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文檔簡介
1、臨床檢驗儀器學(xué)選擇、填空 測量值與真值的差異被稱為:誤差,測量值偏離真值的程度即精度。檢驗儀器常用的性能指標(biāo)有:靈敏度、誤差、精度、重復(fù)性、分辨率、噪聲、線性范圍、響應(yīng)時間、頻率響應(yīng)范圍。 檢測儀器的靈敏度是輸出量與輸入量之比。 物體在離心力場中表現(xiàn)的沉降運(yùn)動現(xiàn)象是指離心現(xiàn)象。應(yīng)用離心沉降進(jìn)行物質(zhì)的分析和分離的技術(shù)稱為離心技術(shù)。分離細(xì)胞內(nèi)不同細(xì)胞器的主要技術(shù)是離心技術(shù)。當(dāng)物體所受外力小于圓周運(yùn)動所需要的向心力時,物體將作離心運(yùn)動。國際上對離心機(jī)有三種分類法,分別是按用途分、按轉(zhuǎn)速分和按結(jié)構(gòu)分。離心機(jī)按轉(zhuǎn)速分類,分為高速離心機(jī)、低速離心機(jī)和超速離心機(jī)。在離心力場中作用在離心管內(nèi)顆粒上的力是:離心
2、力。相對離心力場的單位是:g 。固定角轉(zhuǎn)頭的標(biāo)識是 FA 。表示從轉(zhuǎn)軸中心至試管最外緣或試管底的距離的轉(zhuǎn)頭參數(shù)是 Rmax 。表示從轉(zhuǎn)軸中心至試管最內(nèi)緣或試管頂?shù)木嚯x的轉(zhuǎn)頭參數(shù)是 Rmin 。表示轉(zhuǎn)頭的最高安全轉(zhuǎn)速的轉(zhuǎn)頭參數(shù)是 RPMmax 。在強(qiáng)大離心力作用下 , 單位時間內(nèi)物質(zhì)運(yùn)動的距離稱為沉降速度。單位離心力場下的沉降速度是指沉降系數(shù)。沉降系數(shù)與樣品顆粒的質(zhì)量或密度的關(guān)系,質(zhì)量和密度越大 , 沉降系數(shù)越大。在介質(zhì)中,由于微粒的熱運(yùn)動而產(chǎn)生的質(zhì)量遷移現(xiàn)象,主要是由于密度差引起的,這種現(xiàn)象稱為擴(kuò)散現(xiàn)象。當(dāng)離心機(jī)的轉(zhuǎn)速可以達(dá)到 21000rpm 時,被稱為高速離心機(jī)。相對離心力是在離心力場中,
3、作用于顆粒的離心力相當(dāng)于地球重力的倍數(shù)。相對離心力場的大小為:做圓周運(yùn)動的物體受到的離心力與其重力之比。利用不同的粒子在離心場中沉降的差別,在同一離心條件下,通過不斷增加相對離心力,使一個非均勻混合液內(nèi)大小、 形狀不同的粒子分布沉淀的離心方法是差速離心法。利用樣品中各組份的沉降系數(shù)不同而進(jìn)行分離的方法稱為差速離心法。差速離心法和速率區(qū)帶離心法進(jìn)行分離時,主要的根據(jù)是不同樣品組份的沉降系數(shù)。不同的離心方法選擇的離心時間不同,對于差速離心法來說是某種顆粒完全沉降到離心管底部的時間。1不同的離心方法選擇的離心時間不同,對于等密度梯度離心而言是全部組份顆粒完全到達(dá)各自的等密度點(diǎn)的平衡時間。 速率區(qū)帶離
4、心法、等密度區(qū)帶離心法屬于密度梯度離心法。密度梯度離心法又稱為區(qū)帶離心法。在梯度液中不同沉降速度的粒子處于不同的密度梯度層內(nèi)形成幾條分開的樣品區(qū)帶,達(dá)到彼此分離的目的,這種方法是 速率區(qū)帶離心法。根據(jù)樣品組份的密度差別進(jìn)行分離純化的分離方法是等密度區(qū)帶離心法。Percoll 分離液從外周血中分離單個核細(xì)胞的分離方法屬于速率區(qū)帶離心法。速率區(qū)帶法要求樣品粒子的密度與梯度液柱中任一點(diǎn)密度的關(guān)系必須是:大于。等密度區(qū)帶離心法對樣品進(jìn)行分離和純化主要是利用不同的密度。等密度區(qū)帶離心法對于密度梯度液柱的要求是液柱頂部的密度明顯小于樣品組份的密度,液柱底部的密度明顯大于樣品 組份的密度。離心機(jī)可達(dá)到的最大
5、轉(zhuǎn)速:低速, 10000;高速, 25000;超速, 80000。離心機(jī)的相對離心力可達(dá):低速, 15000g ;高速, 89000g ;超速, 510000g 。高速離心機(jī)由于運(yùn)轉(zhuǎn)速度高,一般都帶有低溫控制裝置。離心轉(zhuǎn)盤屬于低速離心機(jī)部件。為了研究生物大分子的沉降特性和結(jié)構(gòu),使用了特殊的轉(zhuǎn)子和檢測手段,以便連續(xù)監(jiān)測物質(zhì)在一個離心力場中的沉降過 程,這種離心機(jī)稱為分析超速離心機(jī)。測定生物大分子的相對分子重量應(yīng)用最廣泛的方法是沉降速率法。分析生物大分子中的構(gòu)象變化采用的方法是分析超速離心法。 原子光譜和分子光譜是由外層電子躍遷引起的。原子發(fā)射光譜分析法可進(jìn)行分析的是定性、半定量和定量。原子發(fā)射光
6、譜和熒光光譜同屬于放射光譜。原子吸收分光光度計的主要部件有光源、單色器、檢測器和原子化器。輻射能作用于粒子 (原子、 分子或離子 后 , 粒子選擇性地吸收某些頻率的輻射能 , 并從低能態(tài) (基態(tài) 躍遷至高能態(tài) (激 發(fā)態(tài) , 這種現(xiàn)象稱為吸收。原子吸收光譜法是一種成分分析方法 , 可對六十多種金屬和某些非金屬元素進(jìn)行定量測定 , 它廣泛用于下述定量測定中 的極微量元素。分子光譜的產(chǎn)生是由于電子相對于原子核的運(yùn)動以及核間相對位移引起的振動和轉(zhuǎn)動。光學(xué)分析法中使用到電磁波譜 , 其中可見光的波長范圍為 400nm 750nm 。2石墨爐原子吸收分析和分子熒光分析分別利用的是原子外層電子和分子振動躍
7、遷。四種光源的蒸發(fā)溫度由低到高排序:直流電弧 -低壓交流電弧 -火花 -ICP 。在經(jīng)典 AES 分析中,蒸發(fā)溫度最高的光源是 ICP ??招年帢O燈的主要操作參數(shù)是燈電流??招年帢O燈中對發(fā)射線半寬度影響最大的因素是燈電流。空心陰極燈內(nèi)充的氣體是少量的氖或氬等惰性氣體。采用調(diào)制的空心陰極燈主要是為了克服火焰中的干擾譜線。在電熱原子吸收分析中 , 多利用氘燈進(jìn)行背景扣除 , 扣除的背景主要是原子化器中分子對共振線的吸收。用標(biāo)準(zhǔn)加入法作為原子吸收的定量方法時 , 下述中被消除的干擾有基體效應(yīng)。在原子吸收光譜分析中,當(dāng)組分較復(fù)雜且被測組分含量較低時,為了簡便準(zhǔn)確地進(jìn)行分析,最適用的分析方法是標(biāo)準(zhǔn)加 入
8、法。在原子吸收分析法中 , 被測定元素的靈敏度、準(zhǔn)確度在很大程度上取決于原子化系統(tǒng)。原子吸收分析中,如燈中有連續(xù)背景發(fā)射,宜采用的措施是用純度較高的單元素?zé)簟Ec火焰原子吸收法相比,石墨爐原子吸收法的特點(diǎn)有物理干擾多但原子化效率高。原子化器的主要作用是將試樣中待測元素轉(zhuǎn)化為基態(tài)原子。原子吸收分析對光源進(jìn)行調(diào)制 , 主要是為了消除原子化器火焰的干擾。質(zhì)量濃度為 0.1g/mL 的 Mg 在某原子吸收光譜儀上測定時,得吸光度為 0.178,結(jié)果表明該元素在此條件下的 1% 吸 收靈敏度為 0.00244。在原子吸收分析中 , 過大的燈電流除了產(chǎn)生光譜干擾外 , 還使發(fā)射共振線的譜線輪廓變寬。這種變寬
9、屬于多普勒變寬(熱 變寬 。原子吸收光譜法測定試樣中的鉀元素含量,通常需加入適量的鈉鹽 , 其作用是消電離劑。不是 石墨爐原子化器特點(diǎn)的是:原子化效率較低。不是 原子吸收光譜儀檢出限特點(diǎn)的是:表示在選定的實驗條件下,被測元素溶液能給出的測量信號 2倍于標(biāo)準(zhǔn)偏差時所 對應(yīng)的濃度。不是 單波長單光束分光光度計特點(diǎn)的是:采用兩個光柵或棱鏡加光柵的雙單色器、從光源到試樣至接收器有兩個光通道。 下述中是單波長雙光束分光光度計特點(diǎn)的有從光源到檢測器有兩條光路。原子吸收光譜儀與原子發(fā)射光譜儀在結(jié)構(gòu)上的不同之處是原子化器。在原子吸收光譜法分析中 , 能使吸光度值增加而產(chǎn)生正誤差的干擾因素是背景干擾。原子吸收分
10、光光度計中常用的檢測器是光電倍增管。光電直讀光譜儀與攝譜儀的區(qū)別在于:檢測系統(tǒng)不同。3原子吸收光譜法是基于吸光度與待測元素的含量成正比而進(jìn)行分析檢測的,即氣態(tài)原子對光的吸收符合朗伯 -比爾定律。 鎢燈所產(chǎn)生的光具有的特點(diǎn):連續(xù)光譜、藍(lán)光少、遠(yuǎn)紅外光多、熱量多。高壓氙燈是常用的光源之一,它所產(chǎn)生的光具有的特點(diǎn)是譜與日光很相似,高光強(qiáng)。鹵鎢燈的適用波長范圍是 320nm 2500nm 。用雙波長分光光度計來測定高濃度試樣和混濁試樣以及多組分混合物的定量分析具有很大的優(yōu)越性。選擇光電倍增管的三個主要指標(biāo):波長響應(yīng)、靈敏度、噪聲水平。分光光度計的核心部件是:單色器。分光光度計常用的分光色散元件是棱鏡和
11、光柵。紫外可見分光光度計在紫外區(qū)測量時必須用石英池。按照光學(xué)系統(tǒng)不同,紫外可見分光光度計可分為單波長單光、單波長雙光束、雙波長三種類型。棱鏡所產(chǎn)生的光譜是非勻排光譜;光柵所產(chǎn)生的是勻排光譜。棱鏡或光柵可作為分光元件。在同一介質(zhì)中,紅光與黃色光的折射率相比較:黃色光折射率更大。721型分光光度計在校準(zhǔn)時,廠家推薦鋪釹濾光片的校正波長為:529nm 。熒光分光光度計一般是在入射光的 90度(垂直方向檢測樣品的發(fā)光信號。雙波長分光光度計利用吸收點(diǎn)法測得的二組分混合物在兩特定波長處的吸光度差 A 應(yīng)為:等于待測組分的 A 。 與雙波長分光光度計相比較,單、雙光束可見分光光度計的缺點(diǎn)是:不能克服由于非特
12、征吸收信號的影響而帶來測定中 的誤差。熒光光度法可以根據(jù)二種光譜來鑒定物質(zhì)。原子吸收分光光度計中使用最普通的光源燈是:空心陰極燈。原子吸收光譜儀中理想的光源是:譜線寬度窄、強(qiáng)度高、穩(wěn)定。 在光學(xué)顯微鏡下所觀察到的細(xì)胞結(jié)構(gòu)稱為顯微結(jié)構(gòu)。研究細(xì)胞的亞顯微結(jié)構(gòu)一般利用電子顯微鏡技術(shù)。研究組織或細(xì)胞顯微結(jié)構(gòu)的主要技術(shù)是顯微鏡技術(shù)。用顯微鏡觀察細(xì)胞時,選擇目鏡 10×,物鏡 4×的組合在視野內(nèi)所看到的細(xì)胞數(shù)目最多。不能直接觀察透明標(biāo)本的是:普通倒置顯微鏡。最常見的像差是:球差。相襯顯微鏡中相板的作用是:推遲相位吸收光量。普通光學(xué)顯微鏡由光學(xué)系統(tǒng)、機(jī)械系統(tǒng)兩大系統(tǒng)組成,其分辨極限約為
13、0.2(0.22 m 。靠近物體的是物鏡,靠近人眼4的是目鏡,最后成倒立的虛像,位于人眼的明視距離處。適于觀察細(xì)胞復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜系統(tǒng)、細(xì)胞骨架系統(tǒng)的三維結(jié)構(gòu)的顯微鏡是:激光掃描共聚焦顯微鏡。主要用于觀察活細(xì)胞中有規(guī)則的纖維結(jié)構(gòu)如紡錘絲、染色體以及纖維絲等構(gòu)造的光學(xué)顯微鏡是偏振光顯微鏡。適于觀察培養(yǎng)瓶中活細(xì)胞的顯微鏡是倒置顯微鏡。要將視野內(nèi)的物像從右側(cè)移到中央,應(yīng)向哪個方向移動標(biāo)本右側(cè)。雙筒目鏡顯微鏡兩目鏡光軸間的距離可在 53-73(75 mm 范圍內(nèi)變化。當(dāng)顯微鏡的目鏡為 10X ,物鏡為 10X 時,在視野直徑范圍內(nèi)看到一行相連的 8個細(xì)胞。若目鏡不變,物鏡換成 40X 時, 則在視野
14、中可看到這行細(xì)胞中的 2個。選擇題中下列有誤的 :光學(xué)顯微鏡的分辨率由目鏡決定。使用油鏡時,需將聚光器降至最低,光圈關(guān)至最小。所 用標(biāo)本須經(jīng)超薄切片 。關(guān)于相襯顯微鏡,下列有誤的 :所觀察的標(biāo)本要經(jīng)固定處理 。關(guān)于光學(xué)顯微鏡的分辨率,下列有誤的 :與照明光的波長成反比 。關(guān)于熒光顯微鏡,下列有誤的 :使用時應(yīng)在較明亮的環(huán)境中進(jìn)行。關(guān)于電子顯微鏡,下列有誤的:組織或細(xì)胞觀察前均需經(jīng)超薄切片。關(guān)于超薄切片,下列有誤的 :組織細(xì)胞樣品被切片之前常需雙重固定但無需包埋。在物鏡里增加一個相位板和在聚光鏡上增加一個環(huán)形光闌的顯微鏡是相襯顯微鏡。中、高檔顯微鏡常用的調(diào)焦機(jī)構(gòu)是柯拉照明。偏光顯微鏡中勃式鏡的作
15、用是:將物鏡像方焦面上的干涉圖像成于目鏡的物方焦面上。環(huán)形光闌不是熒光顯微鏡的結(jié)構(gòu)元件。倒置顯微鏡的標(biāo)本應(yīng)放在物鏡的上面。顯微鏡的核心器件是:物鏡。電鏡標(biāo)本制備時常用的固定劑:鋨酸、戊二醛。分別使用光鏡的低倍鏡和高倍鏡觀察同一細(xì)胞標(biāo)本相,可發(fā)現(xiàn)在低倍鏡下相較小、視野較亮 。使用放大倍率較高的目鏡與提高顯微鏡分辨能力無關(guān)。某學(xué)生在顯微鏡下觀察標(biāo)本切片,當(dāng)轉(zhuǎn)動細(xì)調(diào)節(jié)螺旋時,有一部分細(xì)胞看得清晰,另一部分細(xì)胞較模糊,這是由于標(biāo)本 切得厚薄不均。如圖所示, 1、 2為物鏡長度, 3、 4為目鏡長度, 5、 6為觀察時物鏡與標(biāo)本切片間距離,哪種組合情況下,顯微鏡的放 大倍數(shù)最大:2、 3、 5。在光學(xué)顯
16、微鏡下,觀察透明的、染色較淺的細(xì)胞時,必須注意做到把光圈縮小一些,使視野暗一些。在普通光學(xué)顯微鏡下,一個細(xì)小物體若被顯微鏡放大 50倍,這里“被放大 50倍”是指該細(xì)小物體的長度或?qū)挾取?色譜分析 對于高效液相色譜儀的描述:分析速度丌快。 不正確:氣相色譜儀只能分析氣態(tài)樣品。 氣相色譜系統(tǒng)的核心是:分析柱。 色譜儀用梱測器的基本要求是:靈敏度高、反映時間要快。 色譜法按照兩相的狀態(tài)分類,若流動相是液體,固定相是固體吸附劑,則稱為液固吸附譜法;若流動相是液體,固定相 也是液體,則稱為液液分配色譜法。 按動力學(xué)方法可將色譜法分為沖洗法、頂替法(叏代法) 、前沿法(迎頭法) 。 氣相色譜儀氣路系統(tǒng)的
17、目的是為向色譜柱提供質(zhì)地潔凈和流動平穩(wěn)的流動相。 氣相色譜儀氣路系統(tǒng)工作時要求:先穩(wěn)定載氣的壓強(qiáng),再穩(wěn)定其流量。 對液相色譜儀中的溶劑輸送系統(tǒng)主要要求為:寬的流速范圍和寬的入口壓力范圍幵能適于所有的溶劑。 氣相色譜儀恒溫操作的一般要求比樣品最高沸點(diǎn)高 40左右。 在高效液相色譜工作中,對于復(fù)雜樣品,常觃無法梱出時,可采用下列措施:程序升溫、程序便流速,組合柱或梯度洗 脫。 色譜儀可以迚樣的標(biāo)志是溫度穩(wěn)定,流量穩(wěn)定。 在氣液色譜法中,為了改發(fā)色譜柱的選擇性,下述可迚行的操作是改發(fā)固定液的種類。 在氣液色譜系統(tǒng)中,若被分離組分不固定液分子的類型越相似,則它們之間作用力越大,保留值越大。 對色譜柱管
18、的具體要求是高效液相色譜柱管較短,常用直管柱。 要增加色譜柱的選擇性能,可以采叏的有效措施是使用高選擇性固定相。 色譜分析中,不被測物濃度成正比的特征是峰面積。 影響熱導(dǎo)池靈敏度的主要因素是電橋電流。 氣相色譜分析中,在色譜柱選定以后,首先考慮的色譜條件是柱溫。 降低柱溫會引起相對保留值的增加。 液色譜法流動相選擇的依據(jù)是流動相盡可能不固定相丌溶,粘度要小一些。 對于色譜儀的工作過程,先分離后梱測樣品。 對于一般樣品,高效液相色譜儀常用的迚樣裝置和迚樣方式是丌停流的隔斷式注射器迚樣。 使用高效液相色譜儀分離復(fù)雜樣品,常液系脫分離效果丌好時,最常用的改善分離方法是梯度洗脫。 為了實現(xiàn)氣路系統(tǒng)的目
19、的,可以采叏的措施有:去掉載氣中的雜志,使用穩(wěn)壓閥和穩(wěn)流閥。 對于沸點(diǎn)分布比較均勻的樣品,常用的程序升溫方式為:線性程序。 高效液相色譜儀的収展源自于高壓技術(shù)、高效固定相技術(shù)、梱測技術(shù)、電子及計算機(jī)技術(shù)的収展。 6 熱導(dǎo)梱測器特點(diǎn),依據(jù)樣品不載氣具有丌同的導(dǎo)熱系數(shù)來梱測;氫火焰離子化梱測器特點(diǎn),靈敏度高;電子捕獲梱測器 特點(diǎn),屬于選擇性的梱測器;紫外可見光梱測器特點(diǎn),響應(yīng)速度快;示差折光梱測器特點(diǎn),靈敏度低;熒光梱測器特點(diǎn), 梱測過程中丌破壞樣品。 熱導(dǎo)梱測器是基于載氣及樣品各個組分具有丌同的導(dǎo)熱系數(shù)迚行梱測的,氫火焰離子化監(jiān)測器對有機(jī)物較敏感,電子捕 獲梱測器只對具有電負(fù)性的組分有響應(yīng),示差
20、折光梱測器源自折射率的發(fā)化。 不氣相色譜儀相比較,HPLC 的特點(diǎn)是:溶劑種類多、可以分析自然界中大多數(shù)樣品。 氣路系統(tǒng)為保證載氣流量的穩(wěn)定,必須注意穩(wěn)流閥必須接在穩(wěn)壓閥后面。 自動生化分析儀 丐界上第一臺自動生化分析儀屬于連續(xù)流動式。 丐界上第一臺自動生化分析儀產(chǎn)于 20 丐紀(jì) 50 年代。 丐界上最早的自動生化分析儀是管道式自動生化分析儀。 單通道、連續(xù)流動式自動生化分析儀誕生在:20 丐紀(jì) 50 年代。 具有空氣分段系統(tǒng)的自動生化分析儀是連續(xù)流動式自動生化分析儀。 連續(xù)流動式自動生化分析儀中氣泡的作用是防止管道中的交叉污染。 連續(xù)流動式自動生化分析儀可分為空氣分段系統(tǒng)和試劑分段系統(tǒng)式。
21、連續(xù)流動式自動生化分析儀的交叉污染率相對較高。 自動生化分析儀中所指的交叉污染主要來自樣本之間。 自動生化分析儀自動清洗樣品探針主要作用是防止交叉污染。 采用膠囊化學(xué)技術(shù)的自動生化分析儀屬于連續(xù)流動式。 鹵素?zé)舻墓ぷ鞑ㄩL為 325nm800nm。 氙燈的工作波長為 285nm750nm。 透析器的透析效率不下列哪項因素?zé)o關(guān)透析開始的時間。 自動生化分析儀是一種把生化分析中叏樣、加試劑、去干擾、混合、恒溫、反應(yīng)、梱測、結(jié)果處理以及清洗等過程中的 部分或全部步驟迚行自動化操作的儀器。 自動生化分析儀常用的梱測器是:光電倍增管。 自動分析儀中采用“順序分析”原理的是連續(xù)流動式自動生化分析儀。 自動分析儀中采用“同步分析”原理的是離心式自動生化分析儀。 離心式自動分析儀的待測樣品在離心力作用下,在各自反應(yīng)槽內(nèi)不試劑混合幵完成化學(xué)反應(yīng),這種測定
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