除菌過(guò)濾系統(tǒng)驗(yàn)證方案及報(bào)告

1、除菌過(guò)濾系統(tǒng)驗(yàn)證方案驗(yàn)證方案的申請(qǐng)與審批 驗(yàn)證方案的起草起草部門(mén)起草人起草日期驗(yàn)證方案的審核審核部門(mén)審核人審核日期驗(yàn)證方案的批準(zhǔn)職務(wù)批準(zhǔn)人簽名日 期目錄1.概述及驗(yàn)證方案說(shuō)明1.1.概述1.2.驗(yàn)證目的1.3.驗(yàn)證范圍1.4.驗(yàn)證職責(zé)2.驗(yàn)證儀器、試劑及文件說(shuō)明2.1.驗(yàn)證儀器2.2.驗(yàn)證試劑2.3.相關(guān)文件3.驗(yàn)證內(nèi)容3.1.細(xì)菌截留驗(yàn)證及濾芯化學(xué)兼容性驗(yàn)證3.1.1.殺菌性能驗(yàn)證3.1.2.驗(yàn)證前準(zhǔn)備3.1.3.驗(yàn)證步驟3.2.溶出物驗(yàn)證3.2.1.驗(yàn)證前準(zhǔn)備3.2.2.驗(yàn)證步驟3.3.吸附驗(yàn)證3.4.可見(jiàn)異物檢查4.驗(yàn)證結(jié)果評(píng)價(jià)及結(jié)論5.正常運(yùn)行后的控制要點(diǎn)6.驗(yàn)證周期1.概述及驗(yàn)證方案

2、說(shuō)明1.1.概述我公司的凍干粉針劑為非最終滅菌的無(wú)菌制劑，除菌過(guò)濾是整個(gè)工藝流程中保證藥液無(wú)菌的重要環(huán)節(jié)。公司在生產(chǎn)中使用的除菌過(guò)濾系統(tǒng)包括濾芯、濾殼。濾芯為上海金科生產(chǎn)的0.2um的除菌級(jí)聚醚砜濾芯，規(guī)格為5英寸；過(guò)濾設(shè)備為山東濰坊精鷹生產(chǎn)的配液、除菌過(guò)濾系統(tǒng)。1.2驗(yàn)證目的：通過(guò)此驗(yàn)證，證明該除菌過(guò)濾系統(tǒng)符合本公司注射用生長(zhǎng)抑素凍干粉針劑生產(chǎn)工藝要求和GMP規(guī)定。1.3驗(yàn)證范圍本方案適用于本公司的注射用生長(zhǎng)抑素凍干粉針劑在新建凍干粉針劑車(chē)間的除菌過(guò)濾系統(tǒng)驗(yàn)證。1.4驗(yàn)證職責(zé)小組職務(wù)姓 名所在部門(mén)職 責(zé)組 長(zhǎng)組 員組 員組 員組 員組 員組 員2.驗(yàn)證儀器、試劑及文件說(shuō)明2.1驗(yàn)證儀器儀器名

3、稱型號(hào)或規(guī)格校正時(shí)間標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定是否符合要求過(guò)濾器完整性檢測(cè)儀除菌過(guò)濾系統(tǒng)除菌過(guò)濾濾芯PH計(jì)高效液相色譜儀不溶性微粒檢測(cè)儀電子天平偏差分析及總結(jié)：確認(rèn)人日期復(fù)核人日期2.2.驗(yàn)證試劑試劑名稱廠家備注甘露醇藥用醋酸生長(zhǎng)抑素原料藥缺陷假單胞菌規(guī)格：107CFU/片2.3.相關(guān)文件公司文件編號(hào)濾芯的供應(yīng)商審計(jì)報(bào)告除菌過(guò)濾系統(tǒng)安裝確認(rèn)、運(yùn)行確認(rèn)高效液相色譜使用SOPxxx型完整性測(cè)試儀使用SOP不溶性微粒檢測(cè)儀使用SOP注射用生長(zhǎng)抑素生產(chǎn)工藝規(guī)程注射用生長(zhǎng)抑素半成品配制SOP5.驗(yàn)證內(nèi)容：5.1. 細(xì)菌截留驗(yàn)證及濾芯化學(xué)兼容性驗(yàn)證取規(guī)格為107CFU/片的菌片，將其培養(yǎng)成1010CFU/ml的菌懸液，備用

4、。根據(jù)10版GMP要求，驗(yàn)證細(xì)菌截留時(shí)，濾膜單位面積除菌量不得低于107CFU/cm2。2.5寸的濾芯過(guò)濾面積為1250cm2，因此所需菌液量不能少于1.25×1010CFU缺陷假單胞菌。5.1.1殺菌性能驗(yàn)證3.1.1.1從生產(chǎn)線中取已配置好的生長(zhǎng)抑素半成品溶液100ml，用移液槍移加入1ml濃度為1010CFU/ml的菌懸液，混勻。取混勻后溶液1ml，稀釋涂布培養(yǎng)，平行操作兩份，作為對(duì)照組。3037培養(yǎng)48小時(shí)候后，計(jì)算菌落數(shù)，通過(guò)菌落數(shù)推算菌懸液濃度。帶菌藥液放置8小時(shí)后，取1ml溶液，稀釋涂布培養(yǎng)，平行操作兩份，作為樣品組。3037條件下培養(yǎng)48小時(shí)候后，計(jì)算菌落數(shù)，通過(guò)菌落

5、數(shù)推算菌懸液濃度。將其結(jié)果記錄于下表：項(xiàng)目對(duì)照組實(shí)驗(yàn)組差值培養(yǎng)基編號(hào)12平均值12平均值理論菌懸液濃度(CFU/ml)菌落數(shù)(CFU)實(shí)際菌懸液濃度(CFU/ml)菌懸液濃度計(jì)算公式：菌懸液濃度=(菌落數(shù)×稀釋倍數(shù))/取樣量偏差分析及總結(jié)：確認(rèn)人日期復(fù)核人日期3.1.1.2.樣品實(shí)際菌懸液濃度與對(duì)照品實(shí)際菌懸液濃度對(duì)比，若前者比后者細(xì)菌濃度降低1個(gè)對(duì)數(shù)值時(shí)，則為殺菌性藥液，分析殺菌原因，選擇替代藥液或方案重新進(jìn)行驗(yàn)證。否則，可以認(rèn)為是非殺菌性藥液，驗(yàn)證繼續(xù)。3.1.2驗(yàn)證前準(zhǔn)備3.1.2.1.濾芯先用注射用水充分潤(rùn)濕。3.1.2.2.按照注射用生長(zhǎng)抑素半成品配制SOP在配液罐中配制生

6、長(zhǎng)抑素半成品溶液40000ml，備用。3.1.2.3.將除菌過(guò)濾系統(tǒng)各個(gè)部件連接好，用注射用水對(duì)除菌過(guò)濾系統(tǒng)進(jìn)行檢漏，無(wú)漏液現(xiàn)象則進(jìn)行以下操作，不然分析原因并改進(jìn)。3.1.2.4.將除菌過(guò)濾實(shí)驗(yàn)用到的儀器設(shè)備放到高溫滅菌鍋中12160分鐘滅菌。3.1.3.驗(yàn)證步驟注：在細(xì)菌截留試驗(yàn)中，應(yīng)考慮生產(chǎn)過(guò)程中的較差條件。分析過(guò)濾的條件中，過(guò)濾壓力的高低可能對(duì)除菌過(guò)濾造成較差的影響，故我們選擇過(guò)濾壓力：高于通常情況的0.30 Mpa；通常條件下的0.20 Mpa；低于通常情況的0.10Mpa。另外，在藥液的體積上，我們也比正常生產(chǎn)情況的34000ml稍大一些，采用40000ml。3.1.3.1.用移液槍

7、移取1010CFU/ml的缺陷假單胞菌菌液2ml加入到生長(zhǎng)抑素半成品溶液中，將溶液混勻。取5ml將其放置到離心管中，冷藏作為對(duì)照備用。3.1.3.2.將滅菌后的除菌過(guò)濾設(shè)備取出連接，用完整性測(cè)試儀進(jìn)行起泡點(diǎn)測(cè)試，測(cè)試使用注射用水作為潤(rùn)濕液時(shí)的起泡點(diǎn)（BPw1）并記錄。3.1.3.3.過(guò)濾帶菌藥液，用滅菌的離心管取5ml過(guò)濾液作為樣品液；過(guò)濾結(jié)束后，用完整性測(cè)試儀進(jìn)行起泡點(diǎn)測(cè)試，測(cè)產(chǎn)品起泡點(diǎn)（BPp）并記錄。3.1.3.4用氫氧化鈉溶液清洗、再用注射用水清洗，再測(cè)試起泡點(diǎn)（BPw2）并記錄，則BPw=（BPw1+ BPw2）/2，并作為標(biāo)準(zhǔn)。產(chǎn)品氣泡點(diǎn)的比率：實(shí)際產(chǎn)品的起泡點(diǎn)/水潤(rùn)濕的起泡點(diǎn) B

8、PpBPR = -BPw起泡點(diǎn)偏差表 品名：注射用生長(zhǎng)抑素凍干粉針劑 規(guī)格： /支濾芯批號(hào)批號(hào)：批號(hào)：批號(hào)：BPR的均值BPw1BPw2均值BPpBPR偏差分析及總結(jié)：確認(rèn)人日期復(fù)核人日期3.1.3.5對(duì)比BPw1和BPw2的起泡點(diǎn)測(cè)試數(shù)據(jù)，若BPw2的值相比BPw1無(wú)明顯的降低，則本濾芯對(duì)于藥液的化學(xué)兼容性好，適合用于注射用生長(zhǎng)抑素藥液的除菌過(guò)濾。否則，化學(xué)兼容性差，需更換濾芯并重新進(jìn)行驗(yàn)證。3.1.3.6取對(duì)照液及樣品液各1ml，稀釋涂布培養(yǎng)，各平行操作兩份，在3037條件下培養(yǎng)48小時(shí)候后，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)。以上操作分別在過(guò)濾壓力為0.1Mpa、0.2Mpa、0.3 Mpa情況下各操作一次。將

9、結(jié)果記錄于表：過(guò)濾壓力0.1 MPa0.2 MPa0.3 MPa所用微生物菌種起泡點(diǎn)壓力測(cè)試合格標(biāo)準(zhǔn)0.34 MPa濾前濾后濾芯規(guī)格批號(hào)對(duì)照組菌落數(shù)1號(hào)2號(hào)樣品組菌落數(shù)1號(hào)2號(hào)偏差分析及總結(jié)：確認(rèn)人日期復(fù)核人日期3.2.溶出物驗(yàn)證3.2.1驗(yàn)證前準(zhǔn)備3.2.1.1.除菌過(guò)濾系統(tǒng)的清洗3.2.1.2.除菌過(guò)濾系統(tǒng)的滅菌3.2.1.3.準(zhǔn)備三個(gè)不同批次的濾芯3.2.2驗(yàn)證操作3.2.2.1.按照注射用生長(zhǎng)抑素半成品配制SOP配制藥液2000ml，攪拌均勻。3.2.2.2.將藥液用壓縮空氣打入除菌過(guò)濾系統(tǒng)中，注滿整個(gè)濾筒，將系統(tǒng)的進(jìn)、出液口封閉，放置6小時(shí)，為樣品1。3.2.2.3.將剩余的藥液不打

10、入過(guò)濾系統(tǒng)，放置到冰箱中冷藏保存，放置6小時(shí)，為樣品2。3.2.2.4將樣品1從過(guò)濾系統(tǒng)中放出,用攪拌器（型號(hào)為）攪拌10min。3.2.2.5以樣品2為對(duì)照，檢測(cè)樣品1中的有關(guān)物質(zhì)。從而通過(guò)有關(guān)物質(zhì)的變化判斷是否有物質(zhì)從濾芯中溶出。3.2.2.6三個(gè)批次的濾芯按上述步驟個(gè)操作一次，將其結(jié)果記錄于下表：項(xiàng)目批號(hào)樣品中物質(zhì)對(duì)照品中物質(zhì)濾芯偏差分析及總結(jié)：確認(rèn)人日期復(fù)核人日期3.3.吸附驗(yàn)證將3.2.2.4試驗(yàn)中過(guò)濾系統(tǒng)內(nèi)的的藥液取樣，檢測(cè)有效成分初始時(shí)含量和放置6小時(shí)后的含量，將其結(jié)果記錄下表：項(xiàng)目批號(hào)吸附前有效成分含量吸附后有效成分含量吸附前后差值濾芯差值標(biāo)準(zhǔn)差值要求小于2%偏差分析及總結(jié)：確認(rèn)人日期復(fù)核人日期3.4 可見(jiàn)異物檢查從3.2.2.4樣品1中取適量藥液放入到透明的玻璃試管中，觀察藥液中是否有顆粒物和纖維等可見(jiàn)異物。若有異物存在，說(shuō)明濾芯材質(zhì)不合格，對(duì)濾