分子生物學(xué)題庫(kù)

1、第二章一、填空題1、由 DNA 和 組蛋白 組成的染色質(zhì)纖維細(xì)絲是許多核小體連成的念珠狀結(jié)構(gòu)。P302、 核小體的形成 是染色體中DNA壓縮的第一階段。P323、DNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)分兩大類：一類是 右手螺旋，另一類是 左手螺旋。P374、如果DNA聚合酶把一個(gè)不正確的核苷酸加到3末端，一個(gè)含有3 5活性的獨(dú)立催化區(qū)會(huì)將這個(gè)錯(cuò)配堿基切去。這個(gè)催化區(qū)成為 。5、 原核生物中有三種起始因子分別是 、 和 。6、 由于新合成的DNA分子中，都保留了原DNA的一條鏈因此叫半保留復(fù)制 p437、 復(fù)制時(shí)，雙鏈DNA要解開成兩股鏈分別進(jìn)行，所以，這個(gè)復(fù)制起始點(diǎn)呈現(xiàn)叉子的形式，被稱為復(fù)制叉.p438、 為了解釋

2、DNA的等速?gòu)?fù)制現(xiàn)象，日本學(xué)者岡崎（okazaki）等提出了DNA的半不連續(xù)復(fù)制.p469、 兩條鏈均按5'到3'方向合成,一條鏈3'末端的方向朝著復(fù)制叉前進(jìn)的方向,可連續(xù)合成,稱前導(dǎo)鏈。P4610、 環(huán)狀DNA雙鏈的復(fù)制可分為型、滾環(huán)形和D型幾種類型.p4711、 真核細(xì)胞的DNA聚合酶和細(xì)菌DNA聚合酶基本性質(zhì)相同，均以_dNTP_為底物，需要_Mg2+_激活，聚合時(shí)必須有 _模板鏈 和_3-OH末端_的引物鏈，鏈的延伸方向?yàn)?3. (55頁(yè)) 12、 DNA聚合酶的的功能主要是 引物合成,即能起始前導(dǎo)鏈和后導(dǎo)鏈的合成.（P55）13、 DNA復(fù)制的調(diào)控主要發(fā)生在

3、起始階段_ ,一旦開始復(fù)制,如果沒有意外的阻力,就可以一直復(fù)制下去直到完成.(P56)14、 質(zhì)粒DNA編碼兩個(gè)負(fù)調(diào)控因子_Rop蛋白_和反義RNA(RNA1),它們控制了起始DNA復(fù)制所必須的_引物_。(P56)15、 染色體的復(fù)制與_細(xì)胞分裂_一般是同步的，但復(fù)制與_細(xì)胞分裂_不直接偶聯(lián)。(P56)16、 轉(zhuǎn)座子分為兩大類:插入序列和復(fù)合型轉(zhuǎn)座子。（書P62）17、 轉(zhuǎn)座子存在于原核細(xì)胞和真核細(xì)胞內(nèi)。（書P63）18、 玉米細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)座子歸納為兩大類：自主性轉(zhuǎn)座子和非自住性轉(zhuǎn)座子。（書P64）19、 轉(zhuǎn)座作用可被分為復(fù)制型和非復(fù)制型兩大類。（書P65）20、 插入序列是最簡(jiǎn)單的轉(zhuǎn)座子，它不

4、含有任何宿主基因。（書P62）21、 SOS反應(yīng)廣泛存在于原核和真核生物中，主要包括兩個(gè)方面：DNA的修復(fù)；產(chǎn)生變異。P622、 名詞解釋C值反常現(xiàn)象：指C值往往與種系進(jìn)化的復(fù)雜程度不一致，某些低等生物卻有較大的C值p29端粒：是真核生物線性基因組DNA末端的一種特殊結(jié)構(gòu)，它是一段DNA序列和蛋白質(zhì)形成的復(fù)合體p33DNA變性與復(fù)性：p40增色效應(yīng)：當(dāng)DNA溶液溫度升高到接近水的沸點(diǎn)時(shí)，260nm的吸光度明顯增加。p40復(fù)制子：一般把生物體內(nèi)能獨(dú)立進(jìn)行復(fù)制的單位稱為復(fù)制子p43復(fù)制起始點(diǎn)：復(fù)制子中控制復(fù)制起始的位點(diǎn)稱為復(fù)制起始點(diǎn)p43染色體水平調(diào)控：決定不同染色體或同一染色體不同部位的復(fù)制子按

5、一定順序在S期起始復(fù)制。P57DNA聚合酶:P53AP位點(diǎn)：所有細(xì)胞中都帶有不同類型、能識(shí)別受損核酸位點(diǎn)的糖苷水解酶，它能特異性切除受損核苷酸上的N-ß糖苷鍵，在DNA鏈上形成去嘌呤或去嘧啶位點(diǎn)，統(tǒng)稱為AP位點(diǎn)。p59轉(zhuǎn)座子：存在于染色體DNA上可自主復(fù)制和移位的基本單位（P62）復(fù)合型轉(zhuǎn)座子：兩個(gè)相同或高度同源的IS元件插入某些抗藥性基因(或其他宿主基因)兩端時(shí)所組成的轉(zhuǎn)座子。(P62)SNP：即單核苷酸多態(tài)性，指基因組DNA序列中由于單個(gè)核苷酸（A TC和G）的突變而引起的多態(tài)性。p66三、簡(jiǎn)答題1. 染色體具備哪些作為遺傳物質(zhì)的特征？分子結(jié)構(gòu)相對(duì)穩(wěn)定能夠自我復(fù)制，使親子代之間保

6、持連續(xù)性能夠指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成，從而控制整個(gè)生命過程能夠產(chǎn)生可遺傳的變異P252. 什么是核小體？簡(jiǎn)述其形成過程：核小體是染色質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)單位，由200bpDNA和組蛋白八聚體組成。形成過程：核小體是由H2A、H2B、H3、H4各兩個(gè)分子生成的八聚體和由大約200bp的DNA組成的。形成核小體時(shí)八聚體在中間，DNA分子盤繞在外組成真核細(xì)胞染色體的一種重復(fù)珠狀結(jié)構(gòu)。p31-p323. 簡(jiǎn)述組蛋白都有哪些類型的修飾，其功能分別是什么？類型：甲基化、乙?；?、磷酸化、泛素化及ADP核糖基化。功能：不同程度的甲基化極大地增加了組蛋白修飾和調(diào)節(jié)基因表達(dá)的復(fù)雜性，組蛋白的甲基化與基因激活和與基因沉默相關(guān)，與其他

7、相比其修飾較為穩(wěn)定。P284. 簡(jiǎn)述DNA的一、二、三級(jí)結(jié)構(gòu)：1，DNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)，就是指4種核苷酸的連接及排列順序，表示了該DNA分子的化學(xué)成分；2，DNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)是指兩條多核苷酸連反向平行盤繞所形成的雙螺旋結(jié)構(gòu)；3，DNA的高級(jí)結(jié)構(gòu)是指DNA雙螺旋進(jìn)一步扭曲盤繞所形成的特定空間結(jié)構(gòu)p35-p415. DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型是有誰(shuí)提出的？簡(jiǎn)述其發(fā)現(xiàn)的主要實(shí)驗(yàn)依據(jù)及其在分子生物學(xué)發(fā)展中的重要意義。P35P37意義：DNA雙螺旋模型揭示了DNA作為遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定性特征最有價(jià)值的是確定了堿基配對(duì)原則這是DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和反轉(zhuǎn)錄的分子基礎(chǔ)亦是遺傳信息傳遞和表達(dá)的分子基礎(chǔ)。6. 解釋在DNA復(fù)制過程中

8、，后隨鏈?zhǔn)窃鯓雍铣傻?。P46 答：DNA聚合酶只能朝53方向合成DNA，后隨鏈不能像前導(dǎo)鏈一樣一直進(jìn)行合成，隨后鏈?zhǔn)且源罅开?dú)立片段（岡崎片段）合成，每個(gè)片段都以53合成的，每個(gè)片段都以53方向合成，這些片段最后由連接酶連接在一起，每個(gè)片段獨(dú)立引發(fā)、聚合、連接。7.簡(jiǎn)述DNA復(fù)制的調(diào)控P568.真核生物DNA的特點(diǎn)P549.原核生物DNA具有哪些不同于真核生物DNA的特征？1,  結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)練  原核DNA分子的絕大部分是用來(lái)編碼蛋白質(zhì)，只有非常小的一部分不轉(zhuǎn)錄，這與真核DNA的冗余現(xiàn)象不同。 2,  存在轉(zhuǎn)錄單元 &#

9、160;原核生物DNA序列中功能相關(guān)的RNA和蛋白質(zhì)基因，往往叢集在基因組的一個(gè)或幾個(gè)特定部位，形成功能單元或轉(zhuǎn)錄單元，它們可被一起轉(zhuǎn)錄為含多個(gè)mRNA的分子，稱為多順反子mRNA。 3,  有重疊基因    重疊基因，即同一段DNA能攜帶兩種不同蛋白質(zhì)信息。主要有以下幾種情況 一個(gè)基因完全在另一個(gè)基因里面  部分重疊  兩個(gè)基因只有一個(gè)堿基對(duì)是重疊的P50-p5410.大腸桿菌中的DNA修復(fù)系統(tǒng)及其功能？p57答：錯(cuò)配修復(fù)：恢復(fù)錯(cuò)配；切除修復(fù)：切除突變的堿基和核甘酸片段；重

10、組修復(fù)：復(fù)制后的修復(fù)，重新啟動(dòng)停滯的復(fù)制叉；DNA直接修復(fù)：修復(fù)嘧啶二體或甲基化DNA；SOS系統(tǒng)：DNA的修復(fù)，導(dǎo)致變異。11.轉(zhuǎn)座子的類型：(P65)答： 1）復(fù)制性轉(zhuǎn)座子：整個(gè)轉(zhuǎn)座子被復(fù)制，移動(dòng)的僅僅是原轉(zhuǎn)座子的拷貝。如TnA家族 2） 原始轉(zhuǎn)座子作為一個(gè)可移動(dòng)的實(shí)體直接被移動(dòng)。如IS序列，Tn5。12.轉(zhuǎn)座子的遺傳效應(yīng)：(P65)答：1）轉(zhuǎn)座引起插入突變，導(dǎo)致結(jié)構(gòu)基因失活。 2）出現(xiàn)新的基因 3）染色體畸變 4）引起生物進(jìn)化，相距很遠(yuǎn)的基因組合到一起產(chǎn)生新的功能基因或蛋白四、論述題1.談?wù)勗趶?fù)制型轉(zhuǎn)座過程中，轉(zhuǎn)座和切離的關(guān)系。P65 答：在復(fù)制轉(zhuǎn)座過程中，轉(zhuǎn)座和切離是兩個(gè)獨(dú)立事件。先是

11、由轉(zhuǎn)座酶分別切割轉(zhuǎn)座子的供體和受體DNA分子。轉(zhuǎn)座子的末端與受體DNA分子連接，并將轉(zhuǎn)座子復(fù)制一份拷貝，由此生成的中間體即共整合體（cointegrat，）有轉(zhuǎn)座子的兩份拷貝。然后在轉(zhuǎn)座子的兩份拷貝間發(fā)生類似同源重組的反應(yīng)，在解離酶的作用下，供體分子同受體分子分開，并且各帶一份轉(zhuǎn)座子拷貝。同時(shí)受體分子的靶位點(diǎn)序列也重復(fù)了一份拷貝。2.為什么說DNA的復(fù)制是半保留半不連續(xù)復(fù)制？P46 答：半不連續(xù)復(fù)制是由于DNA雙螺旋的兩股單鏈?zhǔn)欠聪蚱叫?，一條鏈的走向?yàn)?'-3',另一條鏈為3'-5',DNA的兩條鏈都能作為模板以邊解鏈邊復(fù)制方式，同時(shí)合成兩條新的互補(bǔ)鏈。但是，所

12、有已知DNA聚合酶的合成方向都是5-3，所以在復(fù)制是，一條鏈的合成方向和復(fù)制叉前進(jìn)方向相同，可以連續(xù)復(fù)制，稱為領(lǐng)頭鏈；另一條鏈的合成方向與復(fù)制叉前進(jìn)方向相反，不能順著解鏈方向連續(xù)復(fù)制，必須待模板鏈解開至足夠長(zhǎng)度，然后從5-3生成引物并復(fù)制子鏈。延長(zhǎng)過程中，又要等待下一段有足夠長(zhǎng)度的模板，再次生成引物而延長(zhǎng)，然后連接起來(lái)，這條鏈稱隨從鏈。因此就把領(lǐng)頭鏈連續(xù)復(fù)制，隨從鏈不連續(xù)復(fù)制的復(fù)制方式稱為半不連續(xù)復(fù)制。3.原核生物和真核生物DNA復(fù)制的異同點(diǎn)(50-51)第三章一、填空題1、 轉(zhuǎn)錄的基本過程包括：模板的識(shí)別、轉(zhuǎn)錄起始、通過啟動(dòng)子；轉(zhuǎn)錄的延伸和終止p742、 大腸桿菌RNA聚合酶與啟動(dòng)子的相互作

13、用主要包括啟動(dòng)子區(qū)的識(shí)別、酶與啟動(dòng)子的結(jié)合以及因子的結(jié)合與解離。P853、 核酶分可分為剪切型核酶和剪接型核酶兩大類。P1124、 RNA編輯具有重要的生物學(xué)意義，其中包括校正作用、調(diào)控翻譯和擴(kuò)充遺傳信息。P1095、 基因轉(zhuǎn)錄實(shí)際上是RNA聚合酶、轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子和啟動(dòng)子區(qū)各種調(diào)控元件相互作用的結(jié)果。6、.基因表達(dá)包括_轉(zhuǎn)錄_和_翻譯_兩個(gè)階段。P727、.大腸桿菌RNA聚合酶與啟動(dòng)子的相互作用主要包括_啟動(dòng)子區(qū)的識(shí)別_，_酶與啟動(dòng)子的結(jié)合_和_因子的結(jié)合與解離_p858、RNA剪接主要有_pre-mRNA剪接_,_1類自剪接內(nèi)含子_和_2_類自剪接內(nèi)含子p1009、tRNA的3個(gè)加工過程內(nèi)含子

14、的剪接，3端添加CCA和核苷酸的修飾p10010、.RNA編輯的生物學(xué)意義 校正作用，調(diào)控翻譯和擴(kuò)充遺傳信息p10911、tRNA的種類有起始tRNA、延伸tRNA、同工tRNA、校正tRNA P12712、一般把生物體內(nèi)能獨(dú)立進(jìn)行復(fù)制的單位稱為 復(fù)制子。P431 3、核糖體是指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成的大分子機(jī)器。P12814、RNA既可作為信息分子又能作為功能分子發(fā)揮作用。P7415、PCR的基本反應(yīng)過程包括：變性、退火、延伸 三個(gè)階段。P17816. RNA含有核糖和嘧啶，通常是_單鏈線性_分子(P73)17.RNA既可作為信息分子又能作為 _功能_分子發(fā)揮作用。（P74)18.RNA轉(zhuǎn)錄的基本過程

15、包括模板識(shí)別，轉(zhuǎn)錄起始_通過啟動(dòng)子_和_轉(zhuǎn)錄的延伸和終止_（P74-P78）19.啟動(dòng)子是基因轉(zhuǎn)錄起始所必需的一段DNA序列，是基因表達(dá)調(diào)控的 上游順式作用元件_之一(P74)20.大腸桿菌RNA聚合酶與啟動(dòng)子的相互作用主要包括啟動(dòng)子區(qū)的識(shí)別_酶與啟動(dòng)子的結(jié)合_和因子的結(jié)合與解離_p8521：RNA既可作為信息分子又能作為（功能分子）發(fā)揮作用。P7422：（RNA聚合酶）是轉(zhuǎn)錄過程中最關(guān)鍵的酶。P8123：RNA轉(zhuǎn)錄的一只雞根據(jù)其作用性質(zhì)的主要可分為兩大類，（DNA模板功能抑制劑）和（RNA聚合酶抑制劑）。P9224：根據(jù)（中心法則），DNA、RNA和蛋白質(zhì)之間存在著直接的線性關(guān)系。P1082

16、5：生物體內(nèi)主要有3種RNA：（mRNA、tRNA、Rrna）。P7426、真核細(xì)胞都有明顯的核結(jié)構(gòu)，除了（-性細(xì)胞-）以外，真核細(xì)胞的染色體都是二倍體，而性細(xì)胞即生殖細(xì)胞的染色體數(shù)目是體細(xì)胞的一半，故稱為（單倍體-）1、 27、啟動(dòng)子是基因轉(zhuǎn)錄起始所必需的一段（- DNA序列）p742、 28、細(xì)菌釋放因子有哪三種：（RF1、RF2、RF3）二、名詞解釋1、 核酶：是一種可以催化RNA切割和RNA剪接反應(yīng)的，由RNA組成的酶，可以作為基因表達(dá)和病毒復(fù)制的抑制劑。P1102、 增強(qiáng)子：遠(yuǎn)離轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)（130Kb）、決定基因的時(shí)間、空間特異性表達(dá)、增強(qiáng)啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄活性的DNA序列，其發(fā)揮作用的方式

17、通常與方向、距離無(wú)關(guān)。增強(qiáng)子也是有若干功能組件增強(qiáng)體組成，是特異轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合DNA的核心序列。P893、編碼鏈：指DNA雙鏈中與mRNA序列和方向相同的那條DNA鏈。4、模板識(shí)別：指RNA聚合酶與啟動(dòng)子DNA雙鏈相互作用并與之結(jié)合的過程。P745、錯(cuò)意突變：由于結(jié)構(gòu)基因中某個(gè)核苷酸的變化使一種氨基酸的密碼變成另一種氨基酸的密碼。P1276、信號(hào)肽：在起始密碼子后，有一段編碼疏水性氨基酸序列的RNA區(qū)域，這個(gè)氨基酸序列就被稱為信號(hào)肽。 P1517. 轉(zhuǎn)錄延伸（P77）8 轉(zhuǎn)錄終止(p78)9：轉(zhuǎn)錄：拷貝出一條與DNA鏈序列完全相同的RNA單鏈的過程。P7210：翻譯：以新生的mRNA為模板，把核

18、苷酸三聯(lián)遺傳密碼子翻譯成氨基酸序列、合成多肽鏈的過程。P7211、DNA聚合酶p5312、錯(cuò)配修復(fù)p58三、簡(jiǎn)答題1、 試比較原核和真核細(xì)胞的mRNA的異同。P93（1）真核生物mRNA的5端存在帽子結(jié)構(gòu)，絕大多數(shù)真核細(xì)胞生物mRNA還具有多（A）尾巴，原核一般沒有；（2）原核的mRNA可以編碼幾個(gè)多肽，真核只能編碼一個(gè)；（3）原核生物以AUG作為起始密碼，有時(shí)以GUG、UUG作為起始密碼，真核幾乎永遠(yuǎn)以AUG作為起始密碼。（4）原核生物mRNA半衰期短，真核長(zhǎng)。（5）真核生物以多順反子的形式存在，真核以單順反子的形式存在。2、簡(jiǎn)述增強(qiáng)子的特點(diǎn)p89（1）遠(yuǎn)距離效應(yīng)，一般位于上游-200bp處

19、，但可增強(qiáng)遠(yuǎn)處啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄，即使相距十多個(gè)千堿基對(duì)也能發(fā)揮作用。（2）無(wú)方向性，無(wú)論位于靶基因的上游、下游或內(nèi)部都可發(fā)揮增強(qiáng)轉(zhuǎn)錄的作用。（3）順式調(diào)節(jié)，只調(diào)節(jié)位于同一染色體上的靶基因，而對(duì)其他染色體上的基因沒有作用。（4）無(wú)物種和基因的特異性，可以連接到異源基因上發(fā)揮作用。（5）具有組織特異性，SV40的增強(qiáng)子在3T3細(xì)胞中比多瘤病毒的增強(qiáng)子要弱，但在HeLa細(xì)胞中SV40的增強(qiáng)子比多瘤病毒的要強(qiáng)5倍。增強(qiáng)子的效應(yīng)需特定的蛋白質(zhì)因子參與。（6）有相位性，其作用和DNA的構(gòu)象有關(guān)。（7）有點(diǎn)增強(qiáng)子可以對(duì)外部信號(hào)產(chǎn)生反應(yīng)，如熱休克基因在高溫下才表達(dá)，某些增強(qiáng)子可以被固醇類激素所激活。3、簡(jiǎn)述RNA

20、的功能。 答：書本P744、簡(jiǎn)述原核生物和真核生物mRNA的區(qū)別。 答：書本P935、真核生物基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)主要有哪些？P33 （1）真核基因組龐大，一般都遠(yuǎn)大于原核生物的基因組； （2）真核基因組存在大量的重復(fù)序列； （3）真核基因組的大部分為非編碼序列，占整個(gè)基因組序列的90%以上，該特點(diǎn)是真核生物與細(xì)菌和病毒之間最主要的區(qū)別；（4）真核基因組的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順反子； （5）真核基因是斷裂基因，有內(nèi)含子結(jié)構(gòu)； （6）真核基因組存在大量的順式作用元件，包括啟動(dòng)子、增強(qiáng)子、沉默子等； （7）真核基因組中存在大量的DNA多態(tài)性； （8）真核基因組具有端粒結(jié)構(gòu)。6、RNA作為功能分子有哪些重要作用

21、？ P74 （1）作為細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)生物合成的主要參與者； （2）部分RNA可以作為核酶在細(xì)胞中催化一些重要的反應(yīng)，主要作用于初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的剪接加工； （3）參與基因表達(dá)的調(diào)控，與生物的生長(zhǎng)發(fā)育密切相關(guān)； （4）在某些病毒中，RNA是遺傳物質(zhì)。7、.RNA的結(jié)構(gòu)有哪些特點(diǎn)。P738、.簡(jiǎn)述因子的作用。P829：原核生物mRNA的特征p93 1，原核生物mRNA的半衰期短。2，許多原核生物的mRNA可能以多順反子的形式存在。3，原核生物mRNA的5端無(wú)帽子結(jié)構(gòu)，3端沒有或只有較短的多(A)結(jié)構(gòu)。P9310：真核生物mRNA的特征p96 1,真核生物mRNA的5端存在帽子結(jié)構(gòu)。2，絕大多數(shù)真核生物m

22、RNA具有多(A)尾巴。P96論述11、什么是編碼鏈？什么是模板鏈？12、試述PCR擴(kuò)增的原理和步驟p177四、論述題1、大腸桿菌的終止子有哪兩大類？請(qǐng)分別介紹一下它們的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。P78（1）不依賴因子的終止子：終止位點(diǎn)上游一般存在一個(gè)富含GC堿基的二重對(duì)稱區(qū)， 由其轉(zhuǎn)錄的RNA容易形成發(fā)卡結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致RNA聚合酶的暫停，破壞DNA-RNA雜合 鏈的結(jié)構(gòu)。在終止位點(diǎn)前還有一段48個(gè)A組成的序列，對(duì)應(yīng)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的3端為寡聚U（poly U），該結(jié)構(gòu)特征導(dǎo)致了轉(zhuǎn)錄的終止。轉(zhuǎn)錄終止不依賴因子。 （2） 依賴因子的終止子：轉(zhuǎn)錄的RNA也有發(fā)卡結(jié)構(gòu)，但其后無(wú)poly（U）。形成 的發(fā)卡結(jié)構(gòu)較疏松，結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定

23、。轉(zhuǎn)錄終止需要因子的參與。與不依賴因 子的終止相同的是，終止信號(hào)存在于新生RNA鏈，而非DNA鏈。2、大腸桿菌的終止子有哪兩類？請(qǐng)分別介紹它們的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)？ 答：書本P78-793、試論述原核生物與真核生物轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的比較。P93答：（1）只有一種RNA聚合酶參與所有類型的原核生物基因轉(zhuǎn)錄，而真核生物有3種以上的RNA聚合酶來(lái)負(fù)責(zé)不同類型的基因轉(zhuǎn)錄，合成不同類型的、在細(xì)胞核內(nèi)有不同定位的RNA。（2）轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物有差別。原核生物的初級(jí)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物大多數(shù)是編碼序列，與蛋白質(zhì)的氨基酸序列呈線性關(guān)系；而真核生物的初級(jí)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物很大，含有內(nèi)含子序列，成熟的mRNA只占初級(jí)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的一小部分。（3）原核生物的初級(jí)轉(zhuǎn)錄

24、產(chǎn)物幾乎不需要剪接加工，就可直接作為成熟的mRNA進(jìn)一步行使翻譯模板的功能；真核生物轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物需要經(jīng)過剪接、修飾等轉(zhuǎn)錄后加工成熟過程才能成為成熟的mRNA。（4）在原核生物細(xì)胞中，轉(zhuǎn)錄和翻譯不僅發(fā)生在同一個(gè)細(xì)胞空間里，而且這兩個(gè)過程幾乎是同步進(jìn)行的，蛋白質(zhì)合成往往在mRNA剛開始轉(zhuǎn)錄時(shí)就被引發(fā)了。真核生物mRNA的合成和蛋白質(zhì)的合成則發(fā)生在不同的空間和時(shí)間范疇內(nèi)。4、.真核與原核生物基因轉(zhuǎn)錄有哪些差異？（p93-p100）5、RNA的種類和其生物學(xué)作用？p74 種類：mRNA、tRNA、rRNA 生物學(xué)作用作為信息分子：RNA擔(dān)負(fù)著貯藏及轉(zhuǎn)移遺傳信息的功能，起著遺傳信息由DNA到蛋白質(zhì)的中間傳遞

25、體的核心作用。作為功能分子：1、作為細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)生物合成的主要參與者 2、部分RNA可以作為核酶在細(xì)胞中催化一些重要的反應(yīng)，主要作用于初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的剪接加工 3、參與基因表達(dá)的調(diào)控，與生物的生長(zhǎng)發(fā)育密切相關(guān) 4、在某些病毒中，RNA是遺傳物質(zhì) 6、核酶具有哪些結(jié)構(gòu)特點(diǎn)？根據(jù)其催化功能不同可分為那兩大類？其生物學(xué)意義是什么？p110第四章一、填空題1.翻譯從（起始密碼AUG）開始，沿著mRNA(5-3)的方向連續(xù)閱讀密碼子，直至（終止密碼）為止。P1162.一個(gè)密碼子由（3）個(gè)核苷酸組成，（4）核苷酸可組成（64）個(gè)密碼子。P1203.終止密碼子為（UAA）、（UAG）、（UAG）。 P1204

26、.作為基因產(chǎn)物的蛋白質(zhì)是受（基因）控制的。 P1165.mRNA中有（4）種核苷酸，而蛋白質(zhì)中有（20）種氨基酸。 P1176tRNA為相應(yīng)氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)到核糖體提供了 運(yùn)送載體 ，所以它又被稱為第二遺傳密碼。P1237tRNA的種類有起始tRNA， 延伸tRNA ，同工tRNA和校正tRNA；P127 8核糖體小亞基負(fù)責(zé) 對(duì)模板mRNA進(jìn)行序列特異性識(shí)別 ，大亞基負(fù)責(zé) 攜帶氨基酸及tRNA的功能 P1349翻譯過程的肽鏈延長(zhǎng)，也稱為核糖體循環(huán)。每次核糖體循環(huán)又分為三個(gè)步驟：  進(jìn)位  、成肽和  轉(zhuǎn)位   。10、核糖體是由幾

27、十種蛋白質(zhì)和幾種核糖體RNA組成的的亞細(xì)胞顆粒P12811、蛋白質(zhì)的生物合成是以（ 氨基酸 ）作為原料，在（ 核糖體 ）中進(jìn)行的生物過程。 （P135 第一段 氨基酸的活化）12、蛋白質(zhì)的生物合成包括（ 氨基酸活化 ）、肽鏈的起始，伸長(zhǎng)，終止、以及（ 新肽鏈的折疊與加工 ）。P134 第五段 蛋白質(zhì)合成的生物學(xué)機(jī)制13、（ tRNA ）與（ 相應(yīng)氨基酸 ）的結(jié)合是蛋白質(zhì)合成中的關(guān)鍵步驟。（P136 第一段）14、（ 抗生素 ）是蛋白質(zhì)生物合成的主要抑制劑。（P148 第三段 蛋白質(zhì)合成的抑制劑）15、肽鏈的終止密碼有（ UAA ）、（ UAG ）、（UGA ）（P143 第三段 肽鏈的終止）1

28、6若某個(gè)蛋白質(zhì)的合成和運(yùn)轉(zhuǎn)是同時(shí)發(fā)生的，則屬于翻譯運(yùn)轉(zhuǎn)同步機(jī)制。（P150 4.5）17若蛋白自從和糖體上釋放后才發(fā)生運(yùn)轉(zhuǎn)，則屬于翻譯后運(yùn)轉(zhuǎn)機(jī)制。（P150 4.5）18、?？康鞍准碊P是在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的受體蛋白，它能夠與結(jié)合有信號(hào)序列的SRP牢牢地結(jié)合，使它在合成蛋白質(zhì)的核糖體?？康絻?nèi)質(zhì)網(wǎng)上來(lái)。（P153 4.5.1）19、擁有前導(dǎo)肽的線粒體蛋白質(zhì)前體能夠跨膜運(yùn)轉(zhuǎn)進(jìn)入線粒體，在這一過程中前導(dǎo)肽被水解，前體轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒斓鞍?，失去繼續(xù)跨膜能力。（P155 4.5.2）20、葉綠體定位信號(hào)肽一般有兩個(gè)部分，第一部分決定該蛋白質(zhì)能否進(jìn)入葉綠體基質(zhì)，第二部分決定該蛋白能否進(jìn)入類囊體。（P155 4.5.2

29、）21.泛素化修飾涉及（泛素激活酶E1）、（泛素激活酶E2）、（泛素連接酶E3）等3個(gè)酶的級(jí)聯(lián)反應(yīng)。（P159 4.6.1）22.蛋白質(zhì)的（SUMO化修飾）能夠阻止泛素化引起的蛋白質(zhì)降解。（P161 4.6.2圖4-41解釋）23.NEDDylation可能參與（細(xì)胞增殖分化）、（細(xì)胞發(fā)育）、（細(xì)胞周期）、（信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)）等重要生命過程的調(diào)控。（P162 4.6.3）24.NEDD8參與NEDDylantion過程的關(guān)鍵位點(diǎn)是（賴氨酸殘基）。（P163 4.6.3）25.在真核生物中，蛋白質(zhì)的降解主要依賴與（泛素）。（P159 4.6.1）二、名詞解釋1、密碼子：mRNA上毎3個(gè)核苷酸翻譯成蛋白質(zhì)

30、多肽鏈上的一個(gè)氨基酸，這3個(gè)核苷酸就稱為密碼，也叫三聯(lián)子密碼即密碼子。 P1162、簡(jiǎn)并：由一種以上密碼子編碼同一個(gè)氨基酸的現(xiàn)象稱為簡(jiǎn)并。P1213、同工tRNA：由于一種氨基酸可能有多個(gè)密碼子，因此有多個(gè)tRNA來(lái)識(shí)別這些密碼子，即多個(gè)tRNA代表一種氨基酸，我們將幾個(gè)代表相同氨基酸的tRNA稱為同工tRNA。P1274、無(wú)義突變：在蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因中，一個(gè)核苷酸的改變可能使代表某個(gè)氨基酸的密碼子變成終止密碼子，使蛋白質(zhì)合成提前終止，合成無(wú)功能的或無(wú)意義的多肽，這種突變成為無(wú)義突變。P127 4.2.4.35、糖基化：是真核細(xì)胞蛋白質(zhì)的特征之一，大多數(shù)糖基化是由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中的糖基化酶催化進(jìn)行的。

31、所有的分泌蛋白和膜蛋白幾乎都是糖基化蛋白質(zhì)。 P145 第四段 糖基化6、熱休克蛋白：一類應(yīng)激反應(yīng)性蛋白，包括HSP70、HSP40、GrpE三個(gè)家族，廣泛存在于原核細(xì)胞以及真核細(xì)胞中。三者協(xié)同作用，促使某些能自發(fā)折疊的蛋白質(zhì)正確折疊形成天然空間構(gòu)象。 P147 最后一段 熱休克蛋白7信號(hào)肽：絕大多數(shù)越膜蛋白的N端都具有長(zhǎng)度大約在13-36個(gè)殘基之間的以疏水氨基酸為主的N端信號(hào)序列稱為信號(hào)肽。（P151 4.5.1）8、信號(hào)識(shí)別顆粒：是一種核糖核酸蛋白復(fù)合體，它的作用是識(shí)別信號(hào)序列，并將核糖體引導(dǎo)到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上。（P153 4.5.1）9、泛素化：泛素分子在泛素激活酶、結(jié)合酶、連接酶等的作用下，對(duì)

32、靶蛋白就進(jìn)行特異性修飾的過程。（P159 4.6.1）10、SUMO化修飾：把SUMO轉(zhuǎn)移到底物的賴氨酸殘基上，穩(wěn)定靶蛋白使其免受降解的過程。（P161 4.6.2）3、 簡(jiǎn)答題1、遺傳密碼具有哪些性質(zhì)？ P119-P1232、蛋白質(zhì)如何產(chǎn)生？P111 蛋白質(zhì)生物合成的主要過程？ P1163、簡(jiǎn)述真核細(xì)胞中翻譯終止的過程。參考P143 肽鏈的終止答：由于氨酰 tRNA 上沒有反密碼子能夠與三個(gè)終止密碼子互補(bǔ)配對(duì)，因此翻譯終止。終止并需要tRNA 的協(xié)助，此時(shí)沒有氨基酸能夠連接到位于 P 位點(diǎn)的肽酰 tRNA 上。釋放因子（eRF）有助于終止的發(fā)生，可能使 tRNA 上的氨基酸 C 端不需要轉(zhuǎn)肽

33、基和脫?；l(fā)生轉(zhuǎn)位。新生肽直接從 P 位點(diǎn)離開核糖體并進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)（細(xì)胞質(zhì)核糖體）或進(jìn)入轉(zhuǎn)位酶通道（內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核糖體）。4、 區(qū)別 tRNA 和 mRNA 在翻譯中的作用。P116答：mRNA 是氨基酸裝配成多肽的模板。tRNA 一方面是識(shí)別特異氨基酸的接頭分子，另一方面又可以識(shí)別特異的 mRNA 密碼子。5、蛋白質(zhì)前體的加工主要內(nèi)容 P144 蛋白質(zhì)前體的加工答：N端f Met或Met的切除：N端的甲硫氨酸往往在多肽合成完畢之前被切除 二硫鍵的形成：蛋白質(zhì)的二硫鍵是蛋白質(zhì)合成后，通過兩個(gè)半胱氨酸的氧化作用生成的，密碼子中沒有胱氨酸的密碼子。特定氨基酸的修飾：氨基酸側(cè)鏈的修飾包

34、括磷酸化、糖基化、甲基化、已基化、羥基化和羧基化等。切除新生肽鏈中的非功能片段：不少肽類激素和酶的前體都要經(jīng)過加工才能變成活性分子6、蛋白質(zhì)合成的過程 P134-P135答：氨基酸的活化翻譯的起始肽鏈的延伸肽鏈的終止 肽鏈的折疊和加工7、信號(hào)肽的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是什么？（P151 4.5.1） 1.一般帶有10-15個(gè)疏水氨基酸。 2.常常在靠近該序列N-端疏水氨基酸區(qū)上游帶有1個(gè)或數(shù)個(gè)帶正電荷的氨基酸。 3.在其C-末端靠近蛋白酶切割位點(diǎn)處常常帶有數(shù)個(gè)極性氨基酸，離切割位點(diǎn)最近的那個(gè)氨基酸往往帶有很短的側(cè)鏈(Ala或Gly)。8、 前導(dǎo)肽一般具有什么特性？（P155 4.5.2） 1.帶正

35、電荷的堿性氨基酸（特別是精氨酸）含量較為豐富，它們分散于不帶電荷的氨基酸序列之間； 2.缺少帶負(fù)電荷的酸性氨基酸； 3.羥基氨基酸（特別是絲氨酸）含量較高； 4.有形成兩親（既有親水又有疏水部分）-螺旋結(jié)構(gòu)的能力。9、.泛素化修飾的作用？（P160 4.6.1）降解蛋白質(zhì)，參與多種生物功能的調(diào)控，在蛋白質(zhì)的定位、代謝、和降解中都起著重要作用，能參與細(xì)胞周期、增殖、凋亡、分化、轉(zhuǎn)移、基因表達(dá)、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)、信號(hào)傳遞、損傷修復(fù)、炎癥免疫等幾乎一切生命活動(dòng)調(diào)控。10、.SUMO化修飾的作用？P161-P162 4.6.2）影響蛋白質(zhì)亞細(xì)胞定位，廣泛參與細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用、DNA結(jié)合、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、

36、核質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、轉(zhuǎn)錄因子激活等重要過程。四、論述題1、遺傳密碼有哪些特性？并回答各特點(diǎn)對(duì)生物具有哪些意義。 P119-P1232、真核與原核核糖體的主要區(qū)別是什么？參考P128-P134答：真核細(xì)胞 80S 核糖體中核糖體蛋白和 rRNA 數(shù)量和體積比原核細(xì)胞 70S 核糖體的，其體積約為原核的 2 倍。真核細(xì)胞的大小亞基（即 40S 和 60S）均比原核細(xì)胞的（原核細(xì)胞為 30S 和50S）。在兩種細(xì)胞的核糖體中，rRNA 占了絕大部分體積，原核細(xì)胞的 RNA 含量則比真核細(xì)胞高。原核細(xì)胞核糖體有 E 位點(diǎn)便于脫酰 tRNA 的離開。3、試述蛋白質(zhì)是如何合成、加工并運(yùn)輸?shù)侥康牡匦惺咕唧w功能的？P1

37、34-P164答：蛋白質(zhì)合成的過程：DNA轉(zhuǎn)錄形成信使RNA(mRNA),mRNA單鏈同時(shí)與多個(gè)核糖體結(jié)合，合成許多條肽鏈，肽鏈盤曲折疊形成復(fù)雜空間結(jié)構(gòu)，初步合成了蛋白質(zhì)。 接下來(lái)，進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔后，還要經(jīng)過一些加工，如折疊、組裝、加上一些糖基團(tuán)等，才能成為比較成熟的蛋白質(zhì)，然后，由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔膨大、出芽形成具膜的小泡，包裹著蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到高爾基體，把蛋白質(zhì)輸送到高爾基體腔內(nèi)，做進(jìn)一步的加工。接著，高爾基體邊緣突起形成小泡，把蛋白質(zhì)包裹在小泡里，運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞膜，小泡與細(xì)胞膜融合，把蛋白質(zhì)釋放到細(xì)胞外。4、線粒體蛋白質(zhì)的跨膜運(yùn)轉(zhuǎn)過程有什么特征？（P154 4.5.2）  通過線粒體膜的蛋白質(zhì)是在

38、合成以后再運(yùn)轉(zhuǎn)的。這個(gè)過程有如下特征： 通過線粒體膜的蛋白質(zhì)在運(yùn)轉(zhuǎn)之前大多數(shù)以前體形式存在，它由成熟蛋白質(zhì)和N端延伸出的一段前導(dǎo)肽共同組成。 蛋白質(zhì)通過線粒體內(nèi)膜的運(yùn)轉(zhuǎn)是一種需能過程； 蛋白質(zhì)通過線粒體膜運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)，首先由外膜上的Tom受體復(fù)合蛋白識(shí)別與Hsp70或MSF等分子伴侶相結(jié)合的待運(yùn)轉(zhuǎn)多肽，通過Tom和Tim組成的膜通道進(jìn)入線粒體內(nèi)腔。5、 蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)對(duì)蛋白質(zhì)穩(wěn)定性的影響？（P163 4.6.4）成熟蛋白N端的第一個(gè)氨基酸在蛋白質(zhì)的降解中有著舉足輕重的作用。當(dāng)某個(gè)蛋白質(zhì)N端是甲硫氨酸、甘氨酸、丙氨酸、絲氨酸、蘇氨酸和纈氨酸時(shí)，表現(xiàn)穩(wěn)定。N段是賴氨酸、精氨酸時(shí)，表現(xiàn)不穩(wěn)定，平均2-3m

39、in被降解。泛素調(diào)控的蛋白質(zhì)降解有重要的生理意義，不僅能夠清除錯(cuò)誤蛋白質(zhì)，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)周期、DNA復(fù)制以及染色體結(jié)構(gòu)有重要調(diào)控作用。第五章一、填空題：1. 細(xì)菌轉(zhuǎn)化常用的方法有CaCl2法 和 電擊法 。P1752. 在一定的 電場(chǎng)強(qiáng)度 下，DNA分子的電泳的遷移率取決于 核酸分子本身的大小 和 構(gòu)型 。P1733. 電泳的速率與 電場(chǎng)強(qiáng)度 和 電泳分子本身所攜帶的凈電荷數(shù) 成正比。P1734. 凝膠濃度的高低影響凝膠介質(zhì)孔隙的大小，濃度 越高 ，孔隙 越小 ，其分辨能力就 越強(qiáng) 。P1735. CoLE1質(zhì)粒載體是松弛型復(fù)制控制的 多拷貝質(zhì)粒 。P1686. PCR反應(yīng)的原始材料是_（模板DN

40、A）_。出處：課本177頁(yè)7. DNA聚合酶是一種天然產(chǎn)生的能催化DNA的_合成_和_復(fù)制_的生物大分子。出處：課本177頁(yè)8. 基因組中的某些區(qū)域中，CpG序列密度可達(dá)均值的5倍以上，成為鳥嘌呤和胞嘧啶的富集區(qū)，形成所謂的_（CpG島）出處：課本第四章137頁(yè)9. DNA甲基化的主要形式有_5-甲基胞嘧啶_、_6-甲基腺嘌呤_和_7-甲基鳥嘌呤_。（、）出自課本181頁(yè)10. 由于PCR技術(shù)具有極高的敏感性，擴(kuò)增產(chǎn)物總量的變異系數(shù)常常達(dá)到_。（10%-30%）出自課本178頁(yè)11. 細(xì)胞中總RNA包括（mRNA）（rRNA）（tRNA）（sRRNA）P18512. 基因文庫(kù)必須具有一定的（代

41、表性）和（隨機(jī)性）P18313. 目前實(shí)驗(yàn)室常用的總RNA的抽屜方法是（異硫氰酸胍-苯酚抽提法）P18514. 構(gòu)建基因組文庫(kù)最常用的的方法是（噬菌體載體）和（限制性核酸內(nèi)切酶）部分消化法。P18415. RNA的濃度和純度科以通過測(cè)定其（OD260）和（OD280）來(lái)判斷。P18516. 基因文庫(kù)篩選的只要篩選方法包括（核酸雜交法）、（PCR篩選法）和（免疫篩選法）。(p189)17. 可以用核酸雜交篩選法進(jìn)行（重組噬菌體）的篩選。（P189）18. 基因文庫(kù)的篩選是指通過某種特殊方法從（基因文庫(kù)）中鑒定出含有所需重組DNA分子的特定克隆的過程。（P189）19. 含有cDNA插入片段的重組

42、噬菌粒只有經(jīng)過體外蛋白外殼包裝反應(yīng)，才能成為有（侵染）和（復(fù)制）能力的成熟噬菌體。（P188）20. 在cDNA合成的過程中，應(yīng)選用活性較高的（反轉(zhuǎn)錄酶）及（甲基化cDNA），cDNA兩端應(yīng)加上不同內(nèi)切酶所識(shí)別的接頭序列，保證所獲得雙鏈cDNA的方向性。（P187）21. RACE是一項(xiàng)在 已知 cDNA序列 的基礎(chǔ)上克隆 5 端或 3 端缺失序列的技術(shù)。P19122. cDNA序列可來(lái)自序列 表達(dá)標(biāo)簽 、 減法cDNA文庫(kù) 、 差式顯示 和 基因文庫(kù)的篩選 。 P19123. Gateway 克隆技術(shù)主要包括 TOPO反應(yīng) 和 LP反應(yīng) 兩步。 P19324. 基因的圖位克隆法是分離 未知性

43、狀目的基因 的一種好方法。 P19325. Gateway基因大規(guī)?？寺》ɡ?噬菌體 進(jìn)行位點(diǎn)特異性DNA片段重組。P19326. 蛋白質(zhì)組學(xué)是_蛋白質(zhì)_和_基因組_研究在形式和內(nèi)容兩方面的組合。 P19627. 分離大量混合蛋白質(zhì)組分的最有效方法是_雙向電泳技術(shù)_，該方法依賴于蛋白質(zhì)的兩個(gè)重要特性，即_等電點(diǎn)_和_相對(duì)分子質(zhì)量_。P19728. 現(xiàn)行的質(zhì)譜儀可分為三個(gè)連續(xù)的組成部分，即是_離子源_、_離子分離區(qū)_和_檢測(cè)器_。P19829. 在DIGE技術(shù)中，_內(nèi)標(biāo)_是所以實(shí)驗(yàn)樣本的混合物。 P198 30. 雙向凝膠的最大分辨率已經(jīng)達(dá)到每塊膠_10000_個(gè)蛋白點(diǎn)。 P197名

44、詞解釋：1. 細(xì)菌轉(zhuǎn)化：指一種細(xì)菌菌株由于捕獲了來(lái)自供體菌株的DNA而導(dǎo)致性狀特征發(fā)生遺傳改變的過程。P1752. 感受態(tài)細(xì)胞：指經(jīng)過適當(dāng)處理后容易接受外來(lái)DNA進(jìn)入的細(xì)胞P1753. DNA甲基化（指生物體在DNA甲基轉(zhuǎn)移酶的催化下，以S-腺苷甲硫氨酸為甲基供體將甲基轉(zhuǎn)移到特定的堿基上的過程）出自課本181頁(yè)4. 同源測(cè)序（指實(shí)驗(yàn)中所挑取的克隆來(lái)源于同一個(gè)原始DNA模板分子，形成了完全相同的沒有代表性的甲基化模式）課本182頁(yè)5. 基因組文庫(kù)：P1836. MRNA的純化：P1867. 核酸雜交法：核酸雜交法以其廣泛的適用性和快速性成為基因文庫(kù)篩選中最常用的的方法之一，是用放射性標(biāo)記的特異D

45、NA探針進(jìn)行高密度的菌落雜交篩選。（P189）8. 基因文庫(kù)：是指某一生物類型的全部基因的集合。P1899. 克?。篜19010. PACE技術(shù)：P19111. 內(nèi)標(biāo) P19812. 雙向電泳 P197簡(jiǎn)答題：1. pUC質(zhì)粒載體由哪幾部分組成？P1682. 在凝膠電泳中使用溴化乙錠的原因。P1743. 簡(jiǎn)述重亞硫酸鹽測(cè)序的主要過程。（課本182頁(yè)）4. 在動(dòng)物細(xì)胞中，DNA的甲基化狀態(tài)有三種，分別是？（出自課本181頁(yè)5. 簡(jiǎn)述在基因組文庫(kù)中通常提高文庫(kù)代表性的兩種策略。P1836. 簡(jiǎn)述RNA基本操作技術(shù)。P1857. 在cDNA合成過程中加入的甲基化dCTP的作用是什么？（P187）答：

46、反應(yīng)體系中一般加入甲基化dCTP，保證新合成的cDNA鏈被甲基化修飾，以防止構(gòu)建克隆時(shí)被限制性內(nèi)切酶切割。8.如何提高用雜交篩選法進(jìn)行重組噬菌斑的篩選的結(jié)果的可靠性？（P189）答：將硝酸纖維素膜覆蓋在瓊脂平板表面，使之與噬菌斑直接接觸，噬菌斑中大量沒有被包裝的游離DNA及噬菌體顆粒便一起轉(zhuǎn)移到膜上?？蓮耐皇删咂桨迳线B續(xù)印幾張同樣的硝酸纖維素膜，進(jìn)行重復(fù)實(shí)驗(yàn)，而且可以使用兩種或數(shù)種不同的探針篩選同一套重組子，提高結(jié)果的可靠性。8. 說說cDNA差異分析法的原理？P1929. cDNA末端快速擴(kuò)增法的主要操作步驟？P19110. 簡(jiǎn)述雙向電泳技術(shù)的原理。 P19711. 簡(jiǎn)述蛋白質(zhì)質(zhì)譜分析技

47、術(shù)的步驟和原理。 P198論述題：1. 簡(jiǎn)述細(xì)菌轉(zhuǎn)化的兩種常用方法。P1752. 敘述PCR技術(shù)的原理。出自課本177頁(yè)）3. CDNA合成時(shí)的方向性是如何實(shí)現(xiàn)的？P1874. 說說cDNA的合成流程？（P187）5. 基因克隆的方法主要有哪幾種？簡(jiǎn)述各種方法的作用及用途。 P191-P193答： 1、RACE技術(shù)，用于在已知cDNA序列的基礎(chǔ)上克隆5端和3端缺失的序列。2、應(yīng)用cDNA差示分析法克隆基因，在沒有任何探針的情況下，通過降低cDNA群體復(fù)雜性和更換cDAN兩端接頭的方法特異性的擴(kuò)增目的基因片段。3、Gateway大規(guī)?？思夹g(shù)，用于實(shí)現(xiàn)不需要傳統(tǒng)的酶切連接過程的基因快速克隆和載體間

48、平行轉(zhuǎn)移，為大規(guī)模克隆基因組注視的可譯框架提供保障。4、基因的圖位克隆法，用于分離未知形狀目的基因。6. 試述熱不對(duì)稱交錯(cuò)多聚酶連鎖反應(yīng)(TAIL-PCR)的主要技術(shù)和原理。P195第六章一、填空1、一般將選擇性剪接分為平衡剪接、5選擇性剪接、3選擇性剪接、外顯子遺漏型剪接及相互排斥型剪接。（P207）2、轉(zhuǎn)錄組研究的基本方法包括基因芯片技術(shù)和轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)。（P204）3、原位雜交通常分為RNA原位雜交和染色體原位雜交。（P209）4、隨著科技的發(fā)展，科學(xué)家主要采用重疊延伸技術(shù)和大引物誘變法兩種PCR方法。（P210）5、高通量測(cè)序技術(shù)可以幾十萬(wàn)甚至幾百萬(wàn)條序列，主要有454測(cè)序平臺(tái)和Sol

49、exa測(cè)序平臺(tái)。（P205）6、基因敲除分為完全基因敲除、條件基因敲除兩種。 （212）7、真核生物基因敲除的技術(shù)路線主要包括構(gòu)建重組基因載體、用電穿孔、顯微注射等方法把重組DNA導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞純系中。 (214)8、胚胎干細(xì)胞分離和體外培養(yǎng)的成功奠定了哺乳動(dòng)物基因敲除的技術(shù)基礎(chǔ)。(214) 9、T-DNA無(wú)專一整合位點(diǎn)，在植物基因組中發(fā)生隨機(jī)整合，所以只要突變株數(shù)目足夠大，從理論上就可獲得任何一個(gè)功能基因都發(fā)生突變的基因敲除植物庫(kù)。 (218)10、因?yàn)橥粗亟M常常發(fā)生在某一條染色體上，要想得到穩(wěn)定遺傳的純合體基因敲除模型，至少需要兩代以上的遺傳。 (

50、217)11、酵母單雜交系統(tǒng)包括酵母單雜交系統(tǒng)，酵母雙雜交系統(tǒng)。P20012、蛋白質(zhì)相互作用技術(shù)可分為等離子表面共振技術(shù)、免疫共沉淀技術(shù)和GST及GAD融合蛋白沉降技術(shù)。P22213、蛋白質(zhì)相互作用技術(shù)中常用到的三種探針包括熒光蛋白、傳統(tǒng)有機(jī)染料、鑭系染料。P22414.小分子干擾核苷酸，即siRNA是導(dǎo)致基因沉默和序列特異性RNA降解的重要中間媒介。P22715、酵母雙雜交系統(tǒng)主要利用真核生物DNA結(jié)構(gòu)域、轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域的轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的組件式結(jié)構(gòu)特征。P22016、用基因芯片進(jìn)行研究一般包括五個(gè)步驟：生物學(xué)問題的提出，樣品制備，生化反應(yīng)，檢測(cè)和數(shù)據(jù)模型分析。(229)17、制備簡(jiǎn)易基因芯片時(shí)

51、，使用機(jī)械臂把DNA片段點(diǎn)在玻璃片或尼龍膜上，在經(jīng)過物理吸附作用烘烤或化學(xué)處理使DNA分別固定在載體上。(229)18、基因芯片數(shù)據(jù)分析包括兩部分：數(shù)據(jù)的可靠性和生物學(xué)意義分析。(229)19、簡(jiǎn)易芯片上的基因數(shù)量少，主要用于研究小部分特定的基因表達(dá)狀態(tài)。(229)20、大規(guī)?；蛐酒ǔＩ婕盎蚪M規(guī)模與數(shù)量一般大于10000個(gè)基因，可采用接觸式點(diǎn)樣，非接觸式點(diǎn)樣或半導(dǎo)體技術(shù)制備樣品。(229)21、酵母中轉(zhuǎn)化DNA的整合重組主要通過 同源重組 方式進(jìn)行，整合效率高。（P231，第二段最后一句。）22、二倍體酵母細(xì)胞在低氮，無(wú)發(fā)酵性碳源的條件下能通過減數(shù)分裂形成單倍體孢子。（p232最后一段第

52、一句。）23、酵母細(xì)胞的三種交配型 MATa 、 MAT 、 MATa/（p232倒數(shù)第三段第一句）24、將外源基因克隆與酵母表達(dá)載體上，轉(zhuǎn)化野生型或突變酵母菌株，通過觀察酵母的表型變化或化學(xué)成分的變化即可推測(cè)該基因的生物學(xué)功能。（p233最后一段第一句）25、酵母菌單倍體細(xì)胞按沿軸的方向出芽；二倍體細(xì)胞按極性方向出芽。（p232第二段最后兩句）26、噬菌體可被分為溶菌周期 和融源周期 兩種不同的類型。（p235）27、研究細(xì)胞定位可采用多種方法，常用的是熒光蛋白標(biāo)記和免疫熒光法。（p242）28、凝膠滯緩實(shí)驗(yàn)是分離純化特定DNA結(jié)合蛋白的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)方法。（p234）29、在蛋白質(zhì)磷酸化分析技術(shù)

53、中，通常蛋白激酶可以促使底物蛋白發(fā)生磷酸化，而蛋白質(zhì)磷酸酯酶則能催化底物蛋白發(fā)生去磷酸化。（p237）30、綠色熒光蛋白（GFP）有兩個(gè)吸收峰，最大吸收峰在395nm，另一個(gè)在475nm，前者由紫外光激發(fā)，后者由藍(lán)光激發(fā)。（p242）二、名詞解釋1、轉(zhuǎn)錄組（P204）2、RNA選擇性剪接（P207）3、基因敲除 （212）4、T-DNA插入失活技術(shù) （218）5、RNA干擾技術(shù)（P227）6、SiRNA（ P227）7、基因芯片 （228）8、管家基因 （230）9、釀酒酵母（p231 第二段第一句）10、MATa/（p232倒數(shù)第三段）11、溫和噬菌體 （236）12、烈性噬菌體 （235）

54、三、簡(jiǎn)答題1、什么是原位雜交？（P209）2、熒光原位技術(shù)的特點(diǎn)？（P209）3、neo基因的雙重作用是什么？(212) 4、基因敲除可用于哪些方面？(212)5、簡(jiǎn)述染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)的原理和基本過程。P2256、簡(jiǎn)述酵母單系統(tǒng)的基本原理與應(yīng)用P2197、 請(qǐng)簡(jiǎn)述大規(guī)?；蛐酒闹饕ぷ髁鞒蹋?229)8由于多種因素影響雜交雙鏈的形成和穩(wěn)定性，在用基因芯片進(jìn)行雜交分析時(shí)，每次的實(shí)驗(yàn)結(jié)果都會(huì)有變化。對(duì)此，應(yīng)如何確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確和保證數(shù)據(jù)的可靠性？(230)9、簡(jiǎn)述酵母單倍體和二倍體細(xì)胞的差異。(p232第二段）10、如何簡(jiǎn)單確定酵母的營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)？（p232第一段）11、免疫印跡程序有哪五個(gè)步驟?

55、(239)12、免疫印跡法的基本原理是什么？(239)四、論述題1、EST測(cè)序技術(shù)和SAGE測(cè)序技術(shù)的優(yōu)劣點(diǎn)？（P204）2、除基因敲除法外，還有什么方法可破壞靶細(xì)胞表達(dá)，具體談?wù)劇?212-218)3、RNAi技術(shù)原理以及在分子生物學(xué)領(lǐng)域運(yùn)用的前景。P2274、論述基因芯片的點(diǎn)制過程。參考：P229 5、證明植入了外源基因的酵母細(xì)胞基因編碼了有功能的-6脂肪酸脫飽和酶。 （233-234） 6、說出凝膠滯緩實(shí)驗(yàn)的原理及應(yīng)用。(P234)第七章填空1.參與大腸桿菌抗終止作用的蛋白是Nus蛋白。p2842.原核生物的翻譯要靠核糖體30S亞基識(shí)別mRNA上的起始密碼子，以此決定它的可讀框。p2853.一個(gè)典型的細(xì)菌mRNA半衰期為23min。p2874.mRNA被降解的可能性取決于它的二級(jí)結(jié)構(gòu)p2875.在乳糖操縱子中，阻遏蛋白結(jié)合的是操縱基因。（253-259）6.在色氨酸操縱子的調(diào)控中發(fā)揮作用的元件是增強(qiáng)子。（261-266）7.基因表達(dá)主要表現(xiàn)在轉(zhuǎn)錄水平上的調(diào)控、轉(zhuǎn)錄后水平上的調(diào)控。（247）8.根據(jù)調(diào)控機(jī)制的不同，原核基因表達(dá)調(diào)控可分類為負(fù)轉(zhuǎn)錄調(diào)控、正轉(zhuǎn)錄調(diào)控。（248）9.原核生物通過特殊代謝物調(diào)節(jié)基因活性主要分為：可誘導(dǎo)調(diào)節(jié) 、可阻遏調(diào)節(jié) 。（250）10.已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的能夠固氮的生物是 原核生物、放線菌、藍(lán)藻。（