紫外可見分光光度法

1、學習目的 通過本章學習，為后續(xù)藥物分析、中藥分析課程中有 關藥品的定性鑒別、雜質(zhì)檢查和含量測定的學習奠定基礎。學習要點 紫外可見分光光度法的基本原理；電子躍遷類型，吸收帶的類型、特點及影響因素;Lambert-Beer 定律;紫外可見分光光光度計的基本構(gòu)造； 定性定量方法。第一節(jié)紫外-可見分光光度法的基本原理第二節(jié)紫外-可見分光光度計第三節(jié)紫外-可見分光光度法分析條件的選擇 第四節(jié)紫外-可見分光光度法的應用概述紫外可見分光光度法（ultraviolet-visiblespectrophotometry, UV-Vis）是基于分子中價電子躍遷所產(chǎn)生的吸收光譜而進行分析的方法，又稱紫外可見吸收光譜

2、法。該法波長范圍一般在”0800mn。特點: 靈敏度較高，一般為10”10-4g/ml;準確度較好，相對誤差一般在05%,精度高的可達02% 儀器設備簡單，操作方便，分析速度較快。QK第一節(jié)紫外-可見分光光度型犍本原理一、紫外可見吸收光譜（一）電子躍遷的類型1、GTO*躍遷2、九一 九*躍遷3、n 一兀*躍遷4、n g*躍遷5、電荷遷移躍遷GG*H 冗一九 >。反鍵軌道武反鍵軌道n非鍵軌道九成鍵軌道。成鍵軌道200300 波長/ nm400電子躍遷所需能量及所處波段示意圖6、配位場躍遷5、電荷遷移躍遷用電磁輻射照射化合物時，電子從給與體向接受體相聯(lián)系的 軌道上躍遷稱為電荷遷移躍遷。某些取

3、代芳煌分子同時具有電子給與體和電子接受體兩部分,可以產(chǎn)生電荷轉(zhuǎn)移吸收光譜。電子接受體電子給予體某些過渡金屬離子與含生色團的試劑反應所產(chǎn)生的配合物, 以及許多無機物離子均可產(chǎn)生電荷遷移躍遷。此類吸收帶較寬，吸收強度大，一般1ax（一）電子躍遷的類型6、配位場躍遷第4、5周期過渡金屬水合離子或過渡金屬離子與顯色劑所形 成的配合物在電磁輻射作用下，吸收適當波長的紫外光或可 見光，從而獲得相應的吸收光譜。配位場躍遷吸收強度較弱，一般£max<102。如3也0）63+水合離子的配位場躍遷吸收帶41ax為490nm。大多數(shù)鍋系和銅系元素離子的4f或5f電子可發(fā)生f產(chǎn)躍遷（配位場躍遷），因而

4、在紫外可見光區(qū)都有吸收。躍遷 類型出現(xiàn)波段吸收 強度化合物 結(jié)構(gòu)特點< 200nm弱單鍵 C-C C-H飽和燒類，對紫外無貢獻，但可作 溶劑九一兀*200nm 1強不飽和鍵 c=c c=c有共朝雙鋼需能1上存在時，tit/躍遷所 羲降低，波長紅移*n>7r250500nm弱c=oC=N等必須是雜原子直接連在雙鍵上* n>0a200nm 1弱C-OH c-nh2 c-s c-x含有未共用 鍵上雜原子極性 雜原子數(shù)目電子對的基團連接在。入紅移T,入紅移6電子躍遷類型及特點8I紫外可見吸收光譜中的常用術(shù)語1、吸收光譜（吸收曲線） 2、生色團 3、助色團 4、藍移、紅移 5、增色效應

5、、減色效應吸收曲線上的最大吸收峰所對應的波長。最小吸收波長（?。┪涨€上的最低部位的谷最大吸收波長（Xmax）所對應的波長。（3）肩峰（曦）吸收峰上的曲折處稱為肩峰。（4）末端吸收在吸收曲線的最短波長處呈 現(xiàn)強吸收而不成峰形的部分 稱為末端吸收。生色團有機化合物分子結(jié)構(gòu)中含有口一犬、冗一江躍遷的基團，能在紫外可見光范圍內(nèi)產(chǎn)生吸收的基團。如C=C、C=O. 一N=N 一等簡單的雙鍵或叁鍵，以及C = o、C = N、C = S、N = O、-NO?等有雜原子滲入的雙鍵或共朝雙鍵。助色團含有非成鍵電子的雜原子飽和基團，本身不能吸收波長大于200mn的輻射，但與發(fā)色團或飽和燒相連時，能使生色團的吸收峰向長波方向位移并增強其吸收強度的基團。如一NH2、-OH、-N