菊花的組織培養(yǎng) 4193

1、課題課題1 1 菊花的組織培養(yǎng)菊花的組織培養(yǎng)組織培養(yǎng)組織培養(yǎng)是指在是指在人工培養(yǎng)基人工培養(yǎng)基上，上，離體培養(yǎng)離體培養(yǎng)植物的器官、組織、細(xì)胞植物的器官、組織、細(xì)胞和原生質(zhì)體，并使其生長(zhǎng)、增殖、分化以及再生植株的技術(shù)。和原生質(zhì)體，并使其生長(zhǎng)、增殖、分化以及再生植株的技術(shù)。 一、基礎(chǔ)知識(shí)一、基礎(chǔ)知識(shí)1 1、植物的組織培養(yǎng)、植物的組織培養(yǎng)（1 1）細(xì)胞的分化）細(xì)胞的分化概念：概念： 在在個(gè)體發(fā)育個(gè)體發(fā)育中，中，相同細(xì)胞相同細(xì)胞的后代在形態(tài)、的后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生理功能上發(fā)生結(jié)構(gòu)、生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異穩(wěn)定性差異的過(guò)的過(guò)程程 . .過(guò)程：過(guò)程：如：受精卵增殖、生長(zhǎng)、分化形成組如：受精卵增殖、生長(zhǎng)、分化

2、形成組織、器官、系統(tǒng)織、器官、系統(tǒng).特點(diǎn)：特點(diǎn)：B.B.穩(wěn)定性：穩(wěn)定性：C.C.全能性：全能性：A.A.持久性：持久性：是一種持久性的變化，它發(fā)生在生物體的是一種持久性的變化，它發(fā)生在生物體的整個(gè)生命過(guò)程中整個(gè)生命過(guò)程中, ,在在胚胎期胚胎期達(dá)到最大限度達(dá)到最大限度. .細(xì)胞分化是穩(wěn)定的，一般是不可逆轉(zhuǎn)的細(xì)胞分化是穩(wěn)定的，一般是不可逆轉(zhuǎn)的. .已分化的細(xì)胞，仍具有發(fā)育的潛能已分化的細(xì)胞，仍具有發(fā)育的潛能. .原因：原因：基因在特定的時(shí)間和空間條件下的選基因在特定的時(shí)間和空間條件下的選擇性表達(dá)的結(jié)果擇性表達(dá)的結(jié)果. .結(jié)果：結(jié)果： 形成不同的細(xì)胞和組織形成不同的細(xì)胞和組織（2 2）細(xì)胞的全能性）

3、細(xì)胞的全能性定義：定義： 生物體的細(xì)胞具有使后代細(xì)胞形成完整生物體的細(xì)胞具有使后代細(xì)胞形成完整個(gè)體的潛能的特性個(gè)體的潛能的特性. .原理：原理： 生物體的每一個(gè)細(xì)胞都包含有該物種所生物體的每一個(gè)細(xì)胞都包含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)，都有發(fā)育成為完特有的全套遺傳物質(zhì)，都有發(fā)育成為完整個(gè)體所必需的全部基因整個(gè)體所必需的全部基因. .高度特化的高度特化的動(dòng)物動(dòng)物細(xì)胞，從整個(gè)細(xì)胞來(lái)說(shuō)，全能細(xì)胞，從整個(gè)細(xì)胞來(lái)說(shuō)，全能性受到限制。但它的細(xì)胞核仍然保持著全能性，性受到限制。但它的細(xì)胞核仍然保持著全能性，這是因?yàn)榧?xì)胞核內(nèi)含有該物種遺傳性所需要的這是因?yàn)榧?xì)胞核內(nèi)含有該物種遺傳性所需要的遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì). .已

4、分化的已分化的植物植物細(xì)胞，仍具有全能性細(xì)胞，仍具有全能性. .實(shí)例實(shí)例受精卵受精卵 生殖細(xì)胞生殖細(xì)胞 體細(xì)胞體細(xì)胞全能性的比較全能性的比較: :（3 3）植物組織培養(yǎng)）植物組織培養(yǎng)細(xì)胞離體細(xì)胞離體必要條件：必要條件：一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、激素和其他一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、激素和其他外界條件外界條件原理原理: : 細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性A.A.外植體：外植體：從從活植物體活植物體上切下進(jìn)行培養(yǎng)的那上切下進(jìn)行培養(yǎng)的那部分細(xì)胞、組織或器官部分細(xì)胞、組織或器官. .相關(guān)概念相關(guān)概念: :B.B.脫分化：脫分化：由由高度分化高度分化的植物器官、組織或細(xì)的植物器官、組織或細(xì)胞產(chǎn)生胞產(chǎn)生愈傷組織愈傷組織的過(guò)程，又稱去

5、分化。的過(guò)程，又稱去分化。C.C.再分化：再分化：脫分化產(chǎn)生的愈傷組織在培養(yǎng)過(guò)程中脫分化產(chǎn)生的愈傷組織在培養(yǎng)過(guò)程中重新分化重新分化根或芽根或芽等器官的過(guò)程等器官的過(guò)程D.D.愈傷組織愈傷組織: :細(xì)胞排列疏松而無(wú)規(guī)則細(xì)胞排列疏松而無(wú)規(guī)則, ,是是高度液高度液泡化泡化的、成無(wú)定形狀態(tài)的的、成無(wú)定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞薄壁細(xì)胞. .人參的愈傷組織人參的愈傷組織菠蘿的愈傷組織菠蘿的愈傷組織2 2、影響植物組織培養(yǎng)的因素、影響植物組織培養(yǎng)的因素（1 1）植物材料的選擇）植物材料的選擇煙草和胡蘿卜的組織培養(yǎng)較為容易煙草和胡蘿卜的組織培養(yǎng)較為容易枸杞愈傷組織的芽誘導(dǎo)比較難枸杞愈傷組織的芽誘導(dǎo)比較難同一植物材料的

6、年齡、保存時(shí)間的長(zhǎng)短會(huì)同一植物材料的年齡、保存時(shí)間的長(zhǎng)短會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果菊花的組織培養(yǎng)一般選擇未開(kāi)花植株的莖菊花的組織培養(yǎng)一般選擇未開(kāi)花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝上部新萌生的側(cè)枝（2 2）離體的植物組織和細(xì)胞對(duì)營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境等條）離體的植物組織和細(xì)胞對(duì)營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境等條件的要求相對(duì)特殊，需配置不同的培養(yǎng)基件的要求相對(duì)特殊，需配置不同的培養(yǎng)基MSMS培養(yǎng)基主要成分包括：培養(yǎng)基主要成分包括：A A、大量元素大量元素: N: N、P P、 S S 、 K K、CaCa、MgMg等等B B、微量元素微量元素:B:B、MnMn、CuCu、ZnZn、FeFe、MoMo、I I、 CoCo等等C C、有機(jī)物

7、有機(jī)物、植物激素植物激素MS固體培養(yǎng)基成分及比例固體培養(yǎng)基成分及比例討論：你能說(shuō)出各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的作用嗎？同專題討論：你能說(shuō)出各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的作用嗎？同專題2 2中微生物培養(yǎng)基的配方相比，中微生物培養(yǎng)基的配方相比，MSMS培養(yǎng)基的配方培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同？有哪些明顯的不同？答：答：微量元素和大量元素提供微量元素和大量元素提供植物細(xì)胞生活所必植物細(xì)胞生活所必需的無(wú)機(jī)鹽；需的無(wú)機(jī)鹽；蔗糖蔗糖提供碳源，同時(shí)能夠維持培養(yǎng)提供碳源，同時(shí)能夠維持培養(yǎng)基的滲透壓；基的滲透壓；甘氨酸、維生素甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了等物質(zhì)主要是為了滿足離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑受到一定影響滿足離體植物細(xì)胞在正常代謝途

8、徑受到一定影響后所產(chǎn)生的特殊營(yíng)養(yǎng)需求。后所產(chǎn)生的特殊營(yíng)養(yǎng)需求。微生物培養(yǎng)基微生物培養(yǎng)基以以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主。與微生物的培養(yǎng)為主。與微生物的培養(yǎng)不同，不同，MSMS培養(yǎng)基培養(yǎng)基則需提供則需提供大量無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)大量無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)，無(wú)機(jī)鹽，無(wú)機(jī)鹽混合物包括植物生長(zhǎng)必須的大量元素和微量元素混合物包括植物生長(zhǎng)必須的大量元素和微量元素兩大類。兩大類。 常用的植物激素：生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素和赤霉常用的植物激素：生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素和赤霉素素生長(zhǎng)素類：生長(zhǎng)素類：2 2，4 4二氯苯氧乙酸（二氯苯氧乙酸（2 2，4 4D D）、吲）、吲哚乙酸（哚乙酸（IAAIAA）、萘乙酸（）、萘乙酸（NAANAA）、吲）、吲哚丁酸（哚

9、丁酸（IBAIBA）細(xì)胞分裂素類：細(xì)胞分裂素類：激動(dòng)素（激動(dòng)素（KTKT）、）、6 6芐基嘌呤芐基嘌呤（ 6 6BABA）、玉米素（）、玉米素（ZTZT）赤霉素類：赤霉素類： 赤霉酸（赤霉酸（GA3GA3）（3 3）植物激素的影響）植物激素的影響生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素作用生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素作用植物中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、植物中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。在生長(zhǎng)素存在脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。在生長(zhǎng)素存在的情況下，細(xì)胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強(qiáng)的趨勢(shì)的情況下，細(xì)胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強(qiáng)的趨勢(shì)使用順序使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果先使用生長(zhǎng)素，后使用先使用生長(zhǎng)素，后使

10、用細(xì)胞分裂素細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂，但不有利于細(xì)胞分裂，但不利分化利分化先使用細(xì)胞分裂素后使先使用細(xì)胞分裂素后使用生長(zhǎng)素用生長(zhǎng)素細(xì)胞既分裂也分化細(xì)胞既分裂也分化同時(shí)使用同時(shí)使用分化頻率高分化頻率高生長(zhǎng)素生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素：細(xì)胞分裂素： 有利于有利于根根的分化的分化生長(zhǎng)素生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素：細(xì)胞分裂素： 有利于有利于芽芽的分化，抑的分化，抑制根的分化制根的分化生長(zhǎng)素生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素：細(xì)胞分裂素：促進(jìn)促進(jìn)愈傷組織愈傷組織生長(zhǎng)生長(zhǎng)生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素同時(shí)使用，用量的比例對(duì)生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素同時(shí)使用，用量的比例對(duì)植物細(xì)胞發(fā)育方向的影響植物細(xì)胞發(fā)育方向的影響（4 4）pHpH、溫度、光照、溫度、光照pHpH

11、控制在控制在5.85.8左右，溫度控制在左右，溫度控制在18182222。C C, ,每日每日用日光燈照射用日光燈照射12h.12h.3 3、植物組織培養(yǎng)過(guò)程、植物組織培養(yǎng)過(guò)程: :離離體體組組織織或或細(xì)細(xì)胞胞植植物物體體脫分化脫分化細(xì)胞分裂素細(xì)胞分裂素生長(zhǎng)素生長(zhǎng)素愈愈傷傷組組織織芽芽根根細(xì)胞分裂素細(xì)胞分裂素 生長(zhǎng)素生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素細(xì)胞分裂素 生長(zhǎng)素生長(zhǎng)素再分化再分化植物細(xì)胞培養(yǎng)植物細(xì)胞培養(yǎng)不需要光不需要光? ?需要光需要光植物組織培養(yǎng)的過(guò)程植物組織培養(yǎng)的過(guò)程離體的植物組織或細(xì)胞愈傷組織根和芽完整的植物體脫分化再分化二、實(shí)驗(yàn)操作二、實(shí)驗(yàn)操作（一）制備（一）制備MSMS固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基MSM

12、S培養(yǎng)基包括培養(yǎng)基包括2020多種營(yíng)養(yǎng)成分，實(shí)驗(yàn)室一般多種營(yíng)養(yǎng)成分，實(shí)驗(yàn)室一般使用使用4 4。C C保存配制好的培養(yǎng)基母液來(lái)制備保存配制好的培養(yǎng)基母液來(lái)制備. .1 1、配置各種母液、配置各種母液無(wú)機(jī)物中大量元素濃縮無(wú)機(jī)物中大量元素濃縮1010倍，微量元素濃倍，微量元素濃縮縮100100倍，常溫保存倍，常溫保存. .激素類、維生素類以及用量較小的有機(jī)物一激素類、維生素類以及用量較小的有機(jī)物一般可按般可按1mg/ml1mg/ml的質(zhì)量濃度單獨(dú)配制成母液的質(zhì)量濃度單獨(dú)配制成母液. .用母液配制培養(yǎng)基時(shí)，需要根據(jù)各種母液用母液配制培養(yǎng)基時(shí)，需要根據(jù)各種母液的濃縮倍數(shù)，計(jì)算用量的濃縮倍數(shù)，計(jì)算用量.

13、.2 2、配置培養(yǎng)基、配置培養(yǎng)基分裝到錐形瓶中，每瓶分裝分裝到錐形瓶中，每瓶分裝50ml50ml或或100ml.100ml. 配制培養(yǎng)液配制培養(yǎng)液 調(diào)調(diào)PHPH培養(yǎng)基的分裝培養(yǎng)基的分裝 由于菊花的莖段的組織培養(yǎng)比較容易，因此由于菊花的莖段的組織培養(yǎng)比較容易，因此不必添加植物激素不必添加植物激素. .3 3、滅菌、滅菌分裝好的培養(yǎng)基連同其他器械一起進(jìn)行高壓蒸分裝好的培養(yǎng)基連同其他器械一起進(jìn)行高壓蒸汽滅菌汽滅菌. .1 1、選材選材：菊花莖段，取生長(zhǎng)旺盛的嫩枝：菊花莖段，取生長(zhǎng)旺盛的嫩枝. .（二）外植體消毒（二）外植體消毒2 2、消毒消毒流水沖洗流水沖洗菊花莖段用流水沖洗后可少許洗衣粉，用軟刷菊

14、花莖段用流水沖洗后可少許洗衣粉，用軟刷輕輕刷洗，刷洗后在流水下沖洗輕輕刷洗，刷洗后在流水下沖洗20min20min左右左右. . 酒精處理酒精處理用無(wú)菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放入體用無(wú)菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放入體積分?jǐn)?shù)為積分?jǐn)?shù)為7070的酒精中搖動(dòng)的酒精中搖動(dòng)2 23 3次次，持續(xù)，持續(xù)6 67s7s，立即將外植體取出，在無(wú)菌水中清洗，立即將外植體取出，在無(wú)菌水中清洗. . 消毒液處理消毒液處理取出后用無(wú)菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放取出后用無(wú)菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.10.1的的氯化汞氯化汞溶液中溶液中1 12min2min，取，取出后在無(wú)菌

15、水中至少清洗出后在無(wú)菌水中至少清洗3 3次，漂凈次，漂凈消毒液消毒液. .（三）接種（三）接種污染的主要來(lái)源是空氣中的細(xì)菌和孢子，接種污染的主要來(lái)源是空氣中的細(xì)菌和孢子，接種室消毒是至關(guān)重要的。用室消毒是至關(guān)重要的。用7070的酒精噴霧的酒精噴霧使空使空氣消毒，氣消毒， 酒精或新潔爾滅酒精或新潔爾滅搽洗工作臺(tái)并用搽洗工作臺(tái)并用紫外紫外線線照射照射2020分鐘分鐘1 1、接種室消毒、接種室消毒2 2、無(wú)菌操作要求、無(wú)菌操作要求操作要在酒精燈火焰旁完成，每次使用器械后，操作要在酒精燈火焰旁完成，每次使用器械后，都需要用火焰灼燒滅菌，接種后立即蓋好瓶蓋。都需要用火焰灼燒滅菌，接種后立即蓋好瓶蓋。3

16、3、材料的切取和接種、材料的切取和接種4 4、接種注意事項(xiàng)、接種注意事項(xiàng)每接種一塊外植體前，鑷子需放入體積分每接種一塊外植體前，鑷子需放入體積分?jǐn)?shù)為數(shù)為7575的酒精溶液中消毒一次，然后在酒的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精燈火焰上燒一遍，冷卻后再接種精燈火焰上燒一遍，冷卻后再接種. .外植體在培養(yǎng)基中要分布均勻，放置外植體外植體在培養(yǎng)基中要分布均勻，放置外植體數(shù)量根據(jù)錐形瓶的大小確定，一般胡蘿卜數(shù)量根據(jù)錐形瓶的大小確定，一般胡蘿卜3 34 4塊，菊的莖或葉塊，菊的莖或葉6 68 8塊，也不要太少，以充分塊，也不要太少，以充分利用培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分和光照條件利用培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分和光照條件. .

17、插入時(shí)應(yīng)注意方向，插入時(shí)應(yīng)注意方向，不要倒插不要倒插。莖段、莖尖莖段、莖尖基部基部插入培養(yǎng)基利于吸收水分和養(yǎng)分插入培養(yǎng)基利于吸收水分和養(yǎng)分. .思考：你打算做幾組重復(fù)？你打算設(shè)置對(duì)照實(shí)思考：你打算做幾組重復(fù)？你打算設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)嗎？驗(yàn)嗎？答：每種材料或配方至少要做一組以上的重復(fù)。答：每種材料或配方至少要做一組以上的重復(fù)。設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)可以取用一個(gè)經(jīng)過(guò)滅菌的裝有培養(yǎng)設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)可以取用一個(gè)經(jīng)過(guò)滅菌的裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，與接種操作后的錐形瓶一同培養(yǎng)，基的錐形瓶，與接種操作后的錐形瓶一同培養(yǎng)，用以說(shuō)明培養(yǎng)基制作合格，沒(méi)有被雜菌污染。用以說(shuō)明培養(yǎng)基制作合格，沒(méi)有被雜菌污染。（四）培養(yǎng)（四）培養(yǎng)1 1、愈傷

18、組織的培養(yǎng)、愈傷組織的培養(yǎng)從接種外植體到出現(xiàn)愈傷組織需經(jīng)過(guò)從接種外植體到出現(xiàn)愈傷組織需經(jīng)過(guò)2 2周周時(shí)間。時(shí)間。2 2周之內(nèi)可以看到外植體上逐漸長(zhǎng)出乳白色或黃白周之內(nèi)可以看到外植體上逐漸長(zhǎng)出乳白色或黃白色的瘤狀愈傷組織。色的瘤狀愈傷組織。首次培養(yǎng)愈傷組織時(shí)，恒溫首次培養(yǎng)愈傷組織時(shí)，恒溫箱的門應(yīng)該關(guān)閉不必見(jiàn)光，因?yàn)樵跓o(wú)光條件下愈箱的門應(yīng)該關(guān)閉不必見(jiàn)光，因?yàn)樵跓o(wú)光條件下愈傷組織長(zhǎng)的更快。傷組織長(zhǎng)的更快。2 2周后，培養(yǎng)基成分接近耗盡，周后，培養(yǎng)基成分接近耗盡，必須更換培養(yǎng)基，進(jìn)行繼代培養(yǎng)必須更換培養(yǎng)基，進(jìn)行繼代培養(yǎng). .繼代培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)愈傷組織的相同，繼代培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)愈傷組織的

19、相同，在嚴(yán)格的無(wú)菌條件下，將愈傷組織連同原來(lái)的外在嚴(yán)格的無(wú)菌條件下，將愈傷組織連同原來(lái)的外植體一起移到新培養(yǎng)基上。愈傷組織的繼代培養(yǎng)植體一起移到新培養(yǎng)基上。愈傷組織的繼代培養(yǎng)一代為一代為20d20d。如果延長(zhǎng)時(shí)間，培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。如果延長(zhǎng)時(shí)間，培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)減少，外植體會(huì)分泌有毒物質(zhì)，造成自身中毒。減少，外植體會(huì)分泌有毒物質(zhì)，造成自身中毒。如果愈傷組織長(zhǎng)到直徑為如果愈傷組織長(zhǎng)到直徑為1 11.5cm1.5cm時(shí)，就可以進(jìn)時(shí)，就可以進(jìn)行行試管苗試管苗培養(yǎng)，否則還需進(jìn)行第二代繼代培養(yǎng)培養(yǎng)，否則還需進(jìn)行第二代繼代培養(yǎng). .2 2、愈傷組織的繼代培養(yǎng)、愈傷組織的繼代培養(yǎng)在愈傷組織繼代培養(yǎng)期間，將恒

20、溫箱的門打開(kāi)，在愈傷組織繼代培養(yǎng)期間，將恒溫箱的門打開(kāi)，讓愈傷組織見(jiàn)光，愈傷組織見(jiàn)光后顏色可以轉(zhuǎn)為讓愈傷組織見(jiàn)光，愈傷組織見(jiàn)光后顏色可以轉(zhuǎn)為綠色綠色. .3 3、試管苗的培養(yǎng)、試管苗的培養(yǎng)當(dāng)愈傷組織長(zhǎng)到一定大小后，可以更換培養(yǎng)基，當(dāng)愈傷組織長(zhǎng)到一定大小后，可以更換培養(yǎng)基，進(jìn)行試管苗的進(jìn)行試管苗的見(jiàn)光培養(yǎng)見(jiàn)光培養(yǎng). .（五）移栽（五）移栽移栽生根的菊花試管苗之前，應(yīng)先打開(kāi)培養(yǎng)移栽生根的菊花試管苗之前，應(yīng)先打開(kāi)培養(yǎng)瓶的封口膜，讓試管苗在培養(yǎng)間生長(zhǎng)幾日瓶的封口膜，讓試管苗在培養(yǎng)間生長(zhǎng)幾日. .1 1、打開(kāi)封口膜、打開(kāi)封口膜2 2、清洗轉(zhuǎn)移、清洗轉(zhuǎn)移用流水清洗根部的培養(yǎng)基，用流水清洗根部的培養(yǎng)基，將幼

21、苗移植到消過(guò)將幼苗移植到消過(guò)毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境下毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境下生活一段時(shí)間生活一段時(shí)間. .（六）栽培（六）栽培3 3、移栽、移栽珍珠巖：珍珠巖：固體基質(zhì)型，含水量高、蓄水性強(qiáng)、固體基質(zhì)型，含水量高、蓄水性強(qiáng)、透性好，適合栽培透性好，適合栽培. .幼苗長(zhǎng)壯后，移栽到土壤中幼苗長(zhǎng)壯后，移栽到土壤中. .幼苗移栽后，每天觀察并記錄幼苗的生長(zhǎng)情幼苗移栽后，每天觀察并記錄幼苗的生長(zhǎng)情況，適時(shí)澆水、施肥，直至開(kāi)花況，適時(shí)澆水、施肥，直至開(kāi)花. .污染的預(yù)防措施污染的預(yù)防措施 （一）防止外植體帶菌 （二）保證培養(yǎng)基及接種器具徹底滅菌 （三）操作人員嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程 （四）保證接種與培養(yǎng)環(huán)

22、境清潔1、培養(yǎng)基的滅菌（高壓蒸汽滅菌）、培養(yǎng)基的滅菌（高壓蒸汽滅菌）2、外植體的消毒（酒精、氯化汞）、外植體的消毒（酒精、氯化汞）3、接種的無(wú)菌操作（酒精、酒精燈、接種的無(wú)菌操作（酒精、酒精燈灼燒）灼燒）4、無(wú)菌箱中的培養(yǎng)；、無(wú)菌箱中的培養(yǎng)；5、移栽到消過(guò)毒的環(huán)境中生存一段時(shí)間。、移栽到消過(guò)毒的環(huán)境中生存一段時(shí)間。在整個(gè)操作過(guò)程中，是如何來(lái)實(shí)現(xiàn)在整個(gè)操作過(guò)程中，是如何來(lái)實(shí)現(xiàn)無(wú)菌無(wú)菌環(huán)境的？環(huán)境的？(1)(1)、培育無(wú)病毒植株、培育無(wú)病毒植株(2)(2)、 培養(yǎng)紫草愈傷組織培養(yǎng)紫草愈傷組織, ,提取紫草素（治療提取紫草素（治療燙傷和割傷的藥物以及染料和化妝品的原料）燙傷和割傷的藥物以及染料和化妝

23、品的原料）(4)(4)、基因工程中亦需用到植物組織培養(yǎng)的方法、基因工程中亦需用到植物組織培養(yǎng)的方法4 4、植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用：、植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用： (3)(3)、誘導(dǎo)離體的植物組織形成具有生根發(fā)芽能誘導(dǎo)離體的植物組織形成具有生根發(fā)芽能力的胚狀結(jié)構(gòu)，包裹上人造種皮，制成人工種力的胚狀結(jié)構(gòu)，包裹上人造種皮，制成人工種子，可以解決子，可以解決有些作物品種繁殖能力差，結(jié)子有些作物品種繁殖能力差，結(jié)子困難或發(fā)芽率低等問(wèn)題困難或發(fā)芽率低等問(wèn)題. .人工種子人工種子目前研制的人工種子的結(jié)構(gòu):體細(xì)胞胚、人工種皮、人工胚乳 同常規(guī)的無(wú)性繁殖方法相比，組織培養(yǎng)快速繁殖法主要具有以下優(yōu)點(diǎn)：（1 1）快速。）快速。采用常規(guī)的方法如分株法，一棵花卉一年一般只能生產(chǎn)幾株或幾十株，但用組織培養(yǎng)的方法則每年可以繁殖出幾萬(wàn)甚至數(shù)百萬(wàn)的小植株。（2 2）周年生產(chǎn)。）周年生產(chǎn)。花卉組織培養(yǎng)快速繁殖是在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行，因條件可控，所以不受季節(jié)限制，可以全年進(jìn)行連續(xù)生產(chǎn)。而常規(guī)的無(wú)性繁殖則受季節(jié)限制，只能在花卉生長(zhǎng)季節(jié)進(jìn)行繁殖。（3 3）經(jīng)濟(jì)效益高。）經(jīng)濟(jì)效益高。花卉組織培養(yǎng)快速繁殖所需要的空間小，在一個(gè)200平方米的培養(yǎng)室內(nèi)一年可生產(chǎn)試管苗上百萬(wàn)株。如按每株1元計(jì)算，每年產(chǎn)值上百萬(wàn)元。（4 4）以組織培養(yǎng)繁殖的種苗與母株有著相同的遺傳基因。