正交設(shè)計研究杭白菊總提取物及總黃酮提取工藝

1、第29卷第8期2004年8月August,2004ChinaJournalofChineseMateriaMedica中國中藥雜志Vol.29,Issue8正交設(shè)計研究杭白菊總提取物及總黃酮提取工藝殷紅1,2,胡永洲13,楊鑫驥2,田秀蘭2,王真3(1.浙江大學藥學院,浙江杭州310031;2.嘉興學院醫(yī)學院,浙江嘉興314000;3.嘉興市第二人民醫(yī)院,浙江嘉興314000)摘要目的:確定杭白菊總提物、。:,量為考察指標,:,:提取次數(shù)溶劑濃度超聲時間:A2B3C3D3。與常規(guī)的提取方法相比,具有提取時間短、簡單、。;正交試驗法R284.文獻標識碼A文章編號100125302(2004)08

2、20737203杭白菊是一常用中藥,具有散風清熱、平肝明目的功效,用于風熱感冒,頭痛眩暈,目赤腫痛,眼目昏花1,其藥用的有效成分主要是黃酮類和揮發(fā)油類。為探索杭白菊總提物及黃酮提取工藝,本實驗以浸膏得率和浸膏中總黃酮含量為考察指標,采用正交試驗等方法對其提取工藝進行了研究。1儀器與材料超聲提取,合并提取液,過濾,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)回收乙醇,水浴蒸干,80干燥3h,干燥器中冷0.5h迅速稱重,浸膏得率(%)=浸膏重/樣品重100%3,結(jié)果見表2。表1因素和水平ABCD水平乙醇濃度/%超聲時間/min203040溶劑量/倍101520提取次數(shù)/次345島津UV-2401PC紫外分光光度計,SWB5200型超

3、聲清洗機(上海必能信超聲有限公司),電子天平,蘆丁對照品(中國藥品生物制品檢定所,批號008029705),其他試劑均為分析純。杭白菊采購于浙江桐鄉(xiāng),經(jīng)嘉興學院醫(yī)學院生藥教研室黃高級講師鑒定為杭白菊ChrysanthemummorifoliumRa2mat.。2方法與結(jié)果2.1正交實驗設(shè)計及結(jié)果2.1.1正交實驗設(shè)計選擇乙醇濃度、超聲時間、1239075602.1.3總黃酮的測定標準曲線制備精密稱取120干燥至恒重的無水蘆丁25mg,置100mL的容量瓶中,加60%的乙醇至刻度。精密吸取2,3,4,5,6,7mL,分別放置25mL的容量瓶中,加5%亞硝酸鈉1.0mL,搖勻,靜置6min,加1.

4、0%的硝酸鋁1.0mL,搖勻,靜置6min,加4%的氫氧化鈉10.0mL,溶劑量、提取次數(shù)4個因素,進行L9(34)正交試驗(表1)。以干浸膏得率和總黃酮含量為考察指標進行考察(表2)。2.1.2浸膏得率測定分別稱取杭白菊二花10.000g9份2。剪碎,按正交試驗表1選擇的條件收稿日期2004202220通訊作者3胡永洲,Tel:(0571)87217412,E2mail:huyz用60%的乙醇釋至刻度,搖勻,靜置10min后于510nm處測吸收度,得回歸方程為:A=0.012721C+0.006811,r=0.9996。線性范圍:0.0050.12mgmL-1。浸膏中總黃酮的測定精密稱取干燥

5、恒重的浸膏0.2000g,加60%乙醇加熱溶解,定容于50mL的容量瓶中,過濾,取續(xù)濾液2.00mL,按標準曲線制備項下處理。結(jié)果見表2。737第29卷第8期2004年8月August,2004ChinaJournalofChineseMateriaMedica表2正交實驗結(jié)果中國中藥雜志Vol.29,Issue8試驗號123456789浸膏得率/%30.75135.27541.57847.58643.02841.11647.8754.67844.27總黃酮含量/%9.6109.99610.83810.8889.70810.2488.5049.7829.438公式評分7.4947.6919.1

6、769.7868.7848.8538.6889.9568.778回收率分別為103.2%,99.1%,97.5%,101.4%,104.1%,RSD2.73%(n=5)。3討論3.1通過正交試驗最佳因素水平為A2B3C3D3。正交結(jié)果分析:60%乙醇和75%乙醇已相當接近,60%乙醇提取浸膏得率雖高,但黃酮含量較低,而且過濾困難,說明浸膏中無效成分(如糖、淀粉)較多,2.1.4公式評分在正交試驗結(jié)果的總體評價中,以總黃酮含量為主(占70%),浸膏得率為輔(30%)。而75%、雜質(zhì)少、操作方便;,超聲時間對總黃:75%乙20,提取5次。3.:分別稱取杭白菊二花10.000g5份,剪碎。75%乙醇

7、100mL超聲20min提取5次,按“標準曲線制備”項下處理。結(jié)果見表4。表4超聲優(yōu)選條件提取結(jié)果浸膏得率總黃酮含量134.9013.26239.0612.68338.0213.10436.0013.14537.1013.08公式法4,2直觀分分,最提取工藝是A2B3C3D3。2.1.5正交設(shè)計實驗結(jié)果分析按方差分析理論%RSD4.411.67得方差分析結(jié)果見表3。表3方差分析結(jié)果方差來源離均差平方和自由度ABC(誤差)D均方1.041360.05890.015421.58548FP2.082730.117830.030843533.8206102.820.05ult

8、rasonictimesolventquantity.Conclusion:Theoptimumultrasonicare2B3C3.extraction,ultractionmethodistimesav2ing,simpletooperate,stableKeyw;ultrasonicextraction;orthogonaltest責任編輯袁桂京銀翹揮發(fā)油/2環(huán)糊精包合常數(shù)的測定研究馬坤芳1,任勇23,王宣3,冒麟3(1.中國藥科大學新藥研究中心,江蘇南京210009;2.南京師范大學新藥研究中心,江蘇南京210097;3.湖北民康藥業(yè)公司,湖北宜昌443002)摘要目的:測定中藥多組分

9、/2環(huán)糊精的包合常數(shù)。方法:在多波長下探測銀翹揮發(fā)油包合作用的紫外光譜特征,以經(jīng)驗公式處理紫外吸收2濃度關(guān)系,測定其包合常數(shù);以相溶解度曲線驗證包合比;以飽和水溶液法制備包合物,差熱法進行包合物鑒定。結(jié)果:紫外測定條件下,銀翹揮發(fā)油/2環(huán)糊精包合反應能夠在多波長處顯示良好的線形特征,包合比為11。結(jié)論:采用多波長法可測定中藥多組分表觀包合常數(shù),該方法可作為中藥包合物的定量研究方法之一。關(guān)鍵詞環(huán)糊精;紫外光譜法;包合常數(shù);相溶解度曲線;差熱掃描圖譜中圖分類號R283.6;R284.1文獻標識碼A文章編號100125302(2004)0820739204隨著環(huán)糊精(CD)包合技術(shù)在藥學領(lǐng)域中的應用,包合常數(shù)(Ka)的測定顯得尤為重要1。但是,目前CD在中藥方面的研究大多關(guān)注于包合物制備等方面,關(guān)于Ka值測定的研究僅有中藥單體Ka測24定的報道2。由于中藥成分復雜,難以確定各組分及其濃度,中藥多組分的Ka值測定目前未見文獻報道。為探討中藥多組分包合的定量研究方法,作者對銀翹揮發(fā)油/2CD的Ka值測定進行了探索。銀翹揮發(fā)油為薄荷、荊芥和連翹3種藥材揮發(fā)油的混合物,是銀翹傷風膠囊、