雙氧水微生物限度檢查方法驗證方案20121112

1、5%雙氧水溶液微生物限度檢查方法驗證方案編碼： VP/QBV-12-T090-00頁碼：7/7項目人員 ItemPersonnel部門/崗位Dept./Position簽名Signature日期Date方案起草Prepared byQC/檢驗員年 月 日 (Y) (M) (D) 方案審核Reviewed byQC/經(jīng)理助理 年 月 日 (Y) (M) (D)QA/副經(jīng)理 年 月 日 (Y) (M) (D)QA/經(jīng)理年 月 日 (Y) (M) (D)方案批準Approved by質(zhì)量受權人 年 月 日 (Y) (M) (D)頒發(fā)部門Issued byQA生效日期Effective Date 年

2、月 日 (Y) (M) (D)分發(fā)部門Distributed to QC制作備份：1份Copies prepared: 1pcs目 錄1.概述32.目的33.依據(jù)及參考文件34.驗證小組和各部門職責35.驗證時間安排46.驗證內(nèi)容47.偏差情況68.變更79.驗證結果評價內(nèi)容7附件1：培訓確認表1附件2：文件檢查確認表2附件3：設備確認結果2附件4：試驗器材確認結果4附件5：試驗用菌種確認結果4附件6：培養(yǎng)基確認結果5附件7：試劑確認結果5附件8：器皿確認結果6附件9：細菌、霉菌及酵母菌計數(shù)驗證結果記錄71.概述5%雙氧水溶液是本公司車間使用的消毒劑種類之一。因需建立5%雙氧水的微生物檢驗方法

3、，所以需對其微生物限度檢查方法進行驗證。按中國藥典2010年版二部附錄XI J“微生物限度檢查法”要求，結合5%雙氧水溶液本身的性質(zhì)，本次確認將采用以下微生物檢驗方法進行確認試驗取2ml 5%雙氧水溶液置100ml pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液中，用封閉式薄膜過濾器濾干，平行制備2張膜，將濾膜菌面朝上貼于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基或玫瑰紅瓊脂培養(yǎng)基平板上培養(yǎng)，置規(guī)定溫度，檢測細菌平皿培養(yǎng)72小時，檢測霉菌及酵母菌平皿培養(yǎng)120小時，測定菌數(shù)。2.目的根據(jù)中國藥典2010年版的要求確定本公司使用的5%雙氧水溶液微生物限度檢查方法。 3.依據(jù)及參考文件3.1中國藥典2010年版二部附錄XI J“微生物限度檢

4、查法”3.2中國藥品檢驗標準操作規(guī)范2010年版“微生物限度檢查法”3.3藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）3.4 微生物限度檢查法 SOP-QC-0213-V013.5 驗證管理規(guī)程 SOP-QA-017-V023.6QC消毒液配制使用標準操作規(guī)程SOP-QC-216-V004.驗證小組和各部門職責4.1驗證小組及對應職責職位姓名部門具體職責組長代珊QC確認總協(xié)調(diào)工作，并審核確認的數(shù)據(jù)組員許維雅QC負責確認方案和確認報告的起草，負責檢品的檢測與確認記錄的填寫，負責確認數(shù)據(jù)的收集。辛海安黃微QC負責檢品的檢測與確認記錄的填寫。林明鳳吳東丹劉利袁碧芳彭艷妃QC監(jiān)督確認過程實施及確認過程中的偏

5、差及OOS處理。吳東琴Q(mào)A負責確認方案和確認報告的歸檔保存。監(jiān)督確認過程實施及確認過程中的偏差及OOS處理。4.2驗證委員會姓名職務職責顏杰質(zhì)量受權人1.負責確認方案及報告的批準；2.負責確認過程中出現(xiàn)的偏差/OOS的批準放行。馬立如QA經(jīng)理1.負責確認方案及報告的審核；2.負責確認過程中出現(xiàn)的偏差/OOS的評估。張德志QA副經(jīng)理5.驗證時間安排時 間工作內(nèi)容2012年11月方案起草、審批2012年11月12月標準確認、檢驗方法確認2012年12月完成報告6.驗證內(nèi)容6.1驗證前準備6.1.1培訓確認本次驗證內(nèi)容是否已對相關人員進行培訓，檢查確認結果記錄在附件1培訓確認表。6.1.2文件確認本

6、次驗證前驗證方案及相關指導的SOP是否已經(jīng)批準。檢查確認結果記錄在附件2文件檢查確認表。如無相關文件，則需要增加發(fā)放。6.1.3儀器設備確認檢查所涉及的設備是否符合實驗要求，確認結果填寫在附件3 設備確認結果中?？山邮軜藴剩涸O備應經(jīng)驗證，在校準有效期內(nèi)。6.1.4試驗器材確認檢查所涉用試驗器材，確認結果填寫在附件4試驗器材確認結果中，可接受標準：試驗器材各配件應齊全，無損壞。6.1.5試驗用菌種確認檢查所涉及的試驗用菌種是否符合實驗要求，確認結果填寫在附件5 試驗用菌種確認結果中?？山邮軜藴剩壕N形態(tài)特征應良好、菌種代數(shù)不得超過第五代。6.1.6培養(yǎng)基確認檢查所涉及的培養(yǎng)基是否符合實驗要求，確

7、認結果填寫在附件6 培養(yǎng)基確認結果?？山邮軜藴剩籂I養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基應在有效期內(nèi)，應做培養(yǎng)基適應性檢查。6.1.7試劑確認檢查所涉用試劑是否符合實驗要求，確認結果填寫在附件7試劑確認結果中?？山邮軜藴剩涸噭谟行趦?nèi)。6.1.8器皿確認檢查所涉用器皿是否符合實驗要求。確認結果填寫在附件8器皿確認記錄中。可接受標準：一般玻璃器皿要求潔凈，無破損，量筒要進行校準。6.1.9驗證用培養(yǎng)基、緩沖液應置121濕熱滅菌30分鐘，平皿、刻度吸管應置200干熱滅菌2小時。6.2驗證方法6.2.1 菌液制備：接種金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸埃希菌新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上，3035培養(yǎng)1

8、824小時；接種白色念珠菌新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基上， 2328培養(yǎng)2448小時。上述培養(yǎng)物分別用0.9%無菌氯化鈉溶液制成每1ml含菌數(shù)為50100cfu 的菌懸液。取黑曲霉菌經(jīng)2328培養(yǎng)57天新鮮改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基斜面培養(yǎng)物，加入含0.05%（ml/ml）聚山梨酯的0.9%無菌氯化鈉溶液洗下孢子吸出，轉移至空試管中作為菌懸液原液，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯的0.9%無菌氯化鈉溶液進行10倍梯度稀釋至含孢子數(shù)50100cfu/ml的孢子懸液。6.2.2菌液計數(shù)：分別取上述3種細菌菌液1ml加入培養(yǎng)皿，注入不超過45營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基1520ml，每種試驗菌平行制備2個平板，于3

9、035倒置培養(yǎng)48小時。分別取上述2種真菌菌液1ml加入培養(yǎng)皿，注入不超過45玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基1520ml，每種試驗菌平行制備2個平板，于2328倒置培養(yǎng)72小時。6.2.3 5%雙氧水的配制：按照QC消毒液配制使用標準操作規(guī)程SOP-QC-216-V00配制上述5%雙氧水。6.2.4細菌數(shù)、霉菌數(shù)、酵母菌數(shù)回收率測定：驗證試驗每種5%雙氧水應進行3次獨立的平行試驗，并計算各試驗菌每次試驗的回收率。要求回收率不低于70%。用薄膜過濾進行驗證，具體擬定方法如下：6.2.4.1試驗組：取2ml5%雙氧水和1ml驗證用菌液（含50100CFU試驗菌）置100ml pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液中，

10、用封閉式薄膜過濾器濾干，平行制備2張膜，將濾膜菌面朝上貼于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基或玫瑰紅瓊脂培養(yǎng)基平板上培養(yǎng)，置規(guī)定溫度培養(yǎng)4872小時，測定菌數(shù)。6.2.4.2供試品組：按試驗組檢驗方法（不加試驗菌）測定供試品本底細菌、霉菌及酵母菌數(shù)，檢測細菌平皿培養(yǎng)72小時，檢測霉菌及酵母菌平皿培養(yǎng)120小時，測定菌數(shù)。6.2.4.3菌液組：測定所加的試驗菌數(shù)。6.2.4.4稀釋劑對照組：用相應的稀釋液替代5%雙氧水，按試驗組的制備方法和菌落計數(shù)法測定菌數(shù)。6.2.4.5試驗結果：結果見附件9細菌、霉菌及酵母菌計數(shù)驗證結果記錄6.2.4.6結果判斷：稀釋劑對照組的菌回收率均應不低于70%。若試驗組的菌回收率均不低

11、于70%，則可按該供試液制備方法和計數(shù)法測定供試品的細菌、霉菌或酵母菌數(shù)；若任一次試驗中試驗組的菌回收率低于70%，需分析原因，采取適當方法重新驗證。注：試驗組回收率（%）=（試驗組平均菌落數(shù)-供試品對照組平均菌落數(shù)）菌液組平均菌落數(shù)100%稀釋劑對照組回收率（%）= 稀釋劑對照組平均菌落數(shù)菌液組平均菌落數(shù)100%6.2.4.7結果統(tǒng)計 實驗結果統(tǒng)計填寫在附件9細菌、霉菌及酵母菌計數(shù)驗證結果記錄7.偏差情況驗證過程中如果有任何偏差應及時記錄，分析原因，評價是否是關鍵偏差，并提出整改措施，并將偏差附于驗證報告中。8.變更驗證過程中是否有變更，如有變更在再驗證報告中進行說明。9.驗證結果評價內(nèi)容對

12、驗證結果進行綜合評價，內(nèi)容包括但不限于：確認實驗是否有遺漏；確認驗證過程中是否有偏差，偏差是否已經(jīng)采取糾偏措施和預防措施；確認記錄是否完整；是否需要進一步補充實驗。評價必須以書面形式寫出報告。附件1：培訓確認表培訓確認表培訓人/培訓日期培訓對象部門職責簽名代珊QC確認總協(xié)調(diào)工作，并審核確認的數(shù)據(jù)彭艷妃QC監(jiān)督確認過程實施及確認過程中的偏差及OOS處理。辛海安QC負責確認方案和確認報告的起草，負責檢品的檢測與確認記錄的填寫，負責確認數(shù)據(jù)的收集。黃微QC負責檢品的檢測與確認記錄的填寫。吳東丹QC劉利QC袁碧芳QC林明鳳QC吳東琴Q(mào)A負責確認方案和確認報告的歸檔保存。監(jiān)督確認過程實施及確認過程中的偏

13、差及OOS處理。確認人/日期： QA復核人/日期： 3硫酸氫氯吡格雷片微生物限度檢查方法確認編碼：R/QBV-11-T008-00頁碼：3/8附件2：文件檢查確認表文件檢查確認表SOP名稱SOP編號是否已批準消毒劑管理規(guī)程SOP-PR-007-V02是 否驗證管理規(guī)程SOP-QA-017-V02是 否生測室管理規(guī)程SOP-QC-005-V01是 否微生物限度檢查法SOP-QC-0213-V01是 否培養(yǎng)基管理規(guī)程SOP-QC-017-V01是 否菌種管理規(guī)程SOP-QC-012-V02是 否XG1.D型脈動真空滅菌柜使用保養(yǎng)標準操作規(guī)程SOP-QC-0343-V01是 否培養(yǎng)箱使用操作規(guī)程SO

14、P-QC-303-V00是 否電子天平使用標準操作規(guī)程SOP-QC-317-V01是 否潔凈工作臺使用保養(yǎng)標準操作規(guī)程SOP-QC-304-V00是 否生物安全柜使用保養(yǎng)標準操作規(guī)程SOP-QC-0386-V00是 否Haier 藥品保存箱使用及保養(yǎng)標準操作規(guī)程SOP-QC-0395-V00是 否評價：確認人/日期： QA復核人/日期： 25%雙氧水溶液微生物限度檢查方法驗證編碼：R/QBV-11-T016-00 頁碼：3/7附件3：設備確認結果 設備確認結果設備名稱型 號生產(chǎn)廠家及出廠編號校準有效期至驗證編號霉菌培養(yǎng)箱MJ-300BS-II上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司(0812240005)

15、霉菌培養(yǎng)箱MJ-300BS-II上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司(1005240001)生化培養(yǎng)箱SPX-300BS- II上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司(0405011)電熱恒溫培養(yǎng)箱DHP-9162上海一恒科技有限公司（035184）脈動真空滅菌柜XG1.DTX-0.24山東新華醫(yī)療器械股份有限公司（20122024）脈動真空滅菌柜XG1.DTX-0.36B山東新華醫(yī)療器械股份有限公司（20100953）生物安全柜BSC-1600A2蘇州安泰空氣技術有限公司（J10060420）生物安全柜BSC-1600A2蘇州安泰空氣技術有限公司（J10060421）生物安全柜BSC-1300A2蘇州安泰空氣

16、技術有限公司（J10050341）電子天平GF-200日本AND(14678558)電子天平HF-200日本AND(12850048)評價：確認人/日期： QA 復核人/日期：75%雙氧水溶液微生物限度檢查方法驗證編碼：R/QBV-11-T016-00頁碼：7/7附件4：試驗器材確認結果試驗器材確認結果名稱型 號來 源檢查項目及標準檢查結果光學顯微鏡YS100Nikon各配件應齊全，無損壞封閉式無菌檢查薄膜過濾器STV2、STV3型浙江寧海白石藥檢儀器廠完整，潔凈，無破損微孔濾膜孔徑0.45m，直徑50mm杭州高得泰林有限公司完整，無破損評價：確認人/日期： QA復核人/日期：附件5：試驗用菌

17、種確認結果試驗用菌種確認結果菌種名稱及編號來 源保存方法及條件菌種代數(shù)（不得超過第五代）/形態(tài)特征金黃色葡萄球菌CMCC（B）26003中國藥品生物制品檢定所培養(yǎng)基斜面28大腸埃希菌CMCC（B）44102中國藥品生物制品檢定所培養(yǎng)基斜面28枯草芽孢桿菌CMCC（B）63501中國藥品生物制品檢定所培養(yǎng)基斜面28白色念珠菌CMCC（F）98001中國藥品生物制品檢定所培養(yǎng)基斜面28黑曲霉CMCC（F）98003廣州市藥品檢驗所培養(yǎng)基斜面28評價：確認人/日期： QA復核人/日期：附件6：培養(yǎng)基確認結果培養(yǎng)基確認結果培養(yǎng)基名稱來 源檢查項目及標準批號/有效期至營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基北京三藥科技開發(fā)公司1

18、.應在有效期內(nèi)2.應做適應性檢查玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基北京三藥科技開發(fā)公司1.應在有效期內(nèi)2.應做適應性檢查評價：確認人/日期： QA復核人/日期：附件7：試劑確認結果試劑確認結果試劑名稱規(guī)格來 源檢查項目及標準批號/有效期至pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液250g/瓶北京三藥科技開發(fā)公司應在有效期內(nèi)氯化鈉500g/瓶廣州化學試劑廠應在有效期內(nèi)苯扎溴銨溶液（新潔爾滅溶液）500ml/瓶廣東恒健制藥有限公司應在有效期內(nèi)洗必泰5kg/箱錦州九泰制藥有限責任公司應在有效期內(nèi)吐溫80500ml/瓶天津市大茂化學試劑廠應在有效期內(nèi)雙氧水應在有效期內(nèi)評價：確認人/日期： QA復核人/日期：附件8：器皿確認結果器皿確認結果容器名稱規(guī)格型號檢查項目及標準檢查結果培養(yǎng)皿90mm潔凈，無破損燒杯1000ml、500ml潔凈，無破損試管18mm180mm、30 mm200mm潔凈，無破損刻度吸管10 ml 、5 ml2 ml、1ml潔凈，無破損量筒500ml、100ml潔凈，無破損應校準評價：確認人/日期： QA復核人/日期：885%雙氧水溶液微生物限度檢查方法驗證編碼：R/QBV-11-T016-00頁碼：8/7附件9：細菌、霉菌及酵母菌計數(shù)驗證結果記