cancercell雜志CD19和CD1d雙重靶向增強CAR19-iNKT細胞的抗淋巴瘤活性

1、cancer cell 雜志 CD19 和 CD1d 雙重靶向增強CAR19-iNKT 細胞的抗淋巴瘤活性展開全文Cancer cell 雜志CD19 和 CD1d 雙重靶向增強 CAR19-iNKT 細胞的抗淋巴瘤活性倫敦帝國理工學院醫(yī)學系血液學中心亮點：v 在增殖能力及對 CD19+CD1d+ 靶的殺傷作用方面 ，CAR19-iNKT 高于 CAR19-T 細胞vaGalCer 和 ATRA 增強 CAR19-iNKT 細胞的反應性，延長CAR19-iNKT 細胞治療后小鼠的存活和腦淋巴瘤的根除Rotolo 等人證明， 抗 CD19 基因工程 （CAR-19） 的 cd1d 限制性 NKT

2、 細胞 （iNKT） 比 CAR19-T 細胞治療 cd1d 陽性的淋巴瘤 （包括腦淋巴瘤）更有效。去抑制CD1d 分子進一步增強CAR19-iNKT 的抗腫瘤效應。基 CAR19-T 細胞免疫治療引起的 CD19 + B 細胞淋巴瘤的臨床緩解往往是短暫的。我們測試了 CAR19 基因工程化的CD1d 限制性自然殺傷iNKT 細胞是否能增強抗淋巴瘤活性。 在體內(nèi)外，依賴于 CD1d 和 CAR19-CD19 的相互作用激活的 CAR19-iNKT 細胞比依賴于 CD1d 的 CAR19-T 細胞更有效地抑制CD1d + 的淋巴瘤。CAR19-iNKT 細胞在體內(nèi)更快的產(chǎn)生抗淋巴細胞活性，并且清

3、除腦淋巴瘤的能力增強，提高了小鼠無腫瘤生存期和總體生存率。結果進一步增強了 CAR19-iNKT 細胞對 CD19 + B 淋巴瘤細胞的毒性，因此， iNKT 細胞是一個高效的基于 CAR 的免疫治療淋巴瘤的一種有潛力的技術， 在其他可能表達CD1d 分子的癌癥方面也具有一定的研究價值。不變性自然殺傷T（ iNKT ） 細胞是一種罕見但功能強大的免疫調(diào)節(jié)和效應 T 細胞，具有重要的抗腫瘤作用。我們和其他人已經(jīng)證明了供者的iNKT 細胞在異基因干細胞移植的背景下對實驗性和臨床性aGVHD 的保護能力。我們以前也發(fā)現(xiàn)CD19 和 CD1d 在許多細胞淋巴瘤亞型中共同表達，包括不可治愈邊緣區(qū)淋巴瘤（

4、 MZL ）和套細胞淋巴瘤（ MCL ）Kotsianidis 等人， 2011） ， 而在 B 細胞慢性淋巴細胞白血?。–LL ） ，最常見的血液學惡性腫瘤， CD1d 表達低于正常B細胞或缺失。重要的是，可以確定iNKT細胞中CD4-的細胞，與 CD4+細胞相比， iNKT 細胞具有更極化的 Th1 細胞因子譜并表達更高水平的細胞毒性顆粒。事實上，我們發(fā)現(xiàn)靜息的 CD4-CAR19iNKT 細胞表達顯著更高水平的穿孔素和顆粒酶B ，并且在活化后，比CD4+亞群分泌更多的顆粒酶B和干擾素-y（IFN-力但更少的IL-4。與CAR19-T細胞相比，CAR19 iNKT細胞表達更高比例的IFN-

5、 丫，穿孔素和顆粒酶三種分子，比例上有著顯著的差異（ 40%對 <5% ， p<0.01 ） 。值得注意的是，雖然>20% 的 CAR19-T 細胞不分泌上述三種分子，但 CAR19-iNKT 細胞的相應比例 <3% 。此外，在8 小時的激活期間， CAR19 iNKT 細胞比 CAR19-T 細胞分泌更高水平的 Th1/2 細胞因子。實際上， 效應細胞與靶細胞（E/T） 比例為 1:1 的 CAR19 iNKT細胞的細胞毒性和增殖活性與E/T 比例為 10:1 的 CAR19-T細胞的細胞毒性和增殖活性相似， 表明功能等同性的 CAR1

6、9iNKT 細胞是 CAR19-T 細胞的 10 倍。CAR19-iNKT 細胞平均擴增 >3000倍，從2X105個純化的 iNKT細胞開始擴增，將產(chǎn)生超過 5X108個CAR19- iNKT 細胞。CAR19 iNKT 細 胞 根 除 顱 內(nèi) 和 復 發(fā) 性 疾 病 ， 增 強CAR19-iNKT 細胞體內(nèi)抗腫瘤活性的體內(nèi)實驗布局。 熒光素酶表達的 c1r-cd1d 細胞經(jīng)靜脈注射轉移至 NSG 小鼠。采用生物發(fā)光法監(jiān)測腫瘤生長。 在連續(xù)兩次相隔至少72 小時的 bli 掃描中，通過增加光子活性確認植入后，輸注 107個效應細胞 （或同體積的 PBS 對照 ） 。與 CAR19-T 細胞相比，CAR19-iNKT 細胞在