《農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全與檢測(cè)分析》

1、農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全與檢測(cè)目錄v一、 前言v二、 農(nóng)藥殘留基本知識(shí)概述v三、 標(biāo)準(zhǔn)的認(rèn)識(shí)與應(yīng)用v四 、檢測(cè)技術(shù)的基本原則與操作的一般要求v五 、農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù)概述v六 、農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)中注意事項(xiàng)v七、 如何避免漏檢和“假陽(yáng)性”樣品的出現(xiàn)v八、 樣品的采集及制備一、前言農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全的內(nèi)涵廣義： 農(nóng)產(chǎn)品數(shù)量保障和質(zhì)量安全狹義： 農(nóng)產(chǎn)品在生產(chǎn)加工過(guò)程中所帶來(lái)的可能對(duì)人、動(dòng)植物和環(huán)境產(chǎn)生危害或潛在危害的因素，如農(nóng)藥殘留、獸藥殘留、重金屬污染、亞硝酸鹽污染等。也就指農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量符合保障人的健康、安全的要求。污染物的分類1、物理性分類： 是由于在農(nóng)產(chǎn)品收獲或加工 過(guò)程中操作不規(guī)范，不慎在農(nóng)產(chǎn)品中混入有毒

2、有害雜質(zhì)，導(dǎo)致農(nóng)產(chǎn)品受到的污染。 該污染可以通過(guò)規(guī)范操作加以防范。2、化學(xué)性污染： 指在生產(chǎn)、加工過(guò)程中不合理使用化學(xué)合成物質(zhì)而對(duì)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全產(chǎn)生的危害。 該污染可以通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)進(jìn)行控制3、生物性污染： 指自然界中各類生物性因子對(duì)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全的危害。 有些可以通過(guò)預(yù)防控制，大多數(shù)則需要通過(guò)采取綜合治理措施加以控制。4、本底性污染： 指農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)地環(huán)境中污染物對(duì)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全生產(chǎn)的危害。 治理難度最大，需要通過(guò)凈化產(chǎn)地環(huán)境或調(diào)整種養(yǎng)品種等措施加以解決。二、 農(nóng)藥殘留基本知識(shí)概述v農(nóng)藥農(nóng)藥 是指在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，為保障、促進(jìn)植物和農(nóng)作物的成長(zhǎng)，所施用的殺蟲、殺菌、殺滅有害動(dòng)物（或雜草）的一類藥物統(tǒng)

3、稱。特指在農(nóng)業(yè)上用于防治病蟲以及調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)、除草等藥劑。農(nóng)藥的分類v農(nóng)藥品種很多，根據(jù)防治對(duì)象，通常把農(nóng)藥分為：v殺蟲劑：敵敵畏、敵殺死、煙堿、辛硫磷、抑食肼等；v殺菌劑：波爾多液、代森錳鋅、多菌靈、百菌清、抗菌霉素等；v殺螨劑：螨類就是我們平時(shí)說(shuō)的紅蜘蛛、白蜘蛛。這類藥劑有螨克、三唑錫、三氯殺螨醇等；v殺線蟲劑:克線蟲劑、克線丹、丁線磷等；v除草劑：丁草胺、除草醚、拿撲凈、百草枯等；v除鼠劑：優(yōu)溴敵隆、氯鼠醇等v植物生長(zhǎng)調(diào)劑：植物生長(zhǎng)調(diào)劑可以促進(jìn)或抑制植物生長(zhǎng)，例如促進(jìn)開花和結(jié)果，形成無(wú)籽的果實(shí)，控制頂端生長(zhǎng)等。這類藥劑有吲哚乙酸、乙烯利、九二0等。農(nóng)藥的分類v根據(jù)農(nóng)藥化學(xué)結(jié)構(gòu)可分為：v有

4、機(jī)磷類： 有機(jī)磷農(nóng)藥是用于防治植物病、蟲、害的含有機(jī)磷農(nóng)藥的有機(jī)化合物。這一類農(nóng)藥品種多、藥效高，用途廣，易分解，在人、畜體內(nèi)一般不積累，在農(nóng)藥中是極為重要的一類化合物。（ 倍硫磷、敵百蟲、敵敵畏、毒死蜱、甲胺磷、甲拌磷、甲基對(duì)硫磷、喹硫磷、樂果、磷胺、馬拉硫磷、殺螟硫磷、氧樂果 等）農(nóng)藥的分類v有機(jī)氯農(nóng)藥： 有機(jī)氯農(nóng)藥是用于防治植物病、蟲害的組成成分中含有有機(jī)氯元素的有機(jī)化合物。主要分為以苯為原料和以環(huán)戊二烯為原料的兩大類。前者如使用最早、應(yīng)用最廣的殺蟲劑DDT和六六六，以及殺螨劑三氯殺螨砜、三氯殺螨醇等，殺菌劑五氯硝基苯、百菌清、道豐寧等；后者如作為殺蟲劑的氯丹、七氯、艾氏劑等。農(nóng)藥的分類

5、v擬除蟲菊酯類農(nóng)藥： 是一類模擬天然除蟲菊酯化學(xué)結(jié)構(gòu)合成的農(nóng)藥，具有殺蟲譜廣、高效、低毒、低殘留的優(yōu)點(diǎn)，是目前較理想的農(nóng)藥。（甲氰菊酯、氯氟氰菊酯、溴氰菊酯、氰戊菊酯、氯菊酯等 ）農(nóng)藥的分類v氨基甲酸酯類農(nóng)藥： 是20世紀(jì)40年代美國(guó)加州大學(xué)的科學(xué)家研究卡立巴豆時(shí)發(fā)現(xiàn)的毒性生物堿毒扁豆堿的合成類似物，是人類針對(duì)有機(jī)氯和有機(jī)磷農(nóng)藥的缺點(diǎn)而開發(fā)出的一種新型廣譜殺蟲、殺螨、除草劑，具有高效、殘留期短的優(yōu)點(diǎn)，對(duì)人的毒性比有機(jī)磷農(nóng)藥低。（如西維因、抗蚜威、滅多威、克百威等） 農(nóng)藥殘留v農(nóng)藥殘留：是指農(nóng)藥使用后，一個(gè)時(shí)期內(nèi)，沒有被分解而殘留于生物體、收獲物、土壤、水體、大氣中的微量農(nóng)藥原體、有毒代謝物、降

6、解物和雜質(zhì)的總稱。 施用于作物上的農(nóng)藥，其中一部分附著于作物上，一部分散落在土壤、大氣和水等環(huán)境中，環(huán)境殘存的農(nóng)藥中的一部分又會(huì)被植物吸收。殘留農(nóng)藥直接通過(guò)植物果實(shí)或水、大氣到達(dá)人、畜體內(nèi)，或通過(guò)環(huán)境、食物鏈最終傳遞給人、畜。v最大殘留限量 ： 在農(nóng)畜產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留的法定最高允許濃度，又稱最高殘留限量，以每千克農(nóng)畜產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留的毫克數(shù)（毫克/千克）表示。 在農(nóng)藥殘留檢測(cè)中，以最大殘留限量值判斷是否超標(biāo)（GB 2763-2014）。三、 標(biāo)準(zhǔn)的認(rèn)識(shí)與應(yīng)用v標(biāo)準(zhǔn)的定義 國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)定義 ：標(biāo)準(zhǔn)是由一個(gè)公認(rèn)的機(jī)構(gòu)制定和批準(zhǔn)的文件。它對(duì)活動(dòng)或活動(dòng)的結(jié)果規(guī)定了規(guī)則、導(dǎo)則或特殊值，供共同和反復(fù)使用，以實(shí)現(xiàn)在

7、預(yù)定領(lǐng)域內(nèi)最佳秩序的效果。 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)定義：標(biāo)準(zhǔn)是對(duì)重復(fù)性事物和概念所做的統(tǒng)一規(guī)定，它以科學(xué)、技術(shù)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的綜合為基礎(chǔ)，經(jīng)過(guò)有關(guān)方面協(xié)商一致，由主管機(jī)構(gòu)批準(zhǔn)，以特定的形式發(fā)布，作為共同遵守的準(zhǔn)則和依據(jù)。 標(biāo)準(zhǔn)的劃分v我國(guó)的標(biāo)準(zhǔn)按照審批權(quán)限和作用范圍分為國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、地方標(biāo)準(zhǔn)和企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)四個(gè)等級(jí)。v按照標(biāo)準(zhǔn)的約束性分為強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)和非強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)。v強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)是指法律法規(guī)規(guī)定強(qiáng)制執(zhí)行的標(biāo)準(zhǔn)，其他標(biāo)準(zhǔn)則是推薦性標(biāo)準(zhǔn)。標(biāo)準(zhǔn)舉例vGB 2763-2014 食品中農(nóng)藥最大殘留限量vGB/T 5009.199-2003 蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測(cè)vNY/T 448-2001 蔬菜中有機(jī)

8、磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)舉例vNY/T 789-2004 農(nóng)藥殘留分析樣本的采樣方法vNY/T 761-2008 蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測(cè)定 vGB/T 20769-2008 水果和蔬菜中450種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法vGB/T 19648-2006 水果和蔬菜中500種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留的測(cè)定 氣相色譜-質(zhì)譜法 四 、檢測(cè)技術(shù)的基本原則與操作的一般要求（一）、基本原則 在檢驗(yàn)檢測(cè)工作中，必須遵循一個(gè)總的原則，即質(zhì)量、安全、快速、可操作和經(jīng)濟(jì)的原則。 1）、質(zhì)量原則 該原則要求檢測(cè)技術(shù)能夠充分保證檢測(cè)質(zhì)量，

9、方法成熟、穩(wěn)定，具有較高的精密度、準(zhǔn)確度和良好的選擇性，從而確保試驗(yàn)數(shù)據(jù)和結(jié)論的科學(xué)性、可信性和重復(fù)性。 2）、安全原則 該原則要求檢測(cè)檢驗(yàn)技術(shù)所使用的方法不應(yīng)對(duì)操作人員造成危害及環(huán)境污染或形成安全隱患。 3）、快速原則 農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全快速檢測(cè)的檢驗(yàn)對(duì)象多為現(xiàn)場(chǎng)檢驗(yàn)或大量樣品的篩選，這就要求快速檢測(cè)技術(shù)所使用的檢驗(yàn)方法反應(yīng)速度快，檢測(cè)效率高。 4）、可操作原則 由于使用快速檢測(cè)檢驗(yàn)技術(shù)的人員是基層質(zhì)檢部門的技術(shù)人員，因此快速檢測(cè)檢驗(yàn)技術(shù)所選用的方法其原理可以復(fù)雜，但操作必須簡(jiǎn)單明確，具有基本專業(yè)基礎(chǔ)的人員經(jīng)過(guò)短期培訓(xùn)都可以理解和掌握。 5）、經(jīng)濟(jì)原則 該原則要求快速檢測(cè)方法所要求的條件易于達(dá)到

10、，以便方法的推廣普及。 （二）、檢測(cè)技術(shù)操作的一般要求 1）、檢驗(yàn)方法中所采用的名詞及單位制，均應(yīng)該符合國(guó)家規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)要求。 2）、檢驗(yàn)方法中所使用的試劑均為分析純，所使用水為純度能滿足分析要求的蒸餾水或軟化水或其他相當(dāng)純度的水，除非特別聲明。 3）、檢驗(yàn)中所用計(jì)量器具必須按國(guó)家規(guī)定及規(guī)程計(jì)量和校正。 4）、稱取、量取精度要求用數(shù)值的有效數(shù)位表示。其中準(zhǔn)確稱取系指用精密天平進(jìn)行的稱量操作；吸取系指用移液管、刻度吸量管取液體物質(zhì)的操作。 5）、檢驗(yàn)有關(guān)要求 （1）檢驗(yàn)時(shí)必須做空白試驗(yàn)?？瞻自囼?yàn)是指除不加樣品外，采用完全相同的分析步驟、試劑和用量，進(jìn)行平行操作所得的結(jié)果。用于扣除樣品中試劑本底和計(jì)

11、算檢驗(yàn)方法的檢出限。 （2）檢驗(yàn)時(shí)必須做平行試驗(yàn)。 6）、檢驗(yàn)方法的選擇 同一檢驗(yàn)項(xiàng)目，如有兩個(gè)或兩個(gè)以上檢驗(yàn)方法時(shí)，可根據(jù)不同條件選擇使用。但必須以國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（GB）方法的第一法為仲裁方法。 7）、采樣必須注意樣品的生產(chǎn)日期、批號(hào)、代表性和均勻性。采集的數(shù)量應(yīng)能反映該樣品的客觀情況和滿足檢驗(yàn)項(xiàng)目對(duì)樣品量的需要。 8）、一般樣品在檢驗(yàn)結(jié)束后，應(yīng)保留3個(gè)月，以備需要時(shí)復(fù)查。保留期限從檢驗(yàn)報(bào)告單簽發(fā)日起計(jì)算。保留樣應(yīng)加封存放在適當(dāng)?shù)胤剑⒈M可能保持其原狀。 連續(xù)可調(diào)微量移液槍的使用方法連續(xù)可調(diào)微量移液槍的使用方法v可調(diào)式自動(dòng)取液器的操作方法: 用拇指和食指旋轉(zhuǎn)取液器上部的旋鈕，使數(shù)字窗口出現(xiàn)所需容量

12、體積的數(shù)字，在取液器下端插上一個(gè)塑料吸頭，并旋緊以保證氣密，然后四指并攏握住取液器上部，用拇指按住柱塞桿頂端的按鈕，向下按到第一停點(diǎn)，將取液器的吸頭插入待取的溶液中，緩慢松開按鈕，吸上液體，并停留12秒鐘（粘性大的溶液可加長(zhǎng)停留時(shí)間），將吸頭沿器壁滑出容器，用吸水紙擦去吸頭表面可能附著的液體排液時(shí)吸頭接觸傾斜的器壁，先將按鈕按到第一停點(diǎn)，停留一秒鐘（粘性大的液體要加長(zhǎng)停留時(shí)間）再按壓到第二停點(diǎn)，吹出吸頭尖部的剩余溶液，如果不便于用手取下吸頭，可按下除吸頭推桿，將吸頭推入廢物缸。 連續(xù)可調(diào)微量移液槍的使用方法連續(xù)可調(diào)微量移液槍的使用方法v移液器使用注意事項(xiàng)： (1)吸取液體時(shí)一定要緩慢平穩(wěn)地松開

13、拇指，絕不允許突然松開，以防將溶液吸入過(guò)快而沖入取液器內(nèi)腐蝕柱塞而造成漏氣。 (2)為獲得較高的精度，吸頭需預(yù)先吸取一次樣品溶液，然后再正式移液，因?yàn)槲⊙宓鞍踪|(zhì)溶液或有機(jī)溶劑時(shí)，吸頭內(nèi)壁會(huì)殘留一層“液膜”，造成排液量偏小而產(chǎn)生誤差。 (3)濃度和粘度大的液體，會(huì)產(chǎn)生誤差，為消除其誤差的補(bǔ)償量，可由試驗(yàn)確定，補(bǔ)償量可用調(diào)節(jié)旋鈕改變讀數(shù)窗的讀數(shù)來(lái)進(jìn)行設(shè)定。 (4)可用分析天平稱量所取純水的重量并進(jìn)行計(jì)算的方法，來(lái)校正取液器，1ml蒸餾水20時(shí)重0.9982g。 (5)禁止使用移液器反復(fù)撞擊吸頭來(lái)上緊的方法，長(zhǎng)期操作會(huì)使內(nèi)部零件松散而損壞移液器。連續(xù)可調(diào)微量移液槍的使用方法連續(xù)可調(diào)微量移液槍的使

14、用方法 (6)移液器未裝吸頭時(shí)，不能移液。 (7)在設(shè)置量程時(shí)，請(qǐng)注意旋轉(zhuǎn)到所需量程數(shù)字清清楚楚在顯示窗中，所設(shè)量程在移液器量程范圍內(nèi)不要將按鈕旋出量程，否則會(huì)卡住機(jī)械裝置，損壞了移液器。 (8)移液器嚴(yán)禁吸取有強(qiáng)揮發(fā)性、強(qiáng)腐蝕性的液體（如濃酸、濃堿、有機(jī)物等）。 (9)嚴(yán)禁使用移液器吹打混勻液體。 (10)不要用大量程的移液器移取小體積的液體，以免影響準(zhǔn)確度。同時(shí)，如果需要移取量程范圍以外較大量的液體，請(qǐng)使用移液管進(jìn)行操作。 (11)在移液槍的使用過(guò)程中不要帶著槍頭平放或倒置。用完后要把量程調(diào)到量程最大處，以減少槍內(nèi)彈簧的疲勞強(qiáng)度，過(guò)一段時(shí)間后，還要給槍內(nèi)加入潤(rùn)滑劑，以延長(zhǎng)槍的使用壽命。 五

15、 、農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù)概述方法依據(jù)方法依據(jù)vGB/T 5009.199-2003 蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測(cè)vNY/T 448-2001 蔬菜上有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)方法檢測(cè)技術(shù)原理 在一定條件下，有機(jī)磷和氨基甲酸類農(nóng)藥對(duì)膽堿酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常情況下，酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物（乙酰膽堿）水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計(jì)測(cè)定412nm下吸光度隨時(shí)間的變化值，計(jì)算出抑制率，通過(guò)抑制率可以判斷出樣品中是否含有有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留?？梢詫?shí)現(xiàn)有機(jī)磷及氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)。 檢測(cè)技術(shù)

16、適用范圍 本方法只適用于蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測(cè)。 不能用于有機(jī)氯、擬除蟲菊酯及除草劑等類型的農(nóng)藥殘留檢測(cè)?？焖贆z測(cè)儀器和設(shè)備快速檢測(cè)儀器和設(shè)備（卡片法）快速檢測(cè)儀器和設(shè)備（酶抑制率法）結(jié)果打印口機(jī)身顯示屏操作按鍵樣品槽快速檢測(cè)儀器和設(shè)備（酶抑制率法）v比色皿速測(cè)儀的種類速測(cè)儀的種類 速測(cè)儀的種類按一次可測(cè)定的數(shù)量分可分為三類：速測(cè)儀的種類按一次可測(cè)定的數(shù)量分可分為三類： 八通道以下的，即一次最多可測(cè)定七個(gè)樣品。大部八通道以下的，即一次最多可測(cè)定七個(gè)樣品。大部分廠家的儀器都屬于這一類；分廠家的儀器都屬于這一類； 大于大于8 8通道小于通道小于8080通道的，目前有通道的，

17、目前有1212通道和通道和3636通道通道的；的； 8080通道以上，即一次可測(cè)定通道以上，即一次可測(cè)定8080個(gè)以上樣品。個(gè)以上樣品。速測(cè)儀的種類速測(cè)儀的種類v從儀器分光結(jié)構(gòu)上可分為二類：從儀器分光結(jié)構(gòu)上可分為二類：v分光裝置使用濾光片；分光裝置使用濾光片；v分光裝置使用光電二極管。分光裝置使用光電二極管。v建議使用分光裝置使用濾光片的儀器。建議使用分光裝置使用濾光片的儀器。試試 劑劑 提取試劑：提取試劑： p H = 8 p H = 8 緩沖液緩沖液膽堿酯酶：乙酰膽堿酯酶或丁酰膽堿酯酶膽堿酯酶：乙酰膽堿酯酶或丁酰膽堿酯酶顯色劑：顯色劑： 二硫代二硝基苯甲酸二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)(D

18、TNB)底物：碘化硫代乙酰膽堿底物：碘化硫代乙酰膽堿(ATCI) (ATCI) 或碘化硫代丁?；虻饣虼□Ｄ憠A膽堿(B TCI) (B TCI) 蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)流程圖蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)流程圖 取樣（葉菜類取樣（葉菜類2 2克，非葉菜類克，非葉菜類4 4克），切碎克），切碎 加入加入2020毫升提取試劑，震蕩毫升提取試劑，震蕩1-21-2分鐘分鐘 于平底小試管中加入于平底小試管中加入5050微升酶、微升酶、3 3毫升樣本提取毫升樣本提取液、液、5050微升顯色劑在微升顯色劑在3738下培養(yǎng)下培養(yǎng)3030分鐘分鐘 于待測(cè)的于待測(cè)的5 5只平底小試管內(nèi)分別加入只平底小試管內(nèi)分別加入5050

19、微升底微升底物分別倒入物分別倒入5 5只比色皿中，放入儀器進(jìn)行測(cè)定只比色皿中，放入儀器進(jìn)行測(cè)定 注：對(duì)照組的比色皿中用注：對(duì)照組的比色皿中用3 3毫升提取試劑代替樣本提取液毫升提取試劑代替樣本提取液 結(jié)果計(jì)算 抑制率（抑制率（% %）= = 抑制率：酶被抑制的程度抑制率：酶被抑制的程度 A c :A c :對(duì)照組對(duì)照組3min 3min 后與后與3min 3min 前吸光值之差前吸光值之差; ; A s :A s :樣本樣本3min 3min 后與后與3min 3min 前吸光值之差。前吸光值之差。 100cscAAA檢測(cè)結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)v乙酰膽堿酯酶（國(guó)標(biāo)）乙酰膽堿酯酶（國(guó)標(biāo)）檢

20、測(cè)結(jié)果以抑制率（檢測(cè)結(jié)果以抑制率（% %）表示）表示v抑制率抑制率50% 50% 陰性陰性 合格合格；v抑制率抑制率50% 50% 陽(yáng)性陽(yáng)性 至少兩次以上重復(fù)至少兩次以上重復(fù) 檢測(cè)檢測(cè) 不合格不合格 用用GCGC進(jìn)一步定性定量分析。進(jìn)一步定性定量分析。 檢測(cè)結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)丁酰膽堿酯酶（農(nóng)業(yè)部行標(biāo)）丁酰膽堿酯酶（農(nóng)業(yè)部行標(biāo)）v檢測(cè)結(jié)果以抑制率（檢測(cè)結(jié)果以抑制率（% %）表示）表示v抑制率抑制率70% 70% 陰性陰性 合格合格；v抑制率抑制率70% 70% 陽(yáng)性陽(yáng)性 至少兩次以上重復(fù)、至少兩次以上重復(fù)、 檢測(cè)檢測(cè) 不合格不合格 用用GCGC進(jìn)一步定性定量分析。進(jìn)一步定性定量分析。

21、樣本檢測(cè) 陰性陽(yáng)性復(fù)測(cè)（兩次以上）陰性陽(yáng)性儀器分析根據(jù)市場(chǎng)規(guī)定處理 六 、農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)中注意事項(xiàng)采樣要求采樣要求 樣品制備樣品制備 試劑的配制與保存試劑的配制與保存 檢測(cè)過(guò)程檢測(cè)過(guò)程 解釋檢測(cè)結(jié)果的異常現(xiàn)象解釋檢測(cè)結(jié)果的異?，F(xiàn)象 采樣要求采樣要求 v隨機(jī)抽取攤位上各部位的蔬菜隨機(jī)抽取攤位上各部位的蔬菜, , 每種樣本至少取每種樣本至少取0.50.51kg1kg左右左右, , 要求具有代表性。要求具有代表性。v抽檢樣本要詳細(xì)記錄。如蔬菜種類、抽檢地點(diǎn)、時(shí)抽檢樣本要詳細(xì)記錄。如蔬菜種類、抽檢地點(diǎn)、時(shí)間、蔬菜來(lái)源、批發(fā)商等，保證可追溯性。間、蔬菜來(lái)源、批發(fā)商等，保證可追溯性。樣品制備樣品制備 選

22、取包含大、中、小個(gè)體具有代表性的蔬菜，擦凈表面泥土，選取包含大、中、小個(gè)體具有代表性的蔬菜，擦凈表面泥土，用取樣器取樣或剪成用取樣器取樣或剪成1cm1cm見方碎片，待用。見方碎片，待用。l葉菜、普通油菜：用取樣器從葉片部位取樣，稱取葉菜、普通油菜：用取樣器從葉片部位取樣，稱取2g2g測(cè)定測(cè)定 l花椰菜和青花菜：取花球部分，切成小塊，稱取花椰菜和青花菜：取花球部分，切成小塊，稱取2g2g測(cè)定測(cè)定 l大白菜、甘藍(lán)、球生菜：選取大白菜、甘藍(lán)、球生菜：選取3 3至至5 5棵菜，用取樣器從蔬菜對(duì)棵菜，用取樣器從蔬菜對(duì)稱位置從表面穿至稱位置從表面穿至1-1.5cm1-1.5cm處取樣，混合均勻，稱取處取樣

23、，混合均勻，稱取2g2g測(cè)定測(cè)定l茶青：選取茶青：選取3-53-5株鮮葉，直接于提取液中浸泡，不能破碎葉株鮮葉，直接于提取液中浸泡，不能破碎葉片，避免導(dǎo)致葉綠素造成假陽(yáng)性片，避免導(dǎo)致葉綠素造成假陽(yáng)性樣品制備樣品制備l果菜（番茄、茄子、辣椒）和瓜類（黃瓜、西葫蘆）果菜（番茄、茄子、辣椒）和瓜類（黃瓜、西葫蘆）菜：從果實(shí)對(duì)稱部位取果皮，切成見方小塊，稱取菜：從果實(shí)對(duì)稱部位取果皮，切成見方小塊，稱取4g4g測(cè)定測(cè)定 l豆類菜（包括：菜豆、豇豆、荷蘭豆等）：選取多豆類菜（包括：菜豆、豇豆、荷蘭豆等）：選取多根菜豆，從中截取一段，再切成小段，混勻，稱取根菜豆，從中截取一段，再切成小段，混勻，稱取4g4g

24、測(cè)定測(cè)定 試劑的配制與保存試劑的配制與保存 p酶的要求酶的要求 p底物與顯色劑底物與顯色劑 酶的要求酶的要求選擇對(duì)國(guó)內(nèi)常用的有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥較敏感以及活選擇對(duì)國(guó)內(nèi)常用的有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥較敏感以及活性高的膽堿酯酶。性高的膽堿酯酶。 以以3min3min后與后與3min 3min 前空白吸光值的差值即前空白吸光值的差值即AcAc在在0.40.40.80.8之之間為佳（國(guó)標(biāo)為間為佳（國(guó)標(biāo)為0.30.3以上）。以上）。如果空白如果空白AcAc低線以下低線以下, ,可適當(dāng)加大酶的加入量，或減少溶可適當(dāng)加大酶的加入量，或減少溶解酶的緩沖液。解酶的緩沖液。粉狀的酶應(yīng)儲(chǔ)存在冷凍室內(nèi)粉狀的酶應(yīng)儲(chǔ)

25、存在冷凍室內(nèi), ,用緩沖液溶解后應(yīng)儲(chǔ)存在用緩沖液溶解后應(yīng)儲(chǔ)存在0055冷藏室內(nèi)冷藏室內(nèi), ,在一周內(nèi)用完；溶后暫時(shí)不用的酶要保存在冷在一周內(nèi)用完；溶后暫時(shí)不用的酶要保存在冷凍室內(nèi)凍室內(nèi), ,用時(shí)解凍用時(shí)解凍, ,解凍后一周內(nèi)用光解凍后一周內(nèi)用光, ,不要反復(fù)解凍不要反復(fù)解凍, ,否則會(huì)否則會(huì)影響酶的活性。影響酶的活性。 底物與顯色劑底物與顯色劑 q加入加入10.0mL10.0mL緩沖液至試劑瓶中，搖勻，緩沖液至試劑瓶中，搖勻，儲(chǔ)存于冷藏室中。儲(chǔ)存于冷藏室中。q在使用過(guò)程中避免交叉污染，觀察試劑顏色在使用過(guò)程中避免交叉污染，觀察試劑顏色是否正常。是否正常。 檢測(cè)過(guò)程檢測(cè)過(guò)程 v使用移液槍時(shí)，避免

26、溶液吸空或推液不盡導(dǎo)致所取使用移液槍時(shí)，避免溶液吸空或推液不盡導(dǎo)致所取溶液體積不準(zhǔn)，造成數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確溶液體積不準(zhǔn)，造成數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確v反應(yīng)溫度、反應(yīng)時(shí)間對(duì)酶抑制率的影響反應(yīng)溫度、反應(yīng)時(shí)間對(duì)酶抑制率的影響 溫度對(duì)酶的活性和穩(wěn)定性影響很大，因此實(shí)驗(yàn)必須溫度對(duì)酶的活性和穩(wěn)定性影響很大，因此實(shí)驗(yàn)必須在恒溫條件下進(jìn)行，使空白和樣品的反應(yīng)溫度一致，在恒溫條件下進(jìn)行，使空白和樣品的反應(yīng)溫度一致，避免實(shí)驗(yàn)誤差避免實(shí)驗(yàn)誤差 檢測(cè)過(guò)程檢測(cè)過(guò)程不同酶抑制時(shí)間影響酶的抑制率。隨著酶抑制時(shí)間不同酶抑制時(shí)間影響酶的抑制率。隨著酶抑制時(shí)間的延長(zhǎng)，抑制率也隨之提高。所以實(shí)驗(yàn)操作中必須的延長(zhǎng)，抑制率也隨之提高。所以實(shí)驗(yàn)操作中必須控制

27、酶抑制時(shí)間，使空白與樣品的反應(yīng)時(shí)間完全一控制酶抑制時(shí)間，使空白與樣品的反應(yīng)時(shí)間完全一致致 v番茄多汁且含有天然色素，振搖后有絮狀物懸浮，番茄多汁且含有天然色素，振搖后有絮狀物懸浮，需延長(zhǎng)靜置時(shí)間，減少干擾需延長(zhǎng)靜置時(shí)間，減少干擾 檢測(cè)過(guò)程檢測(cè)過(guò)程v比色皿的使用：注意手不要摸比色皿的光面，比色皿的使用：注意手不要摸比色皿的光面，要拿毛面，光面對(duì)準(zhǔn)光路。要拿毛面，光面對(duì)準(zhǔn)光路。v比色皿的液體要超過(guò)三分之二，且不要溢出，比色皿的液體要超過(guò)三分之二，且不要溢出，要保持光面外側(cè)的潔凈。要保持光面外側(cè)的潔凈。 七、 如何避免漏檢和“假陽(yáng)性”樣品的出現(xiàn)p假陽(yáng)性的產(chǎn)生假陽(yáng)性的產(chǎn)生 1 1、有的蔬菜細(xì)胞液中存在

28、有抑制膽堿酯酶的物質(zhì)，、有的蔬菜細(xì)胞液中存在有抑制膽堿酯酶的物質(zhì)，在取樣時(shí)如將樣品切得過(guò)碎使得大量的細(xì)胞破碎細(xì)在取樣時(shí)如將樣品切得過(guò)碎使得大量的細(xì)胞破碎細(xì)胞液流出，進(jìn)入到檢測(cè)液中影響檢測(cè)結(jié)果。胞液流出，進(jìn)入到檢測(cè)液中影響檢測(cè)結(jié)果。2 2、有的蔬菜（菠菜等）含有較多的葉綠素對(duì)實(shí)驗(yàn)的、有的蔬菜（菠菜等）含有較多的葉綠素對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響。影響。3 3、韭菜、生姜、蔥、辣椒、胡蘿卜等蔬菜中含有破、韭菜、生姜、蔥、辣椒、胡蘿卜等蔬菜中含有破壞酶活性的物質(zhì)，處理這類蔬菜時(shí)必要時(shí)可以采取壞酶活性的物質(zhì)，處理這類蔬菜時(shí)必要時(shí)可以采取整株提取的方式。整株提取的方式。v漏檢的出現(xiàn)漏檢的出現(xiàn) 漏檢的出現(xiàn)主要分為兩種情況

29、；一、操作失誤漏檢的出現(xiàn)主要分為兩種情況；一、操作失誤導(dǎo)致的漏檢，二、方法的局限性導(dǎo)致的漏檢。導(dǎo)致的漏檢，二、方法的局限性導(dǎo)致的漏檢。 出現(xiàn)漏檢情況應(yīng)該先從第一種情況開始查找問(wèn)出現(xiàn)漏檢情況應(yīng)該先從第一種情況開始查找問(wèn)題，排除第一種情況后才考慮第二種情況。題，排除第一種情況后才考慮第二種情況。 由于方法的局限性第二種情況不可避免，如出由于方法的局限性第二種情況不可避免，如出現(xiàn)應(yīng)送上級(jí)檢測(cè)機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢測(cè)確認(rèn)。現(xiàn)應(yīng)送上級(jí)檢測(cè)機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢測(cè)確認(rèn)。八、 樣品的采集及制備v一、采樣總體要求v1、采樣重要性、采樣重要性 科學(xué)的采樣，是監(jiān)測(cè)工作的基礎(chǔ)； 正確的采樣，是結(jié)果正確的前提；規(guī)范的采樣，是準(zhǔn)確判定的保證。

30、v2、采樣的原則、采樣的原則（1）代表性、公正性、風(fēng)險(xiǎn)性（2）隨機(jī)抽樣：對(duì)采集的樣品不論進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)常規(guī)鑒定還是送實(shí)驗(yàn)室做品質(zhì)鑒定，一般要求隨機(jī)取樣。在某些特殊情況下，例如：為了查明混入的其他品種或任一類型的混雜，允許進(jìn)行選擇取樣。取樣之前要明確取樣的目的，即搞清樣品鑒定性質(zhì)。3 3、采樣的準(zhǔn)備工作、采樣的準(zhǔn)備工作（1 1）抽樣實(shí)施方案）抽樣實(shí)施方案 目的意義、任務(wù)來(lái)源、遵循標(biāo)準(zhǔn)、地點(diǎn)（對(duì)象）、時(shí)間、品種及數(shù)量、人員安排、樣品運(yùn)輸及處置、問(wèn)題處理。（2 2）材料、器材準(zhǔn)備）材料、器材準(zhǔn)備 抽樣單、任務(wù)通知（文件）、有關(guān)證件，樣品袋、刀具及粉碎機(jī)等。（3 3）調(diào)研（如果必要）調(diào)研（如果必要） 對(duì)任務(wù)背景或受檢產(chǎn)品、受檢地區(qū)的情況開展必要的調(diào)查，以充分了解任務(wù)的全面情況。（4）抽樣工具、尤其是容器待要確保不會(huì)對(duì)檢測(cè)對(duì)象造成污染。（5）樣品運(yùn)輸和保存應(yīng)確保不受影響。（6）每次抽樣不得少于2人，其中1人應(yīng)有一定的抽樣工作經(jīng)驗(yàn)，負(fù)責(zé)具體實(shí)施及有關(guān)情況的協(xié)調(diào)處理。抽樣人員應(yīng)衣著整齊，態(tài)度端正，作風(fēng)嚴(yán)謹(jǐn)。v4、抽樣過(guò)程、抽樣過(guò)程（1）主動(dòng)出示有關(guān)證件文件，提交抽樣單。（2）對(duì)實(shí)施抽樣產(chǎn)品進(jìn)行確認(rèn)。（3）按照不同產(chǎn)品規(guī)定，實(shí)施抽樣。（4）對(duì)現(xiàn)場(chǎng)周圍開展調(diào)查。（5）填寫抽樣單：信息齊全、準(zhǔn)確，字跡清晰、工整。經(jīng)雙方簽字確認(rèn)