抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體ppt課件

1、ANCA抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體antineutrophil cytoplasmic antibodiesANCA的發(fā)現(xiàn)的發(fā)現(xiàn)n1982 Davies 寡免疫復(fù)合物型節(jié)段壞寡免疫復(fù)合物型節(jié)段壞死性新月體腎小球腎炎死性新月體腎小球腎炎()病人病人中初次發(fā)現(xiàn)中初次發(fā)現(xiàn)ANCA 。n1985 Vander Woude 研討闡明研討闡明ANCA對對Wegener肉芽腫高度敏感，肉芽腫高度敏感，是疾病活動的目的。是疾病活動的目的。What is ANCA?n是以中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞胞漿成分為是以中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞胞漿成分為靶抗原的本身抗體，主要為靶抗原的本身抗體，主要為IgG型。型。n

2、ANCA好像抗核抗體譜一樣，是一類本好像抗核抗體譜一樣，是一類本身抗體的總稱，其作用的抗原成分是中身抗體的總稱，其作用的抗原成分是中性粒細(xì)胞中的髓樣顆粒蛋白。性粒細(xì)胞中的髓樣顆粒蛋白。ANCA的測定的測定q間接免疫熒光法間接免疫熒光法 (IIF) 最常用最常用q 胞漿型胞漿型 c-ANCA q 核周型核周型 p-ANCA 排除排除ANA的能的能夠夠q 不典型不典型 a-ANCAq酶聯(lián)免疫吸附法酶聯(lián)免疫吸附法 (ELISA)細(xì)胞質(zhì)呈彌漫性顆細(xì)胞質(zhì)呈彌漫性顆粒樣染色不均勻粒樣染色不均勻環(huán)繞細(xì)胞核周圍的細(xì)環(huán)繞細(xì)胞核周圍的細(xì)胞質(zhì)亮染胞質(zhì)亮染 直接運用直接運用IIF法判別法判別ANCA時，時，p-ANC

3、A和和ANA很難區(qū)分，兩者并存時很難區(qū)分，兩者并存時又可相互掩蓋，在又可相互掩蓋，在ANA滴度較高時那滴度較高時那么鑒別更加困難，容易呵斥假陽性或么鑒別更加困難，容易呵斥假陽性或假陰性。假陰性。 以乙醇固定的中性粒細(xì)胞為基質(zhì)有時難以區(qū)分pANCA與抗核抗體，借助靈長類肝臟冰凍切片可以將二者相區(qū)別：假設(shè)抗核抗體陽性那么一切肝細(xì)胞核出現(xiàn)熒光，而pANCA以及cANCA)陽性，僅在肝血竇的中性粒細(xì)胞出現(xiàn)熒光。特異性靶抗原特異性靶抗原nc-ANCA 絲氨酸蛋白酶絲氨酸蛋白酶3 PR3np-ANCA 髓過氧化物酶髓過氧化物酶MPOn 彈性蛋白酶彈性蛋白酶HEL)n 組織蛋白酶組織蛋白酶GCGn 溶菌酶溶

4、菌酶LYn 乳鐵蛋白乳鐵蛋白LFn 通透性殺菌蛋白通透性殺菌蛋白BPIn PR3nPR3PR3是中性絲氨酸蛋白酶家族中的一是中性絲氨酸蛋白酶家族中的一員員, ,是由是由228228個氨基酸組成的分子量為個氨基酸組成的分子量為27KD27KD的蛋白酶。的蛋白酶。nPR3PR3可降解、消化血管壁成分如彈力可降解、消化血管壁成分如彈力蛋白及其它細(xì)胞外基質(zhì)。蛋白及其它細(xì)胞外基質(zhì)。 MPOnMPOMPO是中性粒細(xì)胞內(nèi)含量最為豐富的蛋是中性粒細(xì)胞內(nèi)含量最為豐富的蛋白質(zhì)白質(zhì), ,其分子量為其分子量為133133至至155KD,155KD,由兩條由兩條重鏈和兩條輕鏈組成。重鏈和兩條輕鏈組成。nMPOMPO在中

5、性粒細(xì)胞的氧爆炸或產(chǎn)生超氧在中性粒細(xì)胞的氧爆炸或產(chǎn)生超氧陰離子過程中起重要的催化作用。陰離子過程中起重要的催化作用。 ANCA的致病作用的致病作用中性粒細(xì)胞被攻擊中性粒細(xì)胞被攻擊TNF,IL-1等等靶抗原轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜外表靶抗原轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜外表附著于血管內(nèi)皮細(xì)胞外表附著于血管內(nèi)皮細(xì)胞外表ANCA與之結(jié)合與之結(jié)合中性粒細(xì)胞脫顆粒、中性粒細(xì)胞脫顆粒、出現(xiàn)反響性氧分子、出現(xiàn)反響性氧分子、釋放蛋白溶解酶釋放蛋白溶解酶部分血管損傷，小血管炎癥部分血管損傷，小血管炎癥ANCA的臨床意義的臨床意義 ANCA相關(guān)小血管相關(guān)小血管炎炎n顯微鏡下多血管炎顯微鏡下多血管炎MPAn 變應(yīng)性肉芽腫血管炎變應(yīng)性肉芽腫血管炎

6、CSSn 壞死性新月體腎炎壞死性新月體腎炎NCGN n MPA腎臟局限腎臟局限型型nWegener肉芽腫肉芽腫WG ANCA不僅與原發(fā)性小血管炎相關(guān),也可見于許多其它炎癥性疾病,例如炎癥性腸病,包括潰瘍性結(jié)腸炎和克隆氏病;本身免疫性肝膽疾病,如原發(fā)性硬化性膽管炎;類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎;和某些肺部非感染性炎癥性疾病,如囊性纖維化、肺間質(zhì)纖維化等。但上述ANCA相關(guān)的疾病并不識別PR3和MPO,其特異性ANCA靶抗原為其它胞漿成分。與與ANCA抗體譜相關(guān)的疾病抗體譜相關(guān)的疾病疾病IIF熒光模型特異性靶抗原WGcANCA,pANCA(少見）PR3(85%)MPO(10%)MPAcANCA,pANCAPR3

7、(45%)MPO(45%)NCGNpANCA,cANCA (少見）PR3(25%)MPO(65%)CSSpANCA,cANCA (少見）PR3(10%)MPO(60%)SLEpANCALF,HEL, MPO(少見）RApANCA,aANCALF, MPO(少見）UCpANCA,aANCALF,其他PBCpANCA,aANCALF, HEL,其他感染感染pANCA,aANCAPR3, MPO,BPI,其他c-ANCA在診斷活動性在診斷活動性WG時的敏感性時的敏感性為為81%90%,特異性為特異性為97%,多數(shù)多數(shù)WG患患者的者的ANCA特異性靶抗原為特異性靶抗原為PR3;多數(shù)多數(shù)MPA患者為患者為p-ANCA，靶抗原為，靶抗原為MPO，抗，抗MPO抗體與抗體與p-ANCA同時陽性同時陽性診斷診斷MPA的特異性可高達(dá)的特異性可高達(dá)99%。ANCA陽性的臨床意義 單純間接免疫熒光下單純間接免疫熒光下 ANCA陽陽性，其診斷價值極為有限，故對疑性，其診斷價值極為有限，故對疑心原發(fā)性小血管炎的患者，應(yīng)進(jìn)一心原發(fā)性小血管炎的患者，應(yīng)進(jìn)一步檢測步檢測ANCA所作用的特異性抗原所作用的特異性抗原成分，尤其是成分，尤其是 PR3和和MPO。 北大第一醫(yī)院腎內(nèi)科對疑心小血管炎的5604名患者血清進(jìn)展了ANCA的檢測