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1、會(huì)計(jì)學(xué)1二章細(xì)胞破碎與固液分離技術(shù)二章細(xì)胞破碎與固液分離技術(shù)第1頁/共59頁第2頁/共59頁第3頁/共59頁第4頁/共59頁第5頁/共59頁第6頁/共59頁機(jī)械法化學(xué)及生物化學(xué)法組織搗碎機(jī)、研缽、細(xì)菌磨高壓勻漿、超聲破碎、撞擊法固體剪切作用液體剪切作用 自溶法 酶溶法 化學(xué)滲透法物理法反復(fù)凍融法、急熱驟冷法、滲透破碎法第7頁/共59頁第8頁/共59頁方法技術(shù)原理效果成本舉例機(jī)械法勻漿法(片型)細(xì)胞被攪拌器劈碎 適中適中動(dòng)物組織及動(dòng)物細(xì)胞研磨法細(xì)胞被研磨物磨碎 適中便宜超聲波法用超聲波的空穴作用使細(xì)胞破碎適中昂貴細(xì)胞懸浮液小規(guī)模處理勻漿法(孔型)須使細(xì)胞通過的小孔,使細(xì)胞受到剪切力而破碎劇烈適中
2、細(xì)胞懸浮液大規(guī)模處理珠磨破碎法細(xì)胞被玻璃珠或鐵珠搗碎劇烈便宜細(xì)胞懸浮液和植物細(xì)胞的大規(guī)模處理第9頁/共59頁第10頁/共59頁第11頁/共59頁第12頁/共59頁第13頁/共59頁第14頁/共59頁第15頁/共59頁第16頁/共59頁第17頁/共59頁 動(dòng)、植物組織、體液等 胞外產(chǎn)物 提取發(fā)酵液 預(yù)處理 c分離 c破碎 碎片分離 初步純化 精制 制成品培養(yǎng)液 加 熱 沉 淀 勻 化 離 心 沉 淀 分子篩 無菌過濾酶反應(yīng) 調(diào) pH 離 心 超 聲 萃 取 吸 附 離 子 超 濾 絮 凝 過 濾 胞 溶 過 濾 萃 取 親 和 凍 干 錯(cuò)流過濾 研 磨 錯(cuò)流過濾 超 濾 吸 附 噴 干 憎 水
3、結(jié) 晶 電 泳第18頁/共59頁第19頁/共59頁第20頁/共59頁第21頁/共59頁第22頁/共59頁第23頁/共59頁第24頁/共59頁第25頁/共59頁第26頁/共59頁第27頁/共59頁第28頁/共59頁第29頁/共59頁第30頁/共59頁第31頁/共59頁過濾媒介 過濾器類型其它要求第32頁/共59頁第33頁/共59頁與哪些因素有關(guān)?第34頁/共59頁第35頁/共59頁固定角度水平第36頁/共59頁第37頁/共59頁離心加速度: Stocks Force(粘滯力):離心沉降速度:分離因子定義Fr:離心力/重力加速度(g)的比值:意義:衡量離心設(shè)備的離心程度的重要技術(shù)參數(shù),用于離心機(jī)的
4、分類第38頁/共59頁 從Stokes公式 可看出沉降速度與影響因素的關(guān)系: (1) 密度差(S- l)越大,離心沉降速度越快; (2) 在密度差(S- l)存在下, 固體顆粒尺寸越大, 越容易離心; (3) 液體黏度l越大,越不容易離心。 (4) 離心力(r2)的大小對(duì)固液分離很有影響,細(xì)胞懸浮液或細(xì)胞勻漿中的顆粒尺寸都不大,與液相的密度差也不大,而且液體黏度常常較大,所以要通過增大離心力來提高分離效率。 由于離心機(jī)半徑 (r) 過大會(huì)造成不平衡和振動(dòng),一般高速離心機(jī)都采用增加轉(zhuǎn)速來增大分離能力。第39頁/共59頁第40頁/共59頁RCF=1.118*10-5R(rpm)2第41頁/共59頁第42頁/共59頁第43頁/共59頁分離形式平衡允許誤差應(yīng)用第44頁/共59頁第45頁/共59頁第46頁/共59頁第47頁/共59頁第48頁/共59頁第49頁/共59頁第50頁/共59頁第51頁/共59頁第52頁/共59頁第53頁/共59頁第54頁/共59頁第55頁/共59頁lnm=lnme+lnmh+lnml第56頁/共59頁類型類型形成上相的聚合物形成上相的聚合物形成下相的聚合物形成下相的聚合物非離子型聚合物/ 非離子型聚合物聚乙二醇葡聚糖聚乙烯醇聚丙二醇聚乙二醇聚乙烯吡咯烷酮高分子電解質(zhì)/非離子型聚合物羧甲基纖維素鈉聚乙二醇高分子電解質(zhì)/高分子電解質(zhì)葡聚糖硫
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