實(shí)驗(yàn)一紫外分光光度法測(cè)定苯甲酸

1、紫紫外分光光度法測(cè)定苯甲酸外分光光度法測(cè)定苯甲酸一 實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)運(yùn)用標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比法求樣品含量掌握752型紫外分光光度計(jì)的使用方法二二 實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理l在堿性條件下，苯甲酸形成苯甲酸鹽，對(duì)紫外光有選擇性吸收，其吸收光譜的最大吸收波長(zhǎng)在225nm。可采用紫外分光光度計(jì)測(cè)定物質(zhì)在紫外光區(qū)的吸收光譜并進(jìn)行定量分析。三三 實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟1.苯甲酸吸收曲線的繪制l吸取苯甲酸貯備液4.00ml，放入50ml容量瓶中，用0.01mol/L的NaOH溶液定容，搖勻得標(biāo)準(zhǔn)苯甲酸溶液S（此溶液1ml含8g苯甲酸）。l測(cè)量條件 參比液： 0.01mol/L的NaOH溶液；測(cè)量波長(zhǎng)：210、215、218、220、22

2、2、224、225、226、228、230、235、240nm。l以波長(zhǎng)為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制苯甲酸的紫外吸收曲線。l2. 標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比法測(cè)定樣品液苯甲酸的含量l取10.00ml樣品液，放入50ml容量瓶中，用0.01mol/L的NaOH溶液定容，搖勻得稀釋好的樣品液X。l在上述曲線中找出最大吸收波長(zhǎng)，以此作測(cè)定波長(zhǎng)。以0.01mol/L的NaOH溶液為參比液。在完全相同的條件下測(cè)出稀釋好的樣品液X的吸光度值。l3、按下式計(jì)算樣品液中苯甲酸的濃度：l 58AA1050CAA)ml/g(sxssxxC 四、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)與結(jié)果四、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)與結(jié)果l1.苯甲酸吸收曲線的繪制l2. 標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比法測(cè)定樣品液

3、苯甲酸的含量(nm) 210 215 218 220 222 224 225 226 228 230 235 240A As Ax Cs Cx五五、結(jié)果與討、結(jié)果與討論論l結(jié)果如何？是否符合預(yù)期？l分析失敗的原因：儀器因素？溶液因素？人為因素？環(huán)境因素？紫外分光光度計(jì)的使用方法紫外分光光度計(jì)的使用方法l1.1.打開電源，預(yù)熱打開電源，預(yù)熱2020分鐘分鐘l2.2.按按MODEMODE鍵設(shè)為吸光度方式鍵設(shè)為吸光度方式 顯示器顯示顯示器顯示“-nm,-Abs”-nm,-Abs”l3.3.設(shè)定波長(zhǎng)設(shè)定波長(zhǎng), ,如如220nm220nm 顯示器顯示顯示器顯示“220nm,-Abs”220nm,-Abs

4、”l4.4.打開樣品室蓋，將參比液比色皿和待測(cè)液比色皿放入樣打開樣品室蓋，將參比液比色皿和待測(cè)液比色皿放入樣品室蓋上樣品室蓋品室蓋上樣品室蓋l5.5.將參比液比色皿拉入光路中，按將參比液比色皿拉入光路中，按100%T100%T鍵調(diào)零鍵調(diào)零 調(diào)零完成時(shí)顯示器顯示調(diào)零完成時(shí)顯示器顯示“220nm,0.000Abs”220nm,0.000Abs”l6.6.將待測(cè)溶液拉入光路中，直接讀數(shù)將待測(cè)溶液拉入光路中，直接讀數(shù)注意：每改變波長(zhǎng)，必須重新調(diào)零注意：每改變波長(zhǎng)，必須重新調(diào)零 注意倒溶液時(shí)遠(yuǎn)離儀器，避免濺濕儀器注意倒溶液時(shí)遠(yuǎn)離儀器，避免濺濕儀器比色皿使用注意事項(xiàng)比色皿使用注意事項(xiàng) 1、拿取比色皿時(shí)，只

5、能用手指接觸毛玻璃面，避免接觸光學(xué)面，注意保護(hù)，防止摔破。2、盛裝溶液時(shí)，高度為比色皿的2/3處即可，光學(xué)面如有殘液可先用濾紙輕輕吸附，然后再用擦鏡紙擦拭。 3、 不可隨時(shí)調(diào)換參比用的比色皿和承載樣品比色皿，也就是說參比比色皿應(yīng)該固定。 4、使用比色皿時(shí), 還應(yīng)特別注意通光方向。一般比色皿的毛玻璃面上都刻有箭頭, 或在透光面上蝕刻有標(biāo)記, 以供使用者辨認(rèn)通光方向。5、不能把裝有溶液的比色皿放在儀器上以防止濺濕儀器。 6、比色皿在使用后，應(yīng)立即用水沖洗干凈，收好。實(shí)驗(yàn)課要求實(shí)驗(yàn)課要求l穿白大褂，帶筆記本記錄數(shù)據(jù)l嚴(yán)肅認(rèn)真操作實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁大聲喧嘩l實(shí)驗(yàn)前后把儀器清洗干凈并放回原位置l試劑瓶用完后放回原位置；講臺(tái)上的試劑瓶不能拿走；注意避免滴管和瓶蓋的交叉污染l桌面保持整潔，小心避免損壞儀器l每次做完實(shí)驗(yàn)簽名，值日生打掃干凈，經(jīng)老師檢查通過后才能離