3、1菊花的組織培養(yǎng)(經(jīng)典)總結(jié)

1、菊花的組織培養(yǎng)菊花的組織培養(yǎng) 指植物的離體部分（包括任何器官、指植物的離體部分（包括任何器官、組織、細(xì)胞或組織、細(xì)胞或原生質(zhì)體原生質(zhì)體），在人工控制的），在人工控制的培養(yǎng)基及環(huán)境條件培養(yǎng)基及環(huán)境條件（溫度及光照）下，得（溫度及光照）下，得以生長(zhǎng)和以生長(zhǎng)和分化分化成完整植株的一種無菌培養(yǎng)成完整植株的一種無菌培養(yǎng)技術(shù)。技術(shù)。又稱：又稱：植物離體培養(yǎng)植物離體培養(yǎng)一、一、植物組織培養(yǎng)的概念植物組織培養(yǎng)的概念離體組織離體組織完整植株完整植株人工控制條件人工控制條件離體組織離體組織完整植株完整植株人工控制條件人工控制條件1、離體、離體2、無菌、無菌3、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：4、激素：、激素：5、其他外界條

2、件：、其他外界條件：大量元素大量元素 微量元素微量元素 有機(jī)物有機(jī)物生長(zhǎng)素生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素細(xì)胞分裂素pHpH值值溫度溫度光照光照1、概念：、概念：細(xì)胞的全能性是指已分化的細(xì)胞具細(xì)胞的全能性是指已分化的細(xì)胞具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能。有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能。2、原因：、原因：是生物體的每一個(gè)細(xì)胞都含有該物是生物體的每一個(gè)細(xì)胞都含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)都有發(fā)育成為完種所特有的全套遺傳物質(zhì)都有發(fā)育成為完整個(gè)體所必需的全部基因整個(gè)體所必需的全部基因植物組織培養(yǎng)原理：植物組織培養(yǎng)原理：植物細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞的全能性植物全能性植物全能性的表達(dá)的表達(dá)離體的植物器官、離體的植物器官、組織、細(xì)胞組織、細(xì)胞

3、 胚狀體胚狀體根、芽根、芽 愈傷組織愈傷組織 人工種子人工種子再生植株再生植株 脫脫分分化化 愈傷組織愈傷組織二、影響植物組織培養(yǎng)的因素：二、影響植物組織培養(yǎng)的因素：1、外植體的選取、外植體的選取 不同植物的組織培養(yǎng)難度不同不同植物的組織培養(yǎng)難度不同 同一種植物的不同組織培養(yǎng)難度不同同一種植物的不同組織培養(yǎng)難度不同2、培養(yǎng)基的配制、培養(yǎng)基的配制(MS培養(yǎng)基培養(yǎng)基) 大量元素：大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素：微量元素：Fe 、Mn、 B、 Zn、 Mo、 Cu、I、Co 有機(jī)物：甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等有機(jī)物：甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等 植物激素：生

4、長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素、赤霉素等植物激素：生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素、赤霉素等未開花植物的莖上未開花植物的莖上部新萌生的側(cè)枝部新萌生的側(cè)枝3、不同植物激素使用順序、不同植物激素使用順序使用順序使用順序 實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果 先生長(zhǎng)素，先生長(zhǎng)素，后細(xì)胞分裂素后細(xì)胞分裂素 有利于細(xì)胞分裂但不分化有利于細(xì)胞分裂但不分化 先細(xì)胞分裂素，先細(xì)胞分裂素，后生長(zhǎng)素后生長(zhǎng)素 細(xì)胞既分裂也分化細(xì)胞既分裂也分化 同時(shí)使用同時(shí)使用 分化頻率提高分化頻率提高 4、不同植物激素使用量、不同植物激素使用量生長(zhǎng)素生長(zhǎng)素/ /細(xì)胞分裂素比值細(xì)胞分裂素比值結(jié)果結(jié)果 比值高時(shí)比值高時(shí) 促根分化，促根分化，抑芽形成抑芽形成 比值低時(shí)比值低時(shí) 促芽分

5、化，促芽分化，抑根形成抑根形成 比值適中比值適中 促進(jìn)愈傷組織生長(zhǎng)促進(jìn)愈傷組織生長(zhǎng) 思考：以下培養(yǎng)基出現(xiàn)的現(xiàn)象反應(yīng)了什么問題？思考：以下培養(yǎng)基出現(xiàn)的現(xiàn)象反應(yīng)了什么問題？5、pH、溫度、光照、溫度、光照（菊花組培）（菊花組培） pH=5.8 溫度控制在溫度控制在1822 再分化需要光照再分化需要光照,每日光照每日光照12h6、消毒、消毒在培養(yǎng)的整個(gè)過程中，都需要是一個(gè)無菌環(huán)境在培養(yǎng)的整個(gè)過程中，都需要是一個(gè)無菌環(huán)境5.植物組織培養(yǎng)應(yīng)用植物組織培養(yǎng)應(yīng)用快速繁殖：快速繁殖： 運(yùn)用組織培養(yǎng)的途徑，一個(gè)單株一年可以繁殖幾萬到幾百萬個(gè)植株，而且均來自一單一的個(gè)體，遺傳性狀一致。例如一株葡萄一年繁殖到3萬多

6、株，一株蘭花一年繁殖到400萬株。種苗脫毒種苗脫毒：由于病毒的感染嚴(yán)重影響作物的產(chǎn)量和品質(zhì)，而利用組織培養(yǎng)技術(shù)可以有效地除去植物體內(nèi)的病毒，得到大量的無病毒種苗。主要的方法是培養(yǎng)植物莖尖分生組織，也可以采用熱處理或加入化學(xué)試劑的方法達(dá)到脫毒的效果。已經(jīng)取得成功的有馬鈴薯、草莓、香蕉、葡萄等等。Vi rus el i m i nat i onw hy does t he m eri st em have l ow / no vi rus t i t re? vi rus spreads pri m ari l y t hrough vascul ar syst em -t hi s i s no

7、t devel oped i n t he m eri st em m i t osi s and chrom osom e repl i cat i on com pet e w i t h vi rus repl i cat i on hi gh auxi n i n m eri st em i nhi bi t s vi rus repl i cat i on a vi rus “ i nact i vat i ng” syst em has great est act i vi t y i n m eri st emTobacco m eri st emvi rus-f reet i

8、ssuevi rus part i cl esf ound 遠(yuǎn)緣雜交：利用組織培養(yǎng)可以使難度很大的遠(yuǎn)緣雜交取得成功，從而育成一些罕見的新物種。突變育種：采用組織培養(yǎng)可以直接誘變和篩選出具抗病、抗鹽、高賴氨酸、高蛋白等優(yōu)良性狀的品種基因工程：基因工程：基因工程主要研究DNA的轉(zhuǎn)導(dǎo)，而基因轉(zhuǎn)導(dǎo)后必須通過組織培養(yǎng)途徑才能實(shí)現(xiàn)植株再生 生物制品：生物制品：有些極其昂貴的生物制品，可以用大規(guī)模培養(yǎng)植物細(xì)胞來直接生產(chǎn) 種質(zhì)保存：種質(zhì)保存：繁殖量大，省空間，保存時(shí)間長(zhǎng)制備制備MS固固體培養(yǎng)基體培養(yǎng)基外植體消毒外植體消毒 接種接種 培培 養(yǎng)養(yǎng)栽栽 培培四、實(shí)驗(yàn)操作四、實(shí)驗(yàn)操作 移移 栽栽1、培養(yǎng)基的滅菌（高壓

9、蒸汽滅菌）、培養(yǎng)基的滅菌（高壓蒸汽滅菌）2、外植體的消毒（酒精、氯化汞）、外植體的消毒（酒精、氯化汞）3、接種的無菌操作（酒精、酒精燈、接種的無菌操作（酒精、酒精燈灼燒）灼燒）4、無菌箱中的培養(yǎng)；、無菌箱中的培養(yǎng)；5、移栽到消過毒的環(huán)境中生存一段時(shí)間。、移栽到消過毒的環(huán)境中生存一段時(shí)間。在整個(gè)操作過程中，是如何來實(shí)現(xiàn)在整個(gè)操作過程中，是如何來實(shí)現(xiàn)無菌無菌環(huán)境的？環(huán)境的？結(jié)果分析與評(píng)價(jià)結(jié)果分析與評(píng)價(jià)（一）對(duì)接種操作中污染情況的分析（一）對(duì)接種操作中污染情況的分析（二）是否完成了對(duì)植物組織的脫分化和再分化（二）是否完成了對(duì)植物組織的脫分化和再分化（三）是否進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)、對(duì)照與記錄（三）是否進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)

10、、對(duì)照與記錄（四）生根苗的移栽是否合格（四）生根苗的移栽是否合格課題延伸（略）練習(xí)練習(xí)1.答：植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、答：植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差，對(duì)培養(yǎng)條件的要求較高。用于植物抗性差，對(duì)培養(yǎng)條件的要求較高。用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基同樣適合于某些微生物的組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基同樣適合于某些微生物的生長(zhǎng)，如一些細(xì)菌、真菌等的生長(zhǎng)。而培養(yǎng)生長(zhǎng)，如一些細(xì)菌、真菌等的生長(zhǎng)。而培養(yǎng)物一旦受到微生物的污染，就會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)前物一旦受到微生物的污染，就會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)前功盡棄，因此要進(jìn)行嚴(yán)格的無菌操作。功盡棄，因此要進(jìn)行嚴(yán)格的無菌操作。2.答：外植體的生理狀態(tài)是成功進(jìn)行組織培養(yǎng)答：外植體的生理狀態(tài)是成功進(jìn)行組織培養(yǎng)的重要條件之一。生長(zhǎng)旺盛的嫩枝生理狀況的重要條件之一。生長(zhǎng)旺盛的嫩枝生理狀況好，容易誘導(dǎo)脫分化和再