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文檔簡介

1、專題1基因工程綜合檢測 時間45分鐘,滿分100分。 一、選擇題(每小題3分,共60分)1 .下列關(guān)于基因工程技術(shù)的敘述,正確的是()A.切割質(zhì)粒的限制性核酸切酶均特異性地識別6個核甘酸序列B. PC或應(yīng)中溫度的周期性改變是為了DN咪合酶催化不同的反應(yīng)C.載體質(zhì)粒通常采用抗生素合成基因作為篩選標(biāo)記基因D.抗蟲基因即使成功地插入到植物細(xì)胞染色體上也未必能正常表達(dá)答案D解析本題考查基因工程的相關(guān)知識。不同的限制性核酸切酶特異性地識別核昔序列 不同,A錯誤;酶具有專一性,PCR反應(yīng)中溫度的周期性改變是為了不同的酶將DNA軍旋、擴增,B錯誤;載體質(zhì)粒通常采用抗生素抗生基因作為篩選標(biāo)記基因,C錯誤;基因

2、成功插入也未必會表達(dá),D正確。解答此類題目一定要準(zhǔn)確把握基因工程的步驟、基因工程的工具。2 .下列關(guān)于基因工程的說法中,正確的是()A.基因工程的設(shè)計和施工都是在細(xì)胞水平上進(jìn)行的操作B.目前基因工程中所有的目的基因都是從供體細(xì)胞中直接分離得到的C.只要檢測出受體細(xì)胞中含有目的基因,那么目的基因一定能成功表達(dá)D.基因工程能使科學(xué)家打破物種界限,定向改造生物性狀答案D解析基因工程是在分子水平上進(jìn)行的操作,目前獲取目的基因的方法有從基因文庫 中獲取、利用PCR術(shù)擴增和人工合成三種。 檢測出受體細(xì)胞中含有目的基因,只能證明目的基因已導(dǎo)入受體細(xì)胞,目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)要用抗原一抗體雜交法檢測。以下說

3、法中錯誤的是()3 .甲、乙兩圖表不從細(xì)菌細(xì)胞中獲取目的基因的兩種方法,A.甲方法可建立該細(xì)菌的基因組文庫B.乙方法可建立該細(xì)菌的 cDNA文庫C.甲方法要以脫氧核甘酸為原料D.乙方法需要逆轉(zhuǎn)錄酶參與答案C解析甲方法是以細(xì)菌中的 DNA為基礎(chǔ),用限制酶進(jìn)行切割,它包括了細(xì)胞所有的基 因,可以建立基因組文庫,并且可以從中選出所需的目的基因,不需要模板,不需要原料。 而乙方法是用反轉(zhuǎn)錄的方法人工合成目的基因,它只能得到生物的部分基因,基因中只有編碼區(qū),所以組成的是該細(xì)菌的cDNA文庫。4 .中美科學(xué)家通過改變一種名為NR2B的基因研制出了轉(zhuǎn)基因超級小鼠HobbieJ,Hobbie-J比普通老鼠更加

4、聰明,大腦運轉(zhuǎn)更加迅速,它能夠輕松完成迷宮任務(wù)。下列關(guān)于 Hobbie J產(chǎn)生過程的描述,錯誤的是 ()A. NR2叫因可通過PC破術(shù)進(jìn)行擴增B.改變后的NR2叫因作為目的基因,可直接注入小鼠受精卵C.通常采用顯微注射法將改變后的NR2叫因重組質(zhì)粒導(dǎo)入小鼠受精卵D.可采用基因探針檢測改變后的NR2B基因是否導(dǎo)入小鼠體答案B解析目的基因可通過 PC叱術(shù)擴增;獲取的目的基因需與載體結(jié)合成重組質(zhì)粒后才 可通過顯微注射法導(dǎo)入小鼠的受精卵,直接導(dǎo)入的目的基因不能在小鼠體表達(dá);檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞,可采用放射性同位素標(biāo)記的基因探針。5 .下列說法不正確的是 ()A.基因治療是把正?;?qū)氩∪梭w,

5、使該基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能,從而達(dá)到治療 疾病的目的B.基因文庫包括基因組文庫、cDNA文庫等C.基因工程的核心是基因表達(dá)載體的構(gòu)建D.外源基因插入到轉(zhuǎn)基因生物染色體DNA±后就能夠表達(dá)答案D解析外源基因插入到染色體上不一定表達(dá),所以需進(jìn)行基因工程的第四步:目的基 因的檢測與鑒定,用來確定基因是否表達(dá)。6 . 土壤農(nóng)桿菌含有一個大型的Ti質(zhì)粒(如下圖所示),在侵染植物細(xì)胞的過程中,其中的T- DNA片段轉(zhuǎn)入植物的基因組。若想用基因工程并通過土壤農(nóng)桿菌向某種植物中導(dǎo)入抗 旱基因,以下分析不合理的是()A.若用Ti質(zhì)粒作為抗旱基因的載體,目的基因的插入位置應(yīng)該在TDNA片段,且要保證復(fù)制

6、起始點和用于轉(zhuǎn)移 T-DNA的基因片段不被破壞B.將重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌中時,可以用C廣處理細(xì)菌C.用含有重組Ti質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌去感染植物細(xì)胞,可以通過植物組織培養(yǎng)培育出具有抗旱基因的植物D.若能夠在植物細(xì)胞中檢測到抗旱目的基因,則說明該基因工程項目獲得成功答案D7 .下表關(guān)于基因工程中有關(guān)基因操作的名詞及對應(yīng)的容,正確的組合是 ()供體男力針線載體受體A質(zhì)粒限制性核 酸切酶DNA!接酶提供目的基因的生物大腸桿菌等B提供目的基因的生物DNA!接酶限制性核 酸切酶質(zhì)粒大腸桿菌等C提供目的基因的生物限制性核 酸切酶DNA!接酶質(zhì)粒大腸桿菌等D大腸桿菌等DNA!接酶限制性核 酸切酶提供目的基

7、因的生物質(zhì)粒答案C解析供體在基因工程中是指提供目的基因的個體,受體是指接受目的基因或者重組表達(dá)載體的個體。8 .如圖是利用工程培育抗蟲植物的示意圖。以下相關(guān)敘述,正確的是A.的構(gòu)建需要限制性核酸切酶和DNA聚合酶參與B.侵染植物細(xì)胞后,重組 Ti質(zhì)粒整合到的染色體上C.的染色體上若含抗蟲基因,則就表現(xiàn)出抗蟲性狀D.只要表現(xiàn)出抗蟲性狀就表明植株發(fā)生了可遺傳變異答案D解析本題考查基因工程的操作程序及有關(guān)問題。是Ti質(zhì)粒,作為目的基因的運輸載體;基因表達(dá)載體,構(gòu)建載體需要限制酶和DNA1接酶,A錯誤;將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,侵染植物細(xì)胞后,重組 Ti質(zhì)粒上的T- DNAII合到的染色體上,B錯誤;導(dǎo)

8、入 基因表達(dá)載體的受體細(xì)胞, 染色體上含有目的基因,但目的基因可能不能轉(zhuǎn)錄或者不能翻譯, 或者表達(dá)的蛋白質(zhì)不具有生物活性,因此不一定產(chǎn)生具有生物活性的蛋白質(zhì),C錯誤;轉(zhuǎn)基因生物,植株表現(xiàn)出抗蟲性狀, 說明含有目的基因, 為可遺傳變異,D正確。本題知識中, 目的基因的獲取、 基因表達(dá)載體的構(gòu)建、導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法、目的基因的檢測與表達(dá)是生要的考查點。9 .利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)竣酸酯酶(CarE)制劑的流程如圖所示,下列敘述正確的是()A.過程需使用轉(zhuǎn)錄酶B.過程需使用解旋酶和 PCR獲取目的基因C.過程使用的感受態(tài)細(xì)胞可用NaCl溶液制備D.過程可利用 DNA分子雜交鑒定目的基因是否已導(dǎo)入受體細(xì)

9、胞答案D解析通過流程圖分析,考查基因工程的操作程序?;蚬こ滩僮鬟^程中,過程為逆轉(zhuǎn)錄,需要逆轉(zhuǎn)錄酶;過程為PCR術(shù)擴增目的基因, 該過程應(yīng)用高溫使 DNA雙螺旋解 開,不需要解旋酶;過程為將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,以大腸桿菌作為受體細(xì)胞時,常用的方法就是利用氯化鈣溶液處理大腸桿菌,使之成為感受態(tài)細(xì)胞,利于基因表達(dá)載體進(jìn)入受體細(xì)胞;導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌就成為工程菌,因此,過程為目的基因的檢測,檢測目的基因是否導(dǎo)入大腸桿菌的第一步是用DN酚子雜交法。10 .下列有關(guān)蛋白質(zhì)工程和基因工程的敘述錯誤的是()A.基因工程是通過基因操作把外源基因轉(zhuǎn)入適當(dāng)?shù)纳矬w,并在其中進(jìn)行表達(dá),它的 產(chǎn)品還是該基因編碼

10、的天然存在的蛋白質(zhì)B.蛋白質(zhì)工程的產(chǎn)品已不再是天然的蛋白質(zhì),而是經(jīng)過改造的,具有了人類所需要的 優(yōu)點的蛋白質(zhì)C.蛋白質(zhì)工程利用基因工程的手段,按照人類自身的需要,定向地改造天然的蛋白質(zhì),甚至于創(chuàng)造全新的蛋白質(zhì)分子D.蛋白質(zhì)工程是在分子水平上對蛋白質(zhì)分子直接進(jìn)行操作,定向改變分子的結(jié)構(gòu)答案D解析蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ),通 過基因修飾或基因合成, 對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。其目標(biāo)是根據(jù)人們對蛋白質(zhì)功能的特定需求,對蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行分子設(shè)計,但因為基因決定蛋白質(zhì),因此對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計改造,歸根到底,還需對相應(yīng)

11、的基因進(jìn)行操作,按要求進(jìn)行修飾加工改造,使之能控制合成人類需要的蛋白質(zhì)。11 .( 檢測)下面是四種不同質(zhì)粒的示意圖,其中 ori為復(fù)制必需的序列,amp為氨芳 青霉素抗性基因,tet為四環(huán)素抗性基因,箭頭表示同一種限制酶的酶切位點。下列有關(guān)敘 述正確的是()A.基因amp和tet是一對等位基因,常作為基因工程中的標(biāo)記基因B.質(zhì)粒指細(xì)菌細(xì)胞中能自我復(fù)制的小型環(huán)狀的DNA動植物病毒的 DNAC.限制酶的作用部位是 DNA分子中特定的兩個核甘酸之間的氫鍵D.用質(zhì)粒4將目的基因?qū)氪竽c桿菌,該菌不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長答案D解析等位基因是位于一對同源染色體的相同位置的基因,且控制相對性狀,因而基

12、 因amp和tet不是一對等位基因,但它們常作為基因工程中的標(biāo)記基因。動植物病毒的DNA不是質(zhì)粒。限制酶的作用部位是兩個核甘酸之間的磷酸二酯鍵,而非氫鍵。由于限制酶已破壞了 tet基因,因而四環(huán)素抗性基因不能表達(dá),故該菌不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長。12 .科學(xué)家將控制某藥物蛋白合成的基因車t移到白色來亨雞胚胎細(xì)胞的DNA中,發(fā)育后的雌雞就能產(chǎn)出含該藥物蛋白的雞蛋,在每一只雞蛋的蛋清中都含有大量的藥物蛋白;而且這些含該藥物蛋白的雞蛋孵出的雞,仍能產(chǎn)出含該藥物蛋白的雞蛋。據(jù)此分析不正確的一項是()A.這些雞是基因工程的產(chǎn)物B.這種變異屬于可遺傳的變異C.該過程屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)D.該種變異屬于定

13、向變異答案C解析據(jù)題意可知這些雞屬于轉(zhuǎn)基因動物,是基因工程的產(chǎn)物,不屬于蛋白質(zhì)工程?;蚬こ淌前凑杖藗兊脑竿ㄟ^DN底:組和轉(zhuǎn)基因技術(shù)創(chuàng)造出符合人們需要的新的生物類型或生物產(chǎn)品,依據(jù)的原理是基因重組,屬于可遺傳的定向變異。13 . ( 濰坊模擬)與“限制性核酸切酶”作用部位完全相同的酶是()A.反轉(zhuǎn)錄酶B. RN咪合酶C. DNA接酶D.解旋酶答案C解析 限制性核酸切酶作用部位是DNA特定部位的兩個脫氧核甘酸之間的磷酸二酯鍵,并將其斷開;DNA1接酶作用是恢復(fù)被限制性核酸切酶斷開的磷酸二酯鍵,將兩條 DNA 鏈連接起來,故二者作用部位相同。14. ( 模擬)對下圖所示黏性末端的說法正確的是(

14、)A.甲、乙、丙黏性末端是由兩種限制性核酸切酶作用產(chǎn)生的B.圖乙中的酶切位點在 A與G之間C.如果甲中的G發(fā)生突變,限制性核酸切酶可能不能識別該切割位點D.構(gòu)建基因表達(dá)載體所用限制性核酸切酶和DNA連接酶分另J作用于 a處和b處答案C解析據(jù)圖分析,甲、乙、丙黏性末端是由3種限制性核酸切酶作用產(chǎn)生的;圖乙中的酶切位點在 A與C之間;酶作用具有專一性, 如果甲中G發(fā)生突變,則限制性核酸切酶可 能不能識別該切割位點;限制性核酸切酶能破壞磷酸二酯鍵,DNA連接酶可恢復(fù)磷酸二酯鍵,它們都作用于a處。A.為防止目的基因與質(zhì)粒任意結(jié)合而影響基因的表達(dá),應(yīng)用限制酶I、n同時切割二者B.限制酶、DNA接酶的作用

15、部位都是磷酸二酯鍵C.與啟動子結(jié)合的應(yīng)該是 RNA聚合酶D.能夠檢測到標(biāo)記基因表達(dá)產(chǎn)物的受體細(xì)胞中,也一定會有目的基因的表達(dá)產(chǎn)物答案D解析將質(zhì)粒與目的基因進(jìn)行切割、連接時,不能保證二者全部成功連接,因此,導(dǎo) 入了原質(zhì)粒的受體細(xì)胞中能檢測到標(biāo)記基因的表達(dá)產(chǎn)物,但是不會檢測到目的基因的表達(dá)產(chǎn)物。16. ( 檢測)蛛絲的強度和柔韌度得益于蛛絲蛋白的特殊布局,使它產(chǎn)生了一個由堅硬的結(jié)晶區(qū)和非結(jié)晶區(qū)構(gòu)成的混合區(qū)域。有人試圖通過破解蛛絲蛋白的結(jié)構(gòu)從而推測出其相應(yīng)的基因結(jié)構(gòu),以指導(dǎo)對蠶絲蛋白的修改,從而讓蠶也吐出像蛛絲蛋白一樣堅韌的絲。此過程運用的技術(shù)及流程分別是()A.基因突變;DNARNA蛋白質(zhì)B.基因

16、工程;RNA>RNA蛋白質(zhì)C.基因工程;DNARNA蛋白質(zhì)D.蛋白質(zhì)工程;蛋白質(zhì)- RNA>DNARNA蛋白質(zhì)答案D解析該過程采用的是蛋白質(zhì)工程。從預(yù)期蛋白質(zhì)功能入手,對蛋白質(zhì)控制基因進(jìn)行 改造以達(dá)到改造蛋白質(zhì)的目的。17. ( 檢測)下列關(guān)于基因工程的敘述,錯誤的是 ()A.從基因組文庫中獲取的某種生物的部分基因,可以實現(xiàn)物種間的基因交流B.從cDNA文庫中獲取的目的基因,既無啟動子,又無終止子C.用人胰高血糖素基因制成的 DN琳針,檢測人胰島 B細(xì)胞中的mRNA可形成雜交分 子D.基因表達(dá)載體中的標(biāo)記基因不能含有限制酶的切割位點答案C解析基因工程可以實現(xiàn)物種之間的基因交流,而獲

17、取目的基因是基因工程的第一步,故A正確;cDNA文庫中的基因是通過 mRN阪轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的,故不含有啟動子和終止子,B正確;胰高血糖素是由胰島 A細(xì)胞合成并分泌的,胰島B細(xì)胞不存在胰高血糖素基因轉(zhuǎn)錄成的 mRNA故C錯誤;基因表達(dá)載體中的標(biāo)記基因不能含有限制酶的切割位點,否則標(biāo)記基因會被限制酶切割,失去原有的作用,故 D正確。18. 下列有關(guān)限制酶識別的敘述,不正確的是()A.從反應(yīng)類型來看,限制酶催化的是一種水解反應(yīng)B.限制酶的活性受溫度、pH的影響C. 一種限制酶只能識別雙鏈 DNA中某種特定的脫氧核甘酸序列D.限制酶識別序列越短,則該序列在DNA中出現(xiàn)的幾率就越小答案D解析限制酶切開的是磷酸

18、二酯鍵,屬于水解反應(yīng),A正確;限制酶是由蛋白質(zhì)組成的酶,活性受溫度、pH的影響,高溫、強酸和強堿會破壞酶的空間結(jié)構(gòu)造成失活,B正確;限制酶識別序列越短,則該序列在DNA中出現(xiàn)的幾率就越高, D錯誤。19. ( 檢測)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR技術(shù))是體外酶促反應(yīng)合成特異 DNM段的一種方法, 由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個周期,循環(huán)進(jìn)行,使目的DNA得以迅速擴增,其簡要過程如圖所示。下列關(guān)于PC叱術(shù)敘述不正確的是()A. PC破術(shù)是在實驗室中以少量 DNA制備大量DNA的技術(shù)B.反應(yīng)中新合成的 DN取可以作為下一輪反應(yīng)的模板C. PCFa術(shù)中以核糖核甘酸為原料,以指數(shù)方式擴增D.

19、應(yīng)用PC叱術(shù)與探針雜交技術(shù)可以檢測基因突變答案C解析PC叱術(shù)是人工合成 DNA的方法,原料是脫氧核甘酸,而不是核糖核甘酸。20. ( 檢測)人們試圖利用基因工程的方法,用乙種生物生產(chǎn)甲種生物的一種蛋白質(zhì)。 生產(chǎn)流程是:甲生物的蛋白質(zhì)-mRNA目的基因-與質(zhì)粒DNA重組-導(dǎo)入乙細(xì)胞-獲得甲生物的蛋白質(zhì)。下列說法正確的是()A.過程需要的酶是反轉(zhuǎn)錄酶,原料是A、J G CB.要用限制性核酸切酶切斷質(zhì)粒DNA再用DNA連接酶將目的基因與質(zhì)粒連接在一起C.如果受體細(xì)胞是動物細(xì)胞,過程可用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法D.過程中用的原料不含有 A、U G C答案B解析甲生物的mRNAg過程合成目的基因為反轉(zhuǎn)錄法,需反轉(zhuǎn)錄

20、酶,原料是 A T、 G C;為基因表達(dá)載體的構(gòu)建,需用同一種限制性核酸切酶切斷質(zhì)粒DN用口目的基因,再用DNA連接酶將目的基因與質(zhì)粒連接在一起;如果受體細(xì)胞是動物細(xì)胞,過程可用顯微注射法;過程為目的基因的表達(dá),需用的原料含有A、J G Co二、非選擇題(共40分)21. . (10分)(北京檢測)I .反轉(zhuǎn)錄病毒載體是一種表達(dá)型質(zhì)粒,結(jié)構(gòu)如圖1所示。圖上的“反轉(zhuǎn)錄病毒序列”可以整合到動物細(xì)胞的染色體上,不斷地表達(dá)其攜帶的目的基因。(E、F、H分別為限制酶 E、F、H的酶切位點)。(1)反轉(zhuǎn)錄的原料是 (2)在構(gòu)建重組質(zhì)粒時,目的基因應(yīng)插入到該質(zhì)粒的位置是 ,此過程需 使用的酶是。為了篩選出含

21、重組質(zhì)粒的大腸桿菌, 一般需要用添 加 的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。獲取大量重組質(zhì)粒后,將其再轉(zhuǎn)入到某種哺乳動物細(xì)胞中,可獲得大量重組反轉(zhuǎn)錄病毒。n.圖2為培育轉(zhuǎn)基因小鼠基本過程的示意圖。請回答下列問題:(3)如A為重組質(zhì)粒溶液,將其導(dǎo)入原核期受精卵的方法是 ;如A為重 組反轉(zhuǎn)錄病毒,還可米取 方法。(4)小鼠出生后可從其尾提取 分子,通過 的方法,可 檢測出攜帶目的基因的小鼠。(5)若目的基因進(jìn)入細(xì)胞后插入一條染色體DNA上,那么獲得轉(zhuǎn)基因純合子小鼠的方法答案1.(1)(四種)脫氧核甘酸(2)F(反轉(zhuǎn)錄病毒序列)限制酶和DNA1接酶(缺一不可)抗生素An.(3)顯微注射法感染(侵染)(4)DNA DN

22、A分子雜交(或核酸分子雜交)(5)轉(zhuǎn)基因小鼠間相互交配(或雜交)22. (10分)多聚半乳糖醛酸酶(PG)能降解果膠使細(xì)胞壁破損。番茄果實成熟過程中PG合成顯著增加,能使果實變紅變軟,但不利于保鮮。利用基因工程的方法減少PG基因的表達(dá),可延長果實保質(zhì)期。 科學(xué)家將PG基因反向接到Ti質(zhì)粒上,導(dǎo)入到番茄細(xì)胞中,得到轉(zhuǎn) 基因番茄。請據(jù)圖回答:(1)提取目的基因:若已獲取PG的mRNA可通過 法獲取PG基因。在該基因上游加結(jié)構(gòu) A可確?;虻姆聪蜣D(zhuǎn)錄,結(jié)構(gòu) A上應(yīng)具有 結(jié)合位點。得到的目的基因兩側(cè)需人工合成Bamn黏性末端。已知Bamn的識別序列如下圖中甲所示,請在下圖中乙相應(yīng)位置上,畫出目的基因兩

23、側(cè)的黏性末端。重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到大腸桿菌中的目的是 。(2)用含目的基因的農(nóng)桿菌感染番茄原生質(zhì)體后,可用含有 的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,與此同時,為能更好地達(dá)到培養(yǎng)目的, 還需在培養(yǎng)基中加入 。培養(yǎng)2448h后取樣, 在質(zhì)量分?jǐn)?shù)為25%勺蔗糖溶液中,觀察細(xì)胞 現(xiàn)象來鑒別細(xì)胞壁是否再生。(3)由于導(dǎo)入的目的基因能轉(zhuǎn)錄反義RNA且能與 互補結(jié)合,抑制 PG基因的正常表達(dá)。若轉(zhuǎn)基因番茄的保質(zhì)期比非轉(zhuǎn)基因番茄 ,則可確定轉(zhuǎn)基因番茄成功。(4)獲得的轉(zhuǎn)基因番茄產(chǎn)生的種子不一定保留目的基因,科研人員常采用 方法使子代保持轉(zhuǎn)基因番茄的優(yōu)良性狀。答案(1)反轉(zhuǎn)錄RNA聚合酶如下圖所示使目的基因隨質(zhì)粒的復(fù)制而增加(2)卡那

24、霉素適量植物激素是否發(fā)生質(zhì)壁分離(3)天然PG基因轉(zhuǎn)錄的mRNA長(4)無性繁殖(或植物組織培養(yǎng))解析(1)由mRNAe彳# DNA勺過程為反轉(zhuǎn)錄。通過反轉(zhuǎn)錄得到的目的基因不含RNA聚合酶結(jié)合位點,為了保證轉(zhuǎn)錄的正常進(jìn)行,需要在基因的上游添加RNA聚合酶結(jié)合位點。目的基因兩端均有該限制酶識別的序列,所以酶切后的目的基因兩端都有黏性末端。可以利用PCFa術(shù)對目的基因進(jìn)行擴增,也可以將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌中進(jìn)行擴增。(2)可利用標(biāo)記基因?qū)虻膶?dǎo)入結(jié)果進(jìn)行檢測。植物激素是植物組織培養(yǎng)中不可缺少的組分。(3)因目的基因轉(zhuǎn)錄得到的是反義 RNA與天然PG基因轉(zhuǎn)錄得到的 RNA可以互補配對,從而抑制正 常的

25、翻譯過程。(4)由圖示可知,目的基因整合到了細(xì)胞核染色體上,故獲得的轉(zhuǎn)基因植株 相當(dāng)于雜合子,有性生殖產(chǎn)生的后代不一定帶有目的基因,可以利用無性繁殖技術(shù)確保子代保持轉(zhuǎn)基因番茄的優(yōu)良性狀。23. (10分)農(nóng)桿菌是一種在土壤中生活的微生物,能在自然條件下感染植物,因而在 植物基因工程中得到了廣泛的運用。下圖為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的示意圖,試回答下列問題:(1) 一般情況下農(nóng)桿菌不能感染的植物是 ,利用農(nóng)桿菌自然條件下感染植物的 特點,能實現(xiàn)。具體原理是在農(nóng)桿菌的 Ti質(zhì)粒上存在T- DN附段,它具有可轉(zhuǎn)移 至受體細(xì)胞并整合到受體細(xì)胞 上的特點,因此只要將攜帶外源基因的DNA片段插入到(部位)即可。(2)

26、根據(jù)T DNA一轉(zhuǎn)移特點,推測該DNA段上可能含有控制 (酶)合成的基 因。(3)圖中c過程中,能促進(jìn)農(nóng)桿菌向植物細(xì)胞轉(zhuǎn)移的物質(zhì)是 類化合物。(4)要獲取能表現(xiàn)出新性狀的植株,d過程涉及的生物學(xué)技術(shù)是 。(5)植物基因工程中除了農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法之外,還可采取 方法。(至少寫出兩種)答案(1)單子葉植物目的基因?qū)氲街参锛?xì)胞染色體的DNA T- DNA段(部)(2)DNA連接酶、限制酶(3)酚(4)植物組織培養(yǎng)(5)基因槍法、花粉管通道法解析(1) 一般農(nóng)桿菌不能感染的植物是單子葉植物,可感染雙子葉植物和裸子植物。利用其感染性,可實現(xiàn)目的基因?qū)氲街参锛?xì)胞。真正可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞并整合到受體細(xì)胞染色體

27、的DNA上的是農(nóng)桿菌T- DNA片段,因此目的基因必須插入到該部位才能成功。(2)根據(jù)T- DNA一轉(zhuǎn)移特點,可以推測該DNA段能控制合成 DNA1接酶、限制酶,以實現(xiàn)與雙子葉植物細(xì)胞染色體 DNA的整合。(3)植物細(xì)胞受傷后可產(chǎn)生酚類物質(zhì),促進(jìn)農(nóng)桿菌向 植物細(xì)胞轉(zhuǎn)移。(4)d過程涉及的生物學(xué)技術(shù)是植物組織培養(yǎng),通過脫分化、再分化,最終 形成植物體。(5)植物基因工程中除了農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法之外,還有基因槍法和花粉管通道法等。24. (10分)將動物致病菌的抗原基因?qū)腭R鈴薯制成植物疫苗,飼喂轉(zhuǎn)基因馬鈴薯可使動物獲得免疫力。以下是與植物疫苗制備過程相關(guān)的圖和表。表1引物對序列表(1)在采用常規(guī)PCR方法擴增目的基因的過程中,使用的DNA聚合酶不同于一般生物體的DNA聚合酶,其最主要的特點是 。(2)PCR過程中退火(復(fù)性)溫度必須根據(jù)引物的堿基數(shù)量和種類

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