2021年新高考(八省聯(lián)考)生物試題分類(lèi)匯編19生物技術(shù)實(shí)踐

1、2021年新高考適應(yīng)性考試（八省聯(lián)考）生物試題分類(lèi)匯編（2021八省聯(lián)考湖北生物）12.植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，無(wú)菌操作步驟至關(guān)重要。下列關(guān)于無(wú) 菌操作的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.不耐高溫的植物激素需過(guò)濾除菌后才能添加到已滅菌的培養(yǎng)基中B.超凈工作臺(tái)可用紫外線消毒，銀子、剪刀可灼燒火菌C.植物材料用次氯酸鈉消毒后接種到培養(yǎng)基中D.玻璃培養(yǎng)皿常采用干熱火菌法滅菌【答案】C【解析】【分析】消毒和滅菌：消毒滅菌概念使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表 而或內(nèi)部的部分微生物（不包芽泡和抱子）使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微生物（包括芽泡和抱子）常用方法煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒

2、法灼燒滅菌、干熱火菌、高壓蒸汽火 菌適用對(duì)象操作空間、某些液體、雙手等接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng) 基等【詳解】A、對(duì)不耐高溫的植物激素除菌時(shí)無(wú)法用高壓蒸汽火菌法，可以用濾膜過(guò)濾除菌.再添加到已滅菌的培養(yǎng)基中，A正確：B、接種室和超凈工作臺(tái)等表面消毒，可用紫外線進(jìn) 行消毒，銀子、剪刀等金屬器具可灼燒火菌，B正確；C、植物組織培養(yǎng)中的外植體用70%的酒精和氯化汞（或次氯酸鈉）進(jìn)行消毒，外植體取出 后，在無(wú)菌水中漂洗了消毒液后才能接種到培養(yǎng)基中，C錯(cuò)誤；D、玻璃培養(yǎng)皿常采用干熱火菌法滅菌，D正確。故選C。（2021八省聯(lián)考江蘇生物）4.下列中學(xué)實(shí)驗(yàn)中有關(guān)Na。使用的敘述，正確的是（）A.制作泡菜

3、時(shí)，加入NaCl的目的是抑制細(xì)菌生長(zhǎng)B.牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基中，加入高濃度NaQ可用于篩選耐鹽細(xì)菌C.用剛果紅染色劑篩選纖維素分解菌時(shí)，加入的NaQ可促進(jìn)菌落顯色D.在DNA粗提取時(shí)，用2mol/L的NaCl可析出溶液中的DNA【答案】B【解析】【分析】1、泡菜的制作：將新鮮蔬菜預(yù)先處理成條狀或片狀；泡菜鹽水按清水和鹽為4： 1質(zhì)量比配制煮沸冷卻備用：預(yù)處理的新鮮蔬菜裝至半壇時(shí)放入蒜瓣、生姜、香辛料等佐料，并繼續(xù)裝至八成滿；倒入配制好的鹽水，使鹽水浸沒(méi)全部菜料：蓋上泡菜壇蓋子，并用水密封發(fā)酵，發(fā)酵時(shí)間受到溫度影響。2、選擇性培養(yǎng)基：根據(jù)某微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的

4、培養(yǎng)基，具有使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌的功能，廣泛用于菌種篩選等領(lǐng)域。培養(yǎng)基用途原因加入青霉素分離酵母菌，露菌等真菌青霸素僅作用于細(xì)菌，對(duì)真菌無(wú)作用加入高濃度食鹽分離金黃色葩萄球菌金黃色葡萄球菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)致密，且能分泌血漿凝 固酶，分解纖維蛋白原為纖維蛋白，沉積在細(xì)胞壁 表面形成很厚的一層不透水的膜，不易失水不加氮源分離固氮菌固氮菌能利用空氣中的氮?dú)?，其他菌?lèi)不行不加含碳有機(jī)物分離自養(yǎng)型微生物自養(yǎng)型微生物可利用無(wú)機(jī)碳源，異養(yǎng)型微生物不行加入青霉素等抗目的基因?qū)肓四康幕虻氖荏w細(xì)胞中含有標(biāo)記基因，對(duì)特【詳解】A、固體培養(yǎng)基火菌后，應(yīng)冷卻至50左右時(shí)倒平板，固體培養(yǎng)基中含有瓊脂，40左右會(huì)凝

5、固，因此溫度過(guò)低會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基凝固無(wú)法倒平板，A正確：B、倒好的平板需要冷卻后使用，且不宜久存，以免表而干燥，影響接種后微生物的生長(zhǎng)，B錯(cuò)誤；C、平板涂布分離到的單菌落仍需進(jìn)一步劃線純化，以利于菌種保藏，C正確：D、結(jié)合分析可知，平板涂布法既可用于微生物的分離，也可用于微生物的計(jì)數(shù)，D正確。故選B。（2021八省聯(lián)考廣東）21.幾丁質(zhì)廣泛存在于甲殼類(lèi)動(dòng)物的外殼、昆蟲(chóng)的外件骼和真菌的細(xì) 胞壁中。某些微生物能合成幾丁質(zhì)酶（胞外酶），使幾丁質(zhì)降解為N-乙酰級(jí)基葡萄糖，然 后進(jìn)一步轉(zhuǎn)化利用。科研人員試圖從上壤中篩選出能高效降解幾丁質(zhì)的菌株，通過(guò)微生物培 養(yǎng)獲得幾丁質(zhì)酶，用于生物防治?；卮鹣铝袉?wèn)題：a，花

6、生白絹病菌b.辣椒疫毒病菌c,尖胞鐮刀菌d,擬盤(pán)多毛胞屬菌（1）在篩選過(guò)程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以 為唯一碳源的固體選擇性培養(yǎng)基上篩選目標(biāo)菌株。（2）培養(yǎng)所篩選出的目標(biāo)菌株，計(jì)算各單菌落周?chē)摹八馊χ睆?菌落直徑”的比值，比值 大小反映了。（3）科研人員篩選出了產(chǎn)幾丁質(zhì)酶的菌株A。將菌株A發(fā)酵產(chǎn)生的幾丁質(zhì)酶粗提液加入到 盛有馬鈴薯培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，涂布均勻后分別接種4種病原真菌，以 代替幾丁質(zhì)酶粗提液作為對(duì)照，結(jié)果見(jiàn)圖，幾丁質(zhì)酶粗提液對(duì) 的抑菌效果最強(qiáng)（填入病原菌編號(hào)）。推測(cè)幾丁質(zhì)酶的抑菌機(jī)理是?！敬鸢浮?.幾丁質(zhì) （2）.微生物的降解能力（3）.等量的無(wú)菌水 （4）. d（5）.幾丁

7、質(zhì)是真菌細(xì)胞壁的組成成分，幾丁質(zhì)酶水解了幾丁質(zhì)導(dǎo)致真菌細(xì)胞壁不能合成，抑 制了真菌的繁殖【解析】【分析】1、要從土壤中分離出能合成幾丁質(zhì)酶的微生物，應(yīng)以幾丁質(zhì)為唯一碳源，以淘汰不能產(chǎn)生 幾丁質(zhì)酶的真菌達(dá)到篩選效果：2、水解圈是產(chǎn)生幾丁質(zhì)酶的微生物產(chǎn)生相關(guān)酶水解幾丁質(zhì)產(chǎn)生的，水解圈直徑/菌落直徑越 大，說(shuō)明該菌降解能力越強(qiáng)?！驹斀狻浚?）篩選過(guò)程中，將上壤樣品稀釋液接種以幾丁質(zhì)為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基上，在 該培養(yǎng)基上只有可以利用幾丁質(zhì)的真菌可以生存，其他不能利用幾丁質(zhì)的微生物被淘汰而達(dá) 到篩選的作用。（2）水解圈直徑/菌落直徑可以反應(yīng)水解能力的大小，水解圈直徑/菌落直徑越大，說(shuō)明該 菌降解幾丁質(zhì)

8、能力越強(qiáng)，反之越弱。（3）對(duì)照組實(shí)驗(yàn)應(yīng)滿足單一變量原則，實(shí)驗(yàn)組添加幾丁質(zhì)酶，對(duì)照組加入不含幾丁質(zhì)酶粗 提液的等量的無(wú)菌水，對(duì)4組實(shí)驗(yàn)進(jìn)行觀察比較，d組水解圈直徑/菌落直徑最大，即抑制效 果最強(qiáng)，幾丁質(zhì)是真菌細(xì)胞壁的組成成分，幾丁質(zhì)酶水解了幾丁質(zhì)導(dǎo)致真菌細(xì)胞壁不能合成, 抑制了真菌的繁殖?！军c(diǎn)睛】本題考察微生物的篩選，需要聯(lián)系課本內(nèi)容，并從題目中獲取有效信息進(jìn)行作答， 題目難度較小。（2021八省聯(lián)考河北生物）23.紅樹(shù)萄果酒釀造的基本工藝流程為：破碎原料一酶解處理一 發(fā)酵一后處理一成品?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）來(lái)自紅樹(shù)卷破碎細(xì)胞壁的果膠會(huì)造成原料液渾濁，所以在“酶解處理”環(huán)節(jié)需要加入果 膠酶。某些

9、微生物能夠產(chǎn)生果膠酶，要篩選一株高產(chǎn)果膠酶的微生物，最佳菌體采樣點(diǎn)應(yīng)為 （填"紅樹(shù)莓果實(shí)紅樹(shù)莓果汁產(chǎn)品”或“紅樹(shù)莓果酒產(chǎn)品要獲得高產(chǎn)果膠 酶微生物的單菌落，需配制的選擇性固體培養(yǎng)基應(yīng)包括水、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、硝酸鈉、 剛果紅，還需要 （填序號(hào)：A.牛肉膏B.蛋白陳C.果膠D.葡萄糖E.瓊脂）。接種、培養(yǎng)一段時(shí)間后，選擇 的菌落作為高產(chǎn)果膠酶微生物的候選菌種。（2）寫(xiě)出從微生物中提取和分離果膠酶的基本步驟。（3）果膠酶是能夠分解果膠的一類(lèi)酶的總稱(chēng)，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶、果膠 酯酶等，采用凝膠電泳分離果膠酶中不同組分，是利用了各種酶分子 的差異。(4)在反應(yīng)體系中底物足量且

10、處于最適溫度和pH條件下，測(cè)定果膠酶活性需要在反應(yīng) (填“初期"中期”或“末期”)進(jìn)行，主要原因是。(5)工藝中“發(fā)酵”環(huán)節(jié)所用菌株為酵母菌，如圖中 號(hào)試管為酵母菌在半固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)后狀態(tài)。(6)工藝中“后處理”環(huán)節(jié)的一個(gè)重要工序是將酒樣置于87c保溫30min,目的是【答案】 (1).紅樹(shù)莓果汁產(chǎn)品(2). CE (3).具有透明圈(4).對(duì)細(xì)胞進(jìn)行破碎勻漿處理，過(guò)濾取上清液，加蛋白酶抑制劑，進(jìn)行電泳或用果膠類(lèi)似物進(jìn)行親和層析(5).分子本身大小、形狀以及帶電性質(zhì) (6).中期 (7).中期時(shí)所有酶都與底物充 分接觸，化學(xué)反應(yīng)速率穩(wěn)定 (8). 2 (9).殺死酵母菌，停止酒精發(fā)

11、酵，同時(shí)防止發(fā)酵 液中有機(jī)物的破壞和酒精的流失【解析】【分析】1、微生物的分離是研究和利用微生物的第一步，也是微生物工作的基本方法和重要環(huán)節(jié)。 紅樹(shù)萄果實(shí)含有能產(chǎn)生果膠酶的微生物，本題中要從紅樹(shù)莓果實(shí)獲得果膠酶高產(chǎn)菌株。2、篩選菌株的方法：尋找目的菌株時(shí)，要根據(jù)它對(duì)生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中區(qū)尋 找。3、電泳法的原理：許多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解離的基團(tuán)，在一定 的pH下，這些基團(tuán)會(huì)帶上正電或負(fù)電。在電場(chǎng)的作用下，這些帶電分子會(huì)向著與其所帶電 荷相反的電極移動(dòng)。在同一電場(chǎng)下，由于各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身大小、形狀 的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)樣

12、品中各種分子的分離?！驹斀狻浚?）尋找目的菌株時(shí)，要根據(jù)它對(duì)生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中區(qū)尋找。本題 中需要篩選一株分解紅樹(shù)莓果實(shí)中果膠酶的微生物，最佳菌體采樣點(diǎn)應(yīng)為紅樹(shù)慈果汁產(chǎn)品。 該培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，所以要加入凝固劑：瓊脂。因?yàn)橐Y選分解過(guò)膠的微生物，所以要 以果膠作為唯一的碳源。因此，培養(yǎng)基中還需加入果膠和瓊脂，而不能加入蛋白陳和牛肉膏。 培養(yǎng)基中的剛果紅可以與果膠結(jié)合生成紅色復(fù)合物，但是不與果膠分解后的產(chǎn)物結(jié)合，接種 一段時(shí)間后，如果微生物能產(chǎn)生分解果膠的酶，就會(huì)出現(xiàn)透明圈，所以選擇具有透明圈的菌 落。（2）從微生物中提取和分離果膠酶的基本步驟：對(duì)細(xì)胞進(jìn)行破碎勻漿處理，過(guò)濾取上清液

13、, 加蛋白酶抑制劑，進(jìn)行電泳或用果膠類(lèi)似物進(jìn)行親和層析。（3）采用凝膠電泳分離果膠酶中不同組分，在同一電場(chǎng)下，由于各種酶分子帶電性質(zhì)的差 異以及分子本身大小、形狀的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種 分子的分離。（4）在反應(yīng)體系中底物足量且處于最適溫度和pH條件下，測(cè)定果膠酶活性需要在反應(yīng)中 期進(jìn)行，主要原因是前期前和底物接觸不充分，化學(xué)反應(yīng)速率慢：后期由于產(chǎn)物增多、積累, 可能會(huì)影響酶促反應(yīng)的進(jìn)行：中期時(shí)所有酶都與底物充分接觸，化學(xué)反應(yīng)速率穩(wěn)定。（5）工藝中“發(fā)酵”環(huán)節(jié)所用菌株為酵母菌，圖中2號(hào)試管為酵母菌在半固體培養(yǎng)基中培養(yǎng) 后狀態(tài)，因?yàn)榻湍妇鸀榧嫘詤捬蹙谟醒醯臈l件

14、下大量繁殖，在無(wú)氧的條件下進(jìn)行酒精發(fā) 酵，所以固體培養(yǎng)基與空氣接觸的部位分布了較多酵母菌，固體培養(yǎng)基底部和中部無(wú)氧的環(huán) 境中也有酵母菌生活。（6）工藝中“后處理”環(huán)節(jié) 一個(gè)重要工序是將酒樣置于87c保溫30min,目的是殺死酵母 菌，停止酒精發(fā)酵；同時(shí)87c的條件下可以防止有發(fā)酵液中機(jī)物的破壞和酒精流失；（合理 即可）【點(diǎn)睛】本題以紅樹(shù)莓果酒赧造為背景，綜合考察了微生物的培養(yǎng)和分離、酶的分離和提純。 結(jié)合生活實(shí)際，聯(lián)系應(yīng)用所學(xué)知識(shí)是解決本題的關(guān)鍵。（2021八省聯(lián)考湖南生物）21.研究人員欲從上壤中篩選高淀粉酶活性的細(xì)菌（目標(biāo)菌）， 并對(duì)其進(jìn)行研究?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）在細(xì)菌篩選過(guò)程中，將土壤

15、樣品稀釋液接種至以 為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，除碳源外，該培養(yǎng)基還含有皴源、水、無(wú)機(jī)鹽和。（2）進(jìn)行微生物菌種純化時(shí)，為得到單菌落，最常用的兩種接種方法是,（3）從土壤中篩選目標(biāo)菌時(shí)，加碘液染色后，平板上出現(xiàn)了 A、B和C三種菌落（如圖1所示)。如果要得到淀粉酶活力最高的菌株，應(yīng)該選擇 (填A(yù)'B"或"C”)菌落 進(jìn)一步純化。A菌落經(jīng)檢測(cè)其為硝化細(xì)菌，據(jù)此說(shuō)明A菌落能在此培養(yǎng)基上生長(zhǎng)且沒(méi)有形 成透明圈的原因是,(4)經(jīng)篩選獲得了一菌株，能同時(shí)產(chǎn)兩種不同的淀粉酶X和Y,其相對(duì)分子量分別為45000 和58000。采用凝膠色譜法將這兩種淀粉酶分離時(shí)，先洗脫出來(lái)的

16、是淀粉酶(填 “X”或"Y”)，其原因是o淀粉的甲 淀粉酶乙 淀粉的丙淀新演甲 淀粉前乙 淀粉浦西(5)在研究過(guò)程中獲得了三種淀粉酶，其酶活性與反應(yīng)溫度和pH值有關(guān)(如圖2和圖3 所示)，假如要選擇一種耐酸耐高溫的淀粉酶進(jìn)行后續(xù)研究，應(yīng)該選擇淀粉酶(填 “甲"乙"或'丙、理由是，56789 10pH值圖3【答案】(1),淀粉 (2).瓊脂(凝固劑)(3).稀釋涂布平板法和平板劃線法(4).B (5).硝化細(xì)菌為自養(yǎng)菌，不能產(chǎn)生淀粉酶，能夠利用空氣中的二氧化碳合成有機(jī)物(6).Y(7).在凝膠色譜柱中，淀粉酶Y的相對(duì)分子質(zhì)量大，不容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能

17、在凝膠外部移動(dòng)，路程短，移動(dòng)的速度快，先洗脫出來(lái) (8).丙 (9).淀粉酶丙的 最適溫度最高，最適pH最低，且為酸性【解析】【分析】1、高淀粉酶活性的細(xì)菌可以產(chǎn)生活性較高的淀粉酶，能夠?qū)⒌矸鄯纸鉃辂溠刻呛秃?jiǎn)萄糖。 淀粉分解菌常采用碘液染色進(jìn)行鑒定，碘液可以與淀粉結(jié)合形成藍(lán)色物質(zhì)，淀粉分解菌由于 能夠?qū)⒌矸鄯纸舛谄桨迳系木渲車(chē)霈F(xiàn)無(wú)色的透明圈，透明圈的大小可以反應(yīng)淀粉分解 菌產(chǎn)生的酶的活性大小和酶量多少。2、微生物的接種方法常用稀釋涂布平板法和平板劃線法?！驹斀狻浚?）分析題意可知，該實(shí)驗(yàn)?zāi)?是欲從土壤中篩選高淀粉酶活性的細(xì)菌，故在細(xì)菌 篩選過(guò)程中，將土壤樣品稀釋液接種至以淀粉為唯一碳源的

18、固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，除碳源 外，該培養(yǎng)基還含有皴源、水、無(wú)機(jī)鹽和瓊脂（凝固劑）。（2）進(jìn)行微生物菌種純化時(shí)，為得到單菌落，最常用的兩種接種方法是稀釋涂布平板法和 平板劃線法。（3）分析題圖可知，從土壤中篩選目標(biāo)菌時(shí)，加碘液染色后，平板上B菌落的透明圈最大 說(shuō)明B菌產(chǎn)生的淀粉酶活力最高，故應(yīng)該選擇B菌落進(jìn)一步純化。A菌落經(jīng)檢測(cè)其為硝化 細(xì)菌，據(jù)此說(shuō)明A菌落能在此培養(yǎng)基上生長(zhǎng)且沒(méi)有形成透明圈，原因是硝化細(xì)菌為自養(yǎng)型 細(xì)菌，不能利用現(xiàn)成的淀粉，而能利用空氣中的二氧化碳合成糖類(lèi)等有機(jī)物。（4）凝膠色譜法是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法，相對(duì)分子質(zhì)量小的蛋 白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程

19、長(zhǎng)，移動(dòng)的速度慢；相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不容易進(jìn) 入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動(dòng)，路程短，移動(dòng)的速度快，因此相對(duì)分子質(zhì)量不同 的蛋白質(zhì)得以分離，由于淀粉酶Y的相對(duì)分子量比X大，故采用凝膠色譜法將這兩種淀粉 酶分離時(shí)，先洗脫出來(lái)的是淀粉隨丫。（5）分析題中曲線可知，三種淀粉酶中，丙的最適溫度為70,比甲乙的最適溫度高，最 適pH是3,比甲乙的最適pH低，故要選擇一種耐酸耐高溫的淀粉酶進(jìn)行后續(xù)研究，應(yīng)該 選擇淀粉酶丙?！军c(diǎn)睛】本題考查微生物的分離和培養(yǎng)、蛋白質(zhì)的提取和分離的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生對(duì) 相關(guān)知識(shí)點(diǎn)的識(shí)記、理解和運(yùn)用能力，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系，構(gòu)建知識(shí)網(wǎng)絡(luò)。（2021八省聯(lián)考江蘇生物

20、）22.啤酒生產(chǎn)需經(jīng)過(guò)制麥、糖化、發(fā)酵等主要環(huán)節(jié)。糖化主要是 將麥芽中的淀粉等有機(jī)物水解為小分子的過(guò)程。主要工藝流程如下圖所示，請(qǐng)回答下列問(wèn)題:活化度:型母期二蛇型七理二望產(chǎn)8 一整制麥糖化發(fā)酵（1）大麥?zhǔn)瞧【瓢l(fā)酵的重要碳源，針對(duì)制麥及糖化步驟，下列說(shuō)法正確的有（填序號(hào)）。大麥萌發(fā)時(shí)僅產(chǎn)生淀粉醯，幾乎不產(chǎn)生蛋白酶用赤零素處理大麥，可誘導(dǎo)淀粉酶的合成酵母不能直接利用淀粉，需要淀粉酶等將淀粉轉(zhuǎn)化成酵母可利用的糖糖化采用的溫度越高，淀粉水解速度越快（2）啤酒發(fā)酵時(shí)具有活力的酵母需達(dá)到一定的數(shù)量，故在菌種活化的過(guò)程中，需定時(shí)取樣, 檢測(cè)酵母的生長(zhǎng)狀況。若某次樣品經(jīng)2次10倍稀釋后，經(jīng)臺(tái)盼藍(lán)染色（體積不

21、計(jì)），在25x16 型血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上計(jì)數(shù) 色細(xì)胞，5個(gè)中格中的細(xì)胞數(shù)為244個(gè)，該樣品中活酵母細(xì)胞 的密度為 個(gè)細(xì)胞/mJ（3）敲除釀酒酵母中的蛋白酶基因，減少發(fā)酵液中蛋白的水解，有助于增強(qiáng)啤酒泡沫的穩(wěn) 定性，從而改善啤酒的品質(zhì)。以下是某科研小組的實(shí)驗(yàn)：己知編碼酵母蛋白酶A （PEP4）的基因序列如下（為非模板鏈）：5 '-ATGTTCAGCITGAAAGCATTATTGOCATrGGCCITGTrGTGGCAGOGCC CAATITGA-3'編碼該酶的niRNA,起始端的三個(gè)密碼子依次為 終止密碼子為。Cas9蛋白可在人為設(shè)定的RNA序列（gRNA）引導(dǎo)下，在選定位點(diǎn)切斷相應(yīng)

22、的DNA鏈（如 下圖），在DNA自我連接的修復(fù)過(guò)程中產(chǎn)生突變。DNA序列中含NGG的位點(diǎn)具有較高的 編輯效率（N為任意堿基）。上述PEP4序列虛線框中有 處可作為Cas9的優(yōu)選剪切位點(diǎn)。Cas9剪切位點(diǎn)在其N(xiāo)GG識(shí)別位點(diǎn)的 側(cè)。（填“5"”或3"）用酪蛋白固體培養(yǎng)基篩選突變體，野生型可以水解酪蛋白，在菌落周?chē)纬赏该魅?。需?篩選透明圈 的菌落，表明其蛋白酶活性?！敬鸢浮?（1）,（2）.無(wú)色 （3）.1.22x109 （4）.AUG、UUC、AGC （5）. UGA（6）. 4（7）. 3'（8）.?。?）.弱【解析】【分析】（1）大麥種子萌發(fā)時(shí)，其貯存的大分子物

23、質(zhì)淀粉、蛋白質(zhì)分解為小分子，為種子萌發(fā)提供 物質(zhì)和能量。（2）基因的兩條脫氧核甘酸鏈方向相反，轉(zhuǎn)錄時(shí)RNA聚合酶從模板鏈的5,開(kāi)始催化mRNA 的合成?！驹斀狻浚?）大麥萌發(fā)時(shí)會(huì)產(chǎn)生淀粉酶、蛋白酶等，錯(cuò)誤：赤霉素處理大麥，可誘導(dǎo)淀粉酶的合成，促進(jìn)種子萌發(fā)，正確：酵母細(xì)胞呼吸的底物為簡(jiǎn)萄糖，不能直接利用淀粉，需要淀粉酶等將淀粉轉(zhuǎn)化成酵母可利 用的糖，正確；酶的催化需要適宜溫度，糖化采用的溫度過(guò)高，淀粉水解速度會(huì)變慢，錯(cuò)誤。故選。（2）細(xì)胞膜具有選擇透過(guò)性，臺(tái)盼藍(lán)不能進(jìn)入活細(xì)胞，染色后用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)對(duì) 無(wú)色細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，若某次樣品經(jīng)2次10倍稀釋后，在25x16型血細(xì)胞沖數(shù)板上計(jì)數(shù)，5 個(gè)

24、中格中的細(xì)胞數(shù)為244個(gè)，則該樣品中活酵母細(xì)胞的密度為2444-5x25-70.1 x 1 （Px 103=1.22x 109 個(gè)/mL°（3）已知編碼酵母蛋白酶A （PEP4）的基因序列為如下（為非模板鏈）：5-ATGTTCACCT TCAAAGCATT ATTGCCATTG GCCTTGITGT GGTCAGCGCCCAATTTGA-3'模板鏈與非模板鏈方向相反，轉(zhuǎn)錄時(shí)RNA聚合酶從模板鏈的S開(kāi)始催化mRNA的合成，則編碼該 酶的mRNA和非模板鏈堿基序列類(lèi)似，只是U代替了其中的T,起始端的三個(gè)密碼子依次 為AUG、UUC、AGC,終止密碼子為UGA。DNA序列中含NGG

25、的位點(diǎn)具有較高的編輯效率（N為任意堿基）。根據(jù)PEP4序列虛線 框中的堿基序列，有4處可作為Cas9的優(yōu)選剪切位點(diǎn)。據(jù)圖可知，Cas9的剪切位點(diǎn)在其 NGG識(shí)別位點(diǎn)的3側(cè)。用酪蛋白固體培養(yǎng)基篩選突變體，野生型可以水解酪蛋白，在菌落周?chē)纬赏该魅ΑＲ虼?需要篩選透明圈較小的菌落，表明其蛋白酶活性較弱，這樣的突變體能減少發(fā)酵液中蛋白的 水解，有助于增強(qiáng)啤酒泡沫的穩(wěn)定性，從而改善啤酒的品質(zhì)?！军c(diǎn)睛】血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室中，容積為O.lmnf,根據(jù)5個(gè)中格中的細(xì)胞數(shù)，可推算計(jì) 數(shù)室內(nèi)細(xì)胞數(shù)，再根據(jù)稀釋倍數(shù)可計(jì)算每毫升樣品中細(xì)胞數(shù)。（2021八省聯(lián)考遼寧生物）22.微生物合成的油脂是制備生物柴油的新型原

26、料。圖為產(chǎn)油脂 芽抱桿菌篩選的流程，其中B平板上的5個(gè)菌落是初篩得到的芽泡桿菌，C為B平板上菌 落的原位影印，利用蘇丹黑B可使脂類(lèi)物質(zhì)呈黑色的特性，對(duì)C進(jìn)行染色，得到結(jié)果D。 回答下列問(wèn)題：土壤菌液（1）圖中對(duì)土壤菌液進(jìn)行系列梯度稀釋的目的是。（2）若要使菌落能在A平板上生長(zhǎng)，下列培養(yǎng)基組分中最合理的是 （填"甲'”'乙""丙”），原因是。表2培養(yǎng)基組分:甲葡萄糖、牛肉膏、蛋白脈、NaCk瓊脂、水乙葡萄糖、蔗糖、NaCL瓊脂、水丙葡萄糖、牛肉膏、Na。、蔗糖、水（3）培養(yǎng)基配制完成后需要立即進(jìn)行滅菌，常用的滅菌方法為.（4）根據(jù)D的染色結(jié)果，可判斷

27、B平板中的 （填圖中數(shù)字）是產(chǎn)油脂芽泡桿 菌的菌落。（5）將B平板中的產(chǎn)油脂芽泡桿菌的單菌落進(jìn)一步純化培養(yǎng)得到E。將E中的菌落接種到 試管F的固體斜而培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)后放入4c冰箱中臨時(shí)保藏，以后每3-6個(gè)月需要轉(zhuǎn)接 一次。這種方法不適合長(zhǎng)期保藏菌種的原因是。如需長(zhǎng)期保存可采用的方法?！敬鸢浮?（1）.將微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，進(jìn)而獲得單個(gè)的菌落 （2）.甲 （3）.培養(yǎng) 基甲含有碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽這幾類(lèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，且加入了瓊脂作為凝固劑，可以達(dá)到實(shí) 驗(yàn)效果 （4）.高壓蒸汽滅菌法 （5）. 3 （6）.菌種容易污染或產(chǎn)生變異 （7）.甘油 管藏【解析】【分析】1、滅菌是指在強(qiáng)烈的理化因素條件

28、下，殺死物體內(nèi)外所有微生物，包括芽抱和孩子。2、滅菌的常用方法（1）灼燒滅菌法，例如：接種工具（2）干熱滅菌法，例如：玻璃器皿、金屬用具（3）高壓蒸汽滅菌法，例如：培養(yǎng)基及容器【詳解】（1）因土壤菌數(shù)量較多，菌液濃度較大，如直接接種，菌落密集，在固體培養(yǎng)基表 而無(wú)法形成單個(gè)菌落，需要將微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，進(jìn)而獲得單個(gè)的菌落，所以要對(duì)土壤 菌液進(jìn)行系列梯度稀釋。（2）蛋白陳提供的主要營(yíng)養(yǎng)是氮源和維生素。培養(yǎng)基甲含有碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽這幾 類(lèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，且加入了瓊脂作為凝固劑，可以達(dá)到實(shí)驗(yàn)效果；培養(yǎng)基乙不含蛋白陳（氮源）, 不合理；培養(yǎng)基丙不含凝固劑（瓊脂），無(wú)法形成固體培養(yǎng)基，無(wú)法在培養(yǎng)基表

29、面形成菌落。（3）培養(yǎng)基配制完成后需要立即進(jìn)行滅菌，常用的滅菌方法為高壓蒸汽滅菌法。（4）蘇丹黑B將脂類(lèi)染成黑色，而C又是B平板上菌落的原位影印，對(duì)照實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，平板B中的3是產(chǎn)油脂芽泡桿菌的菌落。（5）該種低溫臨時(shí)保藏菌種的方法，容易污染或產(chǎn)生變異，如需長(zhǎng)期保存，可在溫度為-20（ 下采用甘油管藏的方法?！军c(diǎn)睛】本題考查無(wú)菌操作技術(shù)、培養(yǎng)基、菌落的培養(yǎng)及篩選的相關(guān)知識(shí)。關(guān)鍵要求考生學(xué) 握實(shí)驗(yàn)的原理及基本實(shí)驗(yàn)操作技能。（2021八省聯(lián)考重慶生物）25. 2020年世界性的新型冠狀病毒肺炎大流行，為了能更好地對(duì)病毒展開(kāi)相關(guān)研究，科學(xué)家需要分離和培養(yǎng)病毒。如圖是其流程示意圖：（1）將采集到的病毒樣本進(jìn)行稀釋?zhuān)鐖D所示，用 吸取100PL的病毒樣本，注入到中，使樣本與稀釋液充分混勻，依次操作后，