2022年分子生物學(xué)考場絕對壓軸題

1、精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載學(xué)習(xí)必備歡迎下載20xx年分子生物學(xué)考場肯定壓軸題1. 人類基因組方案（human genome project、 hgp ）的精髓？22. 如何應(yīng)用人類基因組基礎(chǔ)討論幫助臨床醫(yī)學(xué)？23. 什么為基因表達？試述基因表達的特點及其調(diào)控對生物體的重要性？24. 真核生物中,基因表達受不同水平的調(diào)控,請列舉三種；25. 為什么說轉(zhuǎn)錄的調(diào)控為基因表達調(diào)控的中心環(huán)節(jié)？36. 舉例說明 dna甲基化與腫瘤的關(guān)系37. 如何動物建模來評判促創(chuàng)傷愈合的新藥作用成效？38. 對于新型促愈合藥物可能的作用機制的討論思路？39. 試述外源基因在原核體系中的表達需要具備的條件,及影響

2、外源基因表達的因素；.310. 蛋白質(zhì)的分別純化技術(shù)依據(jù)蛋白質(zhì)的性質(zhì)分為哪幾大類,請例舉其中一類,談?wù)勊脑砑皯?yīng)用；311. 以 2gm csf為例,寫出獲得該基因工程重組蛋白純品的流程； 312. 干細胞應(yīng)具備哪些生物學(xué)特點？413. 何為干細胞不對稱分裂？414. 什么為細胞分化？為什么說細胞分化為基因挑選性表達的結(jié)果？415. 何為細胞全能性？如何證明分化成熟細胞的全能性？416. 什么為表觀遺傳學(xué)？它主要討論什么內(nèi)容？517. 什么為甲基化,在調(diào)控基因表達過程中起什么作用？518. 什么為基因印記？它的主要特點為什么？519. 請表達肝細胞對胰高血糖素或腎上腺素的反應(yīng)過程；520.

3、細胞膜在信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的過程中起到怎樣的作用？621. 簡述 crispr/cas-9 的基本原理及優(yōu)點（與傳統(tǒng)的基于同源重組的胚胎干細胞基因敲除相比較）；622 .為何在挑選靶基因敲除的胚胎干細胞時仍需經(jīng)受陰性挑選過程？簡述更昔洛韋（ganciclovir）在胚胎干細胞陰性挑選中的作用機制；623. 基本概念sirna mirna； dicer protein； risc；ptgs624. 請說明 rnai 的作用機制；725. 請分析說明su guo 的試驗結(jié)果；726. 什么為細胞凋亡（cell apoptosis）？727. 細胞凋亡有哪兩條主要的途徑？728. bcl2 家族的分類和結(jié)構(gòu)特

4、點？729. p53 基因在細胞dna損耗中的作用？830. 轉(zhuǎn)錄組及蛋白組的概念分別為什么？其討論內(nèi)容分別包括哪些方面？831. 如何利用轉(zhuǎn)錄組學(xué)及蛋白組學(xué)的方法挑選相關(guān)基因？（寫出主要的檢測指標(biāo)及其試驗方法名稱）832. 線粒體遺傳有哪些特點？833. 討論動物毒素對治療人類疾病和藥物開發(fā)有哪些啟示？可詳細舉兩個例子進行闡述. 834. 討論動物毒素的方法有哪些,所面臨的問題有哪些？935. 如何看待基因治療的安全性及社會倫理問題；936. 疾病討論的相關(guān)基因功能討論的方法及策略937. 結(jié)合你的專業(yè),論述線粒體與醫(yī)學(xué)的關(guān)系；9精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載學(xué)習(xí)必備歡迎下載

5、分子生物學(xué)1.人類基因組方案（ human genome project、 hgp）的精髓？人類基因組方案的精髓 為人類基因組圖譜,包括遺傳圖譜. 物理圖譜. 序列圖譜. 轉(zhuǎn)錄圖譜；遺傳圖譜： 又稱連鎖圖譜,為以具有遺傳多態(tài)性的遺傳標(biāo)記為“路標(biāo)”,以遺傳學(xué)距離為圖距的基因組圖；遺傳圖譜的建立為基因識別和完成基因定位制造了條件；物理圖譜： 指有關(guān)構(gòu)成基因組的全部基因的排列和間距的信息；繪制物理圖譜的目的為把有關(guān)基因的遺傳信息及其在每條染色體上的相對位置線性而系統(tǒng)地排列出來；序列圖譜： 指測定每條染色體的dna序列, 通過 dna序列可以直接推出基因結(jié)構(gòu).定位已知基因.討論基因起源；轉(zhuǎn)錄圖譜： 指

6、在識別基因組所包含的蛋白質(zhì)編碼序列的基礎(chǔ)上繪制的結(jié)合有關(guān)基因序列.位置及表達模式等信息的圖譜；通過這張圖可以明白某一基因在不同時間不同組織.不同水平的表達； 也可以明白一種組織中不同時間.不同基因中不同水平的表達,仍可以明白某一特定時間.不同組織中的不同基因不同水平的表達； 2.如何應(yīng)用人類基因組基礎(chǔ)討論幫助臨床醫(yī)學(xué)？人類疾病相關(guān)的基因為人類基因組中結(jié)構(gòu)和功能完整性至關(guān)重要的信息；人類基因組基礎(chǔ)研究主要通過 基因診斷. 基因治療和基于基因組學(xué)問的治療.基于基因組信息的疾病預(yù)防.疾病易感基因的識別.風(fēng)險人群生活方式.環(huán)境因子的干預(yù)等方式幫助臨床醫(yī)學(xué)；詳細的方式如下：1）基因工程藥物：分泌蛋白（多

7、肽激素,生長因子,趨化因子,凝血和抗凝血因子等）及其受體；2）診斷和討論試劑產(chǎn)業(yè)：基因和抗體試劑盒.診斷和討論用生物芯片.疾病和篩藥模型；3）對細胞.胚胎.組織工程的推動：胚胎和成年期干細胞.克隆技術(shù).器官再造；4）制藥工業(yè)：挑選藥物的靶點：與組合化學(xué)和自然化合物分別技術(shù)結(jié)合,建立高通量的受體.酶結(jié)合試驗以學(xué)問為基礎(chǔ)的藥物設(shè)計：基因蛋白產(chǎn)物的高級結(jié)構(gòu)分 析.猜測.模擬藥物作用“口袋”；個體化的藥物治療：藥物基因組學(xué)；5）基礎(chǔ)生物學(xué)：基因功能的定位；6）交叉學(xué)科的興起；如：基因組學(xué)和生物信息學(xué)等；3.什么為基因表達？試述基因表達的特點及其調(diào)控對生物體的重要性？1）基因表達從 dna到蛋白質(zhì)的過程

8、（為指原核生物和真核生物基因組中特定的結(jié)構(gòu)基因 所攜帶的遺傳信息,經(jīng)過轉(zhuǎn)錄. 翻譯等一系列過程,合成具有特定的生物學(xué)功能的各種蛋白質(zhì),表現(xiàn)出特定的生物學(xué)效應(yīng)的全過程）但并非全部的基因表達都過程都產(chǎn)生蛋白質(zhì),rrnatrna 編碼基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生rna的過程也屬于基因表達；2）特點 組織特異性不同組織細胞中不僅表達的基因數(shù)量不同,而且基因表達的強度和種類也不相同； 階段特異性細胞分化發(fā)育的不同時期,基因表達的情形不相同；與環(huán)境相適應(yīng)當(dāng)四周的養(yǎng)分.溫度.濕度.酸度及各條件變化時,生物體就要轉(zhuǎn)變自身的基因 表達狀況, 以調(diào)整體內(nèi)執(zhí)行和相應(yīng)功能的蛋白質(zhì)的種類.數(shù)量, 從而轉(zhuǎn)變自身的代謝活動度 以來適應(yīng)環(huán)境

9、；（3）對生物體的重要性1.適應(yīng)環(huán)境.維護生長和繁衍；2.維護個體發(fā)育和分化；4.真核生物中,基因表達受不同水平的調(diào)控,請列舉三種；a. 轉(zhuǎn)錄前調(diào)控基因丟失； （原生動物.線蟲.昆蟲和甲殼類動物）轉(zhuǎn)錄前調(diào)控,非洲蛙蟾的卵母細胞中原有的 rrna 基因約 500bp,卵裂期和胚胎期需要大量的 rrna,基因會大量復(fù)制 rrna、 使拷貝數(shù)達到 200 萬倍,擴增約 4000 倍；基因擴增（ gene amplification ）；基因重排（ gene rearrangement ）；dna的甲基化（ dnamethylation ）組蛋白修飾（ histone modification ） /

10、 及組蛋白的修飾；b. 轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控轉(zhuǎn)錄調(diào)控為通過各種調(diào)控元件相互作用來實現(xiàn)的,調(diào)控元件主要包括順式作用元件和反式作用因子；c.轉(zhuǎn)錄后調(diào)控hnrna的挑選性加工運輸；mrna前體的挑選性剪接；rna編輯； rnai；精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載學(xué)習(xí)必備歡迎下載d.翻譯調(diào)控 翻譯因子的磷酸化調(diào)控；mrna穩(wěn)固性調(diào)控；e. 翻譯后調(diào)控 - 蛋白質(zhì)修飾；5.為什么說轉(zhuǎn)錄的調(diào)控為基因表達調(diào)控的中心環(huán)節(jié)？答基因調(diào)控主要發(fā)生在轉(zhuǎn)錄階段,特別起始階段, 由于這些為表達的起始階段,可以防止那些不需要的轉(zhuǎn)錄所造成的資源鋪張；轉(zhuǎn)錄調(diào)控為通過各種調(diào)控元件相互作用來實現(xiàn)的,調(diào)控元件主要包括順式作用

11、元件和反式作用因子；而且轉(zhuǎn)錄起始為基因表達的基本調(diào)控點,涉及 dna序列調(diào)控蛋白及這些因素對rna聚合酶活性的影響, 順式作用元件和反式作用因子之 間相互作用, 均在轉(zhuǎn)錄起始來表達,而轉(zhuǎn)錄后的加工修飾為rna以及翻譯及翻譯后的蛋白質(zhì) 修飾都為以轉(zhuǎn)錄水平為基礎(chǔ)的；6.舉例說明 dna甲基化與腫瘤的關(guān)系答 dna甲基化為基因表達修飾方式之一,與基因表達調(diào)控親密相關(guān),它能關(guān)閉一些基因的活性,而去甲基化能誘導(dǎo)基因的重新活化及表達；dna甲基化修飾通過轉(zhuǎn)變基因的表達,參與了細胞的生長.發(fā)育過程及x染色體失活等的調(diào)控；dna甲基化能引起染色質(zhì)結(jié)構(gòu).dna構(gòu)象. dna的穩(wěn)固性. dna與蛋白質(zhì)相互作用方面

12、的轉(zhuǎn)變,從而掌握基因表達；加方案的狀態(tài)的轉(zhuǎn)變?yōu)橐鹉[瘤的一個重要因素；這種變化包括（1）整體甲基化水平降低；（ 2）正常非甲基化cpg島的高甲基化；（3）維護甲基化模式酶的調(diào)劑失控；從而導(dǎo)致基因組的不穩(wěn)固（如染色體的不穩(wěn)固,可移動遺傳因子的激活,原癌基因的表達）和抑癌基因的不表達；列如對家族性和散發(fā)型乳腺癌和結(jié)腸癌的討論中發(fā)覺,家族性腫瘤中序列無突變的10 個抑癌基因啟動子區(qū)域甲基化常見,但在突變的抑癌基因中沒有發(fā)覺甲基化的現(xiàn)象；由此可見 dna甲基化模式的轉(zhuǎn)變和腫瘤的發(fā)生.進展親密相關(guān)；7.如何動物建模來評判促創(chuàng)傷愈合的新藥作用成效？8.對于新型促愈合藥物可能的作用機制的討論思路？9.試述外

13、源基因在原核體系中的表達需要具備的條件,及影響外源基因表達的因素；外源基因表達所要具備的條件 （1）編碼區(qū)不含插入序列（ mrna-cdn）a ;2位于啟動子下游,方向一樣,原有的讀碼框不變；（3）含起始密碼子（ aug）、 終止密碼（ taa）;4轉(zhuǎn)錄的必需有sd序列,調(diào)劑sd序列與第一個aug間的距離；（ 5）挑選系統(tǒng)編號的簡并密碼；（6）增強產(chǎn)物的穩(wěn)固（如融合蛋白,信號肽）；影響因素 （ 1）啟動子的強弱（主要因素）；（2）基因的劑量；（3） rna轉(zhuǎn)錄效率（ sd互補, augsd距離及序列,aug前后核苷酸序列的相宜性）；（4）密碼子；（ 5）表達產(chǎn)物的大小；（ 6）產(chǎn)物的穩(wěn)固性；1

14、0.蛋白質(zhì)的分別純化技術(shù)依據(jù)蛋白質(zhì)的性質(zhì)分為哪幾大類,請例舉其中一類, 談?wù)勊脑砑皯?yīng)用；答蛋白質(zhì)的分別純化可分為依據(jù)溶解度差別,如硫酸銨分別法； 依據(jù)分子大小不同透析.超過濾.離心法.凝膠過濾層析.凝膠電泳；依據(jù)蛋白質(zhì)分子帶點性質(zhì)不同電泳.離子交換層析；依據(jù)蛋白質(zhì)吸附性質(zhì)不同吸附柱層析.吸附薄層層析；利用蛋白質(zhì)的特異性配體親和層析；舉例電泳；其原理在肯定ph值下,細胞表面帶有凈的正 或負電荷, 能在外加電場的作用下發(fā)生泳動,向正極或負極移動；各種細胞或處于不同生理狀態(tài)的同種蛋白質(zhì)所帶電荷的電量不同,故在肯定的電場中的泳動速度也不同；（影響顆粒電泳遷移率的因素緩沖液,電場,支持介質(zhì)）類型sd

15、s聚丙烯酰胺凝膠電泳.等電點聚 焦電泳.毛細管電泳；應(yīng)用電泳的類型很多,應(yīng)用范疇也很廣,如sds-page,常用于蛋白質(zhì)分子量的測定目前,雙向凝膠電泳已成為蛋白質(zhì)組學(xué)討論的重要技術(shù)；11.以 2gmcsf為例,寫出獲得該基因工程重組蛋白純品的流程；答：1.gm csf全基因及可溶性sgmcsf基因 pcr擴增；2.含腸激酶位點的pth10hisa ·sgm精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載學(xué)習(xí)必備歡迎下載csf表達載體的構(gòu)建 （純化后的gmcsf,sgm csf及質(zhì)檢） ；3.誘導(dǎo)表達pth10hisa ·sgmcsf在大腸桿菌bl21 中誘導(dǎo)表達；4. sgm

16、 csf融合蛋白的制備<1 度工程菌的培育2 度超聲破壞菌體； 5.sgm csf融合蛋白的純化<1 度融合表達載體pthhisa在硫氧仍蛋白融合段有組氨酸標(biāo)簽,用m2+固相化的chelatingsepharosefast flow填材料進行親和,層析 2 度將可溶性表達產(chǎn)物（超聲波, 噬菌體的離心上清）與親和柱結(jié)合,用2 信柱床體積以上的 a 液過柱至基線平穩(wěn),用b液（ a 液加入朱唑至濃度為50mmol/l 梯度習(xí)脫5 10 個柱體體積,用akataexplore進行檢測,收集各洗脫液）；6.sgmcsf融合蛋白的腸激酶切割及純化； 7.sgmcsf融合蛋白及非融合蛋白的wes

17、tern blot檢測；12.干細胞應(yīng)具備哪些生物學(xué)特點？答: 干細胞為人體最原始的細胞,具有很強的再生才能,在干細胞因子和多種白細胞介素的聯(lián)合作用下, 可誘導(dǎo)分化出各種類型的細胞；干細胞為自我更新才能,高度增殖和多向分化潛能的細胞；a：自我更新才能：干細胞可不對稱分裂為1 個子代干細胞和1 個功能細胞,從而使組織和器官保持生長和衰退的動態(tài)平穩(wěn),但干細胞的分裂實際為不對稱的,干細胞在其發(fā)育期間也能夠?qū)ΨQ性地分裂以擴增它們的數(shù)量； b：高度增殖才能：因干細胞數(shù)量不多,所以其高度增殖的生物學(xué)特性有其重要意義：體內(nèi)：如造血干細胞通過高度擴增,可補充由于細胞正常衰老死亡而丟失的血細胞；體外： 體外擴增

18、干細胞為干細胞討論和應(yīng)用的前提和關(guān)鍵；因此,高度擴增的生物學(xué)特點不但對干細胞的討論和應(yīng)用有著重要作用,而且對機體正常功能的維護也起著重要作用；c.多功能性或全能性一分化干細胞具有分化為多種細胞類型的潛能,但不同干細胞的分化潛能有所不同；胚胎干細胞：全能性神經(jīng)干細胞：多功能性；13.何為干細胞不對稱分裂？答：干細胞不對稱分裂為1 個子代干細胞和1 個功能細胞, 從而使組織和器官保持生長和衰退的動態(tài)平穩(wěn)；例如：皮膚更新,干細胞分裂后,其中一個成為干細胞,另一個就分化為上皮細胞或基底細胞等等；14.什么為細胞分化？為什么說細胞分化為基因挑選性表達的結(jié)果？答：（ 1）細胞分化（ cell differ

19、entiation）：指個體發(fā)育過程中,細胞后代之間在形狀結(jié)構(gòu).生化組成和功能上向?qū)Ｒ恍院吞禺愋苑较蜻M展,逐步產(chǎn)生穩(wěn)固性差異的過程；（2） 緣由 : 細胞分化的主要特點為新的.特異性蛋白質(zhì)的合成,隨后細胞在生化.結(jié)構(gòu).功能上發(fā)生變化, 細胞表型顯現(xiàn)差異,從分子層次上看,這為由于基因挑選性表達的結(jié)果,即浪費基因表達使細胞合成特異蛋白；由于基因的挑選性表達而合成分化細胞的某些特異性蛋白,執(zhí)行特別功能, 因此細胞分化的本質(zhì)就為基因表達調(diào)控的問題；在細胞內(nèi)與分化有關(guān)的基因 按其功能分為兩類：一類為管家基因,表達的產(chǎn)物用以維護細胞自身的正常的新陳代謝；另一類為浪費基因, 表達形成細胞功能的多樣性；細胞分

20、化正為浪費基因的挑選性表達的結(jié)果； 因此細胞分化的實質(zhì)就為基因的挑選性表達的結(jié)果；15.何為細胞全能性？如何證明分化成熟細胞的全能性？答: （ 1）細胞全能性（totipotency）：單個細胞在肯定條件下可分化發(fā)育為完整個體的分 化潛能稱為全能性；（2）證明分化成熟體細胞的全能性：由于dna的半保留復(fù)制和細胞的有絲分裂, 從而使生物體的任何體細胞都具有了與原初的受精卵（有性生殖過程中）或起始細胞（無性生殖過程） 相同的一整套基因；依舊受精卵或起始細胞可以發(fā)育成為一個新整體, 那么受精卵或起始細胞復(fù)制而來的與受精卵或起始細胞具有相同的一整套基因的體細胞依然應(yīng)當(dāng)能發(fā)育成為一個完整的個體,即分化成

21、熟的體細胞也為全能的；體細胞的核移植到受精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載學(xué)習(xí)必備歡迎下載精卵的胞質(zhì)中時, 這個具有新核的細胞可以發(fā)育為一個新的個體；這說明分化成熟的體細胞核仍舊保持完整的,在肯定條件下的細胞全能性；如克隆羊； 16.什么為表觀遺傳學(xué)？它主要討論什么內(nèi)容？答（ 1）基因的dna序列不發(fā)上轉(zhuǎn)變的情形下,基因的表達水平與功能發(fā)生轉(zhuǎn)變,并產(chǎn)生可遺傳的表型；不依靠于dna序列的遺傳現(xiàn)象；（2） dna甲基化修飾基因挑選性轉(zhuǎn)錄 表達的調(diào)控, 主要表現(xiàn)為基因組dna上的胞嘧啶第5 位碳原子和甲基間的共價結(jié)合,胞嘧啶由此被修飾為5- 甲基胞嘧啶； 非編碼rna的調(diào)控作用 mirn

22、a調(diào)劑大約30%的人類基因表 達； mirna可以通過靶向dna或組蛋白修飾酶等表觀遺傳復(fù)合物而實現(xiàn)調(diào)劑作用；sirna 通過誘導(dǎo)染色質(zhì)的形成來實現(xiàn)對基因表達的調(diào)控；pirna 主要表現(xiàn)為在配子形成過程中對轉(zhuǎn)座 子元件的緘默作用,為生殖細胞發(fā)育所必需的；組蛋白修飾構(gòu)成核小體的組蛋白,氨基端可以被多種酶進行各種修飾,如磷酸化,乙?；?甲基化和泛素化,組蛋白的這類修飾可 以轉(zhuǎn)變 dna-組蛋白的相互作用,為染色質(zhì)的構(gòu)型發(fā)生轉(zhuǎn)變,稱為染色質(zhì)構(gòu)型重塑；17.什么為甲基化,在調(diào)控基因表達過程中起什么作用？答：（ 1）從活性甲基化合物（如s-腺苷基甲硫氨酸）上催化其甲基轉(zhuǎn)移到其他化合物的過程；可形成各種甲

23、基化合物,或者為對某些蛋白質(zhì)或核酸等進行化學(xué)修飾形成甲基化產(chǎn)物；其中 dna甲基化為指在甲基化酶的作用下將一個甲基添加在dna分子的堿基上, dna甲基化修飾打算基因表達的模式,即打算從親代到子代可遺傳的基因表達狀態(tài)；（2）甲基化為蛋白質(zhì)和核酸的一種重要的修飾,調(diào)劑基因的表達和關(guān)閉,與癌癥. 衰老. 老年癡呆等很多疾病親密相關(guān), 為表觀遺傳學(xué)的重要討論內(nèi)容之一；最常見的甲基化修飾有dna甲基化和組蛋白甲基化； dna甲基化能關(guān)閉某些基因的活性,去甲基化就又到了基因的重新活化和表達；dna甲基化能引起染色質(zhì)結(jié)構(gòu).dna構(gòu)象. dna穩(wěn)固性及dna與蛋白質(zhì)相互作用方式的轉(zhuǎn)變, 從而掌握基因表達；討

24、論證明,cpg二核苷酸中胞嘧啶的甲基化導(dǎo)致了人體1/3 以上由于堿基轉(zhuǎn)換而引起的遺傳病；dna甲基化主要形成5- 甲基胞嘧啶（ 5-mc）和少量的n6- 甲基腺嘌呤n6-ma 及 7- 甲基鳥嘌呤（7-mg）；在真核生物中,5- 甲基胞嘧啶主要顯現(xiàn)在cpg序列.cpxpg.cca/tgg和 gatc中； dna甲基化為指生物體在dna甲基轉(zhuǎn)移酶（ dna methyltransferase, dmt）的催化下,以s- 腺苷甲硫氨酸（sam）為甲基供體,將甲基轉(zhuǎn)移 到特定的堿基上的過程；dna甲基化可以發(fā)生在腺嘌呤的n-6 位.胞嘧啶的n-4 位.鳥嘌呤的 n-7 位或胞嘧啶的c-5 位等；但在

25、哺乳動物中dna甲基化主要發(fā)生在5 -cpg-3的 c 上生成 5- 甲基胞嘧啶（ 5mc）；18.什么為基因印記？它的主要特點為什么？答：基因印跡, 為表觀遺傳調(diào)劑的一種形式,為指兩個親本等位基因的差異性甲基化造成了一個親本等位基因的緘默,另一個親本等位基因保持單等位基因活性； 2. 特點； a 每一個印記基因簇由一個印記掌握元件（ imprint control element , ice）所掌握； b 也稱為印記掌握區(qū)域（ imprint control region, icr）或者印記中心（ imprint centre ,ic ） c 絕大多數(shù)都有 cpgislands ,能夠發(fā)生

26、dna 甲基化； d 在 cpgislands ,內(nèi)或鄰近常有成簇的.有向的重復(fù)片段 ；19.請表達肝細胞對胰高血糖素或腎上腺素的反應(yīng)過程；簡潔答案： 腎上腺素能受體激活與 gi 偶聯(lián) ac活性下降 camp活性下降平滑肌舒張；胰高血糖素能受體激活 gs.增加 ac活性 camp pka（增加肝糖原分解）表達答案： 腎上腺素和胰高血糖素中的任何一種激素同肝細胞膜上相應(yīng)受體結(jié)合后激化g 蛋白, g蛋白化 a 亞基, a 亞基激化腺苷酸環(huán)化酶ac , ac催化小分子信使camp的產(chǎn)生, camp結(jié)合 pka,通過變構(gòu)調(diào)劑作用激化pka,pka通過磷酸化作用激化或抑制各種效應(yīng)蛋白, 連續(xù)傳遞信號,

27、pka激活磷酸化酶b 激酶,促進糖原的分解代謝,糖原分解成1- 磷酸葡萄糖,精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載學(xué)習(xí)必備歡迎下載然后進一步分解為6- 磷酸葡萄糖隨后進入血液；激活的 pka計入細胞核使camp反應(yīng)元件結(jié) 合蛋白 creb）磷酸化；磷酸化的creb結(jié)合于 camp反應(yīng)元件（ cre）,并與 creb結(jié)合蛋白（cbp）結(jié)合；與creb結(jié)合后的cbp作用于通用轉(zhuǎn)錄因子（包括tfiib ） 、 促進 cfiib 等通用轉(zhuǎn)錄因子與啟動子結(jié)合激活基因的表達； 20.細胞膜在信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的過程中起到怎樣的作用？答案 1： 屏障作用,位于細胞膜的某些能特異性地與外源性物質(zhì)結(jié)婚,并誘發(fā)細胞

28、產(chǎn)生某些特定的生理生化反應(yīng),并最終產(chǎn)生生物學(xué)效應(yīng)的物質(zhì)；答案 2：每個細胞在機體內(nèi)并非孤立地存在,而為不斷受到其生活環(huán)境中各種理化因素的影響；各種信號,如化學(xué).機械.電刺激信號,一般第一作用于細胞膜,膜上某些特異性蛋白質(zhì)能挑選性地接受某種特定信號,引起細胞膜兩側(cè)電位變化或細胞內(nèi)發(fā)生某些功能轉(zhuǎn)變；細胞膜的這種作用稱為跨膜信號轉(zhuǎn)導(dǎo)功能；細胞通過位于胞膜或胞內(nèi)的受體感受胞外信息分子的刺激, 經(jīng)復(fù)雜的細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)的轉(zhuǎn)換而影響其生物學(xué)功能, 這一過程稱為細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo), 這為細胞對外界刺激做出應(yīng)答反應(yīng)的基本生物學(xué)方式； 其中, 水溶性信息分子如肽類激素. 生長因子及某些脂溶性信息分子 如前列腺素 等

29、,不能穿過細胞膜, 需通過與膜表面的特別受體相結(jié)合才能激活細胞內(nèi)信息分子, 經(jīng)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的級聯(lián)反應(yīng)將細胞外信息傳遞至胞漿或核內(nèi),調(diào)劑靶細胞功能,這一過程稱為跨膜信號轉(zhuǎn)導(dǎo)；其過程包括： 胞外信號被質(zhì)膜上的特異性受體蛋白識別,受體被活化；通過胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)物 蛋白激酶,其次信使等的相互作用傳遞信號；信號導(dǎo)致效 應(yīng)物蛋白的活化,引發(fā)細胞應(yīng)答 如激活核內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子,調(diào)劑基因表達 ；脂溶性信息分子如類固醇激素和甲狀腺素等能穿過細胞膜,與位于胞漿或核內(nèi)的受體結(jié)合,激活的受體作為轉(zhuǎn)錄因子,轉(zhuǎn)變靶基因的轉(zhuǎn)錄活性,從而誘發(fā)細胞特定的應(yīng)答反應(yīng)； 21.簡述 crispr/cas-9的基本原理及優(yōu)點（與傳統(tǒng)的基于同源重組

30、的胚胎干細胞基因敲除相比較）；答： crispr/cas-9 此系統(tǒng)的工作原理為 crrna（ crispr-derived rna ）通過堿基配對與 tracrrna （trans-activating rna）結(jié)合形成tracrrna/crrna復(fù)合物,此復(fù)合物引導(dǎo)核酸 酶 cas9 蛋白在與crrna 配對的序列靶位點剪切雙連dna；而通過人工設(shè)計這兩種rna,可以改造形成具有引導(dǎo)作用的sgdna（ short guide rna）,足以引導(dǎo)case9 對 dna的定點切割；作為一種rna導(dǎo)向的 dsdna結(jié)合蛋白, cas9 效應(yīng)物核酸酶為已知的第一個統(tǒng)一因子（unifyingfact

31、or）,能夠共定位rna.dna和蛋白,從而擁有龐大的改造潛力；將蛋白與無核酸酶的case9（cas9 nuclease-null融合,并表達適當(dāng)?shù)膕gdna,可靶定任何dsdna 序列, 而 sgdna的末端可連接到目標(biāo),不影響的結(jié)合；因此,能在 任何 dna序列處帶來任何融合蛋白及rna,這為生物體的討論和改造帶來龐大潛力；優(yōu)點： 1.靶向精確性更高；rna靶向序列和基因組序必需完全匹配cas9 才會對 dna進行剪切； 2.可實現(xiàn)對靶基因多個位點同時敲出；3.試驗周期短,最快僅需2 個月,節(jié)約大量時間和成本； 4.無物種限制；22.為何在挑選靶基因敲除的胚胎干細胞時仍需經(jīng)受陰性挑選過程？

32、簡述更昔洛韋（ ganciclovir）在胚胎干細胞陰性挑選中的作用機制；p24、26 題23.基本概念 sirnamirna； dicer protein；risc；ptgssirna：為一種小rna分子 21-25核苷酸 ,由 dicerrnaase家族中對雙鏈rna具有特異性的酶 加工而成； sirna 為 sirisc 的主要成員,激發(fā)與之互補的目標(biāo)mrna的緘默；精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載學(xué)習(xí)必備歡迎下載mirna：為在真核生物中發(fā)覺的一類內(nèi)源性的具有調(diào)控功能的非編碼rna,其大小長約2025個核苷酸；成熟的mirnas為由較長的初級轉(zhuǎn)錄物經(jīng)過一系列核酸酶的剪切加

33、工而產(chǎn)生的,隨后組裝進rna誘導(dǎo)的緘默復(fù)合體,通過堿基互補配對的方式識別靶mrn,a 并依據(jù)互補程度的不同指導(dǎo)緘默復(fù)合體降解靶mrna或者阻遏靶mrna的翻譯；dicer protein：一種核糖核酸內(nèi)切酶,屬于rnaseiii家族中特異識別雙鏈rna的一員,它能以一種atp依靠的方式逐步切割由外源導(dǎo)入或者由轉(zhuǎn)基因,病毒感染等各種方式引入的雙鏈 rna,切割將rna降解為 19-21bp 的雙鏈 rnasdsrnas,每個片段的3' 端都有 2 個堿基突出；risc：rna-induced silencingcomplex risc ：一種 rna-蛋白質(zhì)復(fù)合物,通過與目標(biāo)mrna完全

34、或者部分的互補配對來實施切割或者翻譯抑制功能；sirna組裝 sirisc , mirna組裝mirisc；riscs（無論 sirisc 仍為 mirisc）包括兩種類型：切割型和不切割型；現(xiàn)在的研 究說明, risc當(dāng)中的 ago蛋白質(zhì)打算了risc 為切割型的仍為不切割型的； ptgs：轉(zhuǎn)錄后基因緘默：在基因轉(zhuǎn)錄后的水平上通過對靶rna進行特異性降解而使其失活；24.請說明 rnai的作用機制；答： dsrna進入細胞內(nèi),被一種具有類似rnasetli活性的核酸內(nèi)切酶dicer結(jié)合,并被酶切成 19 23nt 的小干擾rnasmall interference rna,sirna ,在

35、atp的作用下, sirna與由多種蛋白質(zhì)結(jié)合形成且具有活性的rna緘默復(fù)合物 rna in duced silencing co1tipiex , risc 結(jié)合, risc具有解螺旋酶的功能,使與其結(jié)合的sirna 雙鏈解螺旋成單鏈,釋放正義鏈,保留反義鏈,隨后識別并結(jié)合細胞內(nèi)與其反義鏈相互補的mrna鏈； risc將 mrna剪切成 sirna 雙鏈,降解mrm,a 使靶基因表達緘默；20xx 年 p11 頁 7 題；25.請分析說明 suguo 的試驗結(jié)果；答：suguo 的試驗證明白導(dǎo)入一個目的基因的正義與反義rna可以達到敲除某個基因的效 果；由于該基因的野生型與突變型在胚芽時有對

36、稱與不對稱的差異,所以她想從rna共抑制現(xiàn)象（以前的討論結(jié)果）的基礎(chǔ)上實現(xiàn)產(chǎn)生變異的成效,但為由于當(dāng)時仍沒有討論清晰究竟 為哪種 rna起到了抑制的作用,所以她同時導(dǎo)入了正義與反義rna,她當(dāng)時的分析為反義的rna可以特異性的與mrna結(jié)合,從而阻擋rna的翻譯以及以后的步驟,當(dāng)然最終她勝利了, 用現(xiàn)在的科學(xué)成果進行分析和說明,由于她導(dǎo)入了正義與反義rna,使得正義與反義rna在細胞內(nèi)特異性的互補形成了dsrna,然后在被dicer酶切割為干擾dsrna,然后隨著risc形成并識別降解mrn；a26.什么為細胞凋亡（ cell apoptosis）？答：細胞凋亡為指為維護內(nèi)環(huán)境穩(wěn)固,由基因掌握

37、的細胞自主的有序死亡；27.細胞凋亡有哪兩條主要的途徑？答：細胞凋亡信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的兩大途徑a: 由死亡受體（fas.tnfr）介導(dǎo)的外源途徑；在這條途徑中,啟動capase-8第一被激活；b：線粒體介導(dǎo)的內(nèi)源途徑；在這條途徑中,啟動caspase 9 第一被激活；28.bcl2 家族的分類和結(jié)構(gòu)特點？答： bcl-2家族成員分為兩類a：抗細胞凋亡,如bcl-2 .bcl-xl.a1.bcl-w .mcl-1.在這類分子中,都有bcl-2同源區(qū)1-4 的結(jié)構(gòu)； b：促進細胞凋亡；在這類分子中, 又分為 兩個亞族 ：bax 亞族, 如 bax.bak；bok,有 bh1.bh2和 bh3的結(jié)構(gòu)；bh-

38、only 亞族, 如 bik、bad、bid.bim,只有 bh3的結(jié)構(gòu)；1988,vaux 等在依靠il-3的 b 淋巴細胞中發(fā)覺, 轉(zhuǎn)染 bcl-2基因能夠阻擋剝奪了il-3的 b細胞的凋亡；因而,bcl-2為第一個被發(fā)覺的靠阻擋細胞死亡而非促進細胞增殖起作用的癌精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載學(xué)習(xí)必備歡迎下載基因；bcl-2 抗凋亡作用的機制 : 通過與促凋亡蛋白相互作用而抑制細胞凋亡； bax 為細胞凋亡促進因子； bax 自身可以組成同二聚體,也可以與 bcl-2 構(gòu)成異二聚體； bcl-2 與 bax 蛋白量的比率打算異二聚體與同二聚體的比值； 這對打算細胞凋亡的易感

39、性起關(guān)鍵作用； 假如bcl-2的過度表達,與bax 形成異二聚體中的bax,使 bax 游離而促進細胞凋亡；bad 為細胞凋亡促進因子； bad 可以置換bcl-2/bax異二聚體中的bax,使 bax 游離而促進細胞凋亡；bad 缺乏典型的c 端跨膜結(jié)構(gòu),說明它并非一完整膜蛋白；29.p53 基因在細胞 dna損耗中的作用？答： p53并非為全部細胞的凋亡過程所必需,但對dna損耗而誘發(fā)的細胞凋亡卻為必不行少的；p53 的兩大功能： a; 使細胞在 g1 期停滯； 當(dāng) dna損耗后, p53 第一誘導(dǎo)細胞進入g1期,抑制細胞增殖,直至損耗的dna修復(fù)； b：一旦 dna不能被修復(fù),p53 就

40、會活化那些誘導(dǎo)細 胞凋亡的基因轉(zhuǎn)錄,使細胞發(fā)生凋亡；30.轉(zhuǎn)錄組及蛋白組的概念分別為什么？其討論內(nèi)容分別包括哪些方面？答：轉(zhuǎn)錄組指生命單元（通常為一種細胞）所能轉(zhuǎn)錄出來的可直接參與蛋白質(zhì)翻譯的mrna總和,而其他全部非編碼rna 均可歸為rna 組；討論內(nèi)容：目前,轉(zhuǎn)錄組學(xué)討論的側(cè)重點涉及基因轉(zhuǎn)錄的區(qū)域.轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點.染色質(zhì)修飾.dna 甲基化位點等；蛋白組： 細胞. 組織或機體在特定時間和空間上表達的全部蛋白質(zhì)；蛋白質(zhì)組學(xué)的討論主要涉及兩個方面：一為蛋白質(zhì)組表達模式的討論,即結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)組學(xué),二為蛋白質(zhì)組功能模式的討論,即功能蛋白質(zhì)組學(xué)；（一）蛋白質(zhì)鑒定為蛋白質(zhì)組學(xué)的基本任務(wù)（二）翻譯后修

41、飾的鑒定有助于蛋白質(zhì)功能的闡明（三）蛋白質(zhì)功能確定為蛋白質(zhì)組學(xué)的根本目的31.如何利用轉(zhuǎn)錄組學(xué)及蛋白組學(xué)的方法挑選相關(guān)基因？（寫出主要的檢測指標(biāo)及其試驗方法名稱）答：轉(zhuǎn)錄組的討論方法:cdna 芯片.基因芯片的探針；基因表達系列分析技術(shù)（ sage）：獲得能代表某一轉(zhuǎn)錄體特異性信息的標(biāo)簽tag約為 9 14bp; 連接標(biāo)簽組成的dna 片段 、即形成串聯(lián)體concatemer、進行擴增后測序分析、得到代表轉(zhuǎn)錄體信息的標(biāo)簽序列 ;同一標(biāo)簽的重復(fù)次數(shù)代表該轉(zhuǎn)錄體的表達水平大規(guī)模平行信號測序系統(tǒng)（mpss）其基本方法為從生物樣品中提取mrna,將 mrna分子轉(zhuǎn)換成cdna ,通過固相克隆將該 cd

42、na 勻稱地加載到特制的小分子載體表面,然后在小分子載體上進行大量的pcr 擴增；將全部cdna 游離的一端進行精確測序產(chǎn)生16 至 20 個堿基；每一特定序列在整個生 物樣品中所占的比例,就代表了含有該cdna 基因在樣品中的相對表達水平；基因表達聚類分析；蛋白組討論方法：蛋白質(zhì)分別技術(shù)：凝膠雙向電泳.hplc蛋白質(zhì)鑒定技術(shù)：edman測序.質(zhì)譜技術(shù)圖像分析與生物信息：圖像分析軟件,數(shù)據(jù)庫相互作用討論技術(shù)：酵母雙雜交技術(shù).免疫共沉淀.蛋白質(zhì)芯片等；32.線粒體遺傳有哪些特點？答： p25 頁, 35 題33.討論動物毒素對治療人類疾病和藥物開發(fā)有哪些啟示？可詳細舉兩個例子進行闡述；答：揭示人

43、類自身的生理病理機制：運用動物毒素作為分子探針去解析人類生理性蛋白多肽的功能和分子機制,最終闡明疾病的發(fā)生進展機制；測定動物毒素分子的藥理學(xué)和毒理學(xué)作用（體內(nèi)）（人類被有毒動物損害后的癥狀可作為很好的參考）精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料 - - - 歡迎下載學(xué)習(xí)必備歡迎下載確定動物毒素與非膜蛋白分子靶點,細胞膜通道及受體的相互作用機制動物毒素的作用靶標(biāo)多為細胞膜通道及受體,而膜通道及受體的變異與功能調(diào)制失常就為導(dǎo)致很多人類疾病的根源；動物毒素具有三個顯著特點：1高活力和高專一性；(2) 在協(xié)同進化促使下,動物毒素出現(xiàn)豐富的多樣性；(3) 差異的生態(tài)環(huán)境使不同地域動物毒素具有功能和結(jié)構(gòu)的特別性； 在地

44、域?qū)掗熀蜕鷳B(tài)復(fù)雜的我國,動物毒素的上述特點使其在競爭猛烈的新藥研發(fā)中成為不行替代的自然藥物資源；水蛭素：性質(zhì)：從水蛭唾液腺中分別的多肽,含有65aa,mw約為 7 kda；n端結(jié)合凝血酶的催化位點,c 端結(jié)合 exosite-i（凝血酶的底物識別部位、富含堿性aa）, 可高度特異性的抑制凝血酶,阻礙凝血酶的蛋白水解功能；用途： 用于治療靜脈血栓和充滿 性血管凝血；衍生藥物：重組水蛭素；聚乙二醇偶聯(lián)的水蛭素；白蛋白與水蛭素的融合體等；34.討論動物毒素的方法有哪些,所面臨的問題有哪些？答：討論手段和方法：生物化學(xué)與分子生物學(xué).生物信息學(xué)技術(shù)結(jié)構(gòu)測定. 蛋白質(zhì)組學(xué)和轉(zhuǎn)錄組學(xué)技術(shù).電生理技術(shù). 細胞

45、生物學(xué). 藥效學(xué) / 藥動學(xué) / 藥劑學(xué).動物行為學(xué)和模式動物模型；面臨的問題： 運用傳統(tǒng)生物化學(xué)方法純化得到的動物毒素的數(shù)量有限,稍微的污染將會得出錯誤的結(jié)論 依據(jù)基因組學(xué)和轉(zhuǎn)錄組學(xué)討論,可以化學(xué)合成以及重組表達動物毒素,從而保證數(shù)量和質(zhì)量 ；動物毒素分子與目標(biāo)蛋白分子的相互作用通常用體外的方法檢測,不能照實反映其與目標(biāo)分子在體內(nèi)正確的相互作用；加強有毒動物資源的愛護以及建立和完善動物毒素資源庫 毒素基因文庫, 多肽毒素組學(xué)庫,有毒動物種質(zhì)資源庫等 ；加強不同領(lǐng)域討論人員的緊密合作,促進毒素討論的進展；35.如何看待基因治療的安全性及社會倫理問題；20xx 級 16 頁 20 題,或者 20

46、xx 級 10 頁 40 題36.疾病討論的相關(guān)基因功能討論的方法及策略開放性題,可能為最終一道題 （大家都想想完了再整理一下； ；）37.結(jié)合你的專業(yè),論述線粒體與醫(yī)學(xué)的關(guān)系；答：線粒體的主要功能為進行氧化磷酸化,合成atp,為細胞生命活動供應(yīng)能量；線粒體為糖類.脂肪和氨基酸等物質(zhì)最終氧化釋能的場所；糖類和脂肪等養(yǎng)分物質(zhì)在細胞質(zhì)中經(jīng)過降解作用產(chǎn)生丙酮酸和脂肪酸,這些物質(zhì)進入線粒體基質(zhì)中,再經(jīng)過一系列分解代謝形成乙酰輔酶 a,即可進一步參與三羧酸循環(huán)；三羧酸循環(huán)中脫下的氫,經(jīng)線粒體內(nèi)膜上的電子傳遞鏈 呼吸鏈 ,最終傳遞給氧,生成水；線粒體與帕金森氏癥parkinson s disease；pd

47、帕金森病為一種慢性神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病,為由中腦黑質(zhì)致密部多巴胺神經(jīng)元挑選性變性死亡.紋狀體多巴胺削減所致,其發(fā)病機制目前并不很清線粒體呼吸鏈為體內(nèi)氧自由基產(chǎn)生的主要部位,呼吸鏈中任何部位受到抑制都會使自由基產(chǎn)生增多； pd患者黑質(zhì)中線粒體酶復(fù)合體i 缺陷會導(dǎo)致自由基產(chǎn)生增多,atp合成削減； 能量的削減會造成細胞內(nèi)離子失衡,膜電位下降,導(dǎo)致一些電壓依靠的ca2+通道的連續(xù)開放, 造成 ca2+急劇內(nèi)流,細胞內(nèi)ca2+增多,耗竭細胞內(nèi)atp,同時通過活化蛋白酶.脂肪酶. 核酸內(nèi)切酶,介導(dǎo)了興奮毒性的細胞損耗,造成神經(jīng)元死亡；近年來仍發(fā)覺,線粒體掌握核 的程序化死亡 apoptosis,體外試驗說明低濃度的mpp+對酶復(fù)合體i 的抑制可以造成培育的多巴胺能神經(jīng)元的程序化死亡,而高濃度主要引起細胞的壞死舊j；mo chizuki等發(fā)覺精品學(xué)習(xí)資料精選學(xué)習(xí)資料