除菌過濾系統(tǒng)驗(yàn)證方案及報(bào)告

1、除菌過濾系統(tǒng)驗(yàn)證方案驗(yàn)證方案的申請(qǐng)與審批 驗(yàn)證方案的起草起草部門起草人起草日期驗(yàn)證方案的審核審核部門審核人審核日期驗(yàn)證方案的批準(zhǔn)職務(wù)批準(zhǔn)人簽名日 期目錄1.概述及驗(yàn)證方案說明1.1.概述1.2.驗(yàn)證目的1.3.驗(yàn)證范圍1.4.驗(yàn)證職責(zé)2.驗(yàn)證儀器、試劑及文件說明2.1.驗(yàn)證儀器2.2.驗(yàn)證試劑2.3.相關(guān)文件3.驗(yàn)證內(nèi)容3.1.細(xì)菌截留驗(yàn)證及濾芯化學(xué)兼容性驗(yàn)證3.1.1.殺菌性能驗(yàn)證3.1.2.驗(yàn)證前準(zhǔn)備3.1.3.驗(yàn)證步驟3.2.溶出物驗(yàn)證3.2.1.驗(yàn)證前準(zhǔn)備3.2.2.驗(yàn)證步驟3.3.吸附驗(yàn)證3.4.可見異物檢查4.驗(yàn)證結(jié)果評(píng)價(jià)及結(jié)論5.正常運(yùn)行后的控制要點(diǎn)6.驗(yàn)證周期1.概述及驗(yàn)證方案

2、說明1.1.概述我公司的凍干粉針劑為非最終滅菌的無菌制劑，除菌過濾是整個(gè)工藝流程中保證藥液無菌的重要環(huán)節(jié)。公司在生產(chǎn)中使用的除菌過濾系統(tǒng)包括濾芯、濾殼。濾芯為上海金科生產(chǎn)的0.2um的除菌級(jí)聚醚砜濾芯，規(guī)格為5英寸；過濾設(shè)備為山東濰坊精鷹生產(chǎn)的配液、除菌過濾系統(tǒng)。1.2驗(yàn)證目的：通過此驗(yàn)證，證明該除菌過濾系統(tǒng)符合本公司注射用生長抑素凍干粉針劑生產(chǎn)工藝要求和GMP規(guī)定。1.3驗(yàn)證范圍本方案適用于本公司的注射用生長抑素凍干粉針劑在新建凍干粉針劑車間的除菌過濾系統(tǒng)驗(yàn)證。1.4驗(yàn)證職責(zé)小組職務(wù)姓 名所在部門職 責(zé)組 長組 員組 員組 員組 員組 員組 員2.驗(yàn)證儀器、試劑及文件說明2.1驗(yàn)證儀器儀器名

3、稱型號(hào)或規(guī)格校正時(shí)間標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定是否符合要求過濾器完整性檢測儀除菌過濾系統(tǒng)除菌過濾濾芯PH計(jì)高效液相色譜儀不溶性微粒檢測儀電子天平偏差分析及總結(jié)：確認(rèn)人日期復(fù)核人日期2.2.驗(yàn)證試劑試劑名稱廠家備注甘露醇藥用醋酸生長抑素原料藥缺陷假單胞菌規(guī)格：107CFU/片2.3.相關(guān)文件公司文件編號(hào)濾芯的供應(yīng)商審計(jì)報(bào)告除菌過濾系統(tǒng)安裝確認(rèn)、運(yùn)行確認(rèn)高效液相色譜使用SOPxxx型完整性測試儀使用SOP不溶性微粒檢測儀使用SOP注射用生長抑素生產(chǎn)工藝規(guī)程注射用生長抑素半成品配制SOP5.驗(yàn)證內(nèi)容：5.1. 細(xì)菌截留驗(yàn)證及濾芯化學(xué)兼容性驗(yàn)證取規(guī)格為107CFU/片的菌片，將其培養(yǎng)成1010CFU/ml的菌懸液，備用

4、。根據(jù)10版GMP要求，驗(yàn)證細(xì)菌截留時(shí)，濾膜單位面積除菌量不得低于107CFU/cm2。2.5寸的濾芯過濾面積為1250cm2，因此所需菌液量不能少于1.25×1010CFU缺陷假單胞菌。5.1.1殺菌性能驗(yàn)證3.1.1.1從生產(chǎn)線中取已配置好的生長抑素半成品溶液100ml，用移液槍移加入1ml濃度為1010CFU/ml的菌懸液，混勻。取混勻后溶液1ml，稀釋涂布培養(yǎng)，平行操作兩份，作為對(duì)照組。3037培養(yǎng)48小時(shí)候后，計(jì)算菌落數(shù)，通過菌落數(shù)推算菌懸液濃度。帶菌藥液放置8小時(shí)后，取1ml溶液，稀釋涂布培養(yǎng)，平行操作兩份，作為樣品組。3037條件下培養(yǎng)48小時(shí)候后，計(jì)算菌落數(shù)，通過菌落

5、數(shù)推算菌懸液濃度。將其結(jié)果記錄于下表：項(xiàng)目對(duì)照組實(shí)驗(yàn)組差值培養(yǎng)基編號(hào)12平均值12平均值理論菌懸液濃度(CFU/ml)菌落數(shù)(CFU)實(shí)際菌懸液濃度(CFU/ml)菌懸液濃度計(jì)算公式：菌懸液濃度=(菌落數(shù)×稀釋倍數(shù))/取樣量偏差分析及總結(jié)：確認(rèn)人日期復(fù)核人日期3.1.1.2.樣品實(shí)際菌懸液濃度與對(duì)照品實(shí)際菌懸液濃度對(duì)比，若前者比后者細(xì)菌濃度降低1個(gè)對(duì)數(shù)值時(shí)，則為殺菌性藥液，分析殺菌原因，選擇替代藥液或方案重新進(jìn)行驗(yàn)證。否則，可以認(rèn)為是非殺菌性藥液，驗(yàn)證繼續(xù)。3.1.2驗(yàn)證前準(zhǔn)備3.1.2.1.濾芯先用注射用水充分潤濕。3.1.2.2.按照注射用生長抑素半成品配制SOP在配液罐中配制生

6、長抑素半成品溶液40000ml，備用。3.1.2.3.將除菌過濾系統(tǒng)各個(gè)部件連接好，用注射用水對(duì)除菌過濾系統(tǒng)進(jìn)行檢漏，無漏液現(xiàn)象則進(jìn)行以下操作，不然分析原因并改進(jìn)。3.1.2.4.將除菌過濾實(shí)驗(yàn)用到的儀器設(shè)備放到高溫滅菌鍋中12160分鐘滅菌。3.1.3.驗(yàn)證步驟注：在細(xì)菌截留試驗(yàn)中，應(yīng)考慮生產(chǎn)過程中的較差條件。分析過濾的條件中，過濾壓力的高低可能對(duì)除菌過濾造成較差的影響，故我們選擇過濾壓力：高于通常情況的0.30 Mpa；通常條件下的0.20 Mpa；低于通常情況的0.10Mpa。另外，在藥液的體積上，我們也比正常生產(chǎn)情況的34000ml稍大一些，采用40000ml。3.1.3.1.用移液槍

7、移取1010CFU/ml的缺陷假單胞菌菌液2ml加入到生長抑素半成品溶液中，將溶液混勻。取5ml將其放置到離心管中，冷藏作為對(duì)照備用。3.1.3.2.將滅菌后的除菌過濾設(shè)備取出連接，用完整性測試儀進(jìn)行起泡點(diǎn)測試，測試使用注射用水作為潤濕液時(shí)的起泡點(diǎn)（BPw1）并記錄。3.1.3.3.過濾帶菌藥液，用滅菌的離心管取5ml過濾液作為樣品液；過濾結(jié)束后，用完整性測試儀進(jìn)行起泡點(diǎn)測試，測產(chǎn)品起泡點(diǎn)（BPp）并記錄。3.1.3.4用氫氧化鈉溶液清洗、再用注射用水清洗，再測試起泡點(diǎn)（BPw2）并記錄，則BPw=（BPw1+ BPw2）/2，并作為標(biāo)準(zhǔn)。產(chǎn)品氣泡點(diǎn)的比率：實(shí)際產(chǎn)品的起泡點(diǎn)/水潤濕的起泡點(diǎn) B

8、PpBPR = -BPw起泡點(diǎn)偏差表 品名：注射用生長抑素凍干粉針劑 規(guī)格： /支濾芯批號(hào)批號(hào)：批號(hào)：批號(hào)：BPR的均值BPw1BPw2均值BPpBPR偏差分析及總結(jié)：確認(rèn)人日期復(fù)核人日期3.1.3.5對(duì)比BPw1和BPw2的起泡點(diǎn)測試數(shù)據(jù)，若BPw2的值相比BPw1無明顯的降低，則本濾芯對(duì)于藥液的化學(xué)兼容性好，適合用于注射用生長抑素藥液的除菌過濾。否則，化學(xué)兼容性差，需更換濾芯并重新進(jìn)行驗(yàn)證。3.1.3.6取對(duì)照液及樣品液各1ml，稀釋涂布培養(yǎng)，各平行操作兩份，在3037條件下培養(yǎng)48小時(shí)候后，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)。以上操作分別在過濾壓力為0.1Mpa、0.2Mpa、0.3 Mpa情況下各操作一次。將

9、結(jié)果記錄于表：過濾壓力0.1 MPa0.2 MPa0.3 MPa所用微生物菌種起泡點(diǎn)壓力測試合格標(biāo)準(zhǔn)0.34 MPa濾前濾后濾芯規(guī)格批號(hào)對(duì)照組菌落數(shù)1號(hào)2號(hào)樣品組菌落數(shù)1號(hào)2號(hào)偏差分析及總結(jié)：確認(rèn)人日期復(fù)核人日期3.2.溶出物驗(yàn)證3.2.1驗(yàn)證前準(zhǔn)備3.2.1.1.除菌過濾系統(tǒng)的清洗3.2.1.2.除菌過濾系統(tǒng)的滅菌3.2.1.3.準(zhǔn)備三個(gè)不同批次的濾芯3.2.2驗(yàn)證操作3.2.2.1.按照注射用生長抑素半成品配制SOP配制藥液2000ml，攪拌均勻。3.2.2.2.將藥液用壓縮空氣打入除菌過濾系統(tǒng)中，注滿整個(gè)濾筒，將系統(tǒng)的進(jìn)、出液口封閉，放置6小時(shí)，為樣品1。3.2.2.3.將剩余的藥液不打

10、入過濾系統(tǒng)，放置到冰箱中冷藏保存，放置6小時(shí)，為樣品2。3.2.2.4將樣品1從過濾系統(tǒng)中放出,用攪拌器（型號(hào)為）攪拌10min。3.2.2.5以樣品2為對(duì)照，檢測樣品1中的有關(guān)物質(zhì)。從而通過有關(guān)物質(zhì)的變化判斷是否有物質(zhì)從濾芯中溶出。3.2.2.6三個(gè)批次的濾芯按上述步驟個(gè)操作一次，將其結(jié)果記錄于下表：項(xiàng)目批號(hào)樣品中物質(zhì)對(duì)照品中物質(zhì)濾芯偏差分析及總結(jié)：確認(rèn)人日期復(fù)核人日期3.3.吸附驗(yàn)證將3.2.2.4試驗(yàn)中過濾系統(tǒng)內(nèi)的的藥液取樣，檢測有效成分初始時(shí)含量和放置6小時(shí)后的含量，將其結(jié)果記錄下表：項(xiàng)目批號(hào)吸附前有效成分含量吸附后有效成分含量吸附前后差值濾芯差值標(biāo)準(zhǔn)差值要求小于2%偏差分析及總結(jié)：確認(rèn)人日期復(fù)核人日期3.4 可見異物檢查從3.2.2.4樣品1中取適量藥液放入到透明的玻璃試管中，觀察藥液中是否有顆粒物和纖維等可見異物。若有異物存在，說明濾芯材質(zhì)不合格，對(duì)濾