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文檔簡介

1、情境七：蛋白質(zhì)和酶任務(wù)八：酶活力及其測定知識(shí)點(diǎn):酶活力測定方法舉例 課程：化學(xué)及生物物料的識(shí)用酶活力測定示例-淀粉酶活力測定酶活力測定方法舉例 淀粉是葡萄糖分子聚合而成的，它是細(xì)胞中碳水化合物最普遍的儲(chǔ)藏形式。淀粉除食用外，工業(yè)上用于制糊精、麥芽糖、葡萄糖、酒精等，也用于調(diào)制印花漿、紡織品的上漿、紙張的上膠、藥物片劑的壓制等。淀粉酶是水解淀粉和糖原的酶類總稱，自然界中，幾乎所有植物、動(dòng)物和微生物都含有淀粉酶。因此，淀粉酶是研究最多、生產(chǎn)最早、應(yīng)用最廣和產(chǎn)量最大的一種酶。（1）測定原理淀粉酶-淀粉酶可隨機(jī)地作用于淀粉中的-1,4-糖苷鍵，生成葡萄糖、麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖，同時(shí)使淀粉的粘

2、度降低，因此又稱為液化酶。-淀粉酶可從淀粉的非還原性末端進(jìn)行水解，每次水解下一分子麥芽糖，又被稱為糖化酶。 淀粉酶催化產(chǎn)生還原糖酶活力測定方法舉例淀粉酶催化產(chǎn)生還原糖能使3,5-二硝基水楊酸還原，生成棕紅色的3-氨基-5-硝基水楊酸，其反應(yīng)如下：堿 性C O O HO HN O2O2NN H2C O O HO HO2N加 熱還 原 糖糖 酸+兩種淀粉酶特性不同: -淀粉酶不耐酸，在pH3.6以下迅速鈍化。 -淀粉酶不耐熱，在7015min鈍化。 根據(jù)它們的這種特性，在測定活力時(shí)鈍化其中之一，就可測出另一種淀粉酶的活力。棕紅色棕紅色二、酶活力測定 在底物淀粉濃度已知而且過量的條件下，反應(yīng)后加入碘液與未被催化水解的淀粉結(jié)合成藍(lán)色復(fù)合物。碘-淀粉比色法操作簡便迅速 實(shí)用 其藍(lán)色深淺與未經(jīng)酶促反應(yīng)的空白管比較，從而計(jì)算出淀粉的剩余量，再計(jì)算出淀粉酶的活力。二、酶活力測定（2）測定方法測定淀粉酶活力的方法有四類，一是測定底物淀粉的消耗量，有黏度法、濁度法和碘-淀粉比色法等；二是生糖

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