腫瘤基因組開(kāi)題報(bào)告

1、腫瘤基因組開(kāi)題報(bào)告篇一：開(kāi)題報(bào)告青島農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士研究生個(gè)人培養(yǎng)計(jì)劃（二）（學(xué)位論文開(kāi)題報(bào)告）題目小鼠啟動(dòng)子甲基化影響外源基因轉(zhuǎn)入表達(dá)的機(jī)制學(xué)院：學(xué)科專(zhuān)業(yè)：動(dòng)物科技學(xué)院動(dòng)物育種與繁殖指導(dǎo)教研究方向： 動(dòng)物生殖發(fā)育與基因工程學(xué)號(hào)：姓名：師：210091001許登高 潘慶杰填表日期：2011年03月6日說(shuō)明一、開(kāi)題報(bào)告在專(zhuān)業(yè)或?qū)W科的范圍內(nèi)舉行，由導(dǎo)師組組織實(shí)施，應(yīng)當(dāng)有相近專(zhuān)業(yè)或校外專(zhuān)家參加。二、開(kāi)題報(bào)告內(nèi)容：（一）立項(xiàng)依據(jù)與研究?jī)?nèi)容（4000 - 8000字）1.立項(xiàng)依據(jù)（研究意義、國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀與分析、附參考文獻(xiàn)目錄）2.研究?jī)?nèi)容、研究目標(biāo)以及擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題3.擬采取的研究方案及可行性分析（包括

2、有關(guān)方法、技術(shù)路線、試驗(yàn)手段、關(guān)鍵技術(shù)等說(shuō)明）4.研究的特色與創(chuàng)新之處 5 .年度研究計(jì)劃及預(yù)期研究結(jié)果（二）研究基礎(chǔ)與工作條件1. 工作基礎(chǔ)（與導(dǎo)師或本實(shí)驗(yàn)室相關(guān)工作基礎(chǔ)的關(guān)系以及本人的工作進(jìn)展2.工作條件3.個(gè)人簡(jiǎn)歷及知識(shí)結(jié)構(gòu) 4.科研工作經(jīng)歷 （三）經(jīng)費(fèi)預(yù)算三、報(bào)告內(nèi)容按以上所列提綱撰寫(xiě)，書(shū)寫(xiě)字跡務(wù)必清楚。書(shū)寫(xiě)或 打印后與本頁(yè)合訂，一式三份（用A4紙打?。?，研究生、導(dǎo)師和研究生處培養(yǎng)科各一份。四、本報(bào)告第三學(xué)期 12月份完成。導(dǎo)師意見(jiàn)（評(píng)語(yǔ)）：簽名：年月曰導(dǎo)師組意見(jiàn)：簽名：年月曰討論意見(jiàn)：（選題指導(dǎo)思想及難易程度， 研究?jī)?nèi)容、方法可行性及修改意見(jiàn)。 是否通過(guò)開(kāi)題報(bào)告及其成績(jī)）參加討論人員

3、姓名、職稱：會(huì)議主持人簽名：年月日學(xué)院意見(jiàn)：簽名：年月曰（一）立項(xiàng)依據(jù)與研究?jī)?nèi)容：1、項(xiàng)目的立項(xiàng)依據(jù)研究意義：自通過(guò)DNA顯微注射成功獲得轉(zhuǎn)基因小鼠以后，人們就開(kāi)始利 用這一新技術(shù)來(lái)改變生物體的基因組結(jié)構(gòu)從而生產(chǎn)出轉(zhuǎn)基因動(dòng) 物。轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的誕生是遺傳學(xué)發(fā)展新的里程碑，轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的 出現(xiàn)已在基因功能及表達(dá)研究、動(dòng)物品種改良及新品種培育、人 類(lèi)疾病模型建立、器官移植材料供應(yīng)、珍貴醫(yī)藥用蛋白生產(chǎn)等各 方面顯示出巨大的優(yōu)越性和廣闊的應(yīng)用前景。隨著動(dòng)物轉(zhuǎn)基因技 術(shù)的發(fā)展，人們開(kāi)始更多地考慮轉(zhuǎn)入的外源基因的穩(wěn)定遺傳和高 效率地表達(dá)。近年來(lái)，越來(lái)越多的研究表明，目前動(dòng)物轉(zhuǎn)基因技 術(shù)雖能將外源基因整合進(jìn)動(dòng)物基

4、因組中，但在轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)中 卻存在著轉(zhuǎn)基因效率低、外源基因不表達(dá)等問(wèn)題，在這些問(wèn)題中，其中關(guān)鍵的一點(diǎn)是轉(zhuǎn)入基因的沉默不表達(dá)現(xiàn)象。由于近幾年人們 注重于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的制備研究而忽視了轉(zhuǎn)基因動(dòng)物個(gè)體的研究， 尤其是外源基因表達(dá)的分子機(jī)制方面，人們知之甚微，這就極大 程度地制約了轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的應(yīng)用和發(fā)展。在現(xiàn)實(shí)方面，我們所知 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的培育成本遠(yuǎn)高于轉(zhuǎn)基因植物，外源基因的高轉(zhuǎn)入和 高表達(dá)即意味著降低成本和提高科研的產(chǎn)出投入比，對(duì)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物發(fā)展的影響是深遠(yuǎn)的。因此本項(xiàng)目借助本項(xiàng)目組已經(jīng)建立的鼠 原始生殖細(xì)胞（PGC）體外分離培養(yǎng)和制備轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的平臺(tái)，利用基因甲基化技術(shù)來(lái)分析外源基因啟動(dòng)子的甲基化與目

5、的基因沉 默之間的關(guān)系，闡明在轉(zhuǎn)基因動(dòng)物體內(nèi)外源基因啟動(dòng)子甲基化對(duì) 目的基因失活的確切影響，探討啟動(dòng)子甲基化影響目的基因表達(dá) 的分子機(jī)制，為今后轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的有關(guān)研究和應(yīng)用提供理論依據(jù)， 從而使轉(zhuǎn)基因動(dòng)物在各個(gè)領(lǐng)域發(fā)揮其更大的作用。轉(zhuǎn)入基因沉默現(xiàn)象多是由轉(zhuǎn)入基因甲基化引起。在真核生物細(xì)胞內(nèi)，有一套保持遺傳物質(zhì)穩(wěn)定的系統(tǒng)，即甲基轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)。這個(gè) 系統(tǒng)可以給轉(zhuǎn)入基因貼上標(biāo)簽，然后在甲基轉(zhuǎn)移酶作用下發(fā)生甲 基化，從而降低轉(zhuǎn)入基因表達(dá)水平甚至是沉默轉(zhuǎn)入基因，以避免 對(duì)細(xì)胞本身造成傷害。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)細(xì)胞和個(gè)體水平，證明了外源基因的表達(dá)受到啟動(dòng)子甲基化的調(diào)控，并初步探討了這一表達(dá)調(diào)控機(jī)制。本實(shí)驗(yàn)的這一 結(jié)果有

6、利于進(jìn)一步提高外源基因的表達(dá)水平，加快乳腺生物反應(yīng) 器的發(fā)展和應(yīng)用。國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀及分析自20世紀(jì)80年代動(dòng)物轉(zhuǎn)基因技術(shù)出現(xiàn)以來(lái) 1，人們就開(kāi)始對(duì)這 一新生事物篇二：生物工程專(zhuān)業(yè)畢業(yè)設(shè)計(jì)開(kāi)題報(bào)告燕山大學(xué)本科畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）開(kāi)題報(bào)告課題名稱:月日一、綜述本課題國(guó)內(nèi)外研究動(dòng)態(tài)，說(shuō)明選題的依據(jù)和意義：1.國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀DNA分子水平多態(tài)性檢測(cè)技術(shù)是進(jìn)行基因組研究的基礎(chǔ)。佃90年，Williams和Welsh等人運(yùn)用隨機(jī)引物擴(kuò)增尋找的多態(tài)性 DNA 片段用作分子標(biāo)記，并將此技術(shù)命名為 RAPD(randomamplifidpolysnorphicDNA，即隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性 DNA。盡 管RAPD技術(shù)誕生

7、的時(shí)間不長(zhǎng)，但由于其豐富的DNA多態(tài)性及快速、簡(jiǎn)便等特點(diǎn)，使它成為目前植物育種研究工作采用最多的手 段2。隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性 DNA( RandomAmplifiedPolymorphicDNA，是以PCR為基礎(chǔ)，以隨機(jī)的短核苷酸序列為引物，以實(shí)驗(yàn)材料基因組 DNA為模板，進(jìn)行PCR反應(yīng)，找出擴(kuò)增片段的多態(tài)性。由于整個(gè) 基因組存在眾多反向重復(fù)序列，因此需單獨(dú)對(duì)每一隨機(jī)引物進(jìn)行 PCR如果引物結(jié)合部位的核苷酸序列發(fā)生了變化，或者擴(kuò)增范圍內(nèi)堿基出現(xiàn)插入或缺失，DNA重排，就會(huì)導(dǎo)致原來(lái)結(jié)合位點(diǎn)的消失或產(chǎn)生新的結(jié)合位點(diǎn)，或者使擴(kuò)增片段的長(zhǎng)度發(fā)生改變，經(jīng)瓊 脂糖凝膠電泳分離后通過(guò)EB染色就檢測(cè)出基因組所發(fā)生

8、的變化。1-4與其他分子標(biāo)記技術(shù)相比，RAPD具有以下優(yōu)越性：RAPD所用引物為隨機(jī)引物，一套引物可用于不同植物基因組分析，且不需預(yù)先知道待擴(kuò)增基因的核苷酸順序，試驗(yàn)費(fèi)用較低。RAPD技術(shù)的多 態(tài)性位點(diǎn)是無(wú)限的，靈敏度咼，能夠檢測(cè)出品種間的微小差異。RAPD實(shí)驗(yàn)中所需 DNA樣品量少，純度要求不高，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中一 般不需要進(jìn)行South- ern轉(zhuǎn)移、分子雜交等一系列繁瑣的程序， 可一次檢測(cè)大量樣品。同時(shí)，RAPD不需要使用同位素，減少了對(duì)工作人員的危害。RAPD產(chǎn)物，經(jīng)過(guò)克隆和序列分析后，可作為RFLP和原位雜交的探針，在基因定位、克隆及輔助選擇育種中可 以廣泛應(yīng)用。但RAPD分子標(biāo)記技術(shù)也存

9、在著一些缺點(diǎn)，一是標(biāo)記大多是顯性 標(biāo)記，二是實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性一般。但許多研究表明，這些缺點(diǎn)是可以 克服的。通過(guò)在實(shí)驗(yàn)中對(duì) RAPD技術(shù)體系進(jìn)行優(yōu)化，嚴(yán)格控制試 驗(yàn)條件，并進(jìn)行重復(fù)試驗(yàn)即可得到理想的結(jié)果。7,82. 選題依據(jù)及意義此畢業(yè)設(shè)計(jì)的課題為皮皮蝦RAPD分子標(biāo)記的多態(tài)性初步研究,主要是對(duì)皮皮蝦組織總 DNA進(jìn)行離提取，運(yùn)用RAPD分子標(biāo) 記的方法檢測(cè)其多態(tài)性并進(jìn)行初步研究。大致是將各種相關(guān)參數(shù) 和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)建立正交關(guān)系得到最佳提取與標(biāo)記條件，并對(duì)其不同 器官組織的多態(tài)性以及相同時(shí)期不同組織的多態(tài)性 進(jìn)行初步研究，同時(shí)得出最佳提取與標(biāo)記方案。本設(shè)計(jì)利用目前 廣泛應(yīng)用的RAPD分子標(biāo)記檢測(cè) DNA多

10、態(tài)性的方法，利用隨機(jī)引 物（一般為8 10bp）通過(guò)PCR反應(yīng)非定點(diǎn)擴(kuò)增 DNA片段，然后 用凝膠電泳分析擴(kuò)增產(chǎn)物 DNA片段的多態(tài)性。擴(kuò)增片段多態(tài)性便反映了基因組相應(yīng)區(qū)域的DNA多態(tài)性。同一組織的分子標(biāo)記揭示來(lái)自DNA的變異，隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，對(duì)皮皮蝦的遺傳 育種、基因組作圖、基因定位、親緣關(guān)系鑒別、基因庫(kù)構(gòu)建、基 因克隆等方面具有重大意義。二、研究的基本內(nèi)容，擬解決的主要問(wèn)題1. 皮皮蝦組織中總 DNA的提取條件的進(jìn)一步優(yōu)化；2. 通過(guò)分子標(biāo)記，計(jì)算秦皇島皮皮蝦的基因分布特征；3. 皮皮蝦不同組織基因組特定區(qū)域DNA的多態(tài)性分析。三、研究步驟、方法及措施1. 實(shí)驗(yàn)材料1.1皮皮蝦1

11、.2主要試劑RAPD引物：百盛（SBS公司設(shè)計(jì)的 RAPD引物Taq酶10XPCR緩沖液MgCI2: 25mmol/LdNTP: 2.5mmoI/L2. 實(shí)驗(yàn)方法2.1從微量組織中提取總 DNA2.1.1取一小塊冰凍的組織（少于1mg，可用經(jīng)消毒的槍頭鉆?。?或13根帶有毛根的毛發(fā)（需先經(jīng) 90%、70%的乙醇和滅菌水 依次清洗，并剪去毛干部分），或15卩I血液，加入經(jīng)過(guò)高溫消毒的離心管中。離心管內(nèi)事先加入500卩l(xiāng) 5%的Chelex溶液。將樣品管在56C下放置1小時(shí)或更長(zhǎng)時(shí)間，直至組織樣品成粉末狀（不同組織所需時(shí)間各不相同）。在振蕩器上振蕩1015秒鐘。在95100C下煮1540分鐘。在振

12、蕩器上振蕩1015秒鐘。將樣品管在4 C下保存，進(jìn)行 PCR反應(yīng)之前再次離心，使Chelex顆粒沉淀。取上清液（110卩I）作為DNA模板。2.2RAPD分子標(biāo)記2.2.1在15ul反應(yīng)體系中，加入模板 DNA 1ul （30-50ng）; RAPD引 物 1ul （約 5pmol）; 10xPCR Buffer 1.5u| MgCl2 1ul; dNTP 1ul; Taq 酶0.5單位（U）;力口 ddH2O至15ul;混勻稍離心，加一滴（約 20 ul）礦物油。2.2.2在PCR儀中預(yù)變性94C 2分鐘，然后循環(huán)：94C 1分鐘， 36C 1分鐘，72C 1分鐘，共40輪循環(huán)。循環(huán)結(jié)束后，

13、72C 10分鐘，4C保存。在15ul PCR產(chǎn)物中加2ul上樣緩沖液（6x）于1.6%瓊脂糖膠 上電泳，穩(wěn)壓50-100V。電泳結(jié)束，溴化乙錠染色20分鐘。用凝膠成像儀觀察、拍照。四、研究工作進(jìn)度1-3周 查閱相關(guān)文獻(xiàn)資料，設(shè)計(jì)試驗(yàn)方案，寫(xiě)開(kāi)題報(bào)告，任務(wù)書(shū)和文獻(xiàn)綜述；4-8周配制試劑、從微量組織中提取總DNA;9-14周 RAPD分子標(biāo)記，觀察 DNA片段長(zhǎng)度，分析其多態(tài)性；15-16周 分析結(jié)果；撰寫(xiě)畢業(yè)論文；17周論文評(píng)閱、答辯。五、主要參考文獻(xiàn)1劉曉宇.RAPD分子標(biāo)記技術(shù)概述及應(yīng)用.應(yīng)用技術(shù)，2010, 1 1(9): 57-59.2 Toshiharu Hashizume, Iku

14、hiro Shimoto, Yoshiaki Harushi-ma,etal.Constructionflanatusmapforwatermelon(Citrul-lusMatsum)using random amplified polymorph: cDNA(RAPD) J. Euphytica, 1996, 90: 265-273.3 陳亮,王平盛，山口聰.應(yīng)用RAPD分子標(biāo)記鑒定野生茶樹(shù)種質(zhì)資源研究J.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2002, 10:23-27.4 任瑞文，盧強(qiáng),徐曉立.提高RAPD穩(wěn)定性的幾點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)與探討J.生物技術(shù).2001, 02: 7-10.5 韓斌，張林豐.現(xiàn)代生物化工中酶工程

15、技術(shù)研究與應(yīng)用.北京農(nóng)業(yè),2008, (33): 37-39.6 王偉繼；孔杰；董世瑞；欒生；王清印.中國(guó)明對(duì)蝦 AFLP分 子標(biāo)記遺傳連鎖圖譜的構(gòu)建J.動(dòng)物學(xué)報(bào).2006, 03: 465-470.7 宋銘晶,張知彬,徐來(lái)祥.動(dòng)物種群遺傳多態(tài)性研究中的PCR技術(shù)J.動(dòng)物學(xué)雜志.2003, 01: 293-296.8 李聯(lián)泰，安賢惠.幾種海水經(jīng)濟(jì)貝類(lèi)DNA提取方法探討J.淮海工學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版).2005, 04: 264-267.9 張寧，王鳳山.DNA提取方法進(jìn)展J.中國(guó)海洋藥物.2004, 02: 591-594.10 Rai SK ,Mukheljee AK. Developmen

16、t of an Efficient Method for Extracting Total DNA of Intestinal MicrofloraJ Animal Husbandry and Feed Science. 2011, 03: 55-59.11 陳子桂，容麗，宋微波.海洋尾絲蟲(chóng)(Uronema marinum)的 DNA微量提取研究J.動(dòng)物學(xué)報(bào).2001, S1: 7574-7575.12 王明森，王洪光，黃倢.水產(chǎn)動(dòng)物病毒性疾病樣品的采集和 檢測(cè)J.動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展.2009, 08: 710-715.13 T.W. Vahlenkamp, H.K. Enbergs, H. Mul

17、erExperimental and natural bornadisease virus infections: presence of viral RNA in cells of the peripheralblood .Journal of Chemical Technology & amp; Biotechnology, 2000, 5 (2): 112-116.14 李睿,魯志松,喬琰,姚漢超,于非非,楊旭.甲醛對(duì) DNA損傷的彗星實(shí)驗(yàn)研究J,實(shí)驗(yàn)生物學(xué)報(bào)，2004, 04: :1399-1400.15 王春琳，葉選怡,丁愛(ài)俠,母昌考.蝦蛄繁殖生物學(xué)與繁育技術(shù)研究J.海洋湖沼

18、通報(bào).2002, 03(5): 3-4.16 葉惠忠，陳道才，徐水祥.蝦蛄蛋白漿的制備及營(yíng)養(yǎng)價(jià)值分析J.浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào).2006, 01(2): 151.六、導(dǎo)師意見(jiàn)篇三：開(kāi)題報(bào)告理工學(xué)院畢業(yè)設(shè)計(jì)(論文)開(kāi)題報(bào)告題目：幾種食用真菌超氧化物岐化酶的提取及活性測(cè)定學(xué)生姓名：董建峰學(xué) 號(hào)： 08L0304102專(zhuān)業(yè)：生物科學(xué)指導(dǎo)教師：李敏2012 年 3 月 15 日1.結(jié)合畢業(yè)設(shè)計(jì)(論文)課題情況，根據(jù)所查閱的文獻(xiàn)資料，每人撰寫(xiě)2000字左右的文獻(xiàn)綜述：超氧化物歧化酶及應(yīng)用1超氧化物岐化酶的發(fā)現(xiàn)和分類(lèi)地位超氧物歧化酶(Superoxide Dismutase簡(jiǎn)稱 是一種 新型酶制劑。1938

19、年Mann和KeilinJ : 1首次從牛紅細(xì)胞中分 離出一種藍(lán)色的含銅蛋白質(zhì)(Hemocupreid),1969年，Mccord和Fridobvich 2發(fā)現(xiàn)其能催化超氧陰離子(O2)的歧化反應(yīng)而 將其命名為超氧化物歧化酶(SOD),并闡明了超氧陰離子自由基 的生物學(xué)意義，該酶是體內(nèi)一種重要的氧自由基清除劑，能夠平 衡機(jī)體的氧自由基，從而避免當(dāng)體內(nèi)超氧陰離子自由基濃度過(guò)高 時(shí)引起的不良反應(yīng)，同時(shí)SOD是一種很有用途的藥用酶。 有關(guān)SOD 的研究受到國(guó)內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注，涉及到化學(xué)、生物、醫(yī)藥、 日用化工、食品諸領(lǐng)域，是一個(gè)熱門(mén)研究課題。通過(guò)多年努力， 在SOD的基礎(chǔ)研究方面取得了巨大成果。在

20、SOD的制備、結(jié)構(gòu)功能研究及抗衰老、抗輻射、抗炎和抗癌及其作用機(jī)理、吸收機(jī)理 研究方面已取得很大進(jìn)展。CuZnSOD是真核生物酶，主要存在于真核細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)和葉綠體 的基質(zhì)中，動(dòng)物血肝、奶、植物葉、果等均含 CuZnSOD CuZnSOD 中一個(gè)酶分子的亞基含一分子Cu和一分子Zn,Cu位于酶的活性中心，酶的形狀呈一橢圓形狹長(zhǎng)的口袋 ,Cu位于“口袋”的底部，與一 分子水和4個(gè)組氨酸(His)殘基形成配位鍵,Zn則通過(guò)咪唑基與其中 之一的His殘基相連。3SOD類(lèi)型：超氧化物歧化酶按其所含金屬輔基不同可分為三種， 第一種是含銅(8)鋅(Zn)金屬輔基的稱(Cu .Zn- SOD),最為 常見(jiàn)的

21、一種酶，呈綠色，主要存在于機(jī)體細(xì)胞漿中；第二種是是 含錳（Mn）金屬輔基的稱（Mn SOD）,呈紫色，存在于真核細(xì) 胞的線粒體和原核細(xì)胞內(nèi)； 第三種是含鐵（Fe）金屬輔基的稱（Fe SOD），呈黃褐色，存在于原核細(xì)胞中。2 SOD的生產(chǎn)方式目前國(guó)內(nèi)已開(kāi)發(fā)的 SOD產(chǎn)品絕大分都是 Cu/Zn-SOD,它們最早是 從動(dòng)物的血、肝中分離提取的，動(dòng)物SOD的分離提取技術(shù)也較為成熟。人們相繼從牛、豬、羊、馬等動(dòng)物紅細(xì)胞、肌肉、肝臟組 織中分離和純化出 SOD。SOD常用的純化制備方法有離子交換 法、疏水色譜、凝膠過(guò)濾法和金屬螯和親和層析法等。提取方法 主要有以下幾個(gè)步驟：溶血液制備、選擇性熱變性、超濾濃

22、縮、 丙酮沉淀、柱層析、冷凍干燥 4。但是，由于這種方法不可避免地發(fā)生一些交叉感染，過(guò)敏性反應(yīng)等現(xiàn)象，開(kāi)發(fā)研究從植物中提取SOD就顯得尤為重要。我國(guó)近年來(lái)在植物SOD的研究領(lǐng)域有大量相關(guān)報(bào)道。許平5、袁藝6趙文芝7、余旭亞8等分別從大蒜、桑葉、沙棘、仙人掌中 提取SOD并進(jìn)行了相關(guān)研究，其提取方法主要有分步鹽析法、有 機(jī)溶劑沉淀法、層析柱法等。除了從動(dòng)植物中提取SOD外，選育SOD高產(chǎn)菌株進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)也是比較有價(jià)值的一種方法9, 10。由于天然SOD來(lái)源有限，且具有異體蛋白免疫原性，外源 SOD 不易被人體接受等缺陷，使之在應(yīng)用方面受到很大限制。SOD基因工程是廣開(kāi)酶源，降低成本和獲得無(wú)抗原性

23、的人源SOD的有效 途徑。與天然SOD相比，SOD的模擬物有著更顯著的優(yōu)點(diǎn)：首先是獲取和制備比天然 SOD要簡(jiǎn)單得多，其次，天然SOD作為一種 生物大分子，在進(jìn)入體內(nèi)時(shí)存在著進(jìn)入細(xì)胞能力弱、細(xì)胞滲透性 差、在血中半衰期短、不能口服、價(jià)格昂貴等缺點(diǎn)11,所以，目前，生物無(wú)機(jī)化學(xué)家們合成和表征了一系列含銅、錳、鐵等金 屬離子的小分子配合物來(lái)模擬SOD,期待將來(lái)能用小分子模擬化合物代替SOD應(yīng)用于臨床。:12其中研究最多的含銅絡(luò)合物是3, 5-二異丙基水楊酸銅:Cu(3, 5-DIPS),這是一種低分子量的親脂性絡(luò)合物，具有天然Cu/Zn-SOD樣活性，可以起到抗炎及減輕由鏈脲菌素誘導(dǎo)產(chǎn)生的糖尿病。

24、劉京萍等13 合成的鐵(H卜酪氨酸模擬SOD金屬酶，分子量比天然酶小得多，與 天然SOD活性差距較小，且毒性小，從而大大推進(jìn)了人工合成具 有分子質(zhì)量較小、穩(wěn)定性高、毒性較底、活性較高等優(yōu)點(diǎn)的SOD模擬物的研究工作。由于SOD催化的反應(yīng)的特異性，科學(xué)家們一直努力尋找適合其特性的簡(jiǎn)便、精確的測(cè)活方法，多年來(lái)相繼 建立的多種活性測(cè)定方法，一般分為兩大類(lèi)：直接法和間接法。而直接法往往需要操作復(fù)雜、價(jià)格昂貴的儀器，在一般實(shí)驗(yàn)室無(wú) 法使用，所以多采用間接法14。3 SOD作用機(jī)理SOD的作用底物是生物體內(nèi)產(chǎn)生的超氧陰離子自由基，作用機(jī)理是：SOD + O2- SOD- + 02 （還原型）（氧化型）SOD

25、 + 02 （還原型） -+2H+ SOD + H2O2 （氧化型）202- + 2H+ O2H2O2 CAT（ eatalase）H2O2 + 024 SOD的應(yīng)用人體內(nèi)超氧陰離子自由基如果得不到清除就會(huì)引起衰老自身免疫能力下降以及產(chǎn)生一系列病變。目前人們已經(jīng)開(kāi)始研究SOD的廣泛應(yīng)用。4.1在藥用方面在美國(guó)等工業(yè)發(fā)達(dá)國(guó)家SOD應(yīng)用廣泛。目前臨床上應(yīng)用主要是用于清除炎癥，抗病毒及增強(qiáng)免疫力等，特別是用于內(nèi)風(fēng)濕、關(guān) 節(jié)炎及放射性治療后引起的皮膚炎癥SOD在防止癌細(xì)胞擴(kuò)散和作為抗衰老的藥物已引起醫(yī)藥界人士的極大興趣，如即將獲得二類(lèi)新藥證書(shū)的國(guó)產(chǎn)注射用 SOD注射液的臨床應(yīng)用（包括抗炎、抗輻射 損傷

26、和抗缺血再灌損傷）。4.2在食品工業(yè)上的應(yīng)用目前,SOD及化學(xué)修飾SOD在食品工業(yè)中的應(yīng)用日益廣泛 ，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超 過(guò)了相應(yīng)的理論研究水平，SOD在食品工業(yè)中也有很多應(yīng)用。作為保健食品的功效因子或食品營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑：現(xiàn)已證實(shí)，該類(lèi)保健食品具有良好的抗衰老、抗疾病、抗輻射、抗癌、治艾滋病、防 治感冒、抗心血管病、抗疲勞和保健強(qiáng)身的效果"目前已有 添加有SOD的蛋黃醬、牛奶、可溶性咖啡、啤酒、白酒、果汁飲料、礦泉水、奶糖、酸牛乳、冷飲等類(lèi)型的保健食品面市。各種 劑型的SOD或復(fù)合型食品：現(xiàn)已有膠囊、片劑、口服液、脂質(zhì)體、 顆粒劑等形式的SOD保健食品問(wèn)世。用作抗氧化劑：與其它抗氧 劑一樣，SOD可作為罐頭食品、果汁、啤酒等抗氧劑、防止過(guò)氧 化酶引起的食品變質(zhì)及腐敗現(xiàn)象此外，還可作為水果、蔬菜良好的保鮮劑。加工成保健食品：以富含SOD原料未經(jīng)提取，直接修飾加 工制成保健食品， 如大蒜飲料、刺梨汁、余甘子粉 （汁）等,這也是一種新的發(fā)展趨勢(shì)。134.3作為化妝品的添加劑根據(jù)衰老的