紫外可見分光光分析法實用教案

1、會計學1紫外可見紫外可見(kjin)分光光分析法分光光分析法第一頁，共106頁。 基于物質光化學性質而建立起來的分析方法稱之為光化學分析法。 分為:光譜分析法和非光譜分析法。 光譜分析法是指在光（或其它能量）的作用下，通過測量物質產(chǎn)生的發(fā)射光、吸收光或散射光的波長(bchng)和強度來進行分析的方法。 第1頁/共106頁第二頁，共106頁。 在光譜在光譜(gungp)(gungp)分析中，依據(jù)物質對光的選擇性吸收而建立起來的分析方法稱為吸光光度法分析中，依據(jù)物質對光的選擇性吸收而建立起來的分析方法稱為吸光光度法, ,主要有主要有: : 紅外吸收光譜紅外吸收光譜(gungp)(gungp)：分子

2、振動光譜：分子振動光譜(gungp)(gungp)，吸收光波長范圍，吸收光波長范圍2.52.51000 1000 m ,m ,主要用于有機化合物結構鑒定。主要用于有機化合物結構鑒定。 紫外吸收光譜紫外吸收光譜(gungp)(gungp)：電子躍遷光譜：電子躍遷光譜(gungp)(gungp)，吸收光波長范圍，吸收光波長范圍200200400 nm400 nm（近紫外區(qū)）（近紫外區(qū)） ，可用于結構鑒定和定量分析。，可用于結構鑒定和定量分析。 可見吸收光譜可見吸收光譜(gungp)(gungp)：電子躍遷光譜：電子躍遷光譜(gungp)(gungp)，吸收光波長范圍，吸收光波長范圍40040075

3、0 nm 750 nm ，主要用于有色物質的定量分析。，主要用于有色物質的定量分析。 本章主要講授紫外可見吸光光度法。本章主要講授紫外可見吸光光度法。第2頁/共106頁第三頁，共106頁。1 1光的基本性質光的基本性質(xngzh)(xngzh) 光是一種電磁波，具有波粒二象性。光的光是一種電磁波，具有波粒二象性。光的波動性可用波長波動性可用波長、頻率、頻率、光速、光速c c、波、波數(shù)（數(shù)（cm-1cm-1）等參數(shù)來描述：）等參數(shù)來描述： = c = c ； 波數(shù)波數(shù) = 1/ = 1/ = = /c/c 光是由光子流組成，光子的能量：光是由光子流組成，光子的能量： E = h E = h =

4、 h c / = h c / （PlanckPlanck常數(shù)：常數(shù)：h=6.626 h=6.626 10 -34 J 10 -34 J S ) S )第3頁/共106頁第四頁，共106頁。第4頁/共106頁第五頁，共106頁。E = E2 - E1 = h ：量子化 ；選擇性吸收吸收曲線與最大吸收波長(bchng) max用不同波長(bchng)的單色光照射，測吸光度光的互補光的互補(h b)：藍：藍 黃黃M + 熱M + 熒光或磷光M + h M *基態(tài)基態(tài) 激發(fā)激發(fā)態(tài)態(tài)E1 （E） E2第5頁/共106頁第六頁，共106頁。同一種物質對不同波長同一種物質對不同波長(bchng)(bchng

5、)光的吸光度不同。光的吸光度不同。吸光度最大處對應的波長吸光度最大處對應的波長(bchng)(bchng)稱為最大吸收波長稱為最大吸收波長(bchng)max(bchng)max不同濃度的同一種物質，不同濃度的同一種物質，其吸收曲線形狀相似其吸收曲線形狀相似maxmax不不變。而對于不同物質，它們變。而對于不同物質，它們的吸收曲線形狀和的吸收曲線形狀和maxmax則不則不同。同。第6頁/共106頁第七頁，共106頁。第7頁/共106頁第八頁，共106頁。物質分子內部三種運動形式：物質分子內部三種運動形式： 1. 1.電子電子(dinz)(dinz)相對于原子核的運動，相對于原子核的運動， 2.

6、 2.原子核在其平衡位置附近的相對振動原子核在其平衡位置附近的相對振動 3. 3.分子本身繞其重心的轉動。分子本身繞其重心的轉動。第8頁/共106頁第九頁，共106頁。即即e+e+v+v+r r evr evr 第9頁/共106頁第十頁，共106頁。 電子能級電子能級(nngj)(nngj)間躍遷的同時間躍遷的同時，總伴隨有振動和轉動能級，總伴隨有振動和轉動能級(nngj)(nngj)間的躍遷。即電子光譜中總包含有振間的躍遷。即電子光譜中總包含有振動能級動能級(nngj)(nngj)和轉動能級和轉動能級(nngj)(nngj)間躍遷產(chǎn)生的若干譜線而呈現(xiàn)寬譜帶間躍遷產(chǎn)生的若干譜線而呈現(xiàn)寬譜帶。第

7、10頁/共106頁第十一頁，共106頁。1（1 1） 轉動能級間的能量差轉動能級間的能量差rr：0.0050.0050.050eV0.050eV，躍遷產(chǎn)生吸收光譜，躍遷產(chǎn)生吸收光譜(gungp)(gungp)位于遠紅外區(qū)位于遠紅外區(qū)。遠紅外光譜。遠紅外光譜(gungp)(gungp)或分子轉動光譜或分子轉動光譜(gungp)(gungp)；1（2 2）振動能級的能量差）振動能級的能量差vv約為：約為：0.050.05eVeV，躍遷產(chǎn)生的吸收光譜躍遷產(chǎn)生的吸收光譜(gungp)(gungp)位于紅外區(qū)，紅外光譜位于紅外區(qū)，紅外光譜(gungp)(gungp)或分子振動光譜或分子振動光譜(gung

8、p)(gungp)；1（3 3）電子能級的能量差）電子能級的能量差ee較大較大1 120eV20eV。電子。電子躍遷產(chǎn)生的吸收光譜躍遷產(chǎn)生的吸收光譜(gungp)(gungp)在紫外在紫外可見光區(qū)，紫可見光區(qū)，紫外外可見光譜可見光譜(gungp)(gungp)或分子的電子光譜或分子的電子光譜(gungp)(gungp)。第11頁/共106頁第十二頁，共106頁。1（4 4）吸收光譜的波長分布）吸收光譜的波長分布(fnb)(fnb)是由產(chǎn)生譜帶是由產(chǎn)生譜帶的躍遷能級間的能量差所決定，反映了分子內部能的躍遷能級間的能量差所決定，反映了分子內部能級分布級分布(fnb)(fnb)狀況，是物質定性的依據(jù)

9、。狀況，是物質定性的依據(jù)。1（5 5）吸收譜帶的強度與分子偶極矩變化、躍遷）吸收譜帶的強度與分子偶極矩變化、躍遷幾率有關，也提供分子結構的信息。通常將在最大幾率有關，也提供分子結構的信息。通常將在最大吸收波長處測得的摩爾吸光系數(shù)吸收波長處測得的摩爾吸光系數(shù)maxmax也作為定性的也作為定性的依據(jù)。不同物質的依據(jù)。不同物質的maxmax有時可能相同，但有時可能相同，但maxmax不不一定相同；一定相同；1（6 6）吸收譜帶強度與該物質分子吸收的光子數(shù)）吸收譜帶強度與該物質分子吸收的光子數(shù)成正比，定量分析的依據(jù)。成正比，定量分析的依據(jù)。第12頁/共106頁第十三頁，共106頁。1 1紫外紫外可見吸

10、收光譜可見吸收光譜(x shu un p)(x shu un p) 有機化合物的紫外有機化合物的紫外可見吸收光譜可見吸收光譜(x shu un p)(x shu un p)，是其分子中外層價電子躍遷的結果（三種）：，是其分子中外層價電子躍遷的結果（三種）：電子、電子、電子、電子、n n電子。電子。分子軌道理論：一個成鍵軌道必定有一個相應的反鍵軌道。通常分子軌道理論：一個成鍵軌道必定有一個相應的反鍵軌道。通常(tngchng)(tngchng)外層電子均處于分子軌道的基態(tài)，即成鍵軌道或非鍵軌道上。外層電子均處于分子軌道的基態(tài)，即成鍵軌道或非鍵軌道上。 當外層電子吸收紫外或可見輻射后，就從基態(tài)向激

11、發(fā)態(tài)當外層電子吸收紫外或可見輻射后，就從基態(tài)向激發(fā)態(tài)( (反鍵軌道反鍵軌道) )躍遷。主要有四種躍遷所需能量躍遷。主要有四種躍遷所需能量大小順序為：大小順序為：n n n n 第13頁/共106頁第十四頁，共106頁。 所需能量最大，電子只有吸收(xshu)遠紫外光的能量才能發(fā)生躍遷。飽和烷烴的分子吸收(xshu)光譜出現(xiàn)在遠紫外區(qū)(吸收(xshu)波長105 105 ： 超高靈敏超高靈敏(ln mn)(ln mn)； =(6 =(61010）104 104 ： 高靈敏高靈敏(ln mn)(ln mn)； 2 2104 104 ： 不靈敏不靈敏(ln mn)(ln mn)。在數(shù)值上等于濃度為在

12、數(shù)值上等于濃度為1mol/L1mol/L、液層厚度為、液層厚度為1cm1cm時該溶液時該溶液在某一波長下的吸光度。在某一波長下的吸光度。第47頁/共106頁第四十八頁，共106頁。 標準曲線法測定未知溶液的濃度時，發(fā)現(xiàn)：標準曲線常發(fā)生彎曲（尤其當溶液濃度較高時），這種現(xiàn)象稱為對朗伯比耳定律的偏離。 引起這種偏離的因素（兩大類）：一類是物理性因素，即儀器(yq)的非理想引起的；另一類是化學性因素。第48頁/共106頁第四十九頁，共106頁。非單色光、雜散光、非平行入射非單色光、雜散光、非平行入射光都會引起對朗伯光都會引起對朗伯比耳定律的比耳定律的偏離，最主要的是非單色光作為偏離，最主要的是非單色

13、光作為入射光引起的偏離。入射光引起的偏離。第49頁/共106頁第五十頁，共106頁。 假設由波長為1和2的兩單色光組成(z chn)的入射光通過濃度為c的溶液，則： 1lg（o1 /t1 ）1bc 2lg(o2 /t2 ）2bc故： t1 o1101bc ； t2 o2102bc式中o1、o2分別為1、2 的入射光強度； t1、t2分別為1、2 的透射光強度； 1、2分別為1、2的摩爾吸光系數(shù)；第50頁/共106頁第五十一頁，共106頁。第51頁/共106頁第五十二頁，共106頁。 A A總總 =A1 + lg2 - lg(1 =A1 + lg2 - lg(11010bc ) bc ) = 0

14、 = 0； 即：即：1=2 =1=2 = 則：則： A A總總 lglg（o/o/t t）bcbc 0 0 若若 0 0 ；即；即21 20,bc0, lg lg（10bc 10bc ）值隨）值隨c c值增大而增大值增大而增大，則標準曲線偏離直線向，則標準曲線偏離直線向c c軸彎曲，即負偏離軸彎曲，即負偏離；反之；反之(fnzh)(fnzh)，則向，則向A A軸彎曲，即正偏離。軸彎曲，即正偏離。 很小時，即很小時，即1212： 第52頁/共106頁第五十三頁，共106頁。定在待測物質的最大吸收波定在待測物質的最大吸收波長且吸收曲線較平坦處。長且吸收曲線較平坦處。第53頁/共106頁第五十四頁，

15、共106頁。朗朗比耳定律的假定：所有的吸光質點之間不比耳定律的假定：所有的吸光質點之間不發(fā)生相互作用；假定只有在稀溶液發(fā)生相互作用；假定只有在稀溶液(c10-(c10 c 10 2 mol/L 2 mol/L 時，吸光質時，吸光質點間可能發(fā)生締合等相互作用，直接影響了對點間可能發(fā)生締合等相互作用，直接影響了對光的吸收光的吸收(xshu)(xshu)。故：朗伯故：朗伯比耳定律只適用于稀溶液比耳定律只適用于稀溶液 第54頁/共106頁第五十五頁，共106頁。不相同。故：此時溶液不相同。故：此時溶液pH pH 對測定對測定有重要影響。有重要影響。第55頁/共106頁第五十六頁，共106頁。第二節(jié)第二

16、節(jié) 紫外紫外可見可見(kjin)(kjin)分光分光光度計光度計第56頁/共106頁第五十七頁，共106頁。儀器儀器(yq)(yq)第57頁/共106頁第五十八頁，共106頁。第58頁/共106頁第五十九頁，共106頁。光源光源(gungyun)單色器單色器樣品樣品(yngpn)室室檢測器檢測器顯示顯示1. 1. 光源光源 在整個紫外光區(qū)或可見光譜區(qū)可以發(fā)射連續(xù)光譜，具有足夠的輻射強度、較好的穩(wěn)定性、較長的使用壽命。在整個紫外光區(qū)或可見光譜區(qū)可以發(fā)射連續(xù)光譜，具有足夠的輻射強度、較好的穩(wěn)定性、較長的使用壽命。 可見光區(qū)：鎢燈作為光源，其輻射波長范圍在可見光區(qū)：鎢燈作為光源，其輻射波長范圍在32

17、03202500 2500 nmnm。 紫外區(qū)：氫、氘燈。發(fā)射紫外區(qū)：氫、氘燈。發(fā)射185185400 400 nmnm的連續(xù)光譜。的連續(xù)光譜。（動畫動畫）第59頁/共106頁第六十頁，共106頁。 將光源發(fā)射的復合光分解成單色光并可從中選出一任(yrn) 波長單色光的光學系統(tǒng)。 入射狹縫：光源的光由此進入單色器； 準光裝置：透鏡或返射鏡使入射光成為平行光束； 色散元件：將復合光分解成單色光；棱鏡或光柵；聚焦裝置聚焦裝置(zhungzh)(zhungzh)：透鏡或凹面反射鏡，將分光后所得單色光聚焦至出射狹縫；：透鏡或凹面反射鏡，將分光后所得單色光聚焦至出射狹縫；出射狹縫。出射狹縫。第60頁/共

18、106頁第六十一頁，共106頁。 樣品室放置各種類型的吸收池（比色皿）和相應的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池兩種。在紫外區(qū)須采用石英池，可見區(qū)一般用玻璃池。4. 檢測器 利用光電效應將透過(tu u)吸收池的光信號變成可測的電信號，常用的有光電池、光電管或光電倍增管。5. 5. 結果顯示記錄系統(tǒng)結果顯示記錄系統(tǒng)(xtng)(xtng) 檢流計、數(shù)字顯示、檢流計、數(shù)字顯示、微機進行儀器自動控制和微機進行儀器自動控制和結果處理。結果處理。第61頁/共106頁第六十二頁，共106頁。1.1.單光束：簡單，價廉，適于在給定波長單光束：簡單，價廉，適于在給定波長處測量吸光度或透光度，一般不能作全波

19、處測量吸光度或透光度，一般不能作全波段光譜掃描，要求光源和檢測器具有很高段光譜掃描，要求光源和檢測器具有很高的穩(wěn)定性。的穩(wěn)定性。2.2.雙光束：自動記錄，快速雙光束：自動記錄，快速(kui s)(kui s)全波全波段掃描?？上庠床环€(wěn)定、檢測器靈敏段掃描?？上庠床环€(wěn)定、檢測器靈敏度變化等因素的影響，特別適合于結構分度變化等因素的影響，特別適合于結構分析。儀器復雜，價格較高。析。儀器復雜，價格較高。第62頁/共106頁第六十三頁，共106頁。第63頁/共106頁第六十四頁，共106頁。第64頁/共106頁第六十五頁，共106頁。第三節(jié)第三節(jié) 顯色與測量條件顯色與測量條件(tiojin)的

20、選擇的選擇第65頁/共106頁第六十六頁，共106頁。1.1.選擇顯色反應時，應考慮的因素選擇顯色反應時，應考慮的因素(yn (yn s)s)： 靈敏度高、選擇性高、生成物穩(wěn)定、靈敏度高、選擇性高、生成物穩(wěn)定、顯色劑在測定波長處無明顯吸收，兩種有顯色劑在測定波長處無明顯吸收，兩種有色物最大吸收波長之差：色物最大吸收波長之差：“對比度對比度”，要，要求求 60nm 60nm。第66頁/共106頁第六十七頁，共106頁。第67頁/共106頁第六十八頁，共106頁。第68頁/共106頁第六十九頁，共106頁。無機顯色劑：無機顯色劑： 硫氰酸鹽、鉬酸銨、過氧化氫硫氰酸鹽、鉬酸銨、過氧化氫(u (u y

21、n hu qn)yn hu qn)等幾種。等幾種。有機顯色劑：種類繁多有機顯色劑：種類繁多 偶氮類顯色劑：本身是有色物質，生成偶氮類顯色劑：本身是有色物質，生成配合物后，顏色發(fā)生明顯變化；具有性質穩(wěn)配合物后，顏色發(fā)生明顯變化；具有性質穩(wěn)定、顯色反應靈敏度高、選擇性好、對比度定、顯色反應靈敏度高、選擇性好、對比度大等優(yōu)點，應用最廣泛。偶氮胂大等優(yōu)點，應用最廣泛。偶氮胂、PARPAR等。等。 第69頁/共106頁第七十頁，共106頁。第70頁/共106頁第七十一頁，共106頁。1.1.顯色劑用量顯色劑用量 吸光度吸光度(gungd)A(gungd)A與顯色劑用量與顯色劑用量CRCR的關系的關系會出

22、現(xiàn)如圖所示的幾種情況。選擇曲線變化會出現(xiàn)如圖所示的幾種情況。選擇曲線變化平坦處。平坦處。第71頁/共106頁第七十二頁，共106頁。較大較大一般盡量采用水相測定一般盡量采用水相測定第72頁/共106頁第七十三頁，共106頁。v1. 1.加入掩蔽劑：加入掩蔽劑：v選擇掩蔽劑的原則是：選擇掩蔽劑的原則是：v 掩蔽劑不與待測組分反應掩蔽劑不與待測組分反應(fnyng)(fnyng)；v 掩蔽劑本身及掩蔽劑與干擾組分的掩蔽劑本身及掩蔽劑與干擾組分的反應反應(fnyng)(fnyng)產(chǎn)物不干擾待測組分的產(chǎn)物不干擾待測組分的測定。測定。 第73頁/共106頁第七十四頁，共106頁。第74頁/共106頁第

23、七十五頁，共106頁。第75頁/共106頁第七十六頁，共106頁。1.1.選擇適當?shù)娜肷洳ㄩL選擇適當?shù)娜肷洳ㄩL 一般應該選擇一般應該選擇maxmax為入射光波長。但如為入射光波長。但如果果maxmax處有共存組分處有共存組分(zfn)(zfn)干擾時，則應考干擾時，則應考慮選擇靈敏度稍低但能避免干擾的入射光波長。慮選擇靈敏度稍低但能避免干擾的入射光波長。第76頁/共106頁第七十七頁，共106頁。為什么需要使用參比溶液？為什么需要使用參比溶液？ 測得的的吸光度真正反映測得的的吸光度真正反映(fnyng)(fnyng)待測待測溶液吸光強度。溶液吸光強度。參比溶液的選擇一般遵循以下原則：參比溶液的

24、選擇一般遵循以下原則： 若僅待測組分與顯色劑反應產(chǎn)物在測定若僅待測組分與顯色劑反應產(chǎn)物在測定波長處有吸收，其它所加試劑均無吸收，用波長處有吸收，其它所加試劑均無吸收，用純溶劑（水純溶劑（水) )作參比溶液；作參比溶液； 第77頁/共106頁第七十八頁，共106頁。第78頁/共106頁第七十九頁，共106頁。 不同的透光度讀數(shù)不同的透光度讀數(shù)(dsh)(dsh)，產(chǎn)生的誤差大小不，產(chǎn)生的誤差大小不同：同： lgT=bclgT=bc微分：微分：dlgTdlgT0.434dlnT= - 0.434T-1 dT=b 0.434dlnT= - 0.434T-1 dT=b dcdc兩式相除得：兩式相除得：

25、 dc/c= dc/c= （ 0.434 / TlgT 0.434 / TlgT ）dT dT 以有限值表示可得：以有限值表示可得： c/c= c/c=（0.434/TlgT0.434/TlgT）T T 第79頁/共106頁第八十頁，共106頁。）不僅與儀）不僅與儀第80頁/共106頁第八十一頁，共106頁。設：設：T=1%T=1%，則可繪出溶液，則可繪出溶液(rngy)(rngy)濃度相濃度相對誤差對誤差c/cc/c與其透光度與其透光度T T 的關系曲線。的關系曲線。如圖所示：如圖所示：當：當：T =1%T =1%，T T在在20%20%65%65%之間時，濃度相之間時，濃度相對誤差較小，最

26、佳讀數(shù)范圍。對誤差較小，最佳讀數(shù)范圍。 第81頁/共106頁第八十二頁，共106頁。6565( (吸吸 可求出濃度可求出濃度(nngd)(nngd)相對誤差最小時的相對誤差最小時的透光度透光度TminTmin為：為： Tmin Tmin36.8%, Amin36.8%, Amin0.4340.434第82頁/共106頁第八十三頁，共106頁。1.1.合成新的高靈敏度有機顯色劑合成新的高靈敏度有機顯色劑2.2.采用分離富集和測定相結合采用分離富集和測定相結合3.3.采用三元采用三元( (多元多元) )配合物顯色體系配合物顯色體系 由一個中心金屬離子由一個中心金屬離子(lz)(lz)與兩種與兩種(

27、 (或兩或兩種以上種以上) )不同配位體形成的配合物，稱為三元不同配位體形成的配合物，稱為三元( (多元多元) )配合物。配合物。 第83頁/共106頁第八十四頁，共106頁。第84頁/共106頁第八十五頁，共106頁。第85頁/共106頁第八十六頁，共106頁。第四節(jié)第四節(jié) 分光分光(fn un)(fn un)光度測定方光度測定方法法第86頁/共106頁第八十七頁，共106頁。1.1.單組分的測定單組分的測定 通常采用通常采用 A-C A-C 標準曲線標準曲線法定量測定。法定量測定。2.2.多組分的同時測定多組分的同時測定 若各組分的吸收若各組分的吸收(xshu)(xshu)曲線互不重疊，則

28、曲線互不重疊，則可在各自最大吸收可在各自最大吸收(xshu)(xshu)波長處分別進行測定。這本波長處分別進行測定。這本質上與單組分測定沒有區(qū)別。質上與單組分測定沒有區(qū)別。 第87頁/共106頁第八十八頁，共106頁。第88頁/共106頁第八十九頁，共106頁。 普通分光光度法一般只適于測定微量組分，當待測組分含量較高時，將產(chǎn)生較大(jio d)的誤差。需采用示差法。 即提高入射光強度，并采用濃度稍低于待測溶液濃度的標準溶液作參比溶液。第89頁/共106頁第九十頁，共106頁。第90頁/共106頁第九十一頁，共106頁。 x x s =b(cx s =b(cx cs cs ）=bc=bc 測得

29、的吸光度相當于普通法中待測溶液與標準溶液的吸光度之差測得的吸光度相當于普通法中待測溶液與標準溶液的吸光度之差。 示差法測得的吸光度與示差法測得的吸光度與cc呈直線呈直線(zhxin)(zhxin)關系。由標準曲線上查得相應的關系。由標準曲線上查得相應的cc值，則待測溶液濃度值，則待測溶液濃度cx cx ： cx = cs + c cx = cs + c 第91頁/共106頁第九十二頁，共106頁。普通法：普通法： cs cs的的T=10%T=10%；cxcx的的T=5%T=5%示差法：示差法： cs cs 做參比，調做參比，調T=100%T=100%則：則： cx cx的的T=50% T=50

30、% ；標尺；標尺(bioch)(bioch)擴展擴展1010倍倍第92頁/共106頁第九十三頁，共106頁。 不需空白溶液作參比；但需要兩個單色器獲得兩束單色光(1和2)；以參比波長1處的吸光度A1作為參比，來消除干擾。 在分析渾濁(hnzhu)或背景吸收較大的復雜試樣時顯示出很大的優(yōu)越性。靈敏度、選擇性、測量精密度等方面都比單波長法有所提高。 第93頁/共106頁第九十四頁，共106頁。第94頁/共106頁第九十五頁，共106頁。 關鍵問題是測量波長關鍵問題是測量波長22和參比波長和參比波長11的選的選擇與組合。擇與組合。 以兩組分以兩組分x x和和y y的雙波長法測定為例：的雙波長法測定為例： 設：設：x x為待測組分，為待測組分，y y為干擾組分，二者的吸為干擾組分，二者的吸光度差分別為光度差分別為 x x和和y y， 則該體系則該體系(tx)(tx)的總吸光度差的總吸光度差x+yx+y為：為： x+y = x+y = x + x + y y 如何選擇波長如何選擇波長1 1 、22有一定的要求。有一定的要求。第95頁/共106頁第九十六頁，共106頁。第96頁/共106頁第九十七頁，共106頁。 選定的波長1和2處干擾組分應具有相同吸光度， 即：Ay = y2 y1 = 0故： x+y = x=(x2x1)bcx 此時