高效液相色譜法流動相配制標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

1、流動相配制操作規(guī)程1 目的 明確高效液相色譜法流動相的配制過程，保證操作過程的規(guī)范性。 2 適用范圍 適用于實驗室高效液相色譜法流動相的配制。 3 職責(zé) 實驗室分析人員負(fù)責(zé)按本規(guī)程進(jìn)行操作。 4 定義 無。 5 內(nèi)容 5.1 流動相批號的編寫原則 流動相的批號按配制日期編制。如批號20150609代表2015年06月09日配制的流動相。 5.2流動相的配制 5.2.1含水流動相和不含水流動相的配制所用量筒應(yīng)區(qū)分開。配制不含水的有機(jī)溶劑類流動相所用量筒必須是干燥的，不得有水。 5.2.2根據(jù)流動相配制規(guī)定的體積比例，在清潔的帶塞量筒中分別倒入相應(yīng)的溶劑；若該流動相需加入適量酸或堿，則戴上一次性手

2、套，用專用注射器吸取規(guī)定體積的酸或堿，加入量筒；蓋上塞子，搖勻，振搖過程中應(yīng)注意排氣。 5.2.3含鹽的緩沖液類流動相的配制應(yīng)根據(jù)流動相配制規(guī)定的體積比例，分別稱取規(guī)定重量的鹽于清潔的帶塞量筒中，加入適量純水，振搖；待固體完全溶解后，再加純水至規(guī)定刻度，蓋上塞子，搖勻。 5.2.4若該流動相對pH值有特殊要求，根據(jù)流動相配制規(guī)定的體積比例，用酸/堿調(diào)節(jié)pH值，用pH計測定，直至流動相的pH值在規(guī)定范圍內(nèi)。 5.3 流動相的抽濾 5.3.1 含水流動相和不含水流動相的抽濾裝置應(yīng)區(qū)分開。抽濾不含水的有機(jī)溶劑類流動相所用裝置必須是干燥的，不得有水。 5.3.2抽濾裝置準(zhǔn)備：將過濾器套在三角瓶上，用鑷

3、子夾取0.45um的水系或有機(jī)濾膜一張，放在過濾器上（濾膜應(yīng)將濾孔完全覆蓋?。辉賹⒘勘瓑涸跒V膜上，量杯邊緣和過濾器的邊緣對齊；用夾子將過濾器和量杯的邊緣固定在一起（注意調(diào)整夾子的位置，不得將抽濾嘴擋住）；將抽濾軟管口潤濕后，套在抽濾嘴上。 5.3.3 抽濾：將少量配制好的流動相倒入量杯，觀察是否有漏液。若有漏液現(xiàn)象，須重新固定過濾器和量杯。若無漏液現(xiàn)象，則繼續(xù)往量杯中倒入流動相（注意：不要超過最大刻度），開啟真空泵進(jìn)行抽濾。抽濾結(jié)束時，先將抽濾軟管拔下，再關(guān)閉真空泵。 5.4 流動相的儲存及標(biāo)識 將適量抽濾好的流動相倒入流動相專用儲液瓶，潤洗一次后倒入廢液瓶，再將剩余流動相全部倒入專用儲液瓶

4、；填寫流動相標(biāo)簽，并將標(biāo)簽貼在儲液瓶上。流動相標(biāo)簽見附錄1。更換流動相時應(yīng)及時更新流動相標(biāo)簽。 5.5 流動相效期流動相類別效期純甲醇3個月純乙腈1個月5%的甲醇/乙腈水溶液15天緩沖鹽溶液3天純化水1天甲醇與緩沖鹽混合溶液7天乙腈與緩沖鹽混合溶液7天例如：純甲醇使用日期是2015年06月11日，有效期至2015年09月10日；甲醇與緩沖鹽混合溶液配制日期是2015年03月10日，有效期至2015年03月16日。 5.6 配制流動相用量筒和抽濾器具的清潔 5.6.1配制含水流動相用量筒和抽濾器具的清潔：先用自來水清洗配制用量筒及抽濾所用的三角瓶、過濾器和量杯，再用純水潤洗3次，待用。 5.6.

5、2配制不含水流動相用量筒和抽濾器具的清潔：先將適量配制待用的純有機(jī)溶劑倒入安裝好的抽濾裝置中，潤洗后抽濾，再將抽濾后的純有機(jī)溶劑倒入量筒中潤洗，待用。 5.7記錄填寫 流動相配制后，配制人員將配置過程記錄在實驗記錄本或檢驗記錄上。 5.8注意事項 5.8.1流動相配制應(yīng)選用色譜純試劑、高純水或雙蒸水。 5.8.2過濾流動相時應(yīng)注意區(qū)分水系膜和油系膜的使用范圍，防止誤用。 5.8.3配制不含水流動相的抽濾器具及儲存容器應(yīng)清潔干燥，不得帶水。 5.8.4每次使用前應(yīng)對流動相進(jìn)行超聲波脫氣處理510分鐘（瓶蓋松開）。 5.8.5不含有機(jī)溶劑的水溶液類流動相的專用儲液瓶每次使用前應(yīng)進(jìn)行刷洗，再用自來水沖洗，最后用純水潤洗3次。 6 相關(guān)文件6.1中國藥典附錄 高效液相色譜法 6.2