制藥工藝學(xué)復(fù)習(xí)資料

1、第一章生物藥物概述1我國藥物的三大藥源指的是化學(xué)藥物、生物藥物、中草藥 。2、現(xiàn)代生物藥物已形成四大類型，包括基因工程藥物、基因藥物、天然生物藥物、醫(yī)學(xué)生物制品 。一、藥物 、生物藥物、生物制品、藥物：用于預(yù)防、治療或診斷疾病或調(diào)節(jié)機(jī)體生理功能、促進(jìn)機(jī)體康復(fù)保健的物質(zhì)，有4大類：預(yù)防藥、治療藥、診斷藥和康復(fù)保健藥。生物藥物：是利用生物體、生物組織、細(xì)胞或其成分，綜合應(yīng)用生物與醫(yī)學(xué)、生物化學(xué)與分子生物學(xué)、微生物學(xué)與免疫學(xué)、物理化學(xué)與工程學(xué)和藥學(xué)的原理與方法進(jìn)行加工、制造而成的一大類預(yù)防、診斷、治療和康復(fù)保健的制品。生物制品：是應(yīng)用普通的或以基因工程、細(xì)胞工程、蛋白質(zhì)工程、發(fā)酵工程等生物技術(shù)獲得的

2、微生物、細(xì)胞及各種動(dòng)物和人源的組織和液體等生物材料制備的，用于人類疾病預(yù)防、 治療和診斷的藥品。生化藥物：指從生物體（動(dòng)物、植物、和微生物中獲得的天然存在的生化活性物質(zhì)（或者合成、半合成的天然物質(zhì)類似物）?；蛑亟M藥物與基因藥物有什么區(qū)別？基因重組藥物：應(yīng)用基因工程和蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造的重組活性多肽、蛋白質(zhì)及其修飾物。基因藥物：以基因物質(zhì) （RNA或DNA及其衍生物）作為治療的物質(zhì)基礎(chǔ)， 包括基因治療用 的重組目的DNA片段、重組疫苗、反義藥物和核酶等。生物藥物有那些作用特點(diǎn)？藥理學(xué)特性：1活性強(qiáng)：體內(nèi)存在的天然活性物質(zhì)。2、治療針對(duì)性強(qiáng)，基于生理生化機(jī)制。3、毒副作用一般較少，營養(yǎng)價(jià)值高。第

3、二章生物制藥工藝技術(shù)基礎(chǔ)1生化活性物質(zhì)濃縮可采用的方法有鹽析濃縮、有機(jī)溶劑沉淀濃縮、葡聚糖凝聚濃縮、 聚乙二醇濃縮、超濾濃縮2、 生化活性物質(zhì)常用的干燥方法有、減壓干燥等3、 冷凍干燥是在 低溫 、低壓條件下，利用水的 化學(xué)性能而進(jìn)行的一種干燥方法。 4、固定化酶常采用的方法可分為吸附法、 包埋法、 共價(jià)結(jié)合法和交聯(lián)法四大類1由于目的蛋白質(zhì)和雜蛋白分子量差別較大，擬根據(jù)分子量大小分離純化并獲得目的蛋白質(zhì)，可采用（C ）A、SDS凝膠電泳B、鹽析法C、凝膠過濾D、吸附層析2、分離純化早期，由于提取液中成分復(fù)雜，目的物濃度稀，因而易采用（A ）A、分離量大分辨率低的方法B、分離量小分辨率低的方法C

4、、分離量小分辨率高的方法D、各種方法都試驗(yàn)一下，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果確定（重點(diǎn)）簡述生物活性物質(zhì)分離純化的主要原理。生物大分子分離純化的主要原理是：1）根據(jù)分子形狀和大小不同進(jìn)行分離，如差速離心與超離心、膜分離、凝膠過濾等；2）根據(jù)分子電離性質(zhì)（帶電性）差異進(jìn)行分離，如離子交換法、電泳法、等電聚焦法；3）根據(jù)分子極性大小及溶解度不同進(jìn)行分離，如溶劑提取法、鹽析法、等電點(diǎn)沉淀及有機(jī) 溶劑分級(jí)沉淀等；4）根據(jù)物質(zhì)吸附性質(zhì)的不同進(jìn)行分離，如選擇性吸附與吸附層析等；5）根據(jù)配體特異性進(jìn)行分離，如親和層析法等。第三章生物材料的預(yù)處理、細(xì)胞破碎和液-固分離1細(xì)胞培養(yǎng)液的預(yù)處理方法。（1）加入凝聚劑（2）加入絮凝劑

5、（3 ）變性作用（4）吸附（5）加各種沉淀劑沉淀（重點(diǎn)）2凝聚作用和絮凝作用的原理各是什么？凝聚作用：指在某些電解質(zhì)作用下，使膠體粒子的擴(kuò)散雙電層的排斥電位降低，破壞了膠體系統(tǒng)的 分散狀態(tài)，而使膠體粒子聚集的過程。絮凝作用：當(dāng)往膠體懸浮液中加入絮凝劑時(shí)， 膠粒可強(qiáng)烈吸附在絮凝劑表面的功能團(tuán)上， 而且一個(gè) 高分子聚合物的許多鏈節(jié)分別吸附在不同的顆粒的表面上，形成架橋聯(lián)接，形成粗大的絮凝團(tuán)沉淀出來，有助于過濾。3常用的細(xì)胞破碎方法有哪些？一、機(jī)械法 1、勻漿法 2、珠磨法 3、超聲波二、物理法 1.干燥 2. 凍融 3.滲透壓沖擊三、化學(xué)法 1.化學(xué)試劑處理2. 制成丙酮粉四、生物法 1.酶解法

6、2.自溶4. 固液分離方法有哪些？一、 過濾常規(guī)錯(cuò)流二、 離心分離過濾式離心沉降式離心第四章萃取法1、（ 1）.萃取與反萃取萃取：料液與萃取劑接觸后，料液中的溶質(zhì)向萃取劑轉(zhuǎn)移的過程 萃取液萃余液反萃?。簩⑤腿∫号c反萃取劑（含無機(jī)酸或堿的水溶液或水）相接觸，使某種被萃入有機(jī)相的溶質(zhì)轉(zhuǎn)入水相的過程。（2）萃取因素也稱萃取比， 指被萃取溶質(zhì)進(jìn)入萃取相的總量與該溶質(zhì)在萃余相中總量之比。 通常以E表示。萃取相中溶質(zhì)總量MV1V1EK表萃余相中溶質(zhì)總量M 2V 2V 2萃取率：一種萃取劑對(duì)某種溶質(zhì)的萃取能力（工業(yè)上用）分離因素：料液中的溶質(zhì)并非是單一的組分，除了所需產(chǎn)物（A ）外，還存在有雜質(zhì)（B）。分離

7、因素常用 表示，其定義為：在同一萃取體系內(nèi)兩種溶質(zhì)在同樣條件下分配系數(shù)的 比值C A 1 / C B 1K ABC A 2 / C B 2Kb值越大（或越小）分離效果越好，越接近于1，分離效果越差2、萃取的方法有哪些？（一）單級(jí)萃?。ǘ┒嗉?jí)錯(cuò)流萃?。ㄈ┒嗉?jí)逆流萃取3、影響溶劑萃取的因素？一、乳化和破乳化二、pH的影響三、溫度和萃取時(shí)間的影響四、鹽析作用的影響五、溶劑種類、用量及萃取方式的選擇4、萃取的步驟有哪些？一、混合二、分離三、溶劑回收（理解）5、雙水相萃取、反膠束萃取、超臨界流體萃取基本原理及各自的優(yōu)點(diǎn)？ 雙水相萃取原理：利用生物物質(zhì)在互不相溶的兩水相間分配系數(shù)的差異進(jìn)行分離的過程反

8、膠束萃取原理：表面活性劑溶于非極性溶劑中，并使其濃度超過臨界膠束濃度，便會(huì)在有機(jī)溶劑內(nèi)形成 聚集體，非極性基團(tuán)在外，極性基團(tuán)則排列在內(nèi)，形成一個(gè)極性核，此極性核具有溶解 極性物質(zhì)的能力。當(dāng)含有此種反膠束的有機(jī)溶劑與蛋白質(zhì)的水溶液接觸后，蛋白質(zhì)及其 他親水性物質(zhì)能夠溶于極性核內(nèi)部的水中，由于周圍的水層和極性基團(tuán)的保護(hù)，蛋白質(zhì) 不與有機(jī)溶劑接觸，從而不會(huì)造成失活。超臨界萃取原理：當(dāng)氣體物質(zhì)處于其臨界溫度 （Tc）和臨界壓力（Pc）以上時(shí)，不會(huì)凝縮為液體，只是密度增大， 具有許多特殊的物理化學(xué)性質(zhì)：流體的密度接近于液體的密度，粘度接近于氣體；在臨界點(diǎn)附近，超臨界流體的溶解度對(duì)溫度和壓力的變化非常敏感

9、；（重點(diǎn)）6、什么是流體，利用 CO2作為超臨界萃取的優(yōu)點(diǎn)答：（1）密度接近液體，而黏度接近氣體（具有氣體擴(kuò)散性能）的物質(zhì)，稱為超臨界流體。（2）利用CO2作為萃取劑主要有以下優(yōu)點(diǎn)：（1）二氧化碳超臨界溫度（Tc=31.06 C ）是所有溶劑中最接近室溫的， 可以在3540 C的條件 下進(jìn)行提取，防止熱敏性物質(zhì)的變質(zhì)和揮發(fā)性物質(zhì)的逸散。(2) 在C02氣體籠罩下進(jìn)行萃取，萃取過程中不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；又由于完全隔絕了空氣中的氧 ， 因此，萃取物不會(huì)因氧化或化學(xué)變化而變質(zhì)。(3) 由于C02無味、無臭、無毒、不可燃、價(jià)格便宜、純度高、容易獲得，使用相對(duì)安全。(4) CO2是較容易提純與分離的氣體，因

10、此萃取物幾乎無溶劑殘留，也避免了溶劑對(duì)人體的毒 害和對(duì)環(huán)境的污染。(5) C02擴(kuò)散系數(shù)大而粘度小，大大節(jié)省了萃取時(shí)間，萃取效率高。第五章固相析出分離1固相析出法主要包括鹽析 ，有機(jī)溶劑沉淀法，親和沉淀法 ，結(jié)晶法及其它多種沉淀方法等。2按照一般的習(xí)慣，析出物為晶體時(shí)稱為結(jié)晶法，析出物為無定形固體則稱為沉淀法 。3. 影響鹽析的因素有：無機(jī)鹽的種類、溶質(zhì)種類的影響、蛋白質(zhì)濃度的影響、溫度的影響、 PH的影響 。4. 結(jié)晶包括三個(gè)過程：(1) 形成過飽和溶液；(2)晶核形成；(3) 晶體生長。5. 影晶體大小的主要因素，歸納起來與過飽和度、溫度、攪拌速度、晶種等直接有關(guān)。6晶體的質(zhì)量主要是指 晶

11、體的大小、形狀 和 純度 等3個(gè)方面1、 在一定的pH和溫度下改變離子強(qiáng)度(鹽濃度)進(jìn)行鹽析，稱作(A )A. KS鹽析法 B 鹽析法C .重復(fù)鹽析法D .分部鹽析法2、鹽析法與有機(jī)溶劑沉淀法比較，其優(yōu)點(diǎn)是( B )A.分辨率高B.變性作用小C.雜質(zhì)易除D.沉淀易分離3、 將配基與可溶性的載體偶聯(lián)后形成載體-配基復(fù)合物，該復(fù)合物可選擇性地與蛋白質(zhì)結(jié)合，在一定條件下沉淀出來，此方法稱為(A )A親和沉淀B 聚合物沉淀 C 金屬離子沉淀D 鹽析沉淀4、 影響晶體大小的主要因素與下列哪些因素?zé)o關(guān)(D )A .過飽和度B .溫度 C.攪拌速度D .飽和度1. 沉淀與結(jié)晶有何不同？常用的沉淀方法包括哪些

12、？ 結(jié)晶法：析出物為晶體。沉淀法：析出物為無定形固體。常用的沉淀法包括：結(jié)晶法、有機(jī)溶劑沉淀法、等電點(diǎn)沉淀法、成鹽沉淀法、親和沉淀法、 高分子聚合物沉淀法、(重點(diǎn))2 何謂鹽析？其原理是什么？常用的鹽析方法有哪些？影響鹽析的主要因素有哪 些？鹽析操作時(shí)常用的鹽是什么？鹽析法是利用各種生物分子在濃鹽溶液中溶解度的差異，通過向溶液中引入一定數(shù)量的中性鹽，使目的物或雜蛋白以沉淀析出，達(dá)到純化目的的方法。鹽析作用原理破壞雙電層：在高鹽溶液中，帶大量電荷的鹽離子能中和蛋白質(zhì)表面的電荷，使蛋白質(zhì)分子之間電排斥作用相互減弱而能相互聚集起來。破壞水化層：中性鹽的親水性比蛋白質(zhì)大，鹽離子在水中發(fā)生水化而使蛋白質(zhì)

13、脫去了水化膜，暴露出疏水區(qū)域，由于疏水區(qū)域的相互作用，使其沉淀。兩種類型：在一定的pH和溫度下改變離子強(qiáng)度（鹽濃度）進(jìn)行鹽析，稱作Ks鹽析法。由于蛋白質(zhì)對(duì)離子強(qiáng)度的變化非常敏感，易產(chǎn)生共沉淀現(xiàn)象，因此常用于提取液的前處理。在一定離子強(qiáng)度下僅改變 pH和溫度進(jìn)行鹽析，稱作卩鹽析法。 由于溶質(zhì)溶解度變化緩慢，且變化幅度小，因此分辨率更高，后期分離（結(jié)晶） 影響鹽析的因素1. 無機(jī)鹽的種類鹽析作用要強(qiáng)鹽析用鹽需有較大的溶解度鹽析用鹽必須是惰性的來源豐富、經(jīng)濟(jì)2. 溶質(zhì)（蛋白質(zhì)等）種類： Ks、B3. 溶質(zhì)（蛋白質(zhì)等）濃度： 23%4. 溫度：5. pH :鹽析中常用的鹽：硫酸銨、硫酸鈉、磷酸鉀、磷酸

14、鈉3. 有機(jī)溶劑沉淀法的主要原理是什么？影響有機(jī)溶劑沉析的主要因素有哪些？1、降低了介質(zhì)的介電常數(shù)，使溶質(zhì)分子之間的靜電引力增加，聚集形成沉淀。2、 水溶性有機(jī)溶劑本身的水合作用降低了自由水的濃度，壓縮了親水溶質(zhì)分子表面原有 水化層的厚度，降低了它的親水性，導(dǎo)致脫水凝集。1. 有機(jī)溶劑種類能與水無限混溶介電常數(shù)小、沉淀強(qiáng)變性小毒性小，揮發(fā)性適中2. pH的影響3. 溫度4. 無機(jī)鹽的含量5. 某些金屬離子的助沉淀作用6. 樣品濃度4. 什么是結(jié)晶？結(jié)晶過程包括哪些？在何種條件下，溶液中才有晶體析出？結(jié)晶是溶液中的溶質(zhì)在一定條件下因分子有規(guī)則的排列而結(jié)合成晶體。結(jié)晶過程：形成過飽和溶液；晶核形成

15、；晶體生長溶液達(dá)到過飽和狀態(tài)是結(jié)晶的前提；過飽和度是結(jié)晶的推動(dòng)力。5. 提高晶體質(zhì)量的途徑晶體質(zhì)量包括三個(gè)方面的內(nèi)容：晶體大小、形狀和純度1）過飽和度過飽和度值應(yīng)大至使結(jié)晶操作控制在亞穩(wěn)區(qū)內(nèi)，又保持較高的晶體生長速率，使結(jié)晶咼產(chǎn)而優(yōu)質(zhì)。2）溫度（緩慢冷卻）快速冷卻或蒸發(fā) t大量細(xì)小的晶體 ；緩慢冷卻或蒸發(fā)t大而均勻的晶體3）攪拌速度：適當(dāng)，不宜太快4）晶種：誘導(dǎo)結(jié)晶，控制晶體形狀大小均勻度2、晶體的形狀：晶體生長速度、過飽和度、結(jié)晶溫度、溶劑、PH。pH : pH的變化，可以改變?nèi)苜|(zhì)分子的帶電性質(zhì)，是影響溶質(zhì)分子溶解度的一個(gè)重要因素。一般結(jié)晶液所選用的 pH與沉淀大致相同。3、晶體的純度：重結(jié)

16、晶晶體用合適溶劑溶解后再次結(jié)晶，提高純度用于生物物質(zhì)重結(jié)晶的溶劑一般有蒸餾水、丙酮、石油醚、乙酸乙酯、低級(jí)醇等。第六章吸附分離法2、 常用的吸附劑有活性炭 、 硅膠 和 白陶土 等。3、大孔網(wǎng)狀聚合物吸附劑按骨架的極性強(qiáng)弱，可分為非極性、中等極性、極性和強(qiáng)極性吸附劑四類。1用大網(wǎng)格高聚物吸附劑吸附的弱酸性物質(zhì)，一般用下列哪種溶液洗脫（D）A.水 B.高鹽 C.低pH D.高pH2、類似物容易吸附類似物”的原則，一般極性吸附劑適宜于從何種溶劑中吸附極性物質(zhì)（B）C.水D.溶劑（A）D.三氯甲烷A.極性溶劑B.非極性溶劑3、活性炭在下列哪種溶劑中吸附能力最強(qiáng)？A.水 B.甲醇C.乙醇4、關(guān)于大孔樹

17、脂洗脫條件的說法，錯(cuò)誤的是：（A）A .最常用的是以高級(jí)醇、酮或其水溶液解吸。B. 對(duì)弱酸性物質(zhì)可用堿來解吸。C. 對(duì)弱堿性物質(zhì)可用酸來解吸。D. 如吸附系在高濃度鹽類溶液中進(jìn)行時(shí)，則常常僅用水洗就能解吸下來。 第七章凝膠層析1葡聚糖凝膠的孔徑大小取決于交聯(lián)度，其越小，凝膠孔徑越 大而瓊脂糖凝膠的孔徑卻依賴于瓊脂糖的濃度。2、瓊脂糖凝膠的一個(gè)特征是分離的分子量范圍非常大，其分離范圍隨著凝膠濃度上升而 上升，顆粒強(qiáng)度隨濃度上升而上升。1凝膠層析中，有時(shí)溶質(zhì)的Kd>1，其原因是（B）A.凝膠排斥B.凝膠吸附C.柱床過長D.流速過低2、 凝膠層析中，有時(shí)小分子溶質(zhì)的Kd<1，其原因是（A

18、）A.水合作用B.凝膠吸附C.柱床過長D.流速過低3、在凝膠層析中樣品各組分最先淋出的是（ A）A.分子量最大的B.體積最大的C.分子量最小的D.體積最小的4、為了進(jìn)一步檢查凝膠柱的質(zhì)量，通常用一種大分子的有色物質(zhì)溶液過柱，常見的檢查物 質(zhì)為藍(lán)色葡聚糖，下面不屬于它的作用的是（ C）A.觀察柱床有無溝流B.觀察色帶是否平整C.測量流速D.測量層析柱的外水體積第八章離子交換法1、離子交換劑由載體、功能基團(tuán)和 平衡離子組成。平衡離子帶 正電為陽離子交換樹脂，平衡離子帶負(fù)電稱陰離子交換樹脂。2、寫出下列離子交換劑類型：732 強(qiáng)酸型陽離子交換樹脂 , 724 弱酸型陽離子樹脂，7仃強(qiáng)堿型陰離子交換樹

19、脂，CM-C羧甲基纖維素、弱酸型陽離子交換纖維素 QEAE-C二乙胺基乙基纖維素、強(qiáng)堿型陰離子交換樹脂 ，PBE94 堿性陰離子交換齊U。3、 色譜聚焦（chromatofocusing ）是一種高分辨的新型的蛋白質(zhì)純化技術(shù)。它是根據(jù)蛋白質(zhì)等電點(diǎn)，結(jié)合 離子交換系數(shù),能分離幾百毫克蛋白質(zhì)樣品，洗脫峰被聚焦效應(yīng)濃縮，分辨率很高，操作簡單。4、 在采用多緩沖陰離子交換劑作固定相的離子交換聚焦色譜過程中，當(dāng)柱中某位點(diǎn)之pH值下降到蛋白質(zhì)組分 等電點(diǎn)值以下時(shí)，它因帶 正電 電荷而 下移 ,如果柱中有兩種蛋白組分，pl值較 大 者會(huì)超過另一組分， 移動(dòng)至柱下部pH較大 的位點(diǎn) 進(jìn)行聚焦 5、請(qǐng)以CM-C

20、為例說明離子交換纖維素分離純化蛋白質(zhì)時(shí)的洗脫方法有哪些？并說出各種 方法的洗脫原理。（1） 洗脫方法：洗脫緩和。升高環(huán)境的pH、降低pH或是增加離子強(qiáng)度都能將被吸附 物質(zhì)洗脫下來。+ H20第九章親和純化技術(shù)1親和層析洗脫方法有2、親和力大小除由親和對(duì)本身的 包括親和吸附劑的微環(huán)境非專一性洗脫專一性洗脫和配體的濃度、載體孔徑, 特殊洗脫,專 性洗脫。解離常數(shù)決定外，還受許多因素的影響，其中、載體空、配基結(jié)構(gòu)以及配基、等。（2）洗脫原理：3、 親和層析中常用作分離酶的配基有底物的類似物, 抑制劑,和 輔因子。4、 親和層析中非專一性吸附有離子效應(yīng)、疏水基團(tuán)、復(fù)合親和力。5、 親和過濾指的是將親和層析禾廿 膜過濾結(jié)合運(yùn)用，它包括親和錯(cuò)流過濾和親