魚(yú)類毒性實(shí)驗(yàn)論文--海飛絲去屑洗發(fā)水對(duì)吉林市土生小江魚(yú)急性毒性實(shí)驗(yàn)

1、.吉林化工學(xué)院環(huán)境科學(xué)與工程專業(yè)環(huán)境生物學(xué)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn) 院系:資源與環(huán)境工程學(xué)院 班級(jí)：環(huán)境科學(xué)與工程1301 姓名：牛浩 指導(dǎo)老師：鄒繼穎 學(xué)號(hào)：1310338102海飛絲去屑洗發(fā)水對(duì)吉林市土生小江魚(yú)急性毒性實(shí)驗(yàn)（吉林，吉林，吉林化工學(xué)院，牛浩，132022）摘要：半數(shù)致死濃度，是衡量存在于水中的毒物對(duì)水生動(dòng)物和存在于空氣中的毒物對(duì)哺乳動(dòng)物乃至人類的毒性大小的重要參數(shù),毒物的致死效應(yīng)與受試動(dòng)物暴露時(shí)間有密切關(guān)系。本實(shí)驗(yàn)探究不同濃度下海飛絲去屑洗發(fā)水處理下對(duì)小江魚(yú)的毒性，并推導(dǎo)出其半致死濃度，通過(guò)觀察在不同受試物濃度處理下，魚(yú)的急性中毒表現(xiàn)和經(jīng)過(guò)，測(cè)定毒物的半數(shù)致死劑量/濃度 （LD5

2、0/LC50），并探究與魚(yú)類半致死濃度相關(guān)的因素，而且通過(guò)魚(yú)類急性毒性試驗(yàn)可以評(píng)價(jià)受試物對(duì)水生生物可能產(chǎn)生的影響，以短期暴露效應(yīng)表明受試物的毒害性。關(guān)鍵詞：半致死濃度；急性毒性試驗(yàn)；洗發(fā)水；小江魚(yú)Head and shoulders anti-dandruff shampoo for Jilin native fish acute toxicity experiment(Jilin, Jilin, Jilin institute of chemical industry, NiuHao, 131022)Abstract: median lethal concentration, is meas

3、ured in the toxins in the water to aquatic animals, and exist in mammals and human toxic poisons in the air to the size of important parameters, the lethal effect of poison has close relationship with exposure time in animals. The experiments to explore the different concentration under the head and

4、 shoulders anti-dandruff shampoo treatment for jiang fish toxicity, and deduced its lethal concentration, through the observation under the different concentration of processing subjects, fish performance and after acute poisoning, determination of poison median lethal dose (LD50 / LC50)/concentrati

5、on, and to explore the factors associated with fish half lethal concentration, and by fish acute toxicity test subjects for assessment can be possible effects to aquatic organisms, with short-term exposure effect showed that the toxicity of.Keywords: half lethal concentration, acute toxicity test, s

6、hampoo, or fish前言：我國(guó)化學(xué)品管理法規(guī)要求，魚(yú)類急性毒性實(shí)驗(yàn)是必須在中國(guó)境內(nèi)完成的測(cè)試項(xiàng)目之一1。通過(guò)實(shí)驗(yàn)可獲得化學(xué)品對(duì)中國(guó)受試生物的急性毒性數(shù)據(jù)，并為后續(xù)毒性實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)和觀察提供依據(jù)。同時(shí)，由于急性毒性實(shí)驗(yàn)時(shí)間短，易操作，實(shí)驗(yàn)條件便于控制且在國(guó)家管理體系中屬于基礎(chǔ)數(shù)據(jù)要求等特點(diǎn)，成為我國(guó)法規(guī)要求的生態(tài)毒性實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用頻次最高的一種方法2。魚(yú)類對(duì)水環(huán)境的變化反應(yīng)十分靈敏，魚(yú)類毒性試驗(yàn)在研究水污染及水環(huán)境質(zhì)量中占重要地位。當(dāng)水體中的污染物達(dá)到一定程度時(shí)，就會(huì)引起一系列中毒反應(yīng)，例如行為異常、生理功能紊亂、組織細(xì)胞病變、直至死亡。在規(guī)定的條件下，使魚(yú)接觸含不同濃度受試物的水溶液，實(shí)驗(yàn)

7、至少進(jìn)行24h，最好以96h為一個(gè)實(shí)驗(yàn)周期，在24 h、48 h、72h、96 h時(shí)記錄實(shí)驗(yàn)魚(yú)的死亡率，確定魚(yú)類死亡50時(shí)的受試物濃度，半數(shù)致死濃度用24h LC50、48h LC50、72h LC50和96h LC50表示，并記錄無(wú)死亡的最大濃度和導(dǎo)致魚(yú)類全部死亡的最小實(shí)驗(yàn)濃度。魚(yú)類急性毒性試驗(yàn)不僅用于測(cè)定化學(xué)物質(zhì)毒性強(qiáng)度、測(cè)定水體污染程度、檢查廢水處理的有效程度，也為制定水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)、評(píng)價(jià)環(huán)境質(zhì)量和管理廢水排放提供環(huán)境依。1材料方法1.1實(shí)驗(yàn)生物 OECD、ISO、USEPA 等組織機(jī)構(gòu) 關(guān) 于 化 學(xué) 品 的 毒 性 測(cè)

8、試 方 法 都 涉 及 了 魚(yú)類3-10，同時(shí)為了實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性、可比性和通用性，這些方法也推薦了一些通用的實(shí)驗(yàn)魚(yú)種，如: 斑馬 魚(yú) ( Danio rerio ) 、黑 頭 軟 口 鰷 ( Pimephalespromelas) 以及日本青鳉( Oryzias latipes) 等。斑馬魚(yú)是原國(guó)家環(huán)?？偩只瘜W(xué)品測(cè)試方法魚(yú)類急性毒性試驗(yàn)中推薦的種類，考慮到本地沒(méi)有斑馬魚(yú)市場(chǎng)以及經(jīng)濟(jì)問(wèn)題等因素，本實(shí)驗(yàn)選取魚(yú)種在吉林市火車站附近的花鳥(niǎo)市場(chǎng)所購(gòu)買(mǎi)的柳葉魚(yú)苗，體長(zhǎng)3cm±1cm。開(kāi)始試驗(yàn)前對(duì)實(shí)驗(yàn)魚(yú)先進(jìn)性了7天的馴養(yǎng)，馴養(yǎng)中及時(shí)清除受傷、體色異常、畸形、離群游泳、行動(dòng)呆滯的個(gè)體，馴養(yǎng)期間每天

9、換水，所換水為頭一天接的自來(lái)水，經(jīng)過(guò)一天的放置，其目的是用以曝氣，七天之內(nèi)魚(yú)的死亡率小魚(yú)5%。期間喂魚(yú)3次，正式實(shí)驗(yàn)前24h停止喂食，整個(gè)試驗(yàn)期間禁止喂食。1.2實(shí)驗(yàn)用水 養(yǎng)魚(yú)用水考慮到實(shí)驗(yàn)室整體設(shè)備的局限性，該次實(shí)驗(yàn)為現(xiàn)場(chǎng)接的自來(lái)水，經(jīng)過(guò)短暫的曝氣處理，其目的用于除去水中的余氯。水溫15°C左右，水質(zhì)近乎中性，試驗(yàn)水的硬度等均符合要求。因?yàn)樗x魚(yú)種為冷水魚(yú)，經(jīng)試驗(yàn)測(cè)定實(shí)驗(yàn)用水的溶解氧DO值大于5mg/L,因此實(shí)驗(yàn)用水符合該實(shí)驗(yàn)測(cè)定條件。1.3實(shí)驗(yàn)材料 2000ml燒瓶、袋裝海飛絲（水，月桂醇硫酸酯鈉，月桂醇聚醚硫酸酯鈉，氯化鈉，乙二醇二硬脂酸酯，聚二甲基硅氧烷，碳酸鋅，二苯磺酸鈉，

10、香精， 吡硫鎓鋅，椰油酰胺丙基甜菜堿，鹽酸，苯甲酸鈉，瓜兒膠羥丙基三甲基氯化銨，堿式碳酸鎂，丙二醇，香櫞果提取物，cl19140，甲基氯異噻唑啉酮 ，甲基異噻唑啉酮，cl142090）1.4實(shí)驗(yàn)方法 按最大濃度和最小濃度進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)，觀察魚(yú)苗活動(dòng)及存活情況。實(shí)驗(yàn)中采用靜水式試驗(yàn)，周期為96h，水溫控制在15°C左右，實(shí)驗(yàn)容器為2L燒杯，經(jīng)過(guò)充分洗滌燒杯，確保每個(gè)燒杯的燒杯壁無(wú)藥品等的殘留，盡量不用洗滌用品刷洗，再根據(jù)之前設(shè)置5個(gè)梯度濃度及一個(gè)對(duì)照實(shí)驗(yàn)(表1)。將試驗(yàn)海飛絲配成母液，再按比例稀釋成所需濃度。在每個(gè)容器依次加入等量海飛絲稀釋液，最后定容到2000mL，輕

11、微的攪拌溶液，使其混合均勻，再將魚(yú)苗從低濃度到高濃度逐個(gè)放入。，每升水中魚(yú)的質(zhì)量不超過(guò)2g，同時(shí)設(shè)置空白對(duì)照組，空白對(duì)照組采用不加海飛絲的自來(lái)水，經(jīng)過(guò)短時(shí)間的曝氣處理。實(shí)驗(yàn)時(shí)隨機(jī)撈取魚(yú)類個(gè)體放入燒杯中，整個(gè)放魚(yú)過(guò)程在10分鐘內(nèi)完成，8h后觀察魚(yú)的生理狀況，符合實(shí)驗(yàn)要求，繼續(xù)觀察，在24h，48h，96h分別記錄魚(yú)死亡數(shù)，用玻璃棒觸尾部無(wú)反應(yīng)即可認(rèn)為該魚(yú)已死亡，將死亡的魚(yú)苗及時(shí)撈出，5 min 不動(dòng)為死亡，觀察內(nèi)容包括試驗(yàn)魚(yú)苗的異常行動(dòng)，體表變化等。表一 實(shí)驗(yàn)用劑濃度實(shí)驗(yàn)用劑1組2組3組4組5組海飛絲洗發(fā)水（mg/l）0.2250.150.11250.090.0752數(shù)據(jù)處理 本次試驗(yàn)采用體積分

12、數(shù)表示的海飛絲濃度分別為4.5%，3%，2.25%，1.8%，1.5%，同時(shí)做一個(gè)空白對(duì)照組，空白組所用水為經(jīng)過(guò)短暫曝氣處理過(guò)的自來(lái)水，不加海飛絲。試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)結(jié)果見(jiàn)表2表二 數(shù)據(jù)記錄 時(shí)間 濃度%4.50%3%2.25%1.80%1.50%024h10101010101048h-1096h-10由表二和實(shí)驗(yàn)觀察可知，在不到24h的時(shí)間內(nèi)，5個(gè)濃度梯度燒瓶?jī)?nèi)的小魚(yú)全部死亡，而2濃度為2.25%的燒瓶中，在加入溶液30min左右出現(xiàn)第一條死魚(yú)。3數(shù)據(jù)分析 在不到24h的時(shí)間內(nèi)，5個(gè)燒杯中的魚(yú)全部死亡，類比別的組做的預(yù)實(shí)驗(yàn)，可知是由于所配制的海飛絲洗發(fā)水的濃度過(guò)高，超過(guò)了魚(yú)類的耐受濃度，導(dǎo)致魚(yú)類全部死

13、亡。經(jīng)分析認(rèn)為可能是以下原因造成了實(shí)驗(yàn)的失?。?. 在實(shí)驗(yàn)初始階段沒(méi)有做預(yù)實(shí)驗(yàn)，大致確定一定范圍濃度的海飛絲溶液，導(dǎo)致加入的溶液濃度過(guò)高，魚(yú)類全部死亡。2. 海飛絲中含有的表面活性劑會(huì)破壞魚(yú)的口腔黏膜，甚至呼吸系統(tǒng)，魚(yú)類在此溶液中，由于呼系統(tǒng)和消化系統(tǒng)被破壞，很快就死亡。3海飛絲去屑洗發(fā)水運(yùn)用吡硫鎓鋅（ZPT）成分達(dá)到去屑功能，去屑洗發(fā)水致力于讓更多的ZPT成分留在頭皮表面，再加上ZPT本身難以被水清洗，也不易被皮膚吸收，所以ZPT可以在頭皮停留較長(zhǎng)時(shí)間。而在歐盟分類中，ZPT屬于劇毒（T+)。雖然ZPT能以不超過(guò)1.5%的含量加入洗發(fā)水（普通海飛絲中ZPT有效成分含量為1%）等日用化學(xué)品，但

14、是大劑量接觸或食用可能會(huì)有致命危險(xiǎn)。2009年有研究指出，ZPT可能導(dǎo)致人類角質(zhì)形成細(xì)胞和黑素細(xì)胞的熱休克并引起DNA損傷。1999年日本茨城(Ibaraki)筑波(Tsukuba)Onogawa16-2號(hào)國(guó)家環(huán)境研究所區(qū)域環(huán)境處的實(shí)驗(yàn)證明，含ZPT的洗發(fā)水對(duì)斑馬魚(yú)和日本青鳉幼體有顯著致畸作用。所以小江魚(yú)在此高濃度的溶液中，存活時(shí)間短。4. 在實(shí)驗(yàn)中加入的洗發(fā)水濃度高，起的泡沫覆蓋在燒瓶表面和加入的洗發(fā)水中含有的物質(zhì)都阻礙了魚(yú)類的呼吸。3結(jié)論 做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，要謹(jǐn)記實(shí)驗(yàn)步驟不能遺漏任何一步，否則都可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。做有關(guān)毒性試驗(yàn)的時(shí)候，要進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，觀察0-24h，以確定大概的濃度范圍，而且通過(guò)

15、實(shí)驗(yàn)更加直觀的了解到洗發(fā)水之類的洗漱用品直接排放到江河湖泊中對(duì)水域生物造成的損害，所以要堅(jiān)持廢水的處理，保護(hù)本地生物。參考文獻(xiàn)1.國(guó)家環(huán)境保護(hù)總局 新化學(xué)物質(zhì)環(huán)境管理辦法Z.北京，20032.張京佶，殷浩文，趙華清.稀有鮈鯽對(duì)重鉻酸鉀和 3，4-二氯苯胺急性毒性研究J.2014,22(2):57-61.3 OECD Guidelines for Testing of Chemicals，203: Fish，AcuteToxicity Test S 19924 OECD Guidelines for Testing of Chemicals，204: Fish，Pro-longed Toxici

16、ty Test: 14-Day Study S.19845 OECD Guidelines for Testing of Chemicals，210: Fish，Early-Life Stage Toxicity Test S.19926 OECD Guidelines for Testing of Chemicals，212: Fish，Short-term Toxicity Test on Embryo and Sac-Fry Stages S.19987 OECD Guidelines for Testing of Chemicals，215: Fish，JuvenileGrowth Test S .20008 ISO Water quality-determination of the acute lethal toxicity ofsubstances to a freshwater fish Brachydanio rerio Hamilton-Buchanan ( Teleostei，Cyprinidae) -Part 1: Static method Part2: Semi-static method Part 3: Flow-through method Geneva:International Standardi