2020屆二輪基因工程專題卷(江蘇版)

1、2020 屆 二輪 基因工程 專題卷 （江蘇版）一、單項(xiàng)選擇題（每小題4 分）1.（2018 江蘇徐州考前模擬 ）下列有關(guān)基因工程技術(shù)的敘述, 正確的是 （）A. 不同的限制酶切割形成的黏性末端一定不同B.PCR 中周期性的溫度設(shè)置是特定的 ,與擴(kuò)增的目的基因和引物無關(guān)C. 在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)通常需要大量的目的基因和載體D. 質(zhì)粒上的目的基因都必須整合到受體細(xì)胞的 DNA 上并表達(dá)答案 C 不同的限制酶切割形成的黏性末端也可能相同,也可能不同,A 錯(cuò)誤 ;PCR 中周期性的溫度可在一定范圍內(nèi)設(shè)置,不是特定的 ,B 錯(cuò)誤 ;在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)通常需要大量的目的基因和載體,這樣獲得基因表達(dá)載體

2、的概率更高 ,C 正確 ;質(zhì)粒本身也是DNA, 也能自我復(fù)制 ,所以進(jìn)入受體細(xì)胞以后 ,既可以自己進(jìn)行表達(dá),也可以整合到體細(xì)胞的 DNA 上并表達(dá) ,D 錯(cuò)誤。2.（2018江蘇金湖中學(xué)考前模擬）iPS細(xì)胞是利用病毒將四個(gè)基因（0比4、5。乂2、24和0乂丫6導(dǎo)入動(dòng)物體細(xì)胞使其轉(zhuǎn)化為類似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞。在iPS 細(xì)胞培育過程中 （）A. 運(yùn)用了基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等現(xiàn)代生物技術(shù)B. 病毒的作用只是通過侵染將基因?qū)塍w細(xì)胞中C. 使用的工具酶主要有DNA 聚合酶和 DNA 連接酶D. 僅有 Oct4、 Sox2、 Klf4 和 c-Myc 能夠轉(zhuǎn)錄、翻譯答案 A 根據(jù)題干信息分析,在 i

3、PS 細(xì)胞培育過程中 ,先利用基因工程技術(shù)獲得含有四個(gè)基因的動(dòng)物細(xì)胞,再利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得iPS 細(xì)胞 ,A 正確 ;病毒的作用是通過侵染將基因?qū)塍w細(xì)胞 , 同時(shí)使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并表達(dá),B 錯(cuò)誤 ;使用的工具酶是限制酶和DNA連接酶,C錯(cuò)誤;除了 O*、Sox?、Klf4和c-Myc能夠表達(dá)（轉(zhuǎn)錄、翻譯），動(dòng)物體細(xì)胞中原來的許多基因也能夠表達(dá)，D錯(cuò)誤。3.如圖是培育抗除草劑玉米的技術(shù)路線圖，含有內(nèi)含子的報(bào)告基因只能在真核生物中正確表達(dá)，其產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色。轉(zhuǎn)化過程中愈傷組織表面常殘留農(nóng)桿菌，會(huì)導(dǎo)致未轉(zhuǎn)化的愈傷組織可能在含除草劑的培養(yǎng)基中生長。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的

4、是（）幼胚篩選r-i也T-DNA 抗生素 抗性基因_ _ _ 一 , . L .-亡Ti質(zhì)料報(bào)告基因（含有內(nèi)含子）除草劑抗性基因GA.過程用兩種限制酶就可防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化B.過程用Ca2+處理可提高轉(zhuǎn)化成功率C.過程應(yīng)在培養(yǎng)基中加入除草劑和物質(zhì) KD.篩選得到的A是無農(nóng)桿菌附著的轉(zhuǎn)化愈傷組織和農(nóng)桿菌附著的轉(zhuǎn)化愈傷組織答案 A 若過程使用兩種限制酶，且這兩種限制酶切割產(chǎn)生的黏性末端不同，才可以防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化，A錯(cuò)誤;過程用Ca2+處理可增大農(nóng)桿菌細(xì)胞膜的通透性，從而提高轉(zhuǎn)化成功率,B正確;過程在培養(yǎng)基中加入除草劑篩選出來的是無農(nóng)桿菌附著的轉(zhuǎn)化愈傷組織、農(nóng)桿菌附著的轉(zhuǎn)化愈傷組織、農(nóng)桿菌附

5、著的未轉(zhuǎn)化愈傷組織，加入K物質(zhì)篩選出來的是無農(nóng)桿菌附著的轉(zhuǎn)化愈傷組織和農(nóng)桿菌附著的轉(zhuǎn)化愈傷組織，C、D正確。4.（2018江蘇海安高中月考）利用PCR技術(shù)將某DNA分子擴(kuò)增n代的過程中，下列敘述錯(cuò) 誤的是（）A.引物越短,PCR出來的非目標(biāo)DNA就越多B.適溫延伸過程中，需要提供ATPC.引物中G/C含量越高，退火溫度越高D.共有2n-1對引物參與子代DNA分子的合成答案 B引物越短，PCR出來的非目標(biāo)DNA就越多,A正確;適溫延伸過程中，不需要提供 ATP,B錯(cuò)誤;引物中G/C含量越高，則DNA模板中G/C的含量也高，高溫變性的溫度就越 高，退火溫度也越高，C正確;PCR技術(shù)的原理是DNA復(fù)

6、制，根據(jù)DNA分子半保留復(fù)制特點(diǎn) 可知，共有2n-1對引物參與子代DNA分子的合成，D正確。5 .（2018江蘇鎮(zhèn)江一模）下列有關(guān)現(xiàn)代生物技術(shù)敘述，正確的是（）A.外源DNA需位于重組質(zhì)粒的啟動(dòng)子和終止子之間才能表達(dá)B.進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)定期更換培養(yǎng)液的目的是防止雜菌污染C.生產(chǎn)中通常取囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞做 DNA分析進(jìn)行性別鑒定D.改變脫氧核甘酸的序列就可以合成自然界中不存在的蛋白質(zhì)答案 A啟動(dòng)子和終止子分別是轉(zhuǎn)錄開始和結(jié)束的DNA序列，外源DNA需位于重組質(zhì)粒的啟動(dòng)子和終止子之間才能表達(dá),A正確;進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)定期更換培養(yǎng)液的目的是清 除代謝廢物,B錯(cuò)誤;生產(chǎn)中通常取囊胚的滋養(yǎng)層細(xì)胞做

7、 DNA分析進(jìn)行性別鑒定,C錯(cuò)誤；由 于密碼子的簡并性等原因，改變目的基因中的堿基序列不一定能合成自然界中不存在的蛋白 質(zhì),D錯(cuò)誤。6 .（2018江蘇南京期中）如圖為人B-珠蛋白基因與其mRNA雜交的示意圖，表示基因 的不同功能區(qū)。下列敘述錯(cuò)誤的是（） A.密碼子位于mRNA上B.圖中的核甘酸共有8種C.圖中遵循的堿基配對原則為 A與U配對,C與G配對4 / 11D.圖中B-珠蛋白基因中不能編碼B -珠蛋白的序列是 答案 C 密碼子是 mRNA 上編碼一個(gè)氨基酸的相鄰的 3 個(gè)堿基 ,A 正確 ; 圖中含有 DNA 和RNA,因此共有8種核甘酸（四種脫氧核甘酸+四種核糖核甘酸）,B正確；伊珠

8、蛋白基因的、 、區(qū)和mRNA形成的雙鏈分子中的堿基配對類型有3種，即AU、TA、C G,C錯(cuò)誤;圖中和屬于內(nèi)含子，不能編碼蛋白質(zhì)，且和位于基因結(jié)構(gòu)的非編碼區(qū)，也不能編 碼蛋白質(zhì)，因此圖中B-珠蛋白基因中不能編碼B -珠蛋白的序列是，D正確。7.（2018 江蘇南師附中等四校聯(lián)考）下列關(guān)于對轉(zhuǎn)基因生物安全性發(fā)生爭論的原因中,錯(cuò)誤的是 （）A. 對基因的結(jié)構(gòu)和調(diào)控機(jī)制等的了解仍相當(dāng)有限B. 所轉(zhuǎn)移的基因有不少是異種生物之間的基因C. 外源基因插入宿主基因組的部位往往是隨機(jī)的D.DNA 重組技術(shù)需要有精心設(shè)計(jì)的“分子工具”答案 D 對基因的結(jié)構(gòu)和調(diào)控機(jī)制等的了解仍相當(dāng)有限,這是對轉(zhuǎn)基因技術(shù)存在爭議的

9、原因之一 ,A 正確 ;所轉(zhuǎn)移的基因有不少是異種生物之間的基因,這是對轉(zhuǎn)基因技術(shù)存在爭議的原因之一 ,B 正確 ;外源基因插入宿主基因組的部位往往是隨機(jī)的 ,這是對轉(zhuǎn)基因技術(shù)存在爭議的原因之一,C 正確 ;在 DNA 重組技術(shù)中使用的 “分子工具” 包括限制性核酸內(nèi)切酶、 DNA連接酶和運(yùn)載體, 人們可以根據(jù)需要選擇使用,不可能是爭論的原因,D 錯(cuò)誤。8 .（2019 江蘇南通模擬）以下有關(guān)基因工程的敘述,正確的是 （）A. 利用 PCR 技術(shù)可以大量擴(kuò)增目的基因B. 目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞最常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法C. 只能用一種限制酶分別切割運(yùn)載體和目的基因 ,便于兩者連接D. 利用運(yùn)載體上

10、標(biāo)記基因的相關(guān)特性就可檢測出目的基因已導(dǎo)入受體細(xì)胞并成功表達(dá)答案 A 利用 PCR 技術(shù)可以大量擴(kuò)增目的基因 ,A 正確 ; 目的基因?qū)胫参锸荏w細(xì)胞最常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,而導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞運(yùn)用顯微注射法,導(dǎo)入微生物細(xì)胞運(yùn)用鈣離子處理法 ,B 錯(cuò)誤 ;只用一種限制酶分別切割運(yùn)載體和目的基因容易導(dǎo)致目的基因和運(yùn)載體的反向連接 ,C 錯(cuò)誤 ;利用運(yùn)載體上標(biāo)記基因的相關(guān)特性只能確定目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞,而要檢測出目的基因已導(dǎo)入受體細(xì)胞并成功表達(dá)一般運(yùn)用抗原抗體雜交的方法 ,D 錯(cuò)誤。9 .（2018 江蘇前黃高中等五校調(diào)研）在應(yīng)用農(nóng)桿菌侵染植物葉片獲得耐旱基因植株的實(shí)驗(yàn)步驟中 ,不需要的是（）

11、A. 將耐旱基因?qū)朕r(nóng)桿菌并通過農(nóng)桿菌侵染植物葉片細(xì)胞B. 利用標(biāo)記基因和選擇培養(yǎng)基的作用篩選導(dǎo)入耐旱基因的細(xì)胞C. 用 PEG 誘導(dǎo)轉(zhuǎn)基因細(xì)胞的原生質(zhì)體融合后培養(yǎng)出愈傷組織D. 將轉(zhuǎn)基因幼苗栽培在干旱環(huán)境中以檢驗(yàn)植株的耐旱性答案 C 應(yīng)用農(nóng)桿菌侵染植物葉片獲得耐旱基因植株, 需要將耐旱基因?qū)朕r(nóng)桿菌并通過農(nóng)桿菌侵染植物葉片細(xì)胞;利用標(biāo)記基因和選擇培養(yǎng)基的作用篩選導(dǎo)入耐旱基因的細(xì)胞 ;該過程不涉及細(xì)胞融合,不需要使用促融劑聚乙二醇;將轉(zhuǎn)基因幼苗栽培在干旱環(huán)境中,在個(gè)體水平檢驗(yàn)植株的耐旱性。10 .（2018 江蘇揚(yáng)州中學(xué)月考）微生物常被用于基因工程中。下列相關(guān)敘述正確的是（）A. 從耐熱的細(xì)菌

12、中獲取PCR 所需的 DNA 連接酶B. 大腸桿菌、酵母菌等是基因工程常用的載體C. 作為運(yùn)載體的 DNA 分子需具有合成抗生素的基因D. 常利用土壤農(nóng)桿菌將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞答案 D 從耐熱的細(xì)菌中獲取PCR所需的熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）,A錯(cuò)誤;基因工程常用的載體是質(zhì)粒、 動(dòng)植物病毒、 噬菌體衍生物等, 大腸桿菌和酵母菌是常用受體菌 ,B 錯(cuò)誤 ;6/ 11基因工程的運(yùn)載體需要標(biāo)記基因，如抗生素抗性基因，C錯(cuò)誤;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的常用方法，D正確。二、多項(xiàng)選擇題（每小題5分）11 .（2018江蘇姜堰中學(xué)階段測試）利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)竣酸酯酶（CarE）制劑的流程

13、如圖所示，下列敘述正確的是（）A.過程需使用逆轉(zhuǎn)錄酶B.過程需使用解旋酶和PCR獲取目的基因C.過程使用的感受態(tài)細(xì)胞可用 NaCl溶液制備D.過程可利用DNA分子雜交鑒定目的基因是否已導(dǎo)入受體細(xì)胞答案 AD 過程表示利用mRNA通過反轉(zhuǎn)錄法合成目的基因，逆轉(zhuǎn)錄過程中需要逆轉(zhuǎn)錄 酶的催化,A正確;過程表示利用PCR技術(shù)對目的基因進(jìn)行擴(kuò)增，該過程中不需要利用解旋 酶,解旋是通過高溫解鏈實(shí)現(xiàn)的 舊錯(cuò)誤;感受態(tài)細(xì)胞法利用的是CaCl2溶液,C錯(cuò)誤;過程可 利用DNA分子雜交鑒定目的基因是否已導(dǎo)入受體細(xì)胞，D正確。12 .（2018江蘇鹽城三模）下列物質(zhì)或過程可能影響磷酸二酯鍵數(shù)目變化的是（）A.限制性

14、核酸內(nèi)切酶B.構(gòu)建基因表達(dá)載體C.遺傳信息的翻譯 D.染色體的結(jié)構(gòu)變異答案 ABD DNA中含有磷酸二酯鍵，限制性核酸內(nèi)切酶可以斷裂磷酸二酯鍵，使磷酸二酯鍵數(shù)目減少,A正確;構(gòu)建基因表達(dá)載體指將目的基因與運(yùn)載體連接，磷酸二酯鍵數(shù)目會(huì)增加,B正確;遺傳信息的翻譯產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，不涉及磷酸二酯鍵數(shù)目的變化，C錯(cuò)誤;染色體包括DNA和蛋白質(zhì)，染色體的結(jié)構(gòu)變異分為染色體片段的缺失、重復(fù)，會(huì)導(dǎo)致DNA片段的缺失、 重復(fù)，則磷酸二酯鍵數(shù)目會(huì)發(fā)生變化，D正確。13 .（2018江蘇南通、徐州等六市二模）據(jù)報(bào)道，研究人員將口蹄疫病毒結(jié)構(gòu)蛋白 VP1的某一 活性肽基因片段導(dǎo)入胡蘿卜愈傷組織細(xì)胞培育轉(zhuǎn)基因胡蘿卜，用

15、于生產(chǎn)可直接口服的口蹄疫 疫苗。相關(guān)敘述正確的是（）A.胡蘿卜愈傷組織細(xì)胞可利用胡蘿卜體細(xì)胞誘導(dǎo)脫分化獲得B.可將活性肽基因片段直接導(dǎo)入胡蘿卜愈傷組織細(xì)胞C.可利用PCR、DNA分子雜交等技術(shù)鑒定目的片段是否已整合到胡蘿卜染色體中D.轉(zhuǎn)基因是否成功需要對愈傷組織再分化形成的植株進(jìn)行活性肽含量測定答案 ACD 可利用胡蘿卜切皮部的一些細(xì)胞，放入含有植物激素、無機(jī)鹽和糖類等物質(zhì)的培養(yǎng)液中培養(yǎng)。這些離體的植物組織細(xì)胞，經(jīng)過脫分化，可以形成愈傷組織，A正確;外源基因 如果直接導(dǎo)入受體細(xì)胞，無法進(jìn)行自我復(fù)制以及基因的表達(dá)，因此活性肽基因片段必須要經(jīng)由運(yùn)載體導(dǎo)入胡蘿卜愈傷組織細(xì)胞，才能表達(dá),B錯(cuò)誤;可利用

16、PCR、DNA分子雜交等技術(shù)鑒定目的片段是否已整合到胡蘿卜染色體中，C正確;如果轉(zhuǎn)基因成功，轉(zhuǎn)基因胡蘿卜就會(huì)進(jìn)行 基因表達(dá)產(chǎn)生相應(yīng)的VP1的某一活性肽，否則就不會(huì)產(chǎn)生或產(chǎn)生量少。因此對愈傷組織再分化形成的植株進(jìn)行活性肽含量測定，就可知道轉(zhuǎn)基因是否成功，D正確。三、非選擇題14.（2018江蘇南京、鹽城一模）為研究肝癌致病機(jī)理，科研工作者利用下圖所示的差異雜交法和基因工程獲取相關(guān)癌基因以做進(jìn)一步研究。請據(jù)圖回答問題肝癌刷的含癌某因inRNR的總mRN*撥M - 不含杯茶閃mHNA 正?？趦譛胞的總“希、人群含&p的大鼠含叼有Jrid 4 &鏈 電侍未朵交分手I雜交分子回收 為建蒞

17、國文庫13 / 11Not I(3.8)Noil (0.0)EcoK I (L2)癌基因(目的基因)(3.8 kb)圖2圖3圖1中,A過程需要用 酶,D過程需要回收 (填“未雜交”或“雜交”)的含32 P的cDNA單鏈，繼而通過人工合成，獲得，并用其構(gòu)建基因文庫。(2)從圖1構(gòu)建的基因文庫中獲取的目的基因，一般還需進(jìn)行人工改造后才能用于基因表達(dá)載體的構(gòu)建，改造內(nèi)容除了在基因兩端添加限制酶的識別序列外，還需添加，以便其隨載體導(dǎo)入受體細(xì)胞后，能正常調(diào)控表達(dá)過程。圖2為改造后的目的基因。圖3為兩種質(zhì)粒，其中Amp r為氨葦青霉素抗性基因，Tetr為四環(huán)素抗性基因，lacZ為藍(lán)色顯色基因，其表達(dá)產(chǎn)物可

18、使底物X-Gal呈藍(lán)色。EcoR I (0.7kb)、Not I (1.2 kb)等為限制酶及其切割位點(diǎn)與復(fù)制原點(diǎn)之間的距離(1 kb=1 000 個(gè)堿基 對)圖3中能作為載體的最理想的質(zhì)粒是 （填“X”或"Y”），用選定的質(zhì)粒與圖2 的目的基因構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)選用的限制酶是。為篩選出成功導(dǎo)入目的基 因的受體細(xì)胞，培養(yǎng)基中應(yīng)適量添加 。若用EcoR I完全酶切上述中獲得的重組質(zhì)粒，并進(jìn)行電泳觀察，可出現(xiàn)四種長度不同的 片段,其長度分別為1.7 kb、5.3 kb、。答案（1）逆轉(zhuǎn)錄 未雜交 雙鏈cDNA（2）啟動(dòng)子和終止子（3）X Not I四環(huán)素和X-Gal 3.1 kb 和

19、 3.9 kb解析（1）據(jù)圖可知，圖1為構(gòu)建基因文庫的過程，其中需要單鏈mRNA通過A過程形成雜交 雙鏈分子，需要逆轉(zhuǎn)錄酶，D過程需要回收未雜交的含32P的cDNA單鏈，繼而通過人工合成， 獲得雙鏈cDNA,并用其構(gòu)建基因文庫。（2）基因表達(dá)載體的組成包括啟動(dòng)子、目的基因、標(biāo) 記基因和終止子等。其中啟動(dòng)子與終止子能正常調(diào)控表達(dá)過程，使基因表達(dá)開始或終止。因此從圖1構(gòu)建的基因文庫中獲取的目的基因，人工改造后才能用于基因表達(dá)載體的構(gòu)建，改 造內(nèi)容除了在基因兩端添加限制酶的識別序列外，還需添加啟動(dòng)子和終止子。（3）質(zhì)粒X既有四環(huán)素抗性基因（Tetr）,又有藍(lán)色顯色基因（lacZ）,便于對目的基因進(jìn)行

20、檢測和篩選。因此能 作為載體的最理想的質(zhì)粒是 X,Not I的切割位點(diǎn)位于目的基因的兩側(cè)，不會(huì)破壞目的基因， 而EcoR I的切割位點(diǎn)位于基因的中間，會(huì)破壞目的基因，因此用選定的質(zhì)粒與圖2的目的基 因構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)選用的限制酶是Not I ,為篩選出成功導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞， 培養(yǎng)基中應(yīng)適量添加四環(huán)素和 X-Gal。若用EcoR I完全酶切上述中獲得的重組質(zhì)粒， 并進(jìn)行電泳觀察，可出現(xiàn)四種長度不同的片段，分析重組質(zhì)粒，合并重復(fù)的長度可知其長度分 別為 1.7 kb、5.3 kb、3.1 kb 和 3.9 kb 。，其中PrM為乙型腦炎的特異性抗原15.（2018江蘇南通、泰州一模）乙

21、型腦炎和偽狂犬病是豬的兩種常見傳染病。如圖是利用 基因工程技術(shù)生產(chǎn)能同時(shí)預(yù)防這兩種病疫苗的流程圖基因,PK、gG、gD為偽狂犬病的主要抗原基因，TK為偽狂犬病的毒性基因，pgG為啟動(dòng)子,BamH I和EcoR I為兩種限制酶，其識別序列及切割位點(diǎn)分別是 GGATCC、G表達(dá)AATTC 。請回答下列問題：抗原黑白(蛋白疫苗)*分離、純化乙腦病毒 KT-PCR |RNAk izzzzzi 重組載體Bu/nH I EmH II EcoRi.重組載體2缺失7X的偽狂犬病毒基因組導(dǎo)人大腸 :菌 ，八&&R I導(dǎo)人一動(dòng)物 薊胞重組偽狂犬病毒病等基因表達(dá)、包裝 (病毒疫苗)(1)過程所需的酶有O下列四種引物中適用于過程的一對引物是Pl :5'TTGGATCCATGGAAGGCTCAATCATGTG 3'P2:5'CACAAGCTTAGATGAC