DNA損傷定量試劑盒

1、Product Name: DNA Damage Quantification Kit -AP Site Counting-UnitProduct Code5 samplesDK02-1020 samplesDK02-12Product Description:Storage: 0-5 ºCShipping Condition: Blue Ice or Ambient TemperatureDNA損傷定量試劑盒活性氧和DNA作用會(huì)導(dǎo)致DNA的氧化性損傷，尤其是過氧化物和過氧化氫通過Fenton反應(yīng)而生成羥自由基，羥自由基對(duì)脫氧核糖部分的氧化侵蝕會(huì)使DNA釋放出自由堿基，引起DNA鏈斷

2、裂和無(wú)堿基位點(diǎn)（AP Sites）。事實(shí)上，AP Sites是活性氧造成的一種主要的DNA損傷。醛反應(yīng)探針（ARP）試劑（N-氨基甲醛羰基聯(lián)胺-D-生物素，圖1）能特異性地和醛基團(tuán)（是AP Sites的開環(huán)形式）反應(yīng)，該反應(yīng)能夠檢測(cè)到DNA在醛基團(tuán)中的變化。對(duì)含有AP Sites的DNA在加入ARP試劑后，AP Sites就被生物素殘留物所標(biāo)記。使用足夠量的ARP試劑，則所有的AP Sites就會(huì)轉(zhuǎn)變成被生物素標(biāo)記的AP Sites。因此可以采用親和素生物素的分析，然后通過過氧化物酶的比色測(cè)定或堿性磷酸酶生物素的反應(yīng)來測(cè)定（圖2）。圖1：ARP試劑的化學(xué)結(jié)構(gòu)式圖2：ARP和AP Sites反應(yīng)

3、原理DNA損傷定量試劑盒含有各種測(cè)定溶液，能夠測(cè)定出1-40個(gè)AP Sites/1×105bp。試劑盒描述本試劑盒是用96孔板的比色分析方法來測(cè)定DNA樣品中的AP Sites，在試劑盒中的ARP 標(biāo)準(zhǔn)DNA溶液是用小牛胸腺DNA經(jīng)熱、酸脫嘌呤制備而得，可以測(cè)定0-40個(gè)AP Sites1×105bp。試劑盒中含有離心過濾管用于ARP標(biāo)記的樣品DNA的純化，因此在ARP反應(yīng)后不需要測(cè)定DNA濃度。標(biāo)準(zhǔn)ARP DNA和經(jīng)ARP處理并純化過的樣品DNA在96孔板上分別加入DNA Binding solution，然后可以通過生物素親和素過氧化物酶分析方法測(cè)定樣品DNA中的AP

4、Sites的數(shù)量。由于標(biāo)準(zhǔn)ARP-DNA是雙鏈DNA，該試劑盒不能用于單鏈DNA的AP Sites的測(cè)定。用ARP DNA標(biāo)準(zhǔn)溶液制備的校正曲線ARP-DNA 標(biāo)準(zhǔn)溶液0 AP/100,000 bp2.5 AP/100,000 bp5 AP/100,000 bp10 AP/100,000 bp20 AP/100,000 bp40 AP/100,000 bpAP DNA經(jīng)熱、酸脫嘌呤制備而得特點(diǎn)：1、 可在基因組DNA中檢測(cè)AP Sites2、 適合于在96孔板上進(jìn)行比色分析3、 試劑盒中含有各種試劑，操作方便4、 可以檢測(cè)1-40個(gè)AP Sites/1×105bp產(chǎn)品代碼 使用次數(shù)DK02-105個(gè)樣品DK02-1220個(gè)樣品DOJINDO LABORATORIES同仁化學(xué)研究所 中國(guó)（上海）代表處地址: 上海