微生物技能考核標(biāo)準(zhǔn)

1、的使用與維護(hù)班級：姓名：學(xué)號:一、實操部分（80分）序號內(nèi)容評分標(biāo)準(zhǔn)分值得分1準(zhǔn)備（滿分10分）材料準(zhǔn)備充分，中途不得取用非操作臺材料5顯微鏡取用姿勢準(zhǔn)確，安放位置合理52低倍鏡使用（滿分25分）插上電源，打開光源，用拇指和中指移動旋轉(zhuǎn)器（切忌手持物鏡移動5使低倍鏡對準(zhǔn)鏡臺的通光孔，放置載玻片，標(biāo)本中間對準(zhǔn)通光孔，并用壓片夾夾好5調(diào)節(jié)焦距，從一側(cè)看著向上調(diào)節(jié)載物臺，粗準(zhǔn)焦螺旋調(diào)節(jié)物鏡與載物臺至最小距離處5雙眼視目鏡，調(diào)節(jié)粗準(zhǔn)焦螺旋至有模糊的像，然后調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋至清晰的像，二者不得來回交替使用，且光線強(qiáng)弱適宜（2分）。103高倍鏡使用（滿分10分）將觀察對象調(diào)至視野中央，轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器至高倍鏡，防

2、止撞到玻片5調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋至清晰的像，光線調(diào)節(jié)至強(qiáng)弱適宜104油鏡的使用（15分）轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，使高倍鏡頭離開通光孔，在需觀察部位的玻片上滴加一滴香柏油，然后慢慢轉(zhuǎn)動油鏡，在轉(zhuǎn)換油鏡時，從側(cè)面水平注視鏡頭與玻片的距離，使鏡頭浸入油中而又不以壓破載玻片為宜。5如果不出現(xiàn)物象或者目標(biāo)不理想要重找，在加油區(qū)之外重找時應(yīng)按：低倍-高倍-油鏡程序。在加油區(qū)內(nèi)重找應(yīng)按：低倍-油鏡程序，不得經(jīng)高倍鏡，以免油沾污鏡頭（3分），至調(diào)出清晰的像。10擦拭目鏡和物鏡上的油污，擦鏡紙、二甲苯、（0.5）擦拭方法均要正確（1）15取下玻片，拔下電源，關(guān)上開關(guān)，載物臺調(diào)至最大距離處，物鏡八字?jǐn)[開，罩上防塵罩，并認(rèn)真填寫使用

3、記錄。55計時不得超過5分鐘，超過者倒扣分，最多扣5分簡單染色評分標(biāo)準(zhǔn)班級：姓名：學(xué)號:序號考核項目評分要素配分評分標(biāo)準(zhǔn)檢驗結(jié)果得分備注1準(zhǔn)備（10分）著裝整潔；實驗用物齊全適用，放置合理10少選多選1件扣5分2制片（40分）無菌操作取菌20無菌操作正確規(guī)范，錯1處扣5分，涂片區(qū)域圓形，直徑1cm左右3干燥固定5不可過熱、固定操作的規(guī)范性，錯1處扣2分4染色、水洗15染液滴加的量；染色時間，水洗操作的規(guī)范性，錯1處扣5分5鏡檢（35分）顯微鏡的預(yù)備5顯微鏡的檢查；正確放置打開光源，光路又準(zhǔn)，錯1處扣2分6涂片鏡檢10低倍到高倍，到油鏡，物鏡的轉(zhuǎn)換；物象調(diào)節(jié)，錯1處扣2分7鏡檢結(jié)果15菌體分布均

4、勻，密度合適，明暗合適，對比度合適。錯1處扣3分8顯微鏡的整理5鏡頭的擦拭；物鏡的“八字形”轉(zhuǎn)換；將載物臺降到最低，錯1處扣2分9其他（5分）清理用物，環(huán)境衛(wèi)生5清掃實驗臺及收拾產(chǎn)生垃圾，少1環(huán)節(jié)扣1分10時間（10分）操作時間15要求10分鐘內(nèi)完成，每超過1分鐘，扣5分?？偡种苽錈o菌平板評分標(biāo)準(zhǔn)（時間5分鐘）班級：姓名：學(xué)號:項目考核內(nèi)容分值評分細(xì)則扣分備注得分準(zhǔn)備物品準(zhǔn)備、擺放及8物品擺放合理、酒精擦手正確，材料準(zhǔn)備齊全，得8分（10分）酒精擦拭中途不得取用任何物品，取1次扣4分?jǐn)[放的物品影響操作，扣2分取菌前未用酒精擦拭，扣2分貼標(biāo)簽（培養(yǎng)皿）2貼標(biāo)簽且位置合理，得2分每漏貼一個，扣1分

5、每錯貼一個，扣1分三角瓶操作（15）開塞、瓶口滅菌、持法、蓋塞15三角瓶操作正確，得15分未灼燒，開塞不正確，塞子放置不正確，均扣5分蓋塞前瓶口和塞子不灼燒，均扣5分三角瓶的瓶口開口處位置不對，扣5分以上幾項合計最多扣15分倒平板（40分）加培養(yǎng)基（培養(yǎng)皿持法、加入量、污染皿壁、混勻、）40正確（單手持皿，平端，兩指自如開合皿蓋，另一只手持培養(yǎng)基瓶），平板效果優(yōu)秀，得40分培養(yǎng)基溫度不適宜，皿蓋上方水汽過多，扣5分平板未鋪全或高于培養(yǎng)皿高的2/3,一個扣5分，培養(yǎng)基污染皿壁，一個扣10分三角瓶口接觸平皿，一個扣5分培養(yǎng)基傾斜，一個扣5分培養(yǎng)基有凝塊、不透明，一個扣5分無菌操作（15）酒精燈附近

6、區(qū)操作15在酒精燈無菌區(qū)操作，得15分所有開口處均應(yīng)在酒精燈無菌區(qū)，出無菌區(qū)1次扣5分操作情況（10分）操作熟練程度10熟練，得10分較熟練，得8分一般，得6分不熟練，得0分無菌檢查（10分）培養(yǎng)48h,有無微生物生長10無雜菌生長，且平板無開裂，無干枯部位，得10分培養(yǎng)皿有雜菌，每個扣5分平板開裂，共扣5分平板干枯，共扣5分血球計數(shù)板計數(shù)（時間:30min）班級：姓名：學(xué)號:項目考核內(nèi)容分值考核記錄（以"，"表不）備注得分準(zhǔn)備物品擺放合理、酒精擦手正確，得0.5分(3物品擺放及酒精擦手0.5擺放的物品影響操作，扣0.5分分）取菌前未用酒精擦手，扣0.5分顯微鏡的取用0.5

7、顯微鏡的取用與擺放方式準(zhǔn)確，得0.5分取用與擺放方式不正確，扣0.5分血球計數(shù)板的放置與檢查1正確放置血球計數(shù)板于載物臺上，得1分沒用壓片夾夾住，扣0.5分沒有放在計數(shù)區(qū)內(nèi)，扣0.5分1進(jìn)行檢查或經(jīng)清洗后確定清潔，得1分沒有進(jìn)行檢查扣1分清洗后干燥方法不合理，扣1分加樣（2分）添加酵母菌懸液于血球計數(shù)板上2能夠正確添加酵母菌懸液2分加樣前未搖勻菌懸液扣1分未用濾紙吸除多余菌液扣0.5分蓋好玻片后有氣泡扣1.5分顯微鏡調(diào)節(jié)（3分）調(diào)整顯微鏡找到血球計數(shù)板上計數(shù)網(wǎng)格340倍鏡下找到最左上角的大網(wǎng)格，并將顯微鏡調(diào)清晰，給監(jiān)考老師看，得3分未從低倍到高倍轉(zhuǎn)換，扣0.5分未給監(jiān)考老師看扣2.5分未找到最

8、左上角的大網(wǎng)格扣2分找到最左上角的大網(wǎng)格但不清晰扣1分。計數(shù)（2分）準(zhǔn)確計數(shù)，并寫出原始數(shù)據(jù)2分準(zhǔn)確計數(shù)，并寫出原始數(shù)據(jù)，得2分沒有原始數(shù)據(jù)，扣2分?jǐn)?shù)據(jù)不準(zhǔn)確，扣1分原始數(shù)據(jù)不合理，扣1分計算，報告（6分）計算公式、過程4準(zhǔn)確計算，得出菌懸液濃度，得4分?jǐn)?shù)據(jù)處理過程不正確，扣4分?jǐn)?shù)據(jù)處理結(jié)果不正確，扣4分?jǐn)?shù)據(jù)不合理，扣1分報告結(jié)果規(guī)范、正確2報告清楚、準(zhǔn)確、無涂改，得2分結(jié)果報告不準(zhǔn)確，扣0.5分報告填寫每改1次，扣0.5分清洗（2分）血球計數(shù)板清洗，歸位2血球計數(shù)板清洗，并干燥歸位2分清洗方法不正確，扣1分干燥方法不合理，扣1分未將血球計數(shù)板歸位，扣1分文明操作（2分）實驗后臺面整理，設(shè)備歸

9、位2整理，得2分顯微鏡未整理，扣1分臺面未整理，扣1分血球計數(shù)板損壞，扣2分蓋玻片損壞，扣0.5分完成時間（0分）共用（）分鐘并力臺0提前，不加分不扣分按時，不加分不扣分結(jié)束：超時：每超1分鐘，扣1分（最多扣5分）合計平板劃線分離考核標(biāo)準(zhǔn)班級：姓名：學(xué)號:序號項目內(nèi)容滿分（100分）評分細(xì)則扣分總分1實驗前的準(zhǔn)備準(zhǔn)備全所需的所有實驗材料15分3材料準(zhǔn)備充分，中途取用物品扣3分貼標(biāo)簽4未貼扣4分，貼錯扣2分；信息不完整扣2分酒精棉球擦拭手與工作臺面4分未擦拭扣4分擦手不徹底最多2分擦臺面不徹底最多2分接種針的灼燒是否徹底，拿法是否科學(xué)4分灼燒不徹底，最多扣3分接種環(huán)拿法不對，扣1分未灼燒4分2從

10、試管中取樣接入培養(yǎng)皿中試管中取菌（15分）50分3試管口未灼燒，扣3分2持塞手法不正確，扣2分3接種環(huán)未冷卻，扣3分4塞塞子時未灼燒塞子與管口，扣4分3試管口離開無菌區(qū)，扣3分手法是否標(biāo)準(zhǔn)（5分）1持平板的手法不當(dāng)扣1分4開口過大扣4分分區(qū)接種（30）5有離開5cm酒精燈無菌區(qū)1次扣2分，最多扣5分離開無菌區(qū)10cm以上一次扣5分5劃完1區(qū)未灼燒，扣5分5灼燒完未冷卻，扣5分5單手旋轉(zhuǎn)平板，有明顯的分區(qū)操作10劃破平板，最多扣10分3接種士畢，臺面的處理以及培養(yǎng)等臺面的整理：酒精燈熄滅，各試驗器材歸位（4分）10分1分熄滅方式不對，扣1分3分未歸位，扣3分；未整理，扣2分未帶走垃圾，扣2分。最

11、多扣3分置入培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)，以及最適培養(yǎng)溫度的設(shè)置（4分）4分未倒置，扣2分培養(yǎng)溫度和時間寫在標(biāo)簽上，未注明扣2分完成實驗，酒精棉球擦拭手或者洗手（2分）2分未擦拭手或洗手14結(jié)果檢查分離效果20分10分10個以上單菌落，少1個扣1分分區(qū)效果5分無明顯分區(qū)，只有一個區(qū)，扣5分平板無菌落區(qū)按占的比例扣分污染情況5分有其他雜菌污染，扣5分5用時55分鐘，超過1分鐘扣1分平板涂布分離考核標(biāo)準(zhǔn)（20min）班級：姓名：學(xué)號:項目考核內(nèi)容分值考核記錄（扣分）備注得分準(zhǔn)備（10分）物品擺放及酒精擦手5物品準(zhǔn)備合適，不多不少，得3分物品擺放合理、酒精擦手正確，得2分?jǐn)[放的物品影響操作，扣1分取菌前未用酒精

12、擦手，扣1分編號（試管、培養(yǎng)皿），貼標(biāo)簽5都編號且正確，得5分每漏編（貼）一個，扣1分每錯編一個，扣1分；標(biāo)簽信息不全，一個扣1分樣品稀釋（30分）樣品混勻（原始樣品、稀釋樣品）10進(jìn)行且操作正確（平搖樣品瓶、手心震搖試管），得10分原始樣品沒有混勻，扣2分稀釋樣品沒有混勻，一個扣2分手心震搖試管時沒塞塞子，扣2分移液過程其他問題，一次扣2分吸管或移液器使用（打開方式、取液、調(diào)節(jié)液面、放液、稀釋順序）10吸管或移液器使用正確，得5分打開吸管包扎紙時手碰到管尖至吸管的1/3處，一次扣2分；槍頭盒每取一次都要迅速蓋上，注意無菌操作，未蓋一次扣2分放液時若吸管（或移液器）外壁碰到試管口卻沒有灼燒試管

13、口，一次扣2分吸取刻度不準(zhǔn)確，一次扣2分稀釋時將移取過高濃度菌液的吸管插入到低濃度試管中，一次扣2分移液過程中液體流滴在試管外面，一次扣2分試管、三角瓶操作（開塞、管口滅菌、持法、蓋塞）10試管三角瓶操彳正確，得10分菌種試管三角瓶開塞未灼燒，扣2分開塞不正確，一次扣2分蓋塞不正確，一次扣2分持法不正確，一次扣2分蓋塞未灼燒，扣2分平板涂布（25分）加樣5操作正確，得5分將移取過高濃度菌液的吸管插入到低濃度試管中進(jìn)行接種，一次扣1分吸管外壁碰到培養(yǎng)皿壁，一次扣1分漏接培養(yǎng)皿，一個扣1分試管被污染，每根扣1分涂布10涂布棒使用正確，涂布效果好，得10分涂布棒上酒精未灼燒徹底，扣2分涂布棒未冷卻，

14、一次扣2分涂布方法不對，扣2分涂布使平板破，扣4分單手持皿，平端，兩指自如開合皿蓋，錯誤扣2分酒精燈附近區(qū)操作3在酒精燈附近區(qū)操作，得3分未在酒精燈附近區(qū)操作，扣3分空白4進(jìn)行，得4分未進(jìn)行，一個扣2分操作熟練程度3熟練，得3分較熟練，得2分一般，得1分不熟練，得0分培養(yǎng)（3分）培養(yǎng)3正確培養(yǎng)，得3分培養(yǎng)時未翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)皿，一個扣2分將培養(yǎng)時間與培養(yǎng)溫度寫在標(biāo)簽上，錯誤或漏寫均扣1分文明操作（2分）實驗后臺面整理1整理，得1分未整理，扣1分器皿破損1未破損，得1分破損，扣1分完成時間（0）共用（）分鐘開始：0提前，不加分不扣分按時，不加分不扣分超時：每超1分鐘，扣1分（最多扣5分）結(jié)束：合計結(jié)果觀

15、察結(jié)果判斷（30分）培養(yǎng)結(jié)果觀察10菌落無片狀，空白無菌落，得10分有10個以上單菌落，少一個扣1分空白平板有菌落，一個平板扣5分精密度極差與平均值之比（）（以計數(shù)平板進(jìn)行計算）12<10%得12分1015%得9分1520%得6分2030%得3分>30%得0分準(zhǔn)確度（以計數(shù)平板進(jìn)行計算）8<10%得8分1020%得4分2030%得2分>30%得0分培養(yǎng)基的制備與滅菌班級：姓名：學(xué)號:項目考核內(nèi)容分值考核記錄（扣分）備注得分題目配制50mL牛肉膏蛋白豚培養(yǎng)基，全部分裝入試管中，滅菌完畢擺斜面準(zhǔn)備（10藥品準(zhǔn)備2藥品齊全，類別準(zhǔn)確分）天平準(zhǔn)備4水平，干凈其他4操作所需所有物

16、品，均齊全合適計算（5分）準(zhǔn)確5所有物品均計算準(zhǔn)確，且稱量準(zhǔn)確稱量（25分）加水3加水量適宜順序準(zhǔn)確2按照配方順序加入樣品方法正確5牛肉膏的稱取方法正確5蛋白陳迅速，不至潮解操作文明10不得有藥品撒入天平中，一次扣5分溶解與定容（10）藥品溶解5按順序溶解樣品，不糊不溢準(zhǔn)確定容至要求的體積5體積準(zhǔn)確，定容方法準(zhǔn)確調(diào)節(jié)pH（10分）調(diào)制要求值5pH試紙使用準(zhǔn)確5調(diào)節(jié)準(zhǔn)確，不過量，不回調(diào)分裝（15分）分裝試管，將所有培養(yǎng)基分裝完5裝量適宜，過大或過小一支扣1分5分裝時培養(yǎng)基沾染在試管口上，一支1分5分裝過程培養(yǎng)基凝固滅菌（5分）高壓蒸汽滅菌5溫度時間設(shè)定合適，寫在標(biāo)簽上滅菌鍋使用熟練擺斜面5分?jǐn)[接種斜面5長短適宜表面整齊熟練程度（5分）操作熟練程度5熟練，得5分較熟練，得3分一般，得2分不熟練，得0分文明操作（5分）實驗后臺面整理3整理，得3分未整理，扣3分器皿破損2未破損，得2分破損，