玉潔純、硫酸鋅對口腔主要致齲菌生長產(chǎn)酸的影響

1、    玉潔純、硫酸鋅對口腔主要致齲菌生長產(chǎn)酸的影響        摘要目的：評價玉潔純、硫酸鋅對口腔主要致齲菌的影響，確定抑制細 菌所需的濃度 。方法：使用紫外分光光度計及pH電極檢測不同濃度的藥物及兩者相對配伍使用時對口腔主 要致齲菌-變形鏈球菌和遠緣鏈球菌的抑制效果。結果：玉潔純、 硫酸鋅均能有效地抑制變 鏈和遠鏈的生長和產(chǎn)酸，硫酸鋅不能增強玉潔純的抑制效果。結論：初步認為玉潔純可作為齲病預防用藥，硫酸鋅在配方中的作用有待進一步探討。關鍵詞齲齒；三氯生；硫酸鋅；變形鏈球

2、菌；遠緣鏈球菌中分類號：R780.1R979.7文獻標識碼：A文章編號：1001-3733(2000)03-0196-03The effect of triclosan and zinc sulphate on growth and acid production of St reptococcus mutans and Streptococcus sobrinusSun Lei,Feng Xiping,Liu Yanlin.（College of Stomatology,Shanghai Second Medical Un iversity,Shanghai 200011）AbstractO

3、bjective:To evaluate the effect of ticlosan,zinc sulphat e or their combination on the main cariogenic bacteria Streptococcus mutans (S.m) and strep tococcus sobrinus (S.sob) Method:Growth and acid product ion inhibition of the th ree agents at different concentrations on S.m and S.sob were determin

4、ed with ult raviolet spectrophtometer and pH electrode.Results:Triclos an,zinc sulphate or th eir combination inhibited the growth and acid production of S.m and S.sob .The co mbination of the two agents was not synergic.Conclution:Tr iclosan may be used as a caries prevention agent.Key wordsDental

5、cazies;Triclosan,Zinc sulphate,Streptococcus mu tans,streptococcus sobrinus玉潔純(triclosan)，化學名三氯羥苯醚(2，4，4-tricloro-2'hydroxydiphenyl ether)，1968年Furia等發(fā)現(xiàn)玉潔純具有廣譜的抗菌作用。由于玉潔純低毒性、低刺激性的 特點，自80年代末90年代初被考慮用于口腔疾病的治療。玉潔純能有效地抑制菌斑的形成， 并有抗炎、減少牙石沉積的多重作用，因此它較多地被考慮用于牙齦炎、牙周炎的防治 1。作為溫和的非離子型抗菌劑，玉潔純對致齲菌也應具有效的抑制作用，但

6、有關這 方面的報道較為少見。本研究采用體外細菌學實驗方法觀察不同濃度的玉潔純和常與之配伍使用的硫酸鋅對口腔主 要致齲菌變形鏈球菌、遠緣鏈球菌生長和產(chǎn)酸的抑制效果，確定抑制所需的濃度，為研制新 型的防齲制劑提供理論依據(jù)。1材料與方法1.1制劑準備玉潔純：汽巴精化(中國)有限公司提供，因玉潔純難溶于水，因此先將 其溶于丙二醇中，再用蒸餾水對半稀釋加入培養(yǎng)基。硫酸鋅：ZnSO4。7H2O(上?；瘜W試 劑總廠提供)，溶于蒸餾水對半稀釋加入培養(yǎng)基。1.2細菌培養(yǎng)選用國際參考菌株變形鏈球菌(Steptococcus mutans Ingbritt,S.m Ing)、遠緣鏈球 菌(Streptococcus

7、 sobrinus 6715,S.m 6715)和變形鏈球菌、遠緣鏈球菌的臨床分離菌 株各4株。臨床 分離菌株已經(jīng)涂片鏡檢、生化鑒定、葡聚糖凝聚實驗及DNA G+C定量測定鑒定為變形鏈球菌 及遠緣鏈球菌。冷凍保存的菌株活化后轉種胰蛋白酶消化大豆培養(yǎng)基，微需氧，(N2)= 90%，(CO2)=5%，37 培養(yǎng)18 h。1.3生長抑制實驗實驗藥品：玉潔純原液質量濃度自0.005 g/L連續(xù)對半稀釋5次至0.00016 g/L；硫酸鋅 原液質量濃度自2.5 g/L 連續(xù)對半稀釋5次至0.08 g/L；配伍藥液：玉潔純與硫酸鋅 質量濃度由低到高相對配伍。保存的細菌經(jīng)活化后，取培養(yǎng)物于無菌離心管2500

8、 r/min離心，用生理鹽水洗滌兩次制成懸 液，置紫外分光光度計調整菌濃度為吸光度值等于1(=450 nm)。抑制組：用無菌微量加樣器吸取不同濃度的藥液各0.1 ml，分別加入滅菌的4 ml蛋白胨酵母 葡 萄糖培養(yǎng)基中，加樣順序由低濃度到高濃度；藥液加畢后再在每試管中加入0.4 ml菌液，振 蕩混勻，微需氧(N2)=90%、(CO2)=5%、37 培養(yǎng)48 h后取出。培養(yǎng)物經(jīng)旋渦混合 器混勻，通過紫外分光光度計測定吸光度值，并計算生長抑制率：陽性對照組：培養(yǎng)基中不加藥液只加菌液。陰性對照：培養(yǎng)基中只加藥液不加菌液。1.4產(chǎn)酸抑制實驗在測定了各培養(yǎng)基細菌的生長抑制情況后，原培養(yǎng)基用酸度計(pH-

9、3C型，上海雷磁儀器廠)測定培養(yǎng)液的pH值。2結果玉潔純、硫酸鋅以及它們的配伍對S.m、S.sob的國際參考菌株和臨床分離菌株都有顯著 的抑制作用，抑制效果見16。藥物質量濃度序列為：序列號123456玉潔純(g/L)0.0050.00250.00130.000630.000310.00016硫酸鋅(g/L)2.51.250.620.310.160.083討論 由于齲病是由細菌引起的感染性疾病，因此研究人員考慮在潔牙劑中加入抗菌劑以達到 長 期抑菌的目的。目前常用的洗必太雖然能有效地抑制口腔細菌的生長，但長期使用可引起口 腔 粘膜著色、牙石沉積增多和菌群失調。而玉潔純應用在口腔中具有以下優(yōu)點：

10、長期使用含玉 潔純的潔牙劑不干擾正?？谇痪鷧驳纳鷳B(tài)平衡、不引起粘膜著色和牙石沉積增多。另外，玉 潔純能與現(xiàn)有的潔牙劑配方相容，并在中性pH條件下保持穩(wěn)定的疏水性結構，且易于被口腔 粘膜吸收。1玉潔純對各菌的生長抑制率2硫酸鋅對各菌的生長抑制率3玉潔純、硫酸鋅配伍對各菌的生長抑制率4玉潔純對培養(yǎng)基pH值的影響5硫酸鋅對培養(yǎng)基pH值的影響6 玉潔純、硫酸鋅配伍對培養(yǎng)基pH值的影響從實驗結果可見，玉潔純的質量濃度為0.005 g/L時即可有效地抑制口腔主要致齲菌的生 長和產(chǎn)酸，使培養(yǎng)基pH值高于臨界pH值5.5。與之相比硫酸鋅的質量濃度為1.25 g/L時才 能達到與玉潔純相似的效果。這可能由于親脂

11、性的玉潔純可直接作用于細菌的胞漿膜，抑制 細菌對必需氨基酸的攝取2；硫酸鋅需通過抑制細菌代謝的酶系統(tǒng)起作用，而離 子狀態(tài)的鋅易與培養(yǎng)基內的蛋白質及菌體表面蛋白結合而影響了它的作用效果3 。本實驗結果表明硫酸鋅不能增強玉潔純對變形鏈球菌和遠緣鏈球菌的抑菌效果，此結果與 Kjrhem4等人的研究結果一致。但有多項臨床研究認為鋅離子能增強玉潔純抑 制菌 斑的效果。由于菌斑的形成是一個非常復雜的過程，所以藥物的抑菌效果不能完全代表它們 抑制菌斑的效果。Creeth5等認為玉潔純在玉潔純/鋅配方中可獲得較高的化學電 勢因而更多地進入粘膜貯存庫，隨后釋放進入菌斑的濃度也更高。而鋅從粘膜貯存庫中釋放 的速度

12、慢于玉潔純，在玉潔純/鋅配方中鋅的釋放時間又比單純用鋅延長7倍。兩種抑菌成分 的共同長時作用在臨床上表現(xiàn)為持續(xù)、高效的抑菌斑效果。另外，有學者認為實驗室保存的國際參考菌株由于長時間的低溫保存和反復傳代培養(yǎng)可能導 致某些生物學性狀的改變。但從本實驗的結果來看，玉潔純、硫酸鋅對變形鏈球菌、遠緣鏈 球菌的國際參考菌株和臨床分離株生長、產(chǎn)酸的抑制情況沒有顯著的差異(P>0.05)。作者單位：孫蕾（上海第二醫(yī)科大學附屬第九人民醫(yī)院200025）馮希平（上海第二醫(yī)科大學附屬第九人民醫(yī)院口腔預防科）劉艷玲（上海第二醫(yī)科大學附屬第九人民醫(yī)院口腔預防科）參考文獻1Rosing B,Wannfors B,V

13、olpe AR,et al.The use of a triclosan/copolymer dent ifrice retard the progression of periodontis.J Clin Periodontol,1997,24(12):873 2胡德渝，張錦才，萬呼春，等.三氯羥苯醚-共聚體牙膏對牙菌斑、牙齦炎的臨床效果觀 察.華西口腔醫(yī)學雜志，1997，15(4)：3333Watson GK,Cummons D,Oudera VD.Inhibition of acid production by Streptococcos m untans NCTC 10449 by zinc and the effect of metal specoation.Caries Res,1991,2 5:4314Kjrheim V,Skaare A,Barkvoll P,et al.Antiplaque,antibacterial,and anti-inf lamm atory properties of triclosan polyviylmether maleic acid (PVM-MA)copolymer.Eur J