大學-細胞工程試題及答案

1、細胞模擬試題及答案填空（每空一分，共25分）1. 實驗室的物理防護是由隔離的設備、實驗室的設計驗實施等三個方面組成，根據其密封程度的不同，分為P1、P2、P3 P4四個生物安全等級。典型的 P4實驗室由更衣區(qū)、過濾區(qū)、緩沖區(qū)、消毒區(qū)、核心區(qū)組成。2. 細胞系是原代培養(yǎng)經初步純化獲得的以一種細胞為主的、能在體外長期生存的不均一細胞群體。3. 細胞株是指從一個經過生物學鑒定的細胞系用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法，由單細胞增殖形成的細胞群。自穩(wěn)性。4. 干細胞是一類具有自我更新和分化潛能的細胞。干細胞的增殖特性為緩慢性和5. 培養(yǎng)細胞的生長特點為貼附、接觸抑制和密度抑制。6. 植物細胞培養(yǎng)的原理是

2、基于動物細胞的全能性。7.植物細胞懸浮培養(yǎng)的方法為分批培養(yǎng)法、連續(xù)培養(yǎng)法和半連續(xù)培養(yǎng)。8.植物組織培養(yǎng)中培養(yǎng)材料的消毒過程中,消毒的基本原則是既要殺死附著其上的微生物又不損傷材料。9.細胞生長測定的一般方法為：細胞計數、測定細胞密實體積、細胞鮮重或干重。10.體外培養(yǎng)的細胞根據其生長方式主要分為貼附型細胞和非貼附型細胞。11.人工種子的組分包括胚狀體、人工胚乳和人工種皮。12. 細胞融合主要經過了兩原生質體或細胞互相靠近、細胞橋形成、胞質滲透、細胞核融合幾個步驟。其中細胞橋形成是最關鍵的一步。13. 花粉單倍體植株的鑒定方法有形態(tài)鑒定、細胞學鑒定、雜交鑒定、分子標記鑒定。14. 胚胎工程主要是

3、對哺乳類動物的胚胎進行某種人為的工程技術操作，然后讓它繼續(xù)發(fā)育,獲得人們所需要的成體動物。15. 人工誘導單倍體形成的方法包括：遠緣雜交、延遲授粉、核置換、射線照射、花藥培養(yǎng)等。單項選擇題（每題1分，共10分）1. 人參皂甙粉是人參中重要的藥用成分，以前只能從人參中提取產量極低，因而價格昂貴。目前人參皂甙粉可以通過下列哪項技術迅速大量獲?。˙）A .基因工程B.植物組織培養(yǎng)C .植物體細胞雜交D .發(fā)酵工程2. 下列有關動物細胞培養(yǎng)的敘述不正確的是（ C）通過動物細胞培養(yǎng)可獲得大量的細胞分泌蛋白動物細胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶處理，以使細胞分散細胞癌變都發(fā)生于原代培養(yǎng)過程中3.目前使用的或冷凍保存的

4、正常細胞通常為 10 代以內的，以保持其正常核型盡管各種合成培養(yǎng)基給動物細胞培養(yǎng)帶來極大方便， 但許多實驗表明， 單純使用合成培養(yǎng)基細胞的貼壁增殖效果常常不理想。因此，在使用時通常仍然需要加入一定量的(C)A.平衡鹽溶液B. 瓊脂糖C. 動物血清D. 甘露醇4. 制備人工種子的關鍵是控制(A)A. 胚狀體的同步發(fā)育B.人工種皮的同步發(fā)育C. 胚狀體的單獨發(fā)育D.人工種皮的單獨發(fā)育5.細胞融合中使用（C）方法可以在顯微鏡下直接定向誘導細胞融合。A. 仙臺病毒法B.PEG誘導C. 電融合誘導法D.高Ca+和pH誘導法6. 中胚層來源的細胞在體外培養(yǎng)時一般表現為哪種形態(tài)（A）A. 成纖維細胞型細胞B

5、.多形型細胞C. 上皮型細胞D.游走型細胞7. 在每一代貼附生長細胞的生長過程中,哪一個時期的細胞數隨時間變化成倍增長 ,活力最佳 ,最適合進行實驗研究（ D）A. 穩(wěn)定期B. 衰亡期C.潛伏期D.對數生長期8. 以下哪種方法或技術適合進行動物細胞的大規(guī)模培養(yǎng)？（D）A. 懸滴培養(yǎng)法B.培養(yǎng)瓶培養(yǎng)法C.旋轉管培養(yǎng)法D.多孔載體培養(yǎng)技術9. 單克隆抗體制備選擇親本時應選擇（A)A. 骨髓瘤細胞系和免疫動物屬于同一品系B. 骨髓瘤細胞系和免疫動物屬于不同品系C. B淋巴細胞和骨髓瘤屬細胞屬于不同品系D. B 淋巴細胞與骨髓瘤細胞無親緣關系10. 下列關于哺乳動物胚胎發(fā)育和胚胎工程的敘述，正確的是（

6、D）A卵裂期胚胎中細胞數目和有機物總量在不斷增加B胚胎分割時需將原腸胚的內細胞團均等分割C胚胎干細胞具有細胞核大、核仁小和蛋白質合成旺盛等特點D胚胎干細胞是一類未分化細胞，可從早期胚胎中分離獲取多項選擇（每題 3份，共 15分）1. 由外植體或單個細胞形成愈傷組織一般要經過三個步驟（ABD）A.啟動期B.生長期C.分裂期D.分化期2. 植物單細胞培養(yǎng)方法有（ ABCD）A. 平板培養(yǎng)法B.看護培養(yǎng)與飼養(yǎng)層培養(yǎng)法C. 液體淺層靜置培養(yǎng)法D.細胞懸浮培養(yǎng)法3. 動物細胞培養(yǎng)室，無論細胞種類和供體的年齡如何，在細胞的全生長過程中大致都要經過三個主要階段（ ABC）A. 原代培養(yǎng)期B.傳代期C. 衰退

7、期D.穩(wěn)定期4. 干細胞從所具有的分化功能上分為（ABC)A. 單能干細胞B.多能干細胞C. 全能干細胞D.胚胎干細胞5. 動物多倍體育種的方法有（ ABC）A. 溫度休克法B.水靜壓法C. 細胞松弛素 BD.秋水仙素四、簡答題（共 35分）1. 二級生物安全適用于處理什么材料，具體要求有哪些（ 8 分）答：適用于：（1）來自于來自于靈長類動物的材料和細胞系（2） 接觸過靈長類的病毒或被其轉化了的細胞系（3） 含有支原體的細胞系。要求：1）2）所有污染物都應放入裝滿蒸餾水的防漏的不銹鋼桶中；3）大的塑料器皿蓋緊后放入高壓消毒袋中進行高壓消毒；所有可能產生氣溶膠的操作都應使用垂直層流生物安全小室

8、；在處理或沖洗用過的器皿前，應先進行高壓消毒； 進行操作時要帶乳膠手套。2. 原生質體分離的方法有哪些，各有何優(yōu)缺點（ 6 分）答：（1）機械法優(yōu)點：可避免酶制劑對原生質體的破壞。缺點：獲得完整原生質體的數量少，使用此法的植物種類有限。2）酶解法優(yōu)點：可獲得大量原生質體，條件溫和，原生質體完整性好，幾乎所有植物都可用此法。缺點：影響原生質體的活力。3. 植物組織培養(yǎng)的基本步驟（ 6 分）答：（1）培養(yǎng)材料的采集2）培養(yǎng)材料的消毒3）制備外植體接種和培養(yǎng) 根的誘導 組織苗的練苗移栽4. 細胞系和細胞株的鑒定指標及方法（ 8 分）答：鑒定指標：（ 1）純度：分析以何種細胞為主， 所占比例為多少，

9、混雜有哪些其他細胞。2）細胞生物學特征：細胞形態(tài)、結構、染色體組型、生長曲線、分裂指數、倍增時間是否與來源細胞一致。3）穩(wěn)定性：傳代過程中細胞學特征是否發(fā)生變化。4）污染情況：檢查是否有微生物或其他細胞系的污染。鑒定方法：細胞形態(tài)學觀察； 繪制生長曲線， 計算分裂指數； 染色體組型和帶型分析；同工酶譜檢測4. 植物細胞固定化的方法及特點答：吸附法：利用固體吸附劑將細胞吸附在其表面而使細胞固定化的方法。包埋法：將細胞包埋在多孔載體內部而制成固定化細胞的方法。特點：（1）5）由于載體的保護作用，減小剪切力作用，提高細胞存活率和穩(wěn)定性。細胞束縛在一定空間內，不易聚集成團，促進代謝產物的分散?？珊啽愕卦诓煌囵B(yǎng)階段更換不同的培養(yǎng)液。固定化植物細胞可連續(xù)反復使用，可縮短生產周期，提高生產效率。容易與培養(yǎng)液分離，有利于產品的分離純化，提高產品的質量。五、綜合分析題（15 分）植物單細胞培養(yǎng)的程序及各步中應注意的事項答：1. 建立細胞株1） 材料準備a. 確定植物種類品種b. 選擇單細胞或愈傷組織或葉肉、下胚軸等c. 借助酶處理：酶的種類、濃度、處理時間都對材料有一定影響2） 制備細胞懸浮液a. 培養(yǎng)基成分篩選b.懸浮培養(yǎng)，振蕩次數為8090次/min c. 用 200300目鋼網過濾盒離心沉降2. 選擇細胞株平板篩選a.