大黃靈仙膠囊對(duì)慢性肝損傷后膽結(jié)石形成的干預(yù)作用研究

1、大黃靈仙膠囊對(duì)慢性肝損傷后膽結(jié)石形成的干預(yù)作用研究         作者：唐乾利，俞淵，黃名威，關(guān)中正，高善輝 【摘要】 目的探討大黃靈仙膠囊對(duì)慢性肝損傷家兔膽結(jié)石形成的干預(yù)作用及其作用機(jī)制。方法將46只家兔隨機(jī)分為正常組、慢性肝損傷組、肝硬化組、大黃靈仙膠囊大劑量組、大黃靈仙膠囊小劑量組。采用皮下注射CCl4方法進(jìn)行慢性                &#

2、160;         作者：唐乾利，俞淵，黃名威，關(guān)中正，高善輝 【摘要】  目的探討大黃靈仙膠囊對(duì)慢性肝損傷家兔膽結(jié)石形成的干預(yù)作用及其作用機(jī)制。方法將46只家兔隨機(jī)分為正常組、慢性肝損傷組、肝硬化組、大黃靈仙膠囊大劑量組、大黃靈仙膠囊小劑量組。采用皮下注射CCl4方法進(jìn)行慢性肝損傷造模,各組同時(shí)進(jìn)行不同處理。最后觀察各組膽囊成石率，肝臟功能生化指標(biāo)，肝組織病理改變、超微結(jié)構(gòu)改變，膽汁成分改變。結(jié)果慢性肝損傷組、肝硬化組膽石形成陽(yáng)性檢出率較正常對(duì)照組顯著增加（P0.05或P0.01）。大黃

3、靈仙膠囊大劑量組、大黃靈仙膠囊小劑量組膽石陽(yáng)性檢出率較肝硬化組有顯著降低(P0.01或P0.05)。各模型組中肝臟超微結(jié)構(gòu)均發(fā)生不同程度異常改變，大黃靈仙膠囊大、小劑量治療組肝臟病理改變、肝細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)改變較模型組比較均有改善，大劑量組尤為明顯。大黃靈仙膠囊大、小劑量組血清AST，ALT，-GT，非結(jié)合膽紅素均明顯低于肝硬化組（P0.05或P<0.01）；總膽紅素、間接膽紅素、鈣離子大黃靈仙膠囊大、小劑量組較肝硬化組明顯降低（P<0.01），大劑量組較小劑量組明顯降低（P<0.01）。結(jié)論大黃靈仙膠囊對(duì)慢性肝損傷后膽結(jié)石形成具有明顯的預(yù)防效果，其作用機(jī)制主要與抑制CCl4所致

4、肝臟損傷的作用有關(guān)，同時(shí)與大黃靈仙膠囊在多層次、多途徑調(diào)節(jié)參與結(jié)石形成各因素關(guān)系密切。 【關(guān)鍵詞】  慢性肝損傷； 肝硬化； 大黃靈仙膠囊； 膽結(jié)石； 肝臟超微結(jié)構(gòu)Abstract：ObjectiveTo study the interference effect and its mechanism of Dahuanglinxian Capsules on gallstone formation after chronic liver injury of rabbits. Methods46 rabbits were randomly divided into 5 groups,

5、respectively named by group A (normal control group), group B (chronic liver injury group), group C (liver cirrhosis group), group D (group fed with large dose Dahuanglinxian capsule) and group E (group fed with large dose Dahuanglinxian capsule). The chronic liver injured rabbits were induced by su

6、bcutaneous injection with CCl4 and each group was treated by different factors at the same time. The gallstone formation rate, liver function biochemical index, pathological changes in liver tissues, ultrastructural changes, and biliary component change were observed by the methods of biochemical an

7、d pathological technology. ResultsThe gallstone formation rate of group B and C were obviously higher than group A (P0.05 or P0.01). The gallstone formation rate of D and E were obviously lower than group C (P0.05 or P0.01). There were abnormal ultrastructural changes to certain extent in models B a

8、nd C. Compared with the model groups, the D and E groups improved the ultrastructural changes and pathological changes in liver tissues, especially D group. The level of AST，ALT，r-GT and indirect bilirubin in serum of groups D and E were obviously lower than group C (P0.05 or P<0.01). At the same

9、 time, the content of total bilirubin, indirect bilirubin, Ca2+ of groups D and E were obviously lower than group C (P<0.01), the same of group D was lower than group E (P<0.01). ConclusionThe Dahuanglinxian capsules have significant effect of preventing gallstone formation due to its protecti

10、ve effect to liver injury which is induced by CCl4, and its association with regulations to many factors participating in the gallstone formation on multiple levels and ways.Key words： Chronic liver injury；  Cirrhosis of liver；  Dahuanglinxian Capsule；  Gallstones；  Ultrastructur

11、e    本實(shí)驗(yàn)利用CCl4皮下注射誘發(fā)家兔慢性肝損傷，在此基礎(chǔ)上觀察膽囊結(jié)石形成率，并用大黃靈仙膠囊組方煎劑進(jìn)行灌胃，通過觀察結(jié)石形成率，肝臟細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的病理學(xué)改變，測(cè)定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肝功能及膽汁成分并進(jìn)行膽汁培養(yǎng)，以探討大黃靈仙膠囊對(duì)家兔慢性肝損傷膽結(jié)石模型的干預(yù)治療作用。1  材料與儀器1.1  材料、儀器健康家兔，體質(zhì)量2.53.0 kg，雌雄不拘，普通級(jí)，廣西中醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)20060820。各生化試劑盒分別購(gòu)于上海申能德賽診斷技術(shù)有限公司和伊利康生物技術(shù)有限公司。奧地利Biocell2010酶標(biāo)儀、日立H-500透射電

12、鏡、BX-50-32001奧林巴斯光學(xué)顯微鏡、HPIAS-1000P病理圖文分析系統(tǒng)等分別由廣西醫(yī)科大學(xué)中心實(shí)驗(yàn)室、廣西中醫(yī)學(xué)院一附院病理實(shí)驗(yàn)室提供。1.2  藥品造模用藥：CCl4 分析純（將CCl4與花生油以12.5比例混合，37加熱使充分溶解，制成40CCl4溶液，）、膽固醇分析純，均為上海國(guó)藥集團(tuán)產(chǎn)品。受試用藥：大黃靈仙膠囊1 (生大黃150 g，威靈仙300 g，芒硝100 g，金錢草300 g，枳殼120 g，雞內(nèi)金100 g，澤蘭150 g，柴胡120 g，郁金120 g，磁石120 g，黃芪300 g，甘草50 g)，以上共計(jì)1 930 g生藥，由廣西中醫(yī)學(xué)院第一附屬

13、醫(yī)院制劑室提取965 ml濃縮藥液，并無菌密封瓶裝（生藥量為2 g /ml）。2  方法2.1  動(dòng)物分組及處理方法健康家兔46只，體質(zhì)量2.53.0 kg，雌雄不拘，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后隨機(jī)分為5組，即正常對(duì)照組10只、慢性肝損傷組8只、肝硬化組8只、大黃靈仙膠囊大劑量組10只（用藥量相當(dāng)于成人用量的3倍）、大黃靈仙膠囊小劑量組10只（用藥量相當(dāng)于成人用量）。正常對(duì)照組普食喂養(yǎng)，每日灌服生理鹽水4 ml/kg；慢性肝損傷組采用“慢性肝損傷兔動(dòng)物模型”的建立2，普食喂養(yǎng)10周后，每日灌服生理鹽水4 ml/kg；肝硬化模型組造模方法2：家兔稱重后以2 ml/kg體質(zhì)量，將40CC

14、l4溶液頸后皮下注射，每4天1次，以形成皮下丘狀突起為宜3。造模后第10周開始每日灌服生理鹽水8 ml/kg；大黃靈仙膠囊大、小劑量組第10周起每日灌服膽通膠囊提取液8 ml/kg，4 ml/kg。普食喂養(yǎng)。2.2  檢測(cè)指標(biāo)及方法2.2.1  膽囊結(jié)石成石觀察結(jié)石判定標(biāo)準(zhǔn)為正常膽囊膽汁內(nèi)無有形成分。肉眼觀察膽汁內(nèi)有無棕黑色成型顆粒或泥沙樣沉淀；鏡下觀察有無結(jié)石微?；蚪Y(jié)晶。2.2.2  生化指標(biāo)檢測(cè)天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(-GT)采用速率法檢測(cè)；血清中總膽紅素、直接膽紅素、間接膽紅素、血清總膽固醇、總膽汁酸、膽汁總膽汁酸、總膽固醇采用化學(xué)比色法檢測(cè)；鈣離子含量采用乙二胺四乙酸二鈉法檢測(cè)；磷脂含量酶顯色法檢測(cè)。2.3  統(tǒng)計(jì)學(xué)處理所有數(shù)據(jù)采用SPSS14.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料以±s表示，兩組間均數(shù)比較用t檢驗(yàn)；兩組間率的比較采用卡方檢驗(yàn)；P0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3  結(jié)果3.1  家兔膽囊結(jié)石發(fā)生情況結(jié)果見表1。表1  膽石發(fā)生情況（略）3.2  家兔肝臟病理改變光鏡下觀察，慢性肝損傷組（