利福霉素SV響應面分析法調節(jié)因子有機酸發(fā)酵罐碩士論文

1、利福霉素SV發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化和代謝初步分析發(fā)酵工程， 2011， 碩士【摘要】 利福霉素SV主要由地中海擬無枝酸菌(Amycolatoposis mediterranei)產生,廣泛應用于結核病、麻風病和與艾滋病有關的分枝菌感染的治療。本文根據(jù)已知利福霉素SV生物合成的途徑和特點,對利福霉素SV發(fā)酵和調控補料培養(yǎng)基進行了優(yōu)化,探討了調控因子對生物合成的代謝調節(jié)作用,并在10 L罐水平進行了驗證。研究如下:1)運用響應面分析法優(yōu)化了發(fā)酵培養(yǎng)基中有機氮源。得出魚粉、豆餅粉和蛋白胨三種有機氮源的最佳配比分別為0.50 g/100 mL、0.69 g/100 mL和0.74 g/100 mL,其他各成分

2、不變。在此條件下,利福霉素SV的發(fā)酵單位可達5072 U/ mL,比優(yōu)化前(4610 U/mL)前提高了11.0%。2)研究了在搖瓶發(fā)酵過程中添加豆油和丙氨酸對利福霉素SV生物合成的影響。72 h分別向培養(yǎng)基中添加3 mL/L豆油和0.8 g/L丙氨酸,發(fā)酵液中利福霉素SV的效價分別比對照提高5.3%和6.9%。通過響應面分析法優(yōu)化考察了豆油和丙氨酸對利福霉素SV合成的交互作用,確定在72 h添加0.89 g/L的丙氨酸和2.57 mL/L豆油時,搖瓶發(fā)酵單位是5179 U. 更多還原【Abstract】 Rifamycin SV is produced mainly by Amyc

3、olatoposis mediterranei and widely used in tuberculosis, leprosy and aids-related M.tuberculosis infection treatment. This paper focused on Optimization of rifamycin SV fermentation and control filling material culture and discussion of effect of regulatory factors on rifamycin SV biosynthesis accor

4、ding to ways and traits of rifamycin SV biosynthesis. At lst ,the rezult was verified in10 Lfaermenter level. The results were as follows:1) Organic nitrogen sou. 更多還原 【關鍵詞】 利福霉素SV； 響應面分析法； 調節(jié)因子； 有機酸； 發(fā)酵罐； 【Key words】 Rifamycin SV； Response surface analys； Regulatory factor； Organic acid； ferme

5、ntater； 摘要 4-5 Abstract 5 第1章 引言 9-12 1.1 選題背景 9-10 1.2 主要研究內容 10-12 第2章 文獻綜述 12-24 2.1 利福霉素國內外研究進展概述 12-13 2.2 生產菌種 13-15 2.2.1 利福霉素的產生菌 13 2.2.2 菌種選育 13-15 2.2.3 菌種保藏 15 2.3 利福霉素的生物合成 15-17 2.3.1 利福霉素發(fā)色團合成機理 15-17 2.3.2 利福霉素安莎鏈的合成機理 17 2.3.3 利福霉素的合成 17 2.4 利福霉素SV 的代謝調控 17-20 2.4.1 氨同化 17-18 2.4.2

6、硝酸鹽的影響 18 2.4.3 丙酸鹽的調節(jié) 18-19 2.4.4 甘油的調節(jié) 19 2.4.5 莽草酸途徑的調節(jié) 19-20 2.4.6 磷酸鹽和巴比妥鈉的調節(jié) 20 2.5 利福霉素的生物轉化和發(fā)酵和發(fā)酵類型 20-21 2.6 抑菌機制 21-24 第3章 基礎培養(yǎng)基有機氮源優(yōu)化 24-30 3.1 材料和方法 24-25 3.1.1 菌種 24 3.1.2 培養(yǎng)基 24 3.1.2.1 種子培養(yǎng)基 24 3.1.2.2 發(fā)酵培養(yǎng)基 24 3.1.3 培養(yǎng)方法 24-25 3.1.4 測定與分析方法 25 3.1.5 主要儀器設備 25 3.2 結果與分析 25-29 3.3 小結 2

7、9-30 第4章 豆油和丙氨酸對利福霉素SV 生物合成的影響 30-40 4.1 材料與方法 30-32 4.1.1 菌種 30 4.1.2 培養(yǎng)基 30-31 4.1.2.1 種子培養(yǎng)基 30 4.1.2.2 發(fā)酵培養(yǎng)基 30-31 4.1.3 培養(yǎng)方法 31 4.1.4 測定與分析方法 31 4.1.5 主要試劑和儀器設備 31-32 4.2 結果與分析 32-39 4.2.1 添加豆油對利福霉素SV 發(fā)酵的影響 32-33 4.2.2 添加丙氨酸對利福霉素SV 發(fā)酵的影響 33 4.2.3 豆油和丙氨酸同時添加對利福霉素發(fā)酵的影響 33-36 4.2.4 添加豆油和丙氨酸后發(fā)酵液中的有機酸分析 36-39 4.3 小結 39-40 第5章 10 L 發(fā)酵罐小試 40-46 5.1 材料與方法 40-41 5.1.1 菌種 40 5.1.2 培養(yǎng)基 40 5.1.2.1 種子培養(yǎng)基 40 5.1.2.2 發(fā)酵培養(yǎng)基 40 5.1.3 培養(yǎng)方法 40-41 5.1.4 測定與分析方法 41 5.1.5 主要儀器設備 41 5.2 結果與分析 41-44 5.2.1 溶氧變化情況 41-42 5.2.2 pH