T淋巴細(xì)胞結(jié)果的解讀ppt課件

1、1T T細(xì)胞亞群結(jié)果的解讀細(xì)胞亞群結(jié)果的解讀 2淋巴細(xì)胞分化圖淋巴細(xì)胞分化圖3u按按T T細(xì)胞所處的活化階段細(xì)胞所處的活化階段 初始初始T細(xì)胞（細(xì)胞（naive T cell） 效應(yīng)效應(yīng)T細(xì)胞（細(xì)胞（effector T cell） 記憶性記憶性T細(xì)胞（細(xì)胞（memory T cell）u按按T T細(xì)胞表面受體（細(xì)胞表面受體（TCRTCR）分類）分類 + T細(xì)胞細(xì)胞 + T細(xì)胞細(xì)胞u按按T T細(xì)胞細(xì)胞CD4CD4和和CD8CD8分子表型分子表型 CD4+ T細(xì)胞細(xì)胞 CD8+ T細(xì)胞細(xì)胞 u按按T T細(xì)胞的功能分類細(xì)胞的功能分類 Th（輔助（輔助T細(xì)胞）細(xì)胞） TS（抑制（抑制T細(xì)胞）細(xì)胞）

2、Tr（調(diào)節(jié)（調(diào)節(jié)T細(xì)胞）細(xì)胞）T T淋巴細(xì)胞的分類方法淋巴細(xì)胞的分類方法4外周血中各亞群占淋巴細(xì)胞總數(shù)的比例外周血中各亞群占淋巴細(xì)胞總數(shù)的比例60-80%27-51%15-44%T淋巴細(xì)胞CD4T淋巴細(xì)胞CD8T淋巴細(xì)胞5淋巴細(xì)胞監(jiān)測注重?cái)?shù)量、比例、功能相結(jié)合淋巴細(xì)胞監(jiān)測注重?cái)?shù)量、比例、功能相結(jié)合血液分析常規(guī)檢測血液分析常規(guī)檢測依據(jù)白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞比例及依據(jù)白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞比例及計(jì)數(shù)綁定機(jī)體免疫狀況，無法計(jì)數(shù)綁定機(jī)體免疫狀況，無法精確判斷。精確判斷。T T淋巴細(xì)胞亞群比淋巴細(xì)胞亞群比例檢測例檢測臨床常用，但較片面臨床常用，但較片面T T淋巴細(xì)胞亞群數(shù)量淋巴細(xì)胞亞群數(shù)量觀察免疫細(xì)胞數(shù)值變化，評(píng)估

3、免疫觀察免疫細(xì)胞數(shù)值變化，評(píng)估免疫狀況，通常采用流式細(xì)胞儀法，特狀況，通常采用流式細(xì)胞儀法，特別針對(duì)別針對(duì)CD4CD4的檢測，已成為的檢測，已成為“金標(biāo)金標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)”。功能、數(shù)量、比例功能、數(shù)量、比例結(jié)合結(jié)合更精確評(píng)估機(jī)體免疫更精確評(píng)估機(jī)體免疫狀態(tài)狀態(tài)12346目前臨床主要可以做以下項(xiàng)目的檢測目前臨床主要可以做以下項(xiàng)目的檢測n淋巴細(xì)胞亞群(T+B+NK)的比例和計(jì)數(shù)nT細(xì)胞亞群(CD4+細(xì)胞、CD8+細(xì)胞、CD4+/CD8+比值）nMHLA-DR（單核細(xì)胞HLA-DR)nCD4CD25Treg（調(diào)節(jié)細(xì)胞）及Th17細(xì)胞（我們工作）目前國內(nèi)絕大多數(shù)醫(yī)院沒有開展淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)項(xiàng)目7項(xiàng)項(xiàng) 目目百分含量（百

4、分含量（%淋巴細(xì)胞）淋巴細(xì)胞）Total B lymphocyte (CD19+) 5-18%NK cell (CD3-/CD16+56+) 7-40%Total T lymphocyte (CD3+) 50-84%T helper/inducer cell (CD3+/CD4+) 27-51%T supressor/cytotoxic cell (CD3+/CD8+) 15-44%CD4/CD80.71-2.78(BD)(BD)健康中國人參考范圍健康中國人參考范圍項(xiàng)項(xiàng) 目目百分含量百分含量（% T淋淋巴細(xì)胞）巴細(xì)胞）絕對(duì)含量絕對(duì)含量（cells/ L）Total T lymphocyte (

5、CD3+)770-2041Thelper/inducer cell (CD3+/CD4+/CD8-)34-70%414-1123Tsupressor/cytotoxic cell (CD3+/CD4-/CD8+25-54%238-874CD3+CD4+CD8+ cell0.5-4.0%6-568CD4+CD4+、 CD8+ TCD8+ T淋巴細(xì)胞的計(jì)數(shù)方法一（淋巴細(xì)胞的計(jì)數(shù)方法一（FCM)FCM)n取取100l100l全血，加三種不同熒光素標(biāo)記的鼠全血，加三種不同熒光素標(biāo)記的鼠抗人抗人CD3CD3、CD4CD4、CD8McAbCD8McAb，陰性對(duì)照。，陰性對(duì)照。n加紅細(xì)胞裂解液，溶血，離心，

6、棄上清。加紅細(xì)胞裂解液，溶血，離心，棄上清。n用用PBSPBS洗洗1 1次，次，PBSPBS重懸細(xì)胞，上機(jī)檢測。重懸細(xì)胞，上機(jī)檢測。nFCMFCM分析分析 電子計(jì)算機(jī)自動(dòng)計(jì)算出陽性細(xì)胞百電子計(jì)算機(jī)自動(dòng)計(jì)算出陽性細(xì)胞百分率及總細(xì)胞計(jì)數(shù)。分率及總細(xì)胞計(jì)數(shù)。簡單、快速、相對(duì)精確簡單、快速、相對(duì)精確9nCD3+T細(xì)胞正常范圍為：50-84%nCD4+T細(xì)胞正常范圍為： 27-51% nCD8+T細(xì)胞正常范圍為： 15-44%nCD19+B細(xì)胞正常范圍為：5-18%n與血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀聯(lián)用，得出各淋巴細(xì)胞百分比后乘以淋巴細(xì)胞數(shù)量，得出各淋巴細(xì)胞的絕對(duì)濃度。CD4TCD4T淋巴細(xì)胞的計(jì)數(shù)方法二（推算）淋巴細(xì)胞

7、的計(jì)數(shù)方法二（推算）不精確、繁瑣不精確、繁瑣省錢省錢舉例如下舉例如下10患者血常規(guī)中淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)為患者血常規(guī)中淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)為0.63 0.63 109 /L,109 /L,淋巴細(xì)胞比例測定結(jié)果淋巴細(xì)胞比例測定結(jié)果CD3 CD3 為為64.9%,CD464.9%,CD4為為32.5%,CD832.5%,CD8為為31.1%31.1%CD3CD3細(xì)胞計(jì)數(shù)為細(xì)胞計(jì)數(shù)為0.630.6310109 9/L/L64.9%0.41 64.9%0.41 10109 9 /L /LCD4CD4細(xì)胞計(jì)數(shù)為細(xì)胞計(jì)數(shù)為0.630.63109/L109/L32.5%0.20 32.5%0.20 10109 9 /L /

8、LCD8CD8細(xì)胞計(jì)數(shù)為細(xì)胞計(jì)數(shù)為0.630.63109/L109/L31.1%0.19 31.1%0.19 10109 9 /L /L推推算算1112單核細(xì)胞人類白細(xì)胞抗原單核細(xì)胞人類白細(xì)胞抗原DRDR（ CD14/HLA-DRCD14/HLA-DR）nCD14CD14為為LPSLPS復(fù)合物受體復(fù)合物受體, ,主要分布在單核細(xì)胞，主要分布在單核細(xì)胞，HLA-DRHLA-DR為活化標(biāo)志。為活化標(biāo)志。nCD14/HLA-DRCD14/HLA-DR可反映人體細(xì)胞免疫功能，可反映人體細(xì)胞免疫功能，30%30%提示免疫麻痹。也有人認(rèn)為提示免疫麻痹。也有人認(rèn)為HLA-DRHLA-DR濃度如濃度如果連續(xù)兩

9、天低于果連續(xù)兩天低于8000AB/C8000AB/C可認(rèn)為存在免疫麻痹?？烧J(rèn)為存在免疫麻痹。n廣泛應(yīng)用于臨床。廣泛應(yīng)用于臨床。13T T淋巴細(xì)胞亞群研究淋巴細(xì)胞亞群研究研究逐年增多研究逐年增多14淋巴細(xì)胞亞群變化的常見臨床意義淋巴細(xì)胞亞群變化的常見臨床意義nCD4CD4淋巴細(xì)胞減少：見于惡性腫瘤、遺傳性免疫缺陷病、艾滋病、應(yīng)用免疫抑制劑的淋巴細(xì)胞減少：見于惡性腫瘤、遺傳性免疫缺陷病、艾滋病、應(yīng)用免疫抑制劑的患者患者nCD8CD8淋巴細(xì)胞增多：見于自身免疫性疾病，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡（淋巴細(xì)胞增多：見于自身免疫性疾病，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLESLE）、艾滋病初期、）、艾滋病初期、慢性活動(dòng)性肝炎、腫瘤

10、及病毒感染等慢性活動(dòng)性肝炎、腫瘤及病毒感染等nCD4CD4CD8CD8比值異常：比值異常： 比值降低：一般被稱為比值降低：一般被稱為“免疫抑制免疫抑制”狀態(tài)，常見于免疫缺陷病、惡性腫瘤、再生障狀態(tài)，常見于免疫缺陷病、惡性腫瘤、再生障礙性貧血、白血病、某些病毒感染等礙性貧血、白血病、某些病毒感染等 比值增高：表明細(xì)胞免疫功能處于比值增高：表明細(xì)胞免疫功能處于“過度活躍過度活躍”狀態(tài)，容易出現(xiàn)自體免疫反應(yīng)。狀態(tài)，容易出現(xiàn)自體免疫反應(yīng)。此外還可用于監(jiān)測器官移植的排斥反應(yīng)，若移植后此外還可用于監(jiān)測器官移植的排斥反應(yīng)，若移植后CD4/CD8CD4/CD8較移植前明顯增加，較移植前明顯增加，則可能發(fā)生排異

11、反應(yīng)則可能發(fā)生排異反應(yīng)1515The shift from a pro-in-flammatory to an anti-inflammatory immune response predominant at the systemic level likely occurs before 24 h after diagnosis of shock.膿毒癥休克期存在免疫麻痹膿毒癥休克期存在免疫麻痹16存在免疫麻痹的存在免疫麻痹的SepticSeptic患者死亡率大大增加患者死亡率大大增加100100名名septicseptic患者患者28天死亡天死亡無免疫麻痹無免疫麻痹免疫麻痹免疫麻痹17膿毒癥

12、休克患者膿毒癥休克患者T T淋巴細(xì)胞凋亡、存在免疫紊亂淋巴細(xì)胞凋亡、存在免疫紊亂18存活與死亡存活與死亡SepticSeptic中中T T淋巴細(xì)胞亞群的變化淋巴細(xì)胞亞群的變化一項(xiàng)對(duì)院內(nèi)感染的老年膿毒癥患者的前瞻性對(duì)照研究一項(xiàng)對(duì)院內(nèi)感染的老年膿毒癥患者的前瞻性對(duì)照研究19Injury, Int. J. Care Injured (2007) 38, 13461357嚴(yán)重多發(fā)傷患者免疫細(xì)胞的變化特點(diǎn)嚴(yán)重多發(fā)傷患者免疫細(xì)胞的變化特點(diǎn)CD4/CD8降低降低MHLA-DR降低降低T細(xì)胞及單核細(xì)胞凋亡增加細(xì)胞及單核細(xì)胞凋亡增加20燒傷患者早期外周血淋巴細(xì)胞亞群的變化特點(diǎn)燒傷患者早期外周血淋巴細(xì)胞亞群的變化

13、特點(diǎn)n燒傷患者白細(xì)胞低于正常組燒傷患者白細(xì)胞低于正常組n早期早期CD3CD3、CD4CD4、CD8CD8細(xì)胞計(jì)數(shù)細(xì)胞計(jì)數(shù) 均明顯下降。均明顯下降。nHLA-DRHLA-DR表達(dá)降低。表達(dá)降低。nCD4/CD8CD4/CD8比值下降。比值下降。21CD4T細(xì)胞亞群新分類：細(xì)胞亞群新分類：Th1 、Th2 、Treg 、Th17我們的研究我們的研究22抗炎細(xì)胞抗炎細(xì)胞TregTreg及其分泌的抗炎介質(zhì)及其分泌的抗炎介質(zhì)IL-10IL-10；促炎細(xì)胞；促炎細(xì)胞Th17Th17及分泌的促炎介質(zhì)及分泌的促炎介質(zhì)IL-17IL-17、IL-6IL-6在人體的炎性免疫穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮重要作用。在人體的炎性免疫穩(wěn)態(tài)

14、中發(fā)揮重要作用。2323中國呼吸與危重監(jiān)護(hù)雜志中國呼吸與危重監(jiān)護(hù)雜志, 2010, 09(04): 416-418.結(jié)論一：膿毒癥患者中結(jié)論一：膿毒癥患者中TregTreg明顯升高，表明抗炎反應(yīng)的增強(qiáng)明顯升高，表明抗炎反應(yīng)的增強(qiáng)2424 結(jié)論二：在膿毒癥患者中結(jié)論二：在膿毒癥患者中Th17表達(dá)明顯升高表達(dá)明顯升高吳鐵軍吳鐵軍,亢翠翠亢翠翠, 中華急診醫(yī)學(xué)雜志中華急診醫(yī)學(xué)雜志, 2012, 21(04): 378-380.膿膿毒毒癥癥組組對(duì)對(duì)照照組組膿毒癥患者中膿毒癥患者中Th17Th17表達(dá)明顯升高，提示促炎反應(yīng)的增強(qiáng)。表達(dá)明顯升高，提示促炎反應(yīng)的增強(qiáng)。2525重癥膿毒癥患者淋巴細(xì)胞增殖能力低

15、下、凋亡重癥膿毒癥患者淋巴細(xì)胞增殖能力低下、凋亡淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞Ag-NoR在健康組中的表達(dá)在健康組中的表達(dá) 淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞Ag-NoR在在Sepsis組中的表達(dá)組中的表達(dá)吳鐵軍，張麗娜吳鐵軍，張麗娜 中國呼吸與危重監(jiān)護(hù)雜志中國呼吸與危重監(jiān)護(hù)雜志, 2010, 09(04): 416-418.膿毒癥組膿毒癥組對(duì)照組對(duì)照組26重癥膿毒癥患者存在免疫麻痹重癥膿毒癥患者存在免疫麻痹中國急救醫(yī)學(xué)雜志中國急救醫(yī)學(xué)雜志, 2011, 31(9): 836-838.CD14+單核細(xì)胞人類白細(xì)胞抗原單核細(xì)胞人類白細(xì)胞抗原-DR(HLA-DR) 表達(dá)情況表達(dá)情況對(duì)對(duì)照照組組膿膿毒毒癥癥組組272728T T淋巴細(xì)胞亞群的研究越來越多淋巴細(xì)胞亞群的研究越來越多某種某種T T細(xì)胞亞群過高或過低，都提示存在免疫功能紊亂，主要用于了解惡性腫瘤、免疫缺細(xì)胞亞群過高或過低，都提示存在免疫功能紊亂，主要用于了解惡性腫瘤、免疫缺陷、重癥病毒感染、自身免疫病等患者機(jī)體的免疫功能是處于什么狀態(tài)。陷、重癥病毒感染、自身