng)基及多種器材或物料的滅菌。連續(xù)加壓蒸汽滅菌法：在發(fā)酵行業(yè)里也稱 “連消法 ”。原理：讓培養(yǎng)基在管道的流動過程中快速升溫、維持、冷卻，然后流進(jìn)發(fā)酵罐。條件：加熱到135140 C下維持51

7、5s。適用對象：大型發(fā)酵廠的大批培養(yǎng)基滅菌。優(yōu)點(diǎn)：因采用高溫瞬時滅菌，故既可殺滅微生物，又可最大限度減少營養(yǎng)成分的破壞，從而提高了原料的 利用率和發(fā)酵產(chǎn)品的質(zhì)量和產(chǎn)量 ；由于總的滅菌時間較分批滅菌法明顯減少， 所以縮短了發(fā)酵罐的占用周 期，從而提高了它的利用率；由于蒸汽負(fù)荷均勻，故提高了鍋爐的利用率；適宜于自動化操作，降低了操 作人員的勞動強(qiáng)度。突變的特性： （1）自發(fā)性：各種性狀的突變，可以在沒有人為的誘變因素處理下自發(fā)地產(chǎn)生。（2）不對應(yīng)性：突變的性狀與突變的原因之間沒有直接的對應(yīng)關(guān)系。（3）稀有性：自發(fā)突變可隨時發(fā)生，但其突變率卻是極低的，一般在 10-610-9。（ 4）獨(dú)立性：突變的

8、發(fā)生一般是獨(dú)立的，即在某一群體中，既可發(fā)生 抗青霉素的突變型， 也可發(fā)生抗鏈霉素或任何其他藥物的突變型， 而且還可發(fā)生其他任何性狀的突變型（5）可誘變性：通過誘變劑的作用，可以提高自發(fā)突變的幾率。6）穩(wěn)定性：由于突變的根源是遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)上發(fā)生了穩(wěn)定的變化，所以產(chǎn)生的新的變異性狀也是穩(wěn)定的、可遺傳的。（ 7）可逆性：由原始的野生型基因變異為突變型基因的過程，稱為正向突變，相反的過程則稱為回復(fù)突變，任何性狀都可發(fā)生正向突變， 也都可發(fā)生回復(fù)突變。水體自凈作用： 指在自然水體尤其是快速流動、 氧氣充足的水體中， 存在的為量不多的有機(jī)或無機(jī)污染物， 可通過物理性的擴(kuò)散、稀釋、沉降作用或化學(xué)性的氧化作用

9、以及各種生物學(xué)和生物化學(xué)的作用而得到遷移轉(zhuǎn)化。（ 2）水體自凈的原因除物理性的沉淀、擴(kuò)散、稀釋作用和化學(xué)性的氧化作用外，主要是生物學(xué)和生物化學(xué)的作用，如好氧 菌對有機(jī)物的降解作用，原生動物對細(xì)菌的吞噬作用，噬菌體對宿主的裂解作用，藻類對無機(jī)元素的吸收 利用，細(xì)菌莢膜對污染物的吸收、沉降作用，浮游動物和一系列后生動物通過食物鏈對有機(jī)物的攝取和濃 縮作用等。革蘭氏a G+和G-細(xì)菌主要由于其細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)和化學(xué)成分的差異：引起物理特性（脫色能力）的不同，正由于這 一特性的不同才決定了最終染色反應(yīng)的不同。b、結(jié)晶紫液初染、碘液媒染：在細(xì)菌的細(xì)胞膜內(nèi)可形成不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物。c、乙醇脫色：G+細(xì)

10、菌由于其細(xì)胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次多、交聯(lián)致密，故遇脫色劑乙醇（或丙酮）處 理時，因失水而使網(wǎng)孔縮小，再加上它不含類脂，故乙醇的處理不會溶出縫隙，因此能把結(jié)晶紫與碘的復(fù) 合物牢牢留在壁內(nèi)，使其保持紫色。反之，G-細(xì)菌因其細(xì)胞壁薄、肽聚糖層薄和交聯(lián)度差，外膜層類脂含量高，遇脫色劑乙醇后，以類脂為主的外膜迅速溶解，網(wǎng)孔增大，這時，薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié) 晶紫與碘復(fù)合物溶出，因此細(xì)胞退成無色。d、沙黃復(fù)染：G-細(xì)菌呈現(xiàn)紅色，而 G+細(xì)菌則仍保留最初的紫色（實(shí)為紫加紅色）。革蘭氏染色的意義：革蘭氏染色有著十分重要的理論與實(shí)踐意義。通過這一染色，幾乎可把所有的細(xì)菌分 成革蘭氏陽性菌與革蘭氏陰性菌兩個

11、大類，因此它是分類鑒定菌種時的重要指標(biāo)。又由于這兩大類細(xì)菌 在細(xì)胞結(jié)構(gòu)、成分、形態(tài)、生理、生化、遺傳、免疫、生態(tài)和藥物敏感性等方面都呈現(xiàn)出明顯的差異，因 此任何細(xì)菌只要通過簡單的革蘭氏染色，就可提供不少其他重要的生物學(xué)特性方面的信息。延滯期：定義：是指把少量微生物接種到新培養(yǎng)液中后，在開始培養(yǎng)的一段時間內(nèi)，細(xì)胞數(shù)目不增加的時 期。 特點(diǎn)：（ 1）生長速率常數(shù)為零； 2）細(xì)胞形態(tài)變大或增長； 3）細(xì)胞內(nèi) RNA 尤其是 rRNA 含量增高， 原生質(zhì)呈嗜堿性； 4）合成代謝十分活躍 5）對外界不良條件反應(yīng)敏感。 應(yīng)用：此期的菌體對外界因素敏感，利于殺滅有害微生物；直接影響發(fā)酵周期，發(fā)酵工業(yè)生產(chǎn)中要

12、盡量縮 短延滯期，如，選擇對數(shù)期接種齡的細(xì)胞做種子，增大接種量，使發(fā)酵培養(yǎng)基的成分與種子培養(yǎng)基成分接 近。對數(shù)期：定義：在生長曲線中，緊接著延滯期的一段細(xì)胞數(shù)以幾何級數(shù)增長的時期。特點(diǎn)：（ 1）生長速率常數(shù)（R）最大，代時（G）最短，個體數(shù)呈2n （ 2、4、8、16）幾何級數(shù)增長，此期又叫菌體生 長期；（ 2）細(xì)胞進(jìn)行平衡生長； （ 3）酶系活躍，代謝旺盛； （ 4）抗不良環(huán)境的能力強(qiáng) 應(yīng)用：是研究生理、代謝等的良好材料；是增殖噬菌體的最適宿主；是發(fā)酵生產(chǎn)中用做種子的最佳種齡， 通過補(bǔ)加營養(yǎng)物質(zhì)延長指數(shù)期。整個群體的生理特性較一致，細(xì)胞各成分平衡生長，菌體生長繁殖快，生 理代謝旺盛。但此時培

13、養(yǎng)液中營養(yǎng)成分逐漸減少，有害產(chǎn)物逐漸增加，這時要注意排除這些不利的因素， 以保持長時間的旺盛繁殖。穩(wěn)定期：定義：活細(xì)胞數(shù)保持相對穩(wěn)定的時期。特點(diǎn)： 1）生長速率常數(shù) R 為零。 2）菌體產(chǎn)量已達(dá)到最高 點(diǎn)。 3）活菌數(shù)相對穩(wěn)定； 4）細(xì)胞開始貯存貯藏物； 5）芽孢細(xì)菌形成芽孢。 6）有些微生物在此時形成次 生代謝產(chǎn)物。 （代謝產(chǎn)物合成期）總活菌數(shù)明顯下降的時期。應(yīng)用：是菌體或與菌體生長相平行的代謝產(chǎn)物的最佳收獲期，延長此期有利于提高產(chǎn)量；是對某些生長因 子進(jìn)行測定的必要前提；對連續(xù)培養(yǎng)技術(shù)的設(shè)計(jì)和研究有指導(dǎo)意義。活菌總數(shù)達(dá)到最高值，代謝產(chǎn)物大量 積累，以生產(chǎn)菌體或以代謝產(chǎn)物（如乳酸、抗生素、酒

14、精等）為發(fā)酵產(chǎn)品的微生物，都宜這時收集。此期 營養(yǎng)物質(zhì)尤其是生長限制因子耗盡，菌種繁殖速度和生理活性開始降低。衰亡期：特點(diǎn)： 1 ）生長速率常數(shù) R 為負(fù)值。 2）菌體細(xì)胞大小不一，形態(tài)多樣，細(xì)胞畸形， 多液泡。 3）菌體自溶（蛋白水解酶活力增強(qiáng)） ；4）合成或釋放氨基酸、酶和抗生素等次生代謝 產(chǎn)物，芽孢桿菌開始釋放芽孢。 得到細(xì)菌芽孢及保存菌種的最好時期。進(jìn)入衰亡期，芽孢細(xì)菌開始釋放芽孢，霉菌開始形成孢子，這時， 可保存菌種，收集像蘇云金桿菌的伴孢晶體。 培養(yǎng)基的原則步奏：目的明確，營養(yǎng)協(xié)調(diào)，理化適宜，經(jīng)濟(jì)節(jié)約。 步：原料稱量 （加瓊脂 ） 過濾 定容 調(diào) pH 分裝 加棉塞，包扎 滅菌 擺

15、斜 無菌檢查 防止衰退：控制菌種代數(shù)，創(chuàng)造優(yōu)良條件，利用不易衰退的菌種，采用有效的育種保藏發(fā)，講究菌種選育 技術(shù)，定期進(jìn)行分離純化。 天然培養(yǎng)基：指一類利用動植物、微生物包括用其提取物制成的培養(yǎng)基，是一類營養(yǎng)成分既復(fù)雜又豐富、 難以說出其確切化學(xué)組成的培養(yǎng)基（未知或不恒定成分） 組合培養(yǎng)基：是一類按微生物的營養(yǎng)要求精確設(shè)計(jì)后用多種高純化學(xué)試劑配制成的的培養(yǎng)基（已知成分） 半組合培養(yǎng)基： 指一類主要以化學(xué)試劑配制， 同時還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基 （已知 + 未知成分）。 EMB的作用原理：伊紅和美藍(lán)兩種苯胺染料可抑制G+陽性細(xì)菌和一些難培養(yǎng)的 G-細(xì)菌。在低酸度時，這兩種染料結(jié)合形成沉淀，起著產(chǎn)酸指示劑的作用，使試樣中的多種腸道細(xì)菌在EMB 培養(yǎng)基平板上產(chǎn)生易于用肉眼識別