電化學(xué)發(fā)光定量檢測乙肝五項指標分析及臨床意義

1、電化學(xué)發(fā)光定量檢測乙肝五項指標分析及臨床意義孫學(xué)青 韓景銀 劉兆軍(山東省東營市人民醫(yī)院檢驗科 山東東營257091)【摘要】目的 分析電化學(xué)發(fā)光定量檢測乙肝五項指標與定性檢測結(jié)果的差異及 定量檢測的臨床意義。方法 對292份血標木分別采用elisa法定性檢測和電化 學(xué)發(fā)光法定量檢測乙肝五項指標。結(jié)果elisa法和電化學(xué)發(fā)光法分別檢出9種 和12種乙肝五項指標模式，電化學(xué)發(fā)光法hbsag、hbsab、hbeag、hbeab、hbcab 的陽性檢出率均高于elisa法(p均<0.05)。結(jié)論 電化學(xué)發(fā)光定量檢測乙肝 五項指標敏感性高于定性法并且具有良好的重復(fù)性，適合用于hbv感染的

2、早期 診斷以及臨床抗病毒藥物治療療效預(yù)測和評估。【關(guān)鍵詞】定量檢測 乙肝五項指標 臨床意義【中圖分類號】r446【文獻標識碼】a【文章編號】2095-1752 (2013) 05-0389-03electrochemiluminescenee analysis and clinical significanee of the quantitative detection of hepatitis b five indicatorssun xue-qing, han jingyin, liu zhao-jun(dongying city, shandong provinee, people

3、9;s hospital laboratory shandong dongying 257091)【abstract】objective to analyze the the electrochemiluminescenee quantitative detecti on of hepatitis b five in dicators and qualitative d iff ere nces and qua ntitative detection of the test results of clinical sign訐icance. methods 292 blood samples u

4、sing elisa the legal detection and electrochemiluminescenee quantitative detection of hepatitis b five indicators. results the elisa and eclia were detected 9 and 12 hepatitis b five indicators mode, the eclia hbsag, hbsab, hbeag, hbeab, hbcab positive were higher than the elisa method (p<0.0

5、5). conclusionelectrochemiluminescenee quantitative detection of hepatitis b five indicators more sensitive than the qualitative method with good reproducibility, and suitable for use in the early diagnosis of hbv infection and the clinical antiviral therapy predictionand assessment.【key words quant

6、itative detection hepatitis b five indicators clinicalsign ifica nee乙肝病毒(hbv)在我國以及整個亞洲地區(qū)有很高的感染率，根據(jù)世界 衛(wèi)生組織(who)的統(tǒng)計，全世界1/3的人曾感染過hbv,其中約2%-5%為慢性 感染。在我國法定報告的傳染病中，多年來乙型肝炎的發(fā)病數(shù)和發(fā)病率一直 高居前列。hbv感染人體后在組織細胞與血液中會出現(xiàn)各種類型的感染標志物, 通過對這些感染標志物的檢測分析，可以對hbv的診斷、鑒別診斷、傳染性的 評估、疾病的預(yù)后與轉(zhuǎn)歸、治療效果的評估能夠作出較為合理的分析與判斷。其 中乙肝五項指標是應(yīng)用于臨床最早

7、的乙肝標志物之一 3。1材料和方法1.1標本來源 收集2012年1月一2012年9月在我院門診和病房就診 患者血清標本292份，均抽取空腹靜脈血3ml及時分離血清，分別定性和定量檢 測乙肝五項指標。1.2試劑羅氏公司原裝進口配套試劑、定標液、質(zhì)控品用于定量法； 北京科衛(wèi)臨床診斷試劑公司生產(chǎn)的elisa法定性試劑盒及質(zhì)控品。1.3儀器 羅氏cobasgol全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)，美國bio-rad680酶標儀及1575型洗板機。1.4方法 乙肝五項指標定量的電化學(xué)發(fā)光法和定性的elisa法檢測， 均嚴格按照試劑盒各自說明書和全國臨床檢驗操作規(guī)程中的要求，分別對 292份標本檢測。1.5結(jié)果

8、判定elisa定性結(jié)果參照試劑說明書中的判定方法，電化學(xué)發(fā)光定量檢測結(jié)果以 hbsag≥lcol> hbsab≥10iu/l、hbeag≥lcol、 hbeab≤lcok hbcab≤lcol判定為陽性，反之為陰性。1.6統(tǒng)計學(xué)分析 采用spss12.0軟件統(tǒng)計分析，率的比較行x2檢驗，檢驗水準a=0.05o2結(jié)果2.1兩法乙肝五項指標模式檢出情況見表1,定性法和定量法分別檢出9 種和12種模式。表1兩法乙肝五項指標模式檢出情況注：+示陽性，示陰性2.2兩法乙肝五項指標陽性檢出率見表2,定量法乙肝五項指標陽性檢 岀率均

9、高于定性法（p均<0.05）o表2兩法乙肝五項指標陽性檢出率注：兩法陽性檢出率比較p均<0.05o3討論3.1電化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)是繼放射免疫、酶免疫、熒光免疫、化學(xué) 發(fā)光免疫以后的新一代標記免疫測定技術(shù)。它不使用放射性物質(zhì)及在靈敏度、快 速檢測、自動化等方面的綜合優(yōu)勢和潛力，已廣泛深入應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)，特別是 臨床醫(yī)學(xué)的各個領(lǐng)域中，促進和提高了臨床醫(yī)學(xué)的診斷水平。本文分析顯示乙肝 五項指標定量與定性檢測陽性率差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，并口定量法比定性法多檢 出了 3種少見模式。其原因可能是電化學(xué)發(fā)光使用的固相載體是有磁性的微粒并 且表面積大、吸附率高、標記物循環(huán)利用，發(fā)

10、光吋間延長，強度增加，使檢測靈 敏度顯著提高。另外，隨著hbv病毒新變異株的不斷出現(xiàn)，檢驗方法的不斷 改進完善，也可能導(dǎo)致乙肝五項指標模式的多樣化。eilsa定性檢測乙肝五項標 志物作為診斷hbv是否感染的依據(jù)，由于鉤狀效應(yīng)和敏感度低的原因，常造成 hbv感染的漏診，并且無法定量，不能得知其真正的濃度，無法完成hbv感染 的動態(tài)觀察以及低水平hbv感染指標的檢出。hbv血清乙肝五項指標定量檢測， 能較為準確地反映其血清中的含量，可以間接反映體內(nèi)hbv復(fù)制活躍程度，對 臨床藥物療效評價具有重要意義。3.2電化學(xué)發(fā)光定量檢測乙肝五項指標的臨床意義3.2.1 hbsag的定量檢測hbsag是hbv感

11、染最早出現(xiàn)于血循環(huán)中的標 志物，并可以長吋間高濃度存在，因此它是一個最為常用的hbv感染標志物。 在急性hbv感染的恢復(fù)期，隨著病毒的清除，大多數(shù)患者體內(nèi)hbsag在感染后 46個月清除。如hbsag持續(xù)6個月均可檢出，提示hbv慢性感染。在急性乙 肝早期能及早檢岀hbsag,確證hbv感染，縮短窗口期，并口可發(fā)現(xiàn)低濃度hbsag 攜帶者；在部分慢性乙肝患者中，由于機體缺乏對hbv包膜蛋白的免疫應(yīng)答， hbsag表達較低；高濃度的hbsag可間接提75病毒處于高復(fù)制狀態(tài)，具有較高的 傳染性6。目前的研究表明hbsag定量檢測在抗病毒治療療效預(yù)測中具有一定 的作用7。治療前hbsag定量療效的預(yù)

12、測：部分臨床研究認為，治療前hbsag 定量結(jié)果與聚乙二醇干擾素a-2a/或聯(lián)合拉米夫定治療的持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答相關(guān)。 治療過程中hbsag定量：研究認為治療過程中，早期快速的hbsag下降是聚乙 二醇干擾素a2a治療時病毒學(xué)應(yīng)答的預(yù)測指標。另外，治療過程中hbsag水 平對病毒清除也有預(yù)測價值。我國研究小組的研究也顯示，應(yīng)用聚乙二醇干擾素 a-2b治療hbeag陽性的慢性乙肝患者吋，治療12周和治療24周hbsag定量的 結(jié)果對hbeag血清學(xué)轉(zhuǎn)換具有很強的預(yù)測價值10o3.2.2 hbsab的定量檢測hbsab作為保護性抗體，其持續(xù)存在意味著 hbv的清除和乙肝的恢復(fù)。hbsab是唯一指示乙肝

13、疫苗免疫效果的血清學(xué)標志物, 其濃度越高免疫力越強，持續(xù)時間亦越長，一般認為hbsab≥10iu兒有免疫保 護作用。hbsab定量分析對乙肝疫苗免疫力的評價和高危人群預(yù)防免疫具有重要 意義，特別是在少年兒童預(yù)防乙肝方面llo3.2.3 hbeag的定量檢測hbeag陽性可作為hbv復(fù)制和傳染性高的 指標。hbeag轉(zhuǎn)陰而hbeab轉(zhuǎn)陽,稱為hbeag血清學(xué)轉(zhuǎn)換。臨床上常將hbeag 血清學(xué)轉(zhuǎn)換作為hbeag陽性患者抗病毒治療的治療終點。hbeag反映hbv的復(fù) 制狀態(tài)，較hbv dna更能反映機體對hbv的免疫狀況和治療效果的穩(wěn)定性。 hbeag定量檢測有助于預(yù)測hbeag的轉(zhuǎn)換

14、，其準確性高于hbv dna。臨床試驗 結(jié)果表明，hbeag水平低的慢性乙肝患者應(yīng)用聚乙二醇干擾素a-2a治療更易發(fā) 生hbeag血清學(xué)的轉(zhuǎn)換;hbeag高水平的患者用聚乙二醇干擾素a-2a治療24周, 僅4%發(fā)生了 hbeag血清學(xué)轉(zhuǎn)換；而產(chǎn)生hbeag血清學(xué)轉(zhuǎn)換的患者，在治療期間 hbeag水平持續(xù)降低，并在治療結(jié)束后24周內(nèi)保持了最低水平12。3.2.4 hbeab的定量檢測 定量分析hbeag和hbeab的濃度變化，可 反映病情變化和治療效果，能明確檢測hbeag向hbeab轉(zhuǎn)換的時期，既表現(xiàn)為 hbeag下降和hbeab濃度升高的過程。高濃度hbeab可提示病情好轉(zhuǎn)，而在某 些時候(

15、如肝功能指標很差)則可能與肝壞死、肝硬化、肝癌有關(guān)13。hbeag 消失后出現(xiàn)hbeab,表明病毒的復(fù)制減弱，傳染性減低，急性hbv感染趨向恢 復(fù)。無臨床癥狀的乙肝病毒攜帶者也會出現(xiàn)hbeab,但hbeab依然存在傳染性。3.2.5 hbeab的定量檢測 hbeab提示hbv既往感染。hbeab是hbv感 染后最早出現(xiàn)的抗體，在10%-20%的慢性乙肝急性發(fā)作患者中濃度也會升高到可 檢出的水平14o hbeab濃度的高低，可反映病毒感染狀態(tài)。高濃度hbeab提示 乙肝急性感染，恢復(fù)期的濃度降低。慢性乙肝呈hbeab持續(xù)高濃度狀態(tài)，而低 濃度hbeab 般為恢復(fù)期。乙型肝炎的發(fā)生、發(fā)展、療效、預(yù)

16、后是一個動態(tài)變化的過程，定量檢測 乙肝五項指標的濃度，能準確地反映乙型肝炎的臨床變化，為臨床醫(yī)師早期診斷 以及動態(tài)觀察抗病毒物治療療效預(yù)測和評估提供了依據(jù)。參考文獻i lai clratziu v,yuen mf,etal.vira hepatitis b.lancet, 2003, 362:2089-2093 韓振格，鄭中宏，黃麗麗，等不同來源抗體在hbsag中和確認試驗中的應(yīng)用j中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2001, 34 (10)： 919.3 溫洪周，黃震，束振華.乙肝“兩對半”檢驗?zāi)Ｊ阶冞w分析j分子診斷與治療 雜志，2010, 2 (4)： 263-2654 李甲芬，張靜，馬希祥.156份血標

17、本乙肝五項指標定量與定性檢測結(jié)果分析 j山東醫(yī)藥,2010, 50 (51)： 80. 李金明，張瑞常用乙型病壽性肝炎血清學(xué)標志物檢測結(jié)果報告解釋及臨床應(yīng) 用j中華檢驗醫(yī)學(xué)，2012, 35 (4)： 296-298. 瞿良，王惠瑩，李云，等乙肝血清學(xué)標志物定量檢測及其臨床意義j現(xiàn)代檢 驗醫(yī)學(xué)雜志，2007, 22 (6)： 88-89.7 lee jm,ahn sh.quantification of hbsag:basic virology for clinic practice.world gastroenterol,2011,17:283-298.8 chan hl,wong vw,t

18、ee am,etal.serum hepatitis b surface antigen quantification can iefect hepatitis b virus in the liver and predict treatment response. clin gastroenterol hepatol,2007,5:162-1463.9 moucari r,mackiewicz v,lada 0 ,etal.early serum hbsag drop:a strong predictor of sustained virological response to pegylated interferon alfa-2a in hbeag-hegative patients. hepatology,2009,49:1151-1156.10 魏來標志物定量和標準化是臨床檢測的方向j.中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2009, 32： 967-970.11 康運凱，張學(xué)東，付光宇國產(chǎn)化學(xué)發(fā)光乙肝五項定量檢測試劑盒與雅培試 劑盒對照及臨床應(yīng)用價值探