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文檔簡(jiǎn)介

1、大多綠色開花植物都是靠種子來繁殖的。大多綠色開花植物都是靠種子來繁殖的。有沒有不用種子來培育植物的方法呢?有沒有不用種子來培育植物的方法呢? 組織培養(yǎng)組織培養(yǎng)進(jìn)行植物組織培養(yǎng)的目的1.1.快速、周年生產(chǎn)快速、周年生產(chǎn)1.1.什么是脫毒苗什么是脫毒苗2.2.如何選材如何選材3.3.為什么可以?為什么可以?莖尖分生組織莖尖分生組織2.2.保持優(yōu)良性狀保持優(yōu)良性狀3.3.培育脫毒苗培育脫毒苗是指在人工培養(yǎng)基上,離體是指在人工培養(yǎng)基上,離體培養(yǎng)植物的器官、組織、細(xì)培養(yǎng)植物的器官、組織、細(xì)胞和原生質(zhì)體,并使其生長(zhǎng)、胞和原生質(zhì)體,并使其生長(zhǎng)、增殖、分化以及再生植株的增殖、分化以及再生植株的技術(shù)。技術(shù)。 一

2、、什么是植物組織培養(yǎng)一、什么是植物組織培養(yǎng)(三)細(xì)胞全能性(三)細(xì)胞全能性(1 1)受精卵)受精卵 與與 體細(xì)胞體細(xì)胞(2 2)植物體細(xì)胞)植物體細(xì)胞 與與 動(dòng)物體細(xì)胞動(dòng)物體細(xì)胞(3 3)胚胎干細(xì)胞)胚胎干細(xì)胞 與與 造血干細(xì)胞造血干細(xì)胞(四)細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)與意義(四)細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)與意義1.1.不同的植物組織、同一植物的不同材料不同的植物組織、同一植物的不同材料(外(外植體的選?。恢搀w的選?。?;3.3.環(huán)境條件(環(huán)境條件(PHPH、溫度、光照等);、溫度、光照等);4.4.植物激素植物激素三、三、影響植物組織培養(yǎng)的因素影響植物組織培養(yǎng)的因素蔗糖蔗糖植物激素植物激素制備制備MSMS固體培養(yǎng)基

3、固體培養(yǎng)基1 1. .配制母液配制母液2 2. .配制培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基3 3. .滅菌滅菌外植體消毒外植體消毒接種接種培養(yǎng)培養(yǎng)移栽移栽栽培栽培實(shí)驗(yàn)操作實(shí)驗(yàn)操作流程流程 可以成為植物組織培養(yǎng)條件的是可以成為植物組織培養(yǎng)條件的是 CO2 有機(jī)物有機(jī)物 生長(zhǎng)素生長(zhǎng)素 細(xì)胞分裂素細(xì)胞分裂素 水水 礦質(zhì)元素礦質(zhì)元素A B C D C花的結(jié)構(gòu)花的結(jié)構(gòu)花藥:囊狀結(jié)構(gòu),內(nèi)有很多花粉花藥:囊狀結(jié)構(gòu),內(nèi)有很多花粉小孢子母細(xì)胞小孢子母細(xì)胞小孢子小孢子花粉?;ǚ哿>?xì)胞精原細(xì)胞初級(jí)精母細(xì)胞初級(jí)精母細(xì)胞次級(jí)精母細(xì)胞次級(jí)精母細(xì)胞精細(xì)胞精細(xì)胞精子精子(含(含2 2個(gè)精子)個(gè)精子)1 1個(gè)小孢子母?jìng)€(gè)小孢子母細(xì)胞(細(xì)胞(2n

4、2n)4 4個(gè)小孢子個(gè)小孢子( (四分體四分體) )(n n)1 1個(gè)花粉管細(xì)胞核(個(gè)花粉管細(xì)胞核(n n)1 1個(gè)生殖細(xì)胞核(個(gè)生殖細(xì)胞核(n n)2 2個(gè)精子個(gè)精子單核居中期單核居中期(n n)單核靠邊期單核靠邊期(n n)雙核期雙核期1.1. 產(chǎn)生精子的過程中,產(chǎn)生精子的過程中,1 1個(gè)小孢子母細(xì)胞經(jīng)過了個(gè)小孢子母細(xì)胞經(jīng)過了幾次減數(shù)分裂,幾次有絲分裂?幾次減數(shù)分裂,幾次有絲分裂?2.12.1個(gè)小孢子母細(xì)胞產(chǎn)生幾個(gè)精子?個(gè)小孢子母細(xì)胞產(chǎn)生幾個(gè)精子?3.13.1個(gè)小孢子母細(xì)胞產(chǎn)生幾個(gè)生殖細(xì)胞核?幾個(gè)個(gè)小孢子母細(xì)胞產(chǎn)生幾個(gè)生殖細(xì)胞核?幾個(gè)花粉管細(xì)胞核?幾個(gè)小孢子花粉管細(xì)胞核?幾個(gè)小孢子4.4.

5、小孢子四分體和哺乳動(dòng)物減數(shù)分裂四分體有何小孢子四分體和哺乳動(dòng)物減數(shù)分裂四分體有何區(qū)別?區(qū)別?5.5.花粉粒中幾個(gè)細(xì)胞核的基因型相同嗎?花粉粒中幾個(gè)細(xì)胞核的基因型相同嗎?基因型為基因型為AaBbAaBb的一個(gè)小孢子母細(xì)胞經(jīng)分裂形的一個(gè)小孢子母細(xì)胞經(jīng)分裂形成的一個(gè)花粉粒中有一個(gè)營養(yǎng)核和兩個(gè)精子成的一個(gè)花粉粒中有一個(gè)營養(yǎng)核和兩個(gè)精子,其基因型可能分別為,其基因型可能分別為A AABAB、AbAb、Ab BAb BABAB、ABAB、AB AB C CABAB、aBaB、aB DaB DaBaB、abab、abab某高等植物體細(xì)胞內(nèi)假設(shè)有某高等植物體細(xì)胞內(nèi)假設(shè)有6 6條染色體,它們條染色體,它們是是A

6、aBbDdAaBbDd,那么,一個(gè)花粉管中的兩個(gè)精子,那么,一個(gè)花粉管中的兩個(gè)精子中的染色體是?中的染色體是? A.ABDA.ABD和和abd B.AbDabd B.AbD和和abd abd C.AaBC.AaB和和Bbd D.AbdBbd D.Abd和和AbdAbdDB產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑花藥花藥胚狀體胚狀體愈傷組織愈傷組織叢芽叢芽生根生根植株植株abcde3.3.主要取決于培養(yǎng)基中主要取決于培養(yǎng)基中 種類及其種類及其濃度配比濃度配比1.b. c.1.b. c.過程的名稱分別是什么?過程的名稱分別是什么?2.2.什么是胚狀體?什么是胚狀體?(三)影響花藥培養(yǎng)的因素(三

7、)影響花藥培養(yǎng)的因素1 1. .材料的選擇材料的選擇a.a.材料選擇什么時(shí)期最好,為什么?材料選擇什么時(shí)期最好,為什么?b.b.如何選擇單核期細(xì)胞?如何確認(rèn)單核期?如何選擇單核期細(xì)胞?如何確認(rèn)單核期?d.d.還有哪些影響花藥培養(yǎng)的因素?還有哪些影響花藥培養(yǎng)的因素?親本植株的生長(zhǎng)條件、親本植株的生長(zhǎng)條件、材料的預(yù)處理材料的預(yù)處理及接種密度及接種密度等。等。 選擇完全未開放的花蕾選擇完全未開放的花蕾 染色、鏡檢染色、鏡檢月季初花期月季初花期花粉發(fā)育單核期花粉發(fā)育單核期無菌吸水紙無菌吸水紙吸干水分吸干水分0.10.1氯化汞溶氯化汞溶液液2 24min4min無菌水無菌水沖洗沖洗花花蕾蕾7070酒精酒

8、精大約大約30s30s無菌水無菌水清洗清洗與菊花外植體的消毒相比較,有何不同?為與菊花外植體的消毒相比較,有何不同?為什么?什么?在酒精消毒前,花藥不需要預(yù)先用流水在酒精消毒前,花藥不需要預(yù)先用流水沖洗、洗衣粉洗滌和軟刷刷洗沖洗、洗衣粉洗滌和軟刷刷洗 1.1.為何不能損傷花藥且要徹底去除花絲?為何不能損傷花藥且要徹底去除花絲?與花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體與花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體形成形成損傷花藥,容易從受傷部位產(chǎn)生二倍體的愈損傷花藥,容易從受傷部位產(chǎn)生二倍體的愈傷組織,即得不到單倍體。傷組織,即得不到單倍體。2.2.花藥離體培養(yǎng)得到的植株是否一定是單倍花藥離體培養(yǎng)得到的植

9、株是否一定是單倍體?體?3.3.培養(yǎng)時(shí)需要注意哪些事項(xiàng)?培養(yǎng)時(shí)需要注意哪些事項(xiàng)?花藥開裂長(zhǎng)出愈傷組織或釋放出胚狀體。長(zhǎng)花藥開裂長(zhǎng)出愈傷組織或釋放出胚狀體。長(zhǎng)出的愈傷組織要及時(shí)轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上;釋出的愈傷組織要及時(shí)轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上;釋放的胚狀體,必須在花藥開裂后盡快將幼小植放的胚狀體,必須在花藥開裂后盡快將幼小植株分開,否則這些植株將很難分開。株分開,否則這些植株將很難分開。溫度控制在溫度控制在2525左右,不需要光照。左右,不需要光照。幼小幼小植株植株形成后才需要形成后才需要光照光照。在花藥培養(yǎng)中,特別是通過愈傷組織形成的在花藥培養(yǎng)中,特別是通過愈傷組織形成的花粉植株,常常會(huì)出現(xiàn)染色體倍性

10、的變化。(花粉植株,常常會(huì)出現(xiàn)染色體倍性的變化。(主要原因是營養(yǎng)核和生殖核融合造成的)所以主要原因是營養(yǎng)核和生殖核融合造成的)所以還需要對(duì)培養(yǎng)出來的植株作進(jìn)一步的鑒定和篩還需要對(duì)培養(yǎng)出來的植株作進(jìn)一步的鑒定和篩選選1.1.在月季花藥培養(yǎng)成單倍體植株的過程中,哪在月季花藥培養(yǎng)成單倍體植株的過程中,哪個(gè)時(shí)期最易成活個(gè)時(shí)期最易成活? ? A.A.單核期前的花藥單核期前的花藥 B.B.單核期后的花藥單核期后的花藥 C.C.單核期花藥單核期花藥 D.D.雙核期雙核期C2.2.關(guān)于月季的花藥培養(yǎng)技術(shù)與菊花的組織培養(yǎng)關(guān)于月季的花藥培養(yǎng)技術(shù)與菊花的組織培養(yǎng)技術(shù)的不同,下列說法不正確的是技術(shù)的不同,下列說法不正

11、確的是 A A花藥培養(yǎng)需發(fā)育時(shí)期適宜的花蕾花藥培養(yǎng)需發(fā)育時(shí)期適宜的花蕾B B花藥培養(yǎng)對(duì)培養(yǎng)基配方的要求更為嚴(yán)格花藥培養(yǎng)對(duì)培養(yǎng)基配方的要求更為嚴(yán)格C C培養(yǎng)基配制方法完全不同培養(yǎng)基配制方法完全不同DD花藥裂開后長(zhǎng)出的愈傷組織或釋放的胚狀花藥裂開后長(zhǎng)出的愈傷組織或釋放的胚狀體要及時(shí)換培養(yǎng)基體要及時(shí)換培養(yǎng)基C3.3.關(guān)于花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的途徑,下列敘關(guān)于花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的途徑,下列敘述錯(cuò)誤的是述錯(cuò)誤的是A A花粉可通過愈傷組織發(fā)育成植株花粉可通過愈傷組織發(fā)育成植株B B花粉可通過胚狀體進(jìn)一步分化成植株花粉可通過胚狀體進(jìn)一步分化成植株C C主要由培養(yǎng)基中激素的種類及用量決定途徑主要由培養(yǎng)基中激

12、素的種類及用量決定途徑DD產(chǎn)生胚狀體是花藥離體培養(yǎng)中特有的途徑產(chǎn)生胚狀體是花藥離體培養(yǎng)中特有的途徑D(1)(1)選用的材料合適與否是成功誘導(dǎo)出花粉植株選用的材料合適與否是成功誘導(dǎo)出花粉植株的重要因素,一般來說選用的重要因素,一般來說選用期的花粉可期的花粉可提高成功率。選擇花粉時(shí),一般要通過提高成功率。選擇花粉時(shí),一般要通過來確定花粉是否處于合適的發(fā)育期,這時(shí)需要對(duì)來確定花粉是否處于合適的發(fā)育期,這時(shí)需要對(duì)花粉的細(xì)胞核進(jìn)行染色,常用的染色劑是花粉的細(xì)胞核進(jìn)行染色,常用的染色劑是 。(2)(2)上圖中花藥經(jīng)脫分化產(chǎn)生胚狀體還是愈傷組上圖中花藥經(jīng)脫分化產(chǎn)生胚狀體還是愈傷組織主要取決于培養(yǎng)基中織主要取

13、決于培養(yǎng)基中 。單核單核鏡檢鏡檢醋酸洋紅醋酸洋紅激素的種類及其濃度配比激素的種類及其濃度配比 (3)(3)胚狀體與愈傷組織在結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別在于愈胚狀體與愈傷組織在結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別在于愈傷組織的細(xì)胞排列疏松無規(guī)則,是一種高度傷組織的細(xì)胞排列疏松無規(guī)則,是一種高度的薄壁細(xì)胞,胚狀體與的薄壁細(xì)胞,胚狀體與發(fā)育形成的胚有類發(fā)育形成的胚有類似的結(jié)構(gòu),即具有胚芽、胚軸和胚根。似的結(jié)構(gòu),即具有胚芽、胚軸和胚根。(4)(4)無菌技術(shù)也是成功誘導(dǎo)出花粉植株的重要因素?zé)o菌技術(shù)也是成功誘導(dǎo)出花粉植株的重要因素,請(qǐng)說明下列各項(xiàng)需要消毒,還需要滅菌。培養(yǎng),請(qǐng)說明下列各項(xiàng)需要消毒,還需要滅菌。培養(yǎng)基,培養(yǎng)皿,接種環(huán),花

14、蕾,實(shí)驗(yàn)操作者基,培養(yǎng)皿,接種環(huán),花蕾,實(shí)驗(yàn)操作者的雙手,三角錐形瓶。的雙手,三角錐形瓶。( (填編號(hào)填編號(hào)) )需要滅需要滅菌,菌,( (填編號(hào)填編號(hào)) )需要消毒。需要消毒。液泡化液泡化受精卵受精卵 右圖為植物體細(xì)胞雜交過程示意圖。右圖為植物體細(xì)胞雜交過程示意圖。據(jù)圖回答:據(jù)圖回答:(1 1)步驟是)步驟是 ,最,最常用的方法是常用的方法是 。(2 2)步驟一般常用的化學(xué)試劑)步驟一般常用的化學(xué)試劑是是 ,目的是,目的是 。 (3) (3)在利用雜種細(xì)胞培育成為雜種植在利用雜種細(xì)胞培育成為雜種植株的過程中,運(yùn)用的技術(shù)手段株的過程中,運(yùn)用的技術(shù)手段是是 ,其中步驟相當(dāng)于,其中步驟相當(dāng)于 ,步

15、驟相當(dāng)于,步驟相當(dāng)于 。 (4 4)植物體細(xì)胞雜交的目的是獲得新)植物體細(xì)胞雜交的目的是獲得新的雜種植株。使的雜種植株。使能夠在新能夠在新的植物體上有所表現(xiàn),其根本原因是的植物體上有所表現(xiàn),其根本原因是。去掉細(xì)胞壁,分離原生質(zhì)體去掉細(xì)胞壁,分離原生質(zhì)體酶解法酶解法聚乙二醇(聚乙二醇(PEG)誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)脫分化脫分化再分化再分化遠(yuǎn)緣雜交親本遠(yuǎn)緣雜交親本的遺傳特征的遺傳特征雜種植株獲得雙親的遺傳物質(zhì)雜種植株獲得雙親的遺傳物質(zhì) (5 5)若遠(yuǎn)源雜交親本)若遠(yuǎn)源雜交親本A A和和B B都是二倍體,則都是二倍體,則雜種植株為雜種植株為倍體。倍體。(6 6)從理論上講,雜種植株的育性)從理論上講,雜種植株的育性。若運(yùn)用傳統(tǒng)有性雜交方法能否實(shí)現(xiàn)?若運(yùn)用傳統(tǒng)有性雜交方法能否實(shí)現(xiàn)?。并說明現(xiàn)由并說明現(xiàn)由 。因此,這項(xiàng)研究對(duì)于培養(yǎng)作物新品種方面的重因此,這項(xiàng)研究對(duì)于培養(yǎng)作物新品種方面的重大意義在于大意義在于。 (7 7)利用植物體細(xì)胞雜交的方法培育作物新)利用植物體細(xì)胞雜交的方法培育作物新品種過程中,遺傳物質(zhì)的傳遞是否遵循孟德爾

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