血涂片評價和分類計數(shù)的質(zhì)量控制流程

1、v1.0可編輯可修改血涂片評價和分類計數(shù)的質(zhì)量控制流程血涂片評價血涂片的顯微鏡檢查是血液細胞學檢查的基本方法，臨床上應用極為廣泛， 制備薄適宜，分布均勻，染色良好的血涂片是血液學檢查的重要基本技術之一。一、血涂片制作取末梢血1滴，置載玻片一端，取另一邊緣光滑的推片， 放在血滴前面慢慢后移， 接觸血滴后稍停。血液即沿推片散開，將推片與載片保持3045。角，向前平穩(wěn)均勻推動推片，載片上便留下一層薄血膜。血涂片制成后，立即在空氣中揮動，使其迅速干燥，以免血細胞變形。血膜干燥后，用鉛筆在血膜的一側(cè)寫上病人姓名或編號。一張良好的血片，厚薄要適宜，頭體尾要明顯，細胞分布要均勻，膜的邊緣要整齊，并留有一定的

2、空隙。涂片時血滴愈大，角度愈大，推片速度愈快則血膜愈厚，反之血膜愈薄。太薄的血膜片 50%勺白細胞集中于邊緣或尾部，血涂片過厚，細胞重疊縮小均不利于白細胞分類計數(shù)。如果血膜分布不勻，主要是推片不整齊，用力不均勻，載片不清潔所致。二、血涂片的質(zhì)量控制1、血膜片的質(zhì)量要求是厚薄均勻適度，低倍鏡下觀察全片，細胞不重疊，頭尾及兩側(cè)有一定的空隙，血膜頭部有明確的病人標志。2、一些體積較大的特殊細胞常在血膜的尾部出現(xiàn)，因此蠟筆劃線時應注意保存血膜尾部細胞，血膜必須充分干燥，否則在染色過程中容易脫落。3、配制染料須用優(yōu)質(zhì)甲醇，稀釋染液用緩沖液，因為緩沖液的pH對細胞染色的影響很重要。在偏酸性環(huán)境中正電荷增多

3、， 在偏堿性環(huán)境中負電荷增多，又因為細胞著色對氫離子濃度十分敏感。如果染色偏堿，原是紫紅色的中性顆粒則染成深藍色，造成識別困難。沖洗須用中性水，雖亦可用自來水（但不能保持穩(wěn)定）。4、對所用染液應進行預染試驗，新配制的染液放置一段時間后其中的美藍逐漸氧化成天青B ,天青B對細胞核的著色效果比美藍好，因此，瑞氏染液放置時間越長染色效果越好，臨床上稱之為成熟。判斷染液成熟程度的簡易方法是用正常優(yōu)質(zhì)血片做預染試驗，先用低倍鏡觀察載有染液的血片， 認為著色滿意后，再按照染色后沖洗順序最后用油鏡鏡檢，這樣不僅可了解染液的成熟程度，而且還可以選擇合適的染色時間，供臨床標本染色時參考。5、染液與緩沖液的比例要

4、適當， 以1 ： 2為宜。一般說來緩沖液稀釋度愈大，染色時間愈長，細胞著色愈勻稱、鮮艷。緩沖液和染液量要充足，否則染液很快蒸發(fā)，染料沉淀于細胞上，使細胞深染而無法檢查。細胞較多較厚的涂片（如紅細胞增多癥）染液應多些。細胞較少的 涂片染液應少些。6、染色時間與染液濃度、室溫高低、細胞多少有關，染液愈淡，室溫越低，細胞愈多，所需時間越長，應適當增加染液濃度，因此必須根據(jù)情況靈活掌握。7、染色良好的血膜片，外觀呈淺紅色，紅細胞呈粉紅色，白細胞核呈暗紫紅色，染色質(zhì)結(jié)構(gòu)能辨，粒細胞的顆粒呈固有種特異顏色。四、注意：在日常工作中遇到特殊標本，在制片時就要特殊對待。如：貧血病人、WBC寺高疑為白血病人、腹水

5、或胸水。個人：由檢驗師（士）完成涂片、染色、計數(shù)、分類。兩差比較：由主管技師計數(shù)、分類。雙份技術標準差評價法：由檢驗師（士）及副主管技師計數(shù)、分類后比較。質(zhì)評：A級（優(yōu)）：90100分。B級（良）：8089 分。C級（中）：7079 分。D級（及格）：6069分。E級（不及格）：60分。檢驗士一主管技師一副主任技師質(zhì)控目的：1避免或消除技術誤差。2縮小固有誤差。質(zhì)控評價：1常規(guī)考核標準。2變異百分數(shù)評價。3經(jīng)驗控制。分類計數(shù)的質(zhì)量控制流程制定血細胞分析儀血涂片復檢的標準并加以評價，建立適合我院的分類計數(shù)的標準。方法：通過對200份臨床標本血涂片進行顯微鏡檢查，評價儀器提示結(jié)果與手工分類計數(shù)的一

6、致性和標準執(zhí)行的可行性。復檢標準的標本均需要嚴格按照操作規(guī)程進行顯微鏡鏡檢，以免造成漏診、誤診現(xiàn)象，提高血液學分析質(zhì)量。白細胞分類計數(shù)一、低倍鏡觀察：選擇細胞分布均勻、染色好的部位，轉(zhuǎn)油鏡下計數(shù)100 200個細胞，求出各種白細胞所占百分比。 包括：中性粒細胞、淋巴細胞、單核細胞、嗜酸細胞、嗜堿細胞。二、細胞分布：頭體部以淋巴細胞較多，尾部和兩側(cè)以中性粒、單核細胞較多，片尾部異常大的細胞較多。一般選擇體尾交界處，細胞分布均勻的地方按一定方式，有規(guī)律的移動視野。三、發(fā)現(xiàn)幼稚或異常白細胞，應分類報告，包括在分類百分率中。如遇到不能確認的細胞，應另列入分類不明一項， 如實報告，并保留血片。如發(fā)現(xiàn)有核

7、紅細胞， 應報告分類100個白細胞所見有核紅細胞數(shù)。 檢驗人員必須能對所有常見白細胞進行分類，并了解大多數(shù)白細胞的形態(tài)異常，包括先天性和獲得性。參與細胞形態(tài)學檢查的檢驗人員必須進行專業(yè)培訓，并具備實際工作經(jīng)驗。檢驗人員的工作態(tài)度、動機和專心程度是關鍵因素。因為白細胞分類計數(shù)是一項主觀性很強的工作，影響分類計數(shù)的因素很多，有檢驗人員的態(tài)度、實驗室環(huán)境條件和工作量等。四、血涂片考核考核樣本選擇10份樣本。樣本必須包含 7種類型白細胞（中性分葉核粒細胞、性桿狀核粒細胞、淋巴細胞、異型淋巴細胞、單核細胞、嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞）。按照要求，每份樣本制備5張血涂片，按照第節(jié)所述方法染色， 統(tǒng)一標簽，但檢驗人員不知道樣本來源。玻片分成5套，