輸卵管阻塞動(dòng)物實(shí)驗(yàn)探究進(jìn)展

1、輸卵管阻塞動(dòng)物實(shí)驗(yàn)探究進(jìn)展摘要：輸卵管阻塞的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)主要研究動(dòng)物模型 的造模方法。輸卵管阻塞的病因病機(jī)做了簡(jiǎn)單的介紹。除研 究造模方法外，對(duì)動(dòng)物模型開(kāi)展了評(píng)價(jià)。輸卵管阻塞動(dòng)物 實(shí)驗(yàn)的研究現(xiàn)狀及方向做了概述。關(guān)鍵詞：輸卵管阻塞；動(dòng)物實(shí)驗(yàn)；綜述輸卵管阻塞(fallopian tube obstruction)是由于輸 卵管或盆腔腹膜炎癥所致。當(dāng)輸卵管由于淋球菌、結(jié)核菌、 衣原體、支原體感染或其它細(xì)菌感染，使輸卵管發(fā)炎時(shí)，可 破壞輸卵管內(nèi)膜上皮組織，使輸卵管閉塞，炎癥可以使輸卵 管粘膜破壞而形成瘢痕，引起管腔狹窄或阻塞。精子與卵子 無(wú)法在通道相遇，引起不孕。輸卵管阻塞性不孕癥是臨床常 見(jiàn)病，據(jù)統(tǒng)計(jì)，

2、因輸卵管阻塞所致的不孕癥約占整個(gè)不孕癥 人群的30%40% o對(duì)于輸卵管性阻塞性不孕癥，古代醫(yī) 籍中尚無(wú)明確的闡述，其癥狀可散見(jiàn)于”無(wú)子”、”斷 緒”，”帶下"、”癥痕”、”小腹痛”、”月經(jīng)不調(diào)”等 篇章中。1病因病理1. 1西醫(yī)病因病理1.1.1病因淋球菌主要侵犯粘膜，且以泌尿生殖系統(tǒng)粘 膜為主，有研究指出，輸卵管粘膜為淋球菌的高度特異性受 體2。一旦感染，將會(huì)對(duì)輸卵管粘膜造成嚴(yán)重?fù)p傷。國(guó)內(nèi) 學(xué)者對(duì)大白兔感染解脈支原體后的輸卵管進(jìn)行病理分析，發(fā) 現(xiàn)輸卵管粘膜層上皮細(xì)胞出現(xiàn)輕度腫脹，粘膜下層炎性細(xì)胞 浸潤(rùn)電鏡下可見(jiàn)支原體粘附于輸卵管粘膜上皮細(xì)胞上，同 時(shí)，輸卵管表面的纖毛出現(xiàn)粘連、倒

3、狀，微絨毛稀少、甚至 脫落，纖毛細(xì)胞核膜欠完整，胞漿內(nèi)出現(xiàn)大量大小不等的空 泡。提示支原體到達(dá)輸卵管后可致輸卵管粘膜上皮的損傷 3 o沙眼衣原體感染可導(dǎo)致輸卵管纖毛上皮損傷，且沙眼 衣原體熱休克蛋白誘導(dǎo)人體產(chǎn)生抗體，引起遲法變態(tài)反應(yīng)纖 毛上皮損傷，引起輸卵管粘連、阻塞和積水，發(fā)生不可逆性 損害4。隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展，輸卵管通液術(shù)、輸卵管通 氣術(shù)、腹腔鏡探查術(shù)、宮腹腔鏡聯(lián)合術(shù)、選擇性子宮輸卵管 造影術(shù)、輸卵管介入再通術(shù)及輔助生育術(shù)等多種現(xiàn)代技術(shù)運(yùn) 用于輸卵管阻塞性不孕癥的治療領(lǐng)域，針對(duì)輸卵管腔內(nèi)粘連 梗阻的局部治療有了豐富的發(fā)展。1. 1.2病理改變其病理變化以慢性間質(zhì)部輸卵管炎為 主，此外，還

4、有峽部結(jié)節(jié)性輸卵管炎、輸卵管積水、慢性輸 卵管積膿等病理改變。感染后的輸卵管內(nèi)膜腫脹、間質(zhì)充血、 水腫大量中性粒細(xì)胞滲出、彌漫性浸潤(rùn)、粘膜上皮壞死脫落 等病理變化，造成管腔粘連閉塞；因輸卵管傘端粘連，管腔 滲出物排出障礙，儲(chǔ)留于內(nèi)而形成輸卵管積水或積膿；或因 結(jié)核導(dǎo)致輸卵管粘膜潰瘍、干酪樣壞死癱、痕組織。1.2中醫(yī)病因病機(jī)中醫(yī)認(rèn)為”任主胞胎”，”任脈通, 太沖脈盛，月事以時(shí)下，故有子”。陳修園在女科要旨種 子篇指出：”婦人無(wú)子，皆經(jīng)水不調(diào)，經(jīng)水所以不調(diào)者， 皆由內(nèi)有七情之傷，外有六淫之感，或氣血偏勝，陰陽(yáng)相乘 所致?！蹦I氣不足，痰濕內(nèi)生，濕熱邪毒內(nèi)侵，情志失調(diào)， 均可致沖任失調(diào)，氣機(jī)不利，而致

5、癖血內(nèi)停，癖濕互結(jié)，痹 阻胞宮，兩精相隔而無(wú)子。中醫(yī)認(rèn)為，瘀積是導(dǎo)致本病的主 要原因。輸卵管阻塞不孕癥的病因病機(jī)為外邪內(nèi)傷導(dǎo)致痰 濁、瘀血等病理產(chǎn)物出現(xiàn)，并做為新的致病因素，互相膠結(jié), 相兼為病，癖阻胞脈胞絡(luò)導(dǎo)致不孕。清代陳士鐸在石室祕(mì) 錄中提到：”任督之間，倘有疝痕之證，則精不能施，因 外有所障也”。傅青主女科種子也說(shuō)：”窟痕礙胞胎 而外障，則胞胎必縮于廟癮之內(nèi)，往往經(jīng)施而不能受。”而 輸卵管炎性不孕患者多有輸卵管的扭曲或與其它組織粘連 形成炎性包塊，癥狀與中醫(yī)所指癥癡相符。而癥痕的形成， 多因氣滯、血瘀、痰濕所致，各種內(nèi)外因素導(dǎo)致氣血運(yùn)行不 暢，氣滯血癖，積于胞中，或令胞脈阻滯，則難以攝精

6、成孕, 故以活血化瘀、疏通胞脈為治療大法。說(shuō)明中醫(yī)理論已經(jīng)認(rèn) 識(shí)到生殖系統(tǒng)管道發(fā)生病理性阻塞，可致受精障礙。2動(dòng)物模型及評(píng)價(jià)以苯酚膠漿劑5為代表，衛(wèi)昊等6認(rèn)為，苯酚膠漿造 模的病理變化更貼近中醫(yī)”血瘀”證的診斷標(biāo)準(zhǔn)，其模型復(fù) 制方法更符合在中醫(yī)理論指導(dǎo)下研究中藥復(fù)方的思路。造模 方法是向大鼠卵巢方向注入20%苯酚0.04ml剔除子宮有炎癥 和注藥有阻力的大鼠，分層關(guān)閉腹腔。吳高媛7用0.加ol/l 鹽酸宮腔注射制作大鼠子宮內(nèi)膜炎模型及慢性輸卵管炎模 型。溶血性鏈球菌。李祥云等8用b溶血性鏈球菌制作兔 輸卵管阻塞模型。趙廣興等9采用”混合菌接種法”（大 腸桿菌、金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌，按2

7、： 1： 1用無(wú) 菌水稀釋?zhuān)瑵舛葹?0x108/ml混合菌），造模組大鼠因急性 感染死亡5只，而正常組術(shù)后無(wú)1只死亡。綜上所述，輸卵管阻塞動(dòng)物模型的制備：應(yīng)根據(jù)不同 的研究目的選擇合適的動(dòng)物模型，目前還沒(méi)有發(fā)現(xiàn)結(jié)合中 醫(yī)的病因和辨證分型來(lái)制作輸卵管阻塞的動(dòng)物模型，有待進(jìn) 一步努力制作此種動(dòng)物模型，以實(shí)現(xiàn)辨病與辨證相結(jié)合。3動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究現(xiàn)狀及方向3. 1細(xì)胞因子3. 1. 1腫瘤壞死因子（tnf-a）參與輸卵管炎癥反應(yīng) manimtim等10發(fā)現(xiàn)，人tnf-a以劑量依賴(lài)方式損傷輸卵管 粘膜細(xì)胞，阻斷tnf-a的產(chǎn)生可減輕輸卵管粘膜細(xì)胞的損傷 程度，因而提出輸卵管炎中的輸卵管損傷部分由tnf-a介

8、導(dǎo)。 其作用機(jī)制可能為tnf-a的細(xì)胞毒性作用及誘導(dǎo)炎性細(xì)胞釋 放毒性物質(zhì)的作用，從而刺激成纖維細(xì)胞增生，促進(jìn)膠原酶 釋放等作用參與組織損傷、炎癥纖維增生過(guò)程，造成輸卵管狹窄、阻塞等。有關(guān)研究發(fā)現(xiàn)tnf-a與ct、uu感染所致的 輸卵管傷有關(guān)。uu感染可誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞等免疫細(xì) 胞產(chǎn)生tnf-a, tnf-a升高與輸卵管組織損傷有關(guān)。而ct 感染時(shí)輸卵管上皮細(xì)胞首先釋放tnf-a,再激活局部單核細(xì) 胞、巨噬細(xì)胞產(chǎn)生更多的tnf-a o jendro mc等11研究表 明被衣原體感染的巨噬細(xì)胞可以通過(guò)細(xì)胞間接觸或者體液 因子來(lái)誘導(dǎo)t細(xì)胞的凋亡，從而逃逸t細(xì)胞的殺傷作用，有 利于沙眼衣原體在

9、細(xì)胞內(nèi)生存，建立持續(xù)性感染，tnf-a產(chǎn) 生增多，對(duì)輸卵管造成損傷更嚴(yán)重。3. 1.2白細(xì)胞介素-2 (il-2) il-2是機(jī)體免疫調(diào)節(jié)及炎癥調(diào)控的重要細(xì)胞 因子，il-2亦稱(chēng)t細(xì)胞生長(zhǎng)因子(t cell growth factor) 是促使t細(xì)胞從g1期轉(zhuǎn)至s期的關(guān)鍵性因子，主要由cd4 及th細(xì)胞產(chǎn)生，cd8 t細(xì)胞、nk細(xì)胞、lak細(xì)胞亦可產(chǎn)生 il-2o靜止的th細(xì)胞在識(shí)別apc提高的抗原后，成為誘導(dǎo) 性t細(xì)胞，繼之活化，成為效應(yīng)性th細(xì)胞，并分泌一系列 細(xì)胞因子，包括il-2。il-2是t細(xì)胞最重要的生長(zhǎng)因子， 可促使已激活的t細(xì)胞進(jìn)一步增殖分化，促使t細(xì)胞分泌b 細(xì)胞生長(zhǎng)因子和分

10、化因子。作為t淋巴細(xì)胞生長(zhǎng)因子的白細(xì) 胞介素2 (il-2 )與細(xì)胞表面的高親和力受體il-2ra(kd=10-llmol/l)結(jié)合，誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞及 巨噬細(xì)胞的增殖與分化12,提髙t細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞及 淋巴因子激活殺傷細(xì)胞的細(xì)胞毒活性，促進(jìn)干擾素的分泌， 還可誘導(dǎo)b細(xì)胞的增殖與分化13,從而提高機(jī)體的免疫功 能14 o因此，il-2在免疫調(diào)節(jié)方面具有重要意義。3. 1. 3 白細(xì)胞介素-6 (il-6) schols 等15發(fā)現(xiàn) il-6 參與全身性炎癥反應(yīng)，ulich等16研究認(rèn)為il-6可發(fā)揮一 定的抗炎作用。為抑制炎癥的發(fā)展，局部免疫系統(tǒng)可能使單 核巨噬細(xì)胞合成細(xì)胞因子能

11、力加強(qiáng)，同樣有可能使活化的單 核巨噬細(xì)胞增加，刺激肉芽纖維組織的生長(zhǎng)。在正常情況下, 它可導(dǎo)致多克隆b細(xì)胞的增殖活化產(chǎn)生免疫球蛋白，誘導(dǎo)t 細(xì)胞的合成及表達(dá)il-2和il-2r,以維持穩(wěn)定的免疫功能。 而高濃度的il-6則可明顯抑制t淋巴細(xì)胞il-2和il-2r的 合成17 o在創(chuàng)傷及感染時(shí)，il-6的水平明顯升高，可與其 它炎性細(xì)胞因子如tnf-a -起誘發(fā)全身性炎癥反應(yīng)性綜合征 (sirs),與患者的病死率有明顯關(guān)系17, 18。kassein等 19也認(rèn)為，il-6與其受體系統(tǒng)結(jié)合可促使分化成熟的b細(xì) 胞分泌抗體，促進(jìn)tc、td細(xì)胞增殖分化等生物學(xué)效應(yīng)，過(guò) 量il-6的產(chǎn)生，會(huì)導(dǎo)致過(guò)于劇

12、烈的免疫反應(yīng)，對(duì)機(jī)體造成 傷害。有研究提示17, il-6可能參與慢性炎癥自身發(fā)展的 病理生理，最終形成輸卵管等局部組織粘連、促進(jìn)肉芽纖維 組織的生長(zhǎng)。3. 2細(xì)胞凋亡bcl-2是調(diào)節(jié)凋亡基因家族的基本成員， 這一家族成員還包括 bcl-x、bax、bad、bak、bag-l> mcl-1 和at等等。bcl-2基因產(chǎn)物在人體細(xì)胞中的表達(dá)量與細(xì)胞壽 命長(zhǎng)短有關(guān)。bcl-2對(duì)正常細(xì)胞的生理作用尚不十分清楚， 可能在保護(hù)各種細(xì)胞免遭凋亡方面具有調(diào)節(jié)作用，故被稱(chēng) 為”凋亡抑制基因”。近年來(lái)對(duì)成人和胎兒非造血組織 bcl-2表達(dá)的研究提示：它可能與細(xì)胞發(fā)育、成熟、分化及 形態(tài)發(fā)生有關(guān)。bcl-2

13、保護(hù)效應(yīng)主要體現(xiàn)在線(xiàn)粒體攝入鈣的 增加和減少線(xiàn)粒體內(nèi)鈣對(duì)呼吸鏈的損害，推測(cè)可能阻斷了線(xiàn) 粒體膜轉(zhuǎn)運(yùn)孔道。盡管be2有抗凋亡的作用，但這個(gè)凋亡 調(diào)節(jié)蛋白的具體作用是復(fù)雜的。有許多學(xué)者對(duì)bcl-2基因編 碼的蛋白調(diào)節(jié)凋亡的機(jī)制進(jìn)行了探討。bcl-2是一個(gè)完整的 膜蛋白，主要位于線(xiàn)粒體外膜上。細(xì)胞色素c正常存在于線(xiàn) 粒體內(nèi)膜上，對(duì)于凋亡程序的誘發(fā)啟動(dòng)是必不可少的。細(xì)胞 色素c從線(xiàn)粒體釋放到胞質(zhì)內(nèi)影響半膚氨酸蛋白酶家族，半 膚氨酸蛋白酶家族對(duì)于凋亡啟動(dòng)有著重要的作用。凋亡細(xì)胞 的線(xiàn)粒體內(nèi)細(xì)胞色素c減少而胞漿內(nèi)細(xì)胞色素c水平則升 高。bcl-2的過(guò)分表達(dá)可以阻止細(xì)胞色素c從線(xiàn)粒體內(nèi)外流, 提示bcl-2

14、阻止凋亡的機(jī)制可能為阻止細(xì)胞色素c從線(xiàn)粒體 釋放所啟動(dòng)的凋亡過(guò)程。目前認(rèn)為bcl-2蛋白能夠直接抗自 由基氧化，維持鈣穩(wěn)態(tài)、阻止線(xiàn)粒體釋放細(xì)胞色素c,抑制 凋亡蛋白酶的激活。綜上所述，對(duì)輸卵管阻塞需作系統(tǒng)研究，應(yīng)從微循環(huán)、 血液流變學(xué)、微生物學(xué)等多方面研究而不單單是免疫系統(tǒng)。 將輸卵管阻塞的實(shí)驗(yàn)研究與臨床研究并舉，應(yīng)當(dāng)是現(xiàn)代中 醫(yī)對(duì)輸卵管阻塞研究的主要內(nèi)容之一。參考文獻(xiàn)：1張玉珍中醫(yī)婦科學(xué)m.北京：中國(guó)中醫(yī)藥出版社， 2002： 322-326.2廖慧慧.慢性輸卵管炎性不孕患者生殖道微生物特 征分析j.廣東醫(yī)學(xué)，2005, 26 (10)： 1398-1399.3張帝開(kāi)，賈繼輝，邙健全，等解脈

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