分析化學(xué)課件：9色譜法

1、 碳酸鈣碳酸鈣石油醚石油醚植物植物色素色素色譜分析色譜分析基于物質(zhì)的物理性質(zhì)基于物質(zhì)的物理性質(zhì)進(jìn)行分離和分析的方法。進(jìn)行分離和分析的方法。色譜法是一種色譜法是一種分離分離方法，其特點為存在兩相方法，其特點為存在兩相將色譜法用于分析中，稱為將色譜法用于分析中，稱為色譜分析色譜分析碳酸鈣碳酸鈣石油醚石油醚碳酸鈣碳酸鈣石油醚石油醚色譜分析法色譜分析法氣相色譜法氣相色譜法薄層色譜法薄層色譜法液相色譜法液相色譜法激光色譜法激光色譜法電色譜法電色譜法超臨界色譜法超臨界色譜法氣固色譜氣固色譜(GSC)氣液色譜氣液色譜(GLC)按固定相狀態(tài)分為按固定相狀態(tài)分為液相色譜法液相色譜法流動相流動相進(jìn)樣進(jìn)樣裝置裝置色

2、譜柱色譜柱檢測器檢測器數(shù)據(jù)記錄數(shù)據(jù)記錄與處理與處理min05101520253035mAU020406080100 DAD1 C, Sig=270,16 Ref=360,100 (HUPINGDSLS-A21.D)樣品樣品氣相色譜法應(yīng)用實例：氣相色譜法應(yīng)用實例：工作環(huán)境分析工作環(huán)境分析高效液相色譜法應(yīng)用實例：高效液相色譜法應(yīng)用實例： 牛奶中違禁摻雜三聚氰胺的檢測牛奶中違禁摻雜三聚氰胺的檢測三聚氰胺三聚氰胺色譜峰色譜峰峰高峰高基線基線峰寬峰寬半峰寬半峰寬峰面積峰面積標(biāo)準(zhǔn)偏差標(biāo)準(zhǔn)偏差EEt正態(tài)分布正態(tài)分布 定性、定量定性、定量 分離效果顯分離效果顯示示3. 保留值保留值 : 用時間表示用時間表示進(jìn)

3、進(jìn)樣樣空空氣氣峰峰tRtRtM進(jìn)進(jìn)樣樣空空氣氣峰峰tRtRtM121212RRRRRR21ttVVttr 2ln22 窄窄分離效果分離效果一般一般 窄窄 峰間距大峰間距大（ t大）大）峰窄峰窄（操作條件操作條件） 色譜分離的效果：色譜分離的效果： 兩組份峰間距足夠遠(yuǎn)：兩組份峰間距足夠遠(yuǎn)：每個組份峰寬足夠?。好總€組份峰寬足夠小：)WW()t()t(2RBAARBR )Y()Y(699.1)t()t(2RB2/1A2/1ARBR 上式既反映峰間距也反映峰寬的情況，利用上式既反映峰間距也反映峰寬的情況，利用此式，可直接從色譜流出曲線上求出此式，可直接從色譜流出曲線上求出R。 定義：定義：相鄰兩組分色

4、譜峰保留值之差與兩個相鄰兩組分色譜峰保留值之差與兩個組分色譜峰峰底寬度總和之半的比值。組分色譜峰峰底寬度總和之半的比值。)Y()Y(699.1)t()t(2RB2/1A2/1ARBR 通常用作是否分開的判據(jù)通常用作是否分開的判據(jù) 要改善物質(zhì)對的分離（要改善物質(zhì)對的分離（提高提高R），即），即提高兩相鄰物質(zhì)的分離度，提高兩相鄰物質(zhì)的分離度，增大增大r21 是是最有最有效效的手段。的手段。 在氣相色譜中，在氣相色譜中，增大增大r21最有效的手段是最有效的手段是改變固定相改變固定相，選擇合適的固定相種類是解決選擇合適的固定相種類是解決分離問題的關(guān)鍵。分離問題的關(guān)鍵。 在高效液相色譜中，流動相的種類和

5、配在高效液相色譜中，流動相的種類和配比是改善分離最簡便有效的方法。比是改善分離最簡便有效的方法。改變柱溫改變柱溫也可改變也可改變r21。 各物質(zhì)在一定的色譜條件下均有確定各物質(zhì)在一定的色譜條件下均有確定不變的保留值，故可作為定性指標(biāo)。不變的保留值，故可作為定性指標(biāo)。 利用純物質(zhì)對照定性利用純物質(zhì)對照定性 利用文獻(xiàn)值對照定性（很少用）利用文獻(xiàn)值對照定性（很少用）測量與計算測量與計算mi=fi .Ai 在一定色譜條件下，在一定色譜條件下，被測被測物質(zhì)的量與峰面積成正比物質(zhì)的量與峰面積成正比。iSSiSSiiSiiAmAmA/mA/mfff iii=Amf%100) (=%100=%100=%iii

6、iiiiifAfAmmmmc總總sssiiissiisimfAfAm fAfAmm 常常數(shù)數(shù)總總總總 sisssiiiiAA%100mfAmfA%100mm%C內(nèi)標(biāo)法內(nèi)標(biāo)法%CAA%Cssii 氣路氣路色譜柱色譜柱進(jìn)樣進(jìn)樣檢測器檢測器數(shù)據(jù)記錄數(shù)據(jù)記錄與處理與處理 5.記錄系統(tǒng)記錄系統(tǒng):將電信號放大將電信號放大,記錄出色譜圖記錄出色譜圖,經(jīng)數(shù)據(jù)處理經(jīng)數(shù)據(jù)處理得出結(jié)果，現(xiàn)用色譜工作站得出結(jié)果，現(xiàn)用色譜工作站氣路氣路色譜柱色譜柱進(jìn)樣進(jìn)樣檢測器檢測器數(shù)據(jù)記錄數(shù)據(jù)記錄與處理與處理氣相色譜儀氣相色譜儀氣體凈化裝置氣體凈化裝置TCD進(jìn)樣器進(jìn)樣器 柱溫箱柱溫箱 氣相色譜分離過程是在色氣相色譜分離過程是在色譜柱

7、內(nèi)完成的。譜柱內(nèi)完成的。固定相固定相固體吸附劑固體吸附劑擔(dān)體擔(dān)體和固定液和固定液吸附與脫附吸附與脫附溶解與揮發(fā)溶解與揮發(fā)組組分分在在流流動動相相中中的的濃濃度度組組分分在在固固定定相相中中的的濃濃度度=)mL.g()mL.g(=1l1sccKK小小 cl 隨載氣移動快，隨載氣移動快，tR 小，小，先出峰先出峰不同組分能夠分離的先決條件是其分配系數(shù)不同組分能夠分離的先決條件是其分配系數(shù)不等。兩組分分配系數(shù)相差不等。兩組分分配系數(shù)相差越大越大，兩峰分離，兩峰分離的就的就越好越好。1、當(dāng)固定相一定，、當(dāng)固定相一定，KAKB，哪個先離柱，哪個先離柱?KA小小 Cl A隨載氣移動快，隨載氣移動快，tR

8、小小, A先離柱先離柱 2、當(dāng)、當(dāng)T , K值變大值變大? 小小?K值變小值變小固定液類型固定液類型極性極性應(yīng)用特點應(yīng)用特點固定液舉例固定液舉例烴類烴類最弱最弱非極性化合物非極性化合物角鯊?fù)榻酋復(fù)楣栌皖惞栌皖悩O性范圍廣極性范圍廣應(yīng)用范圍廣應(yīng)用范圍廣SE-30、SE-54聚乙二醇類聚乙二醇類強極性強極性強極性化合物強極性化合物PEG-20M酯類酯類中強極性中強極性價廉價廉苯二甲酸二壬苯二甲酸二壬酯酯腈類腈類強極性強極性極性化合物極性化合物一氧二丙腈一氧二丙腈特殊固定液特殊固定液分離異構(gòu)體分離異構(gòu)體有機皂土有機皂土B) 固定液分類及其應(yīng)用固定液分類及其應(yīng)用以非極性角鯊?fù)榈囊苑菢O性角鯊?fù)榈腜=0 強

9、極性強極性一氧二丙腈一氧二丙腈P=100為基準(zhǔn)，分五級。為基準(zhǔn)，分五級。各組分在其的溶解能力。各組分在其的溶解能力。柱溫選擇的原則：柱溫選擇的原則： 在使最難分離的組分能盡可能好的分離在使最難分離的組分能盡可能好的分離前提下，盡可能采取前提下，盡可能采取較低的柱溫較低的柱溫，以保留時，以保留時間適宜，峰形間適宜，峰形不拖尾不拖尾為度。柱溫為度。柱溫不能高于固不能高于固定液的沸點定液的沸點，否則揮發(fā)流失。，否則揮發(fā)流失。tc=45tc=12030801201801.丙烷丙烷2.丁烷丁烷3.戊烷戊烷4.己烷己烷5.庚烷庚烷6.辛烷辛烷7.溴仿溴仿8.間氯甲苯間氯甲苯9.間溴甲苯間溴甲苯填充柱填充柱

10、13m，要求要求動作快動作快、時間短時間短。檢測器的響應(yīng)值檢測器的響應(yīng)值孔道完全對稱孔道完全對稱不同的氣體具有不同的導(dǎo)熱系數(shù)不同的氣體具有不同的導(dǎo)熱系數(shù)電信號電信號靈靈敏敏度度橋橋 3)I( ，鎢絲，鎢絲 ，池體與鎢絲，池體與鎢絲 ， 有利氣有利氣體傳導(dǎo)，檢測器靈敏度提高。體傳導(dǎo)，檢測器靈敏度提高。I 太大，基線太大，基線不穩(wěn)，毀鎢絲。不穩(wěn)，毀鎢絲。 3）載氣種類：）載氣種類：載氣與試樣的熱導(dǎo)系數(shù)相差載氣與試樣的熱導(dǎo)系數(shù)相差越大越大，檢測靈敏度越高。，檢測靈敏度越高。各種氣體的熱導(dǎo)系數(shù)（單位：各種氣體的熱導(dǎo)系數(shù)（單位：J/cm C s ）檢測對象：檢測對象：適合有機物（水中、大氣中痕量適合有機

11、物（水中、大氣中痕量有機物測定）有機物測定）優(yōu)點：優(yōu)點：結(jié)構(gòu)簡單、靈敏度高（能檢測結(jié)構(gòu)簡單、靈敏度高（能檢測ng/mL級級的痕量物質(zhì)）、響應(yīng)快、死體積小、線性范的痕量物質(zhì)）、響應(yīng)快、死體積小、線性范圍寬、選擇性好等優(yōu)點，圍寬、選擇性好等優(yōu)點，缺點：缺點：對無機化合物無響應(yīng)，檢測時要破壞對無機化合物無響應(yīng)，檢測時要破壞樣品。樣品。CHHCmn 裂裂解解eCHO2OCH2 COOHOHCHO32 +-3. 檢測器檢出依據(jù)檢測器檢出依據(jù)將組分理化性質(zhì)將組分理化性質(zhì)(濃度或質(zhì)量濃度或質(zhì)量)電訊號電訊號E或峰面積或峰面積A SEi=Si miAi=SimiSi= Ai miSi：檢測器對組分檢測器對組分

12、I響應(yīng)值響應(yīng)值一般不等一般不等mA=mBAA=AB?iii=Amfii1=fS習(xí)題：習(xí)題： P359 3、4、5、7思考題：思考題： P358 6、10、12、14、16、211、下列哪種說法不是氣相色譜的特點、下列哪種說法不是氣相色譜的特點( )。(1)選擇性好選擇性好 (2)分離效率高分離效率高(3)可用來直接分析未知物可用來直接分析未知物 (4)分析速度快分析速度快2、在色譜分析中，可用來定性的色譜參數(shù)是、在色譜分析中，可用來定性的色譜參數(shù)是( )。(1)峰面積峰面積 (2)保留值保留值 (3)峰高峰高 (4)半峰寬半峰寬3、在色譜分析中，可用來定量的色譜參數(shù)是、在色譜分析中，可用來定量的色譜參