藥物分析維生素類藥物的分析PPT學(xué)習(xí)教案

1、會計(jì)學(xué)1CH2OR654321987654321R=H VA醇醇 VA1R= COCH3 VA醋酸酯醋酸酯R= COC15H31 VA棕櫚酸酯棕櫚酸酯VA為油狀物為油狀物,存在于魚肝臟中存在于魚肝臟中,稱魚肝油稱魚肝油,不溶于水不溶于水. 有人工合成的有人工合成的. 第1頁/共36頁國際單位微克維生素醋酸酯；國際單位微克維生素醋酸酯；IU微克維生素醇微克維生素醇換算：換算：1g維生素醋酸酯相當(dāng)于：維生素醋酸酯相當(dāng)于：61 1029070000.344/gIUg IU1g維生素醇相當(dāng)于：維生素醇相當(dāng)于：61 1033300000.300/gIUg IU第2頁/共36頁CH2OHCH2OR6543

2、21987654321CH2VA1:VA2:(去氫去氫VA)VA3:(去水去水VA)第3頁/共36頁注意注意:在水中三氯化銻水解在水中三氯化銻水解,必須在絕對無水中進(jìn)行必須在絕對無水中進(jìn)行!2、紫外吸收光譜、紫外吸收光譜 VA的無水乙醇溶液在的無水乙醇溶液在326nm有最大吸收。有最大吸收。VA(5個(gè)共軛雙鍵個(gè)共軛雙鍵)在鹽酸中加熱在鹽酸中加熱,生成生成6個(gè)共軛雙鍵的個(gè)共軛雙鍵的去水去水VA VA在在326nm有一個(gè)吸收峰有一個(gè)吸收峰 去水去水VA在在350-390nm有三個(gè)吸收峰（有三個(gè)吸收峰（P247）第4頁/共36頁3、TLC： 確認(rèn)醇或酯，是醋酸酯或其他酸酯，確認(rèn)醇或酯，是醋酸酯或其他

3、酸酯，例：例：VA和其標(biāo)準(zhǔn)品用環(huán)己烷溶解和其標(biāo)準(zhǔn)品用環(huán)己烷溶解 展開劑：環(huán)己烷展開劑：環(huán)己烷乙醚（乙醚（80：20） 板：硅膠板：硅膠G 顯色：磷鉬酸為顯色劑顯色：磷鉬酸為顯色劑 Rf： VA 醇醇 0. VA 醋酸酯醋酸酯 VA棕櫚酸酯棕櫚酸酯 第5頁/共36頁維生素中含有稀釋用油和其它雜質(zhì)，所測得的維生素中含有稀釋用油和其它雜質(zhì)，所測得的吸光度不是維生素獨(dú)有的吸收對測定有影響吸光度不是維生素獨(dú)有的吸收對測定有影響。即在三個(gè)波長處測得吸光度，進(jìn)行校正后再計(jì)算即在三個(gè)波長處測得吸光度，進(jìn)行校正后再計(jì)算。稱為三點(diǎn)校正法。稱為三點(diǎn)校正法原理：吸光度是維生素原理：吸光度是維生素A和雜質(zhì)吸收之和，測得

4、和雜質(zhì)吸收之和，測得A值需校正。（最大吸收為值需校正。（最大吸收為328nm)紫外分光光度法三點(diǎn)校正法紫外分光光度法三點(diǎn)校正法第6頁/共36頁測定測定波長波長吸光吸光度度吸光度比值吸光度比值吸光度比吸光度比值差值差計(jì)算計(jì)算值值規(guī)定規(guī)定值值300 0.555 316 0.907 (326) 328 1.000 (329) 340 0.811 360 0.299 第7頁/共36頁方法方法:(1)分別測分別測300、316、328、340、360nm吸光度吸光度，求出各波長吸光度與求出各波長吸光度與328nm吸光度比值，吸光度比值，各比值與各比值與P249表中數(shù)據(jù)對比；表中數(shù)據(jù)對比；(2)若比值不超

5、過若比值不超過可直接用測得可直接用測得A值；值；(3)若比值超出則若比值超出則A需校正：需校正： A（校正）（校正）=3.52(2A328-A316-A340)(4)計(jì)算：計(jì)算：1%1100cmAECLA:吸光度吸光度;C:濃度濃度(g/mL);L:溶液厚度溶液厚度(cm);第8頁/共36頁求效價(jià)：每求效價(jià)：每g供試呂中所含維生素供試呂中所含維生素A的國際單位的國際單位1%1/1900cmIU gE求百分含量：求百分含量：1900%100%100A D WWL標(biāo)示量標(biāo)示量A：吸光度（校正后的吸光度）：吸光度（校正后的吸光度）D：稀釋倍數(shù)；：稀釋倍數(shù)；1900：以環(huán)已烷為溶劑時(shí)的換算因子；：以環(huán)

6、已烷為溶劑時(shí)的換算因子；L：比色池厚度；：比色池厚度；W：取樣量；：取樣量；第9頁/共36頁維生素維生素B1的分析的分析一、化學(xué)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)一、化學(xué)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)維生素維生素B1:氨基嘧啶環(huán)和噻唑環(huán)通過亞甲基連接成的氨基嘧啶環(huán)和噻唑環(huán)通過亞甲基連接成的季銨類化合物季銨類化合物. 白色結(jié)晶白色結(jié)晶,溶于水溶于水,顯酸性顯酸性.學(xué)名學(xué)名: 氯化氯化4-甲基甲基-3-（2-甲基甲基-4-氨基氨基-5-嘧啶基）嘧啶基）甲基甲基-5-（2-羥乙基）噻唑的鹽酸鹽羥乙基）噻唑的鹽酸鹽 俗名俗名:鹽酸硫胺鹽酸硫胺第10頁/共36頁二二. 鑒別試驗(yàn)鑒別試驗(yàn)1. 硫色素?zé)晒夥磻?yīng)：硫色素?zé)晒夥磻?yīng)： 維生素維生素B1在堿性

7、溶液中，與鐵氰化鉀氧化成硫色在堿性溶液中，與鐵氰化鉀氧化成硫色素，在正丁醇中顯藍(lán)色熒光素，在正丁醇中顯藍(lán)色熒光VB1專屬反應(yīng)，用于鑒別和含量測定。專屬反應(yīng)，用于鑒別和含量測定。第11頁/共36頁2、沉淀反應(yīng)、沉淀反應(yīng)： 碘化汞鉀碘化汞鉀-淡黃色沉淀淡黃色沉淀 碘碘-紅色沉淀紅色沉淀VB1 硅鎢酸硅鎢酸-白色沉淀白色沉淀 苦味酸苦味酸-扇形白色結(jié)晶扇形白色結(jié)晶 第12頁/共36頁三三. 含量測定含量測定1、非水溶液滴定法、非水溶液滴定法：（收錄）：（收錄） VB1分子中含有已成鹽的伯胺和季銨基團(tuán)，在非分子中含有已成鹽的伯胺和季銨基團(tuán)，在非水溶液中，在醋酸汞存在下，均可被高氯酸滴定。水溶液中，在醋

8、酸汞存在下，均可被高氯酸滴定。溶劑：冰醋酸溶劑：冰醋酸 / 醋酸汞醋酸汞 指示劑：喹哪定紅指示劑：喹哪定紅- 亞甲藍(lán)混合指示液亞甲藍(lán)混合指示液 滴定劑：高氯酸（滴定劑：高氯酸（0.1mol/L) 終點(diǎn)：天藍(lán)色終點(diǎn)：天藍(lán)色 摩爾比：摩爾比：VB1：高氯酸：高氯酸=1：2 VB1摩爾質(zhì)量摩爾質(zhì)量 滴定度滴定度第13頁/共36頁2、紫外、紫外UV（中國藥典）（中國藥典）VB1片：方法與片劑含量測定相同片：方法與片劑含量測定相同(246nm)VB1注射液：與液劑相同。（注射液：與液劑相同。（246nm)1%1100%100cmA D WEW標(biāo)示量1%1%100%100cmA DEV標(biāo)示量標(biāo)示量第14頁

9、/共36頁OCOHHCH2OHOOHOH123456*1、 具有內(nèi)酯結(jié)構(gòu)。具有內(nèi)酯結(jié)構(gòu)。 堿性下可水解。堿性下可水解。2、 具有烯二醇基。具有烯二醇基。 還原性，能夠被氧化成去氫還原性，能夠被氧化成去氫抗壞血酸。抗壞血酸。3、結(jié)構(gòu)與糖類相似，具有糖性質(zhì)。結(jié)構(gòu)與糖類相似，具有糖性質(zhì)。 溶于水，酸性，旋光性。溶于水，酸性，旋光性。第15頁/共36頁OO HOH OHCC H2O HHO HOO HO HCHOO HC H2O HHOO HOH OHCC H2O HHH OOO HO HCHOC H2O HH OHD(-)-異抗壞血酸L(+)-異抗壞血酸L(+)-抗壞血酸D(-)-抗壞血酸4、具有、

10、具有4種光學(xué)異構(gòu)體。其中生理活性最強(qiáng)的是種光學(xué)異構(gòu)體。其中生理活性最強(qiáng)的是L（+）-抗壞血酸抗壞血酸第16頁/共36頁OHOH OOO（黑色）AgAgNOVC32、與、與2，6-二氯靛酚（染料）反應(yīng)二氯靛酚（染料）反應(yīng) VC被還原為無色的酚亞胺被還原為無色的酚亞胺第17頁/共36頁3. 糖的性質(zhì)糖的性質(zhì) VC的結(jié)構(gòu)很象糖結(jié)構(gòu)，具有糖的性質(zhì)的結(jié)構(gòu)很象糖結(jié)構(gòu)，具有糖的性質(zhì)VC + 三氯化醋酸或鹽酸三氯化醋酸或鹽酸-水解水解-脫羧脫羧-戊糖戊糖-失水失水-糠醛糠醛-（加吡咯，加熱）（加吡咯，加熱）-藍(lán)色藍(lán)色4、紫外分光光度法（英國藥典）、紫外分光光度法（英國藥典）VC在鹽酸溶液中，在鹽酸溶液中，24

11、3nm最大吸收。最大吸收。第18頁/共36頁OCOHHCH2OHOOHOHHI2OC OHHCH2OHOOOHI2三三含量測定含量測定 1. 碘量法（收錄）碘量法（收錄）VC在醋酸條件下，被碘定量氧化。在醋酸條件下，被碘定量氧化。 加入淀粉指示劑，藍(lán)色不褪為碘過量（加入淀粉指示劑，藍(lán)色不褪為碘過量（30S內(nèi)）。內(nèi)）。由消耗碘量計(jì)算含量。由消耗碘量計(jì)算含量。第19頁/共36頁 樣品 新沸放冷的水，稀HAc 淀粉 0.1mol/L 碘 終點(diǎn)顏色：無色終點(diǎn)顏色：無色藍(lán)色藍(lán)色 碘液，碘液，1ml 8.806mg C6H8O6加入新沸放冷的水為了減少水中溶解氧的影響。加入新沸放冷的水為了減少水中溶解氧的

12、影響。酸性：使酸性：使VC在空氣中氧化速度減慢。在空氣中氧化速度減慢。VC注射液中常加有亞硫酸鹽如注射液中常加有亞硫酸鹽如NaHSO3作為抗氧劑作為抗氧劑.第20頁/共36頁OCOHHCH2OHOOHOHO HC lC lNO HOC OHHCH2OHOOOO HC lC lN HO H終點(diǎn)的顏色是溶液由無色變?yōu)榧t色。終點(diǎn)的顏色是溶液由無色變?yōu)榧t色。氧化型（紅色）氧化型（紅色）還原型（無色）還原型（無色）+2、 2,6-二氯靛酚滴定法二氯靛酚滴定法 酸性下直接用酸性下直接用2,6-二氯靛酚滴定，用滴定劑二氯靛酚滴定，用滴定劑自身的顏色變化指示終點(diǎn)，不需要另外的指示自身的顏色變化指示終點(diǎn)，不需要

13、另外的指示劑。劑。第21頁/共36頁3、高效液相色譜法、高效液相色譜法 HPLC P276 第22頁/共36頁9.4 9.4 維生素維生素D D VD VD是一類抗佝僂病維生素的總稱是一類抗佝僂病維生素的總稱, ,有片劑有片劑, ,注射注射劑劑, ,膠囊等膠囊等. .一、結(jié)構(gòu)（一、結(jié)構(gòu)（P268P268） 開環(huán)麥角甾烯醇，又稱麥角骨化酸。開環(huán)麥角甾烯醇，又稱麥角骨化酸。VD2VD2，VD3VD3 無色針狀結(jié)晶，旋光性，不溶于水。無色針狀結(jié)晶，旋光性，不溶于水。第23頁/共36頁二、鑒別試驗(yàn)二、鑒別試驗(yàn)1、顯色反應(yīng)、顯色反應(yīng) 2、維生素、維生素D2和和D3的區(qū)分的區(qū)分第24頁/共36頁三、含量測

14、定三、含量測定 高效液相色譜法，藥典收錄。高效液相色譜法，藥典收錄。第25頁/共36頁OCH3CH3CH3CH3CH3CH3CH3H3COCH3CO1458名稱：消旋名稱：消旋-生育酚醋酸酯（生育酚醋酸酯（ -異構(gòu)體生理活性異構(gòu)體生理活性最強(qiáng)）最強(qiáng)）母核：苯駢二氫吡喃衍生物，苯環(huán)上有一乙酰化的母核：苯駢二氫吡喃衍生物，苯環(huán)上有一乙酰化的酚羥基酚羥基側(cè)鏈：脂肪烷烴側(cè)鏈：脂肪烷烴性質(zhì)：不溶于水，油狀，微黃色液體。性質(zhì)：不溶于水，油狀，微黃色液體。9.5 維生素維生素E（稱為生育酚）（稱為生育酚）一、結(jié)構(gòu)：苯并二氫吡喃醇衍生物，一、結(jié)構(gòu)：苯并二氫吡喃醇衍生物，第26頁/共36頁第27頁/共36頁三、

15、雜質(zhì)檢查三、雜質(zhì)檢查檢查游離生育酚檢查游離生育酚: ChP2005: ChP2005鈰量法：用鈰量法：用Ce(SOCe(SO4 4) )2 2(0.01mol/L)(0.01mol/L)滴定，滴定， 指示劑：二苯胺指示劑：二苯胺終點(diǎn)：亮黃終點(diǎn)：亮黃灰紫灰紫 消耗消耗Ce(SOCe(SO4 4) )2 2液不得超過。液不得超過。第28頁/共36頁四、含量測定四、含量測定2、氣相色譜法：、氣相色譜法：Chp20053、高效液相色譜法、高效液相色譜法 日本藥局方（日本藥局方（JP13）第29頁/共36頁ml25ml2ml100g1279. 0第30頁/共36頁%1cm1E首先要求樣品的首先要求樣品的 。第31頁/共36頁655. 0)534. 0584. 0652. 02(52. 3A328（校正）%5 .0100652.0652.0655.0由此可知，應(yīng)該用測得的由此可知，應(yīng)該用測得的328nm處的吸收度計(jì)算。處的吸收度計(jì)算。然后計(jì)算校正吸收度與未校正吸收度相差的百分?jǐn)?shù)然后計(jì)算校正吸收度與未校正吸收度相差的百分?jǐn)?shù)由結(jié)果知，需計(jì)算校正吸收度。由結(jié)果知，需計(jì)算校正吸收度。第32頁/共36頁72.631010232. 0652. 0E%1cm1)g/IU(121