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文檔簡介
1、(生物科技行業(yè))浙大生物化學試題20XX年XX月多年的企業(yè)咨詢豉問經驗.經過實戰(zhàn)驗證可以落地機行的卓越管理方案,值得您下載擁有浙江大學2001年攻讀碩士學位研究生入學考試題考試科目:生物化學,編號555注意:答題必須寫在答題紙上,寫在試卷或草稿紙上均無效壹是非題1/301酶反應的專壹性取決于其輔助因子的結構2肽酰轉移酶在蛋白質合成中催化肽鍵的生成和酯鍵的水解3E.coli連接酶摧化倆條游離單鏈DNA分子形成磷酸二酯鍵4通過檸檬酸途徑將乙酰輔酶A轉移至胞液中,同時可使NADH上的氫傳遞給 NADP生成NADPH5亮氨酸的疏水性比繳氨酸強6必需氨基酸是指合成蛋白質必不可少的壹些氨基酸7脯氨酸是a螺
2、旋破壞者8維系蛋白質三級結構最重要的作用力是氫鍵9在DNA變性過程中總是 G-C對豐富區(qū)先解鏈10真核細胞中DNA只存在于細胞核中11DNA雙螺旋的倆條鏈方向壹定是相反的12酶影響其催化反應的平衡13酶促反應的米氏常數和催化的底物無關14維生素E是壹種天然的抗氧化劑15維生素B1的輔酶形式是 TPP16ATP是體內能量的儲存形式17糖酵解過程無需氧氣的參和18膽固醇是生物膜的主要成分,可調節(jié)生物膜的流動性19蛋白質的生理價值主要取決于必需氨基酸的種類,數量和比例20磷酸口比哆醛只作為轉氨酶的輔酶起作用21DNA復制時,后滯鏈需多個引物22絕緣子和增強子壹樣都屬于順式作用元件23PCR是包括變性
3、,復性和延伸三個步驟的循環(huán)反應24Sanger曾倆獲諾貝爾獎25核糖體上有三個和 tRNA有關的位點:A位點,P位點,E位點26生長激素釋放抑制因子是壹個14肽27脂肪酸合成酶催化白反應是脂肪酸-3氧化反應的逆反應28鐮刀型貧血癥患者血紅蛋白和正常人的血紅蛋白在氨基酸組成上只有2個殘基有差別29地球上所有生物中存在的蛋白質和核酸的種類總數都超過1億種30中國科學家在今年完成了人類基因組1%的測序任務二寫出下列物質的分子結構式1/61Thr2D-核糖3A4GSH5尼克酰胺6丙酮酸三名詞解釋4/241反密碼子2操縱基因3多肽核酸(peptidenucleicacid)4折疊酶5共價調節(jié)6Humen
4、GenomeProject四綜合題10/401試表述Glu經脫氨基,有氧氧化等途徑徹底分解成NH3,CO2,和H2O時的代謝路線,要求用箭頭表示所經過的主要中間產物.計算1摩爾Glu共可產生多少摩爾的NH3,CO2,ATP?2以血紅蛋白為例說明蛋白質四級結構的含義,比較血紅蛋白和肌紅蛋白結構和功能的異同3請對中心法則加以闡述4凝膠過濾是分離蛋白質混合物最有效的方法之壹,請說明其工作原理且簡述用該法分離蛋白質的實驗操作步驟浙江大學2002年攻讀碩士學位研究生入學考試題考試科目:生物化學,編號570注意:答題必須寫在答題紙上,寫在試卷或草稿紙上均無效壹是非題1/201所謂肽單位就是指組成蛋白質的氨
5、基酸殘基2在競爭性抑制劑存在的情況下,即使加入足夠量的底物,酶仍不能達到其催化的最大反應 速度3壹級結構決定空間結構,所以蛋白質合成中新生肽鏈的折疊無須其他蛋白質的幫助4Sanger反應(二硝基氟苯法)用以鑒定多肽鏈竣基末端氨基酸,而Edman反應(苯異硫氟酸酯法)則用以鑒定多肽鏈氨基末端氨基酸.5和膽固醇的化學結構最相近的維生素是維生素B12.6在某些生物中,RNA也能夠是遺傳信息的基本攜帶者7生長激素釋放抑制因子是壹個14肽8維生素B1的輔酶形式是TPP9地球上所有生物中存在的蛋白質和核酸的種類總數都超過1億種10腎上腺素和胰高血糖素都通過cAMP很快地對機體組織發(fā)揮作用11呼吸鏈電子載體
6、是按照其標準勢能逐步下降而氧化仍原電勢逐步增加的方向排列的12CO對氧化磷酸化的影響主要是抑制ATP的形成過程,但不抑制電子傳遞過程13花生四烯酸廣泛存在和植物中,它是哺乳動物的必需脂肪酸14即使在饑餓狀態(tài)下,肝臟也不利用酮體作為燃料分子,而大腦組織在血糖供應不足時會利用酮體作為燃料分子供能15不同生物對氨基氮白排泄方式不同,如魚類以氨的形式直接將氨基氮排出體外;鳥類以尿酸形式植物和動物以尿素形式將氨基氮排出體外16紫外輻射引起的DNA損傷可通過光復活作用修復.光復活酶雖然在生物界分布很廣,從 低等單細胞生物直到鳥類都有,但高等哺乳類中卻沒有17逆轉錄酶存在和所有 RNA病毒中,在RNA病毒復
7、制中起作用18遺傳密碼字典在生物界且非完全通用,像原生動物纖毛蟲就有例外19糖基化是真核生物蛋白質修飾的壹種重要方式,內質網和高爾基體倆種亞細胞器都能對蛋白質進行糖基化修飾20真核生物中同壹轉錄單位能夠通過不同的拼接而產生不同的蛋白質合成模板mRNA二用化學結構式完成下列酶促反應4/201異檸檬酸裂解酶2丙酮酸竣化酶3磷酸戊糖異構酶4烯脂酰輔酶A水化酶5丙氨酰tRNA合成酶三綜合題10/601什么是蛋白質的二級結構碉定二級結構的主要作用力是什么?多肽鏈中存在的脯氨酸對“螺旋的形成有何影響,為什么?哪種蛋白質完全由a螺旋構成 ?2電泳是分離生物大分子的主要方法之壹,簡述其原理;SDS聚丙烯酰胺凝
8、膠電泳能夠測定蛋白質的分子量,其原理是什么?分子量不同的蛋白質在 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳中的遷 移率和其分子量有什么關系 ?3何謂酶促反應動力學?底物濃度,溫度和PH值對酶促反應速度各有什么影響?試分析之.如果希望反應初速度達到其最大速度的90%,底物濃度應為多大?4何謂核酸變性?引起核酸變性的因素有哪些?何力胃DNA的熔解溫度(Tm)?其大小和哪些因素有關?5從結構和功能倆大方面比較E.coliDNA 聚合酶III和RNA聚合酶6Jacob和Monod在上個世紀60年代初提出乳糖操縱子模型,開創(chuàng)了基因表達調節(jié)研究的 新領域具有劃時代意義.請你試述乳糖操縱子理論.浙江大學2003年攻讀碩士學
9、位研究生入學考試題考試科目:生物化學注意:答題必須寫在答題紙上,寫在試卷或草稿紙上均無效壹是非題1/201氧化磷酸化作用是 ATP的生成基于和相偶聯(lián)的磷酸化作用.()2酶的化學本質是蛋白質.()3多肽鏈結構中,壹個氨基酸殘基就是壹個肽單位.()4FMN和FAD的組成中有核黃素.()5在細菌的復制中起主要作用的是DNA聚合酶I()6DNA變性后其粘度增大()7乙醛酸循環(huán)在所有的高等植物中都存在.()8EMP途徑本身只產生仍原劑,而不產生高能中間產物.()9酶促反應的能量效應是降低反應的活化能.()10和膽固醇的化學結構最相近的維生素是維生素B12.()11CoQ只能作為電子傳遞的中間載體.()1
10、2DNA雙螺旋結構的穩(wěn)定性主要來自堿基對之間的氫鍵() 13組成蛋白質的所有氨基酸中,由于含有的“-碳原子屬于不對稱碳原子,因此都具有旋光性.()14mRNA 的3'端polyA 結構是由DNA的非編碼區(qū)轉錄的.()15糖酵解的限速酶為丙酮酸激酶.()16乙酰輔酶A是進入TCA循環(huán)仍是生成酮體,主要由草酰乙酸濃度調控.()17E.coliRNA 聚合酶的亞基和轉錄的終止識別有關.()18氧化仍原電對中,電子從電勢較低的電對流向電勢較高的電對,這是自由能降低的現象.()19葡萄糖和果糖都具有仍原性.()20如果加入足夠量的底物,即使有競爭性抑制劑存在,酶催化的最大反應速度Vmax是能夠達
11、到的()二寫出下列物質的結構式2/101Ser2U3 草酰乙酸 4ATP5D-glucose三寫出下列酶催化的生化反應式(不要求寫結構式)3/301磷酸果糖激酶2磷酸甘油變位酶3丙酮酸脫氫酶系4順烏頭酸酶5異檸檬酸裂解酶6脂酰輔酶A脫氫酶7谷丙轉氨酶8鳥氨酸轉氨甲酰酶9DNA 合成酶10氨酰tRNA合成酶四綜合題15/901簡述SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳的基本原理,你使用該技術分離和檢測過何種物質?主要操作步驟有哪些?2質粒是基因工程中最常用的載體,為獲得某質粒(如pUC18)DNA,請你設計壹個簡單的實驗過程(步驟).3談談你所了解的生物化學近年來的新進展4DNA雙螺旋模型是哪年由誰提出的?簡
12、述其基本內容.為什么說該模型的提出是分子生物學發(fā)展史上的里程碑,具有劃時代的貢獻?5何謂變性,那些因素能夠引起蛋白質的變性?何謂別構(變構)?舉壹例說明.6試述三竣酸循環(huán)是如何溝通糖類,脂類和蛋白質三大有機物的代謝的?浙江大學2004年攻讀碩士學位研究生入學考試題考試科目:生物化學名詞解釋50)1埃德曼降解2抗體3誘導契合學說4熱力學第二定律5補救途徑6荷爾蒙7競爭性抑制8細胞膜9DNA聚合酶10基因表達問答題:1根據國際分類法將酶分成哪幾大類,分別敘述它們的酶反應特征(15)2對生物體轉錄和復制的特征進行說明比較(15)仍有幾份數學試卷,可不知道怎么上傳壓縮文件,如果想要,望告之方法3敘述基
13、因文庫和cDNA文庫的制作步驟且進行它們的特征比較(20)4用圖表示說明生物體內三竣酸循環(huán)ATP產生的途徑和它彳門的調控機理(20)5比較說明SDS-PAGE(SDS-聚丙烯酰胺電泳)和瓊脂糖凝膠電泳的物質分離原理和特點(30)2004浙江大學分子試題1闡述PCR技術原理(15)2描述壹種研究基因表達的方法 (15)3闡述蛋白質生物合成途徑(25)4闡述壹條真核細胞信號轉導途徑(從信號接受到調控基因表達)(25)5闡述壹條反向遺傳克隆功能基因的途徑(20)6A,B和C三個基因都決定矮牽?;ǖ幕ㄉ?,當基因型為 A-B-C-時表型為紅色,其余為白色.AaBbCc的個體和三種純系(系1系2和系3)雜
14、交.分別的紅色:白花1:3,1:7和1:1的分離 比.問:系1和系2雜交,F1基因型和表型如何,F2的基因型和表型如何系3和系2雜交,F1基因型和表型如何,F2的基因型和表型如何(要寫出分離比)(25)7什么是染色體重排和基因重排它們在發(fā)育中有和作用它們在進化中有和作用(25)06浙江大學分子生物學試卷壹、名詞解釋:(25%)1、RFLP:限制性片段長度多態(tài)性,是由DNA變異(產生新的酶切位點或消除原有的酶切位點)導致在限制性核酸內切酶酶切時產生不同的長度片段??山柚鶶outhernBlotting 或PCR的方法進行檢測。2、SSR:簡章序列重復多態(tài)性,引物是根據微衛(wèi)星DNA重復序列倆翼的特
15、定短序列設計,用來擴增重復序列本身。由于重復的長度變化極大,所以是檢測多態(tài)性的壹種有效方法。其 特點包括:壹般檢測到的是壹個單壹的多等位基因位點,共顯性遺傳,故可鑒別雜合子和純 合子;得到的結果重復性很高。3、EST:表達序列標簽,是指從不同的組織構建的cDNA 文庫中,隨機挑選不同的克隆,進行克隆的部分測序所產生的cDNA序列。隨著高通量測序技術的進步,使人們越來越相信,大規(guī)模地產生EST,結合生物信息學的手段,將為人們提供壹種快速有效的發(fā)現新基因的方法。4、STS:序列標簽位點,是由特定引物序列所界定的壹類標記的統(tǒng)稱,短的在基因組上是能夠被唯壹操作的序列,因而能夠確定在物理圖譜上的特定位置
16、。5、CAP:CAP即分解代謝物基因活化蛋白是壹種激活蛋白,因為細菌的許多啟動子為弱啟動子,本身和RNA聚合酶的作用較弱,在有 CAP蛋白這類激活蛋白存在下,可使 RNA聚合 酶和啟動子的親和力增強,CAP蛋白的活性強烈依賴 cAMP。6、AFLP:擴增片段長度多態(tài)性,其特點是把RFLP和PCR結合了起來。其基本步驟是:把DNA進行限制性內切酶酶切, 然后選擇特定的片段進行 PCR擴增(在所有的限制性片段倆端 加上帶有特定序列的“接頭”,用和接頭互補的但 3?端有幾個隨機選擇的核甘酸的引物進行 特異PCR擴增,只有那些和 3?端嚴格配對的片段才能得到擴增 ),再在有高分辨力的測序膠 上分開這些
17、擴增產物,用放射性法、熒光法或銀染染色法均可檢測之。7、SNP:單核甘酸多態(tài)性,是壹種較為新型的分子標記,其依據的是壹位點的不同等位基 因之間常常只有壹個或幾個核甘酸的差異,因此在分子水平上對單個核甘酸的差異進行檢測 是很有意義的。8、FISH:熒光原位雜交技術,是壹種利用非放射性的熒光信號對原位雜交樣本進行檢測的 技術。它將熒光信號的高靈敏度、安全性,熒光信號的直觀性和原位雜交的高準確性結合起 來,通過熒光標記的 DNA探針和待測樣本的 DNA進行原位雜交,在熒光顯微鏡下對熒光信號進行辨別和計數,從而對染色體或基因異常的細胞、組織樣本進行檢測和診斷,為各種 基因相關疾病的分型、預前和預后提供
18、準確的依據。9、Genome :基因組,有機體或細胞中的所有 DNA ,包括核中的染色體和線粒體中的DNA。10、RNAinsituhybridization : RNA 原位雜交,是利用 cDNA 為探針來檢測和其互補的mRNA鏈在細菌或其他真核細胞中的位置,是檢測基因組織特性表達的常用方法。11、單克隆抗體:每個 B淋巴細胞有合成壹種抗體的遺傳基因。動物脾臟有上百萬種不同的B淋巴細胞系,含遺傳基因不同的B淋巴細胞合成不同的抗體。當機體受抗原刺激時,抗原分子上的許多決定簇分別激活各個具有不同基因的B細胞。被激活的B細胞分裂增殖形成該細胞的子孫,即克隆由許多個被激活B細胞的分裂增殖形成多克隆,
19、且合成多種抗體。如果能選出壹個制造壹種專壹抗體的細胞進行培養(yǎng),就可得到由單細胞經分裂增殖而形成細胞群,即單克隆。單克隆細胞將合成壹種決定簇的抗體,稱為單克隆抗體。12、基因芯片:所謂基因芯片,是指將大量探針分子固定于支持物,上,然后和標記的樣品進行雜交,通過檢測雜交信號的強弱進而判斷樣品中靶分子的數量。由于用該技術能夠將極其大量的探針同時固定于支持物上,所以壹次能夠對大量的 DNA分子或RNA分子進行檢測分析,從而解決了傳統(tǒng)核酸印跡雜交,技術復雜、自動化程度低、檢測目的分子數量少、效率低,等不足,而且,通過設計不同的探針陣列,用壹定的分析方法,仍能夠用于序列分析,稱作雜交測序。二、描述cDNA
20、文庫構建原理和方法(25%): (1) cDNA獲得方法,(2)克隆方法,(3) 文庫質量定義。答:cDNA :以 mRNA 為模板,利用反轉錄酶合成和 mRNA 互補的DNA(complementaryDNA , cDNA),再復制成雙鏈 cDNA片段,和適當載體連接后轉入受菌體,擴增為cDNA文庫(cDNAlibrary),然后再采用適當方法從 cDNA文庫種篩選出目的cDNA。和基因組DNA文庫類似,由總mRNA制作的cDNA文庫包括了細胞全部 mRNA信息,自然也含有我們感興趣的編碼cDNA。當前發(fā)現的大多數蛋白質的編碼基因幾乎都是這樣分離的。(1) cDNA 獲得方法: TotalR
21、NA 的提??; mRNA 的分離;cDNA 雙鏈合成:Supersciptll - RT合成第壹鏈,cDNA 第二鏈的合成,雙鏈cDNA 末端補平,EcoRIadaptor 加接,雙鏈cDNA末端的磷酸化及 XhoI酶切,膠回收 cDNA 。(2)克隆方法:載體制備:pBlueScriptII 的提取,pBlueScriptII 的雙酶切消化,載體去磷酸化,載體效率檢測; cDNA雙鏈和載體的連接:連接,檢測( PCR方法);電轉化: 電轉化感受態(tài)細胞的制備,連接產物純化,電轉化;快速鑒定、菌落PCR pBlueScriptcDNA 文庫擴增。(3)文庫質量定義:評價壹個文庫是否有實用價值主要
22、在于文庫的含量和插入片段的大小倆個方面。所構建的文庫中必須有足夠多的克隆數,這樣才能確?;蚪M cDNA中的每壹個序列至少有壹個拷貝存在于重組文庫中,為達到這壹要求,文庫的容量應不小于 1.7 X105,同時為保證cDNA片段的完整性,插入片段的平均大小應不小于1kb。三、闡述基因突變的概念及引起突變的可能途徑(25%) : (1)化學誘變,(2)物理誘變,(3)T-DNA插入,(4)缺失、插入,(5)無意突變概念,(6)堿基修復概念答:基因突變屬分子水平上的變異,是指染色體上個別基因所發(fā)生的分子結構的變化,基因突變在自然界普遍存在?;蛲蛔兊姆绞胶芏?,主要有:(1)化學誘變,基因突變能夠由某些化學物質所引起,這些化學物質稱為化學誘變劑?,F已知很多的化學誘變劑,它們誘變的機制是不同的。在DNA復制過程由于堿基類似物的取代,堿基的化學修飾以及堿基的插入和缺失都會引起突變。(2)物理誘變,利用物理因素引起基因突變的稱物理誘變,如 X射線、紫外線、電離輻射等物理因素可造成(3) T-DNA插入,改變讀碼或變成假基因。(4)移碼突變:基因中插入或者缺失壹個或幾個堿基對,會使 DNA的閱讀框架(讀碼框)發(fā)生改變,導致插入或缺失部位之后的所有密碼子都跟著發(fā)生變化,結果產生壹種異常的多肽鏈。移碼突變誘發(fā)的原因是壹些像口丫咤類染料分子能插入DNA分子,
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