《熒光葉室講解》ppt課件

1、熒光葉室講解熒光葉室講解劉美玲劉美玲基因基因 農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)部農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)部北京力高泰科技北京力高泰科技2007年年12月月根本原理根本原理熒光發(fā)射的根本原理熒光發(fā)射的根本原理1、光能：使基態(tài)、光能：使基態(tài)Chl變成激發(fā)變成激發(fā)態(tài)態(tài)2、一些電子從基、一些電子從基態(tài)躍遷至激態(tài)躍遷至激發(fā)態(tài)發(fā)態(tài)S1,S23、電子從第一激、電子從第一激發(fā)態(tài)落回基發(fā)態(tài)落回基態(tài)態(tài)熒光為什么可以反映光合表現(xiàn)？熒光為什么可以反映光合表現(xiàn)？葉綠素?zé)晒馀c光協(xié)作用葉綠素?zé)晒馀c光協(xié)作用 葉綠素?zé)晒庵饕从沉巳~綠素?zé)晒庵饕从沉薖SII的生理的生理 生化變化。生化變化。 葉綠素?zé)晒猓汗夥错戨A段的各種變化。葉綠素?zé)晒猓汗夥错戨A段的各種變化

2、。 光反響：光合電子傳送鏈，產(chǎn)生光反響：光合電子傳送鏈，產(chǎn)生ATP能量能量和和NADPH復(fù)原力，同時放出復(fù)原力，同時放出O2。 暗反響：固定暗反響：固定CO2。光合電子傳送鏈光合電子傳送鏈Z鏈鏈遠(yuǎn)紅光開放的反響中心和封鎖的反響中心開放的反響中心和封鎖的反響中心“封鎖封鎖 RC：當(dāng)反響中心的電子受體質(zhì)體醌：當(dāng)反響中心的電子受體質(zhì)體醌QA接受電子，全部處于復(fù)原形狀時，不能再接受電接受電子，全部處于復(fù)原形狀時，不能再接受電子，我們稱之為封鎖的子，我們稱之為封鎖的RC。“開放開放 RC：假設(shè)：假設(shè)QA的電子傳出，的電子傳出，RC的電子可以的電子可以完全傳送給完全傳送給QA，那么此時，那么此時RC稱為開

3、放的稱為開放的RC。 熒光參數(shù)熒光參數(shù)LI 6400光合熒光儀測定的參數(shù)直接光合熒光儀測定的參數(shù)直接測定熒光參數(shù)一測定熒光參數(shù)一F0：最小初始熒光，又稱基底熒光或暗熒光。指經(jīng)：最小初始熒光，又稱基底熒光或暗熒光。指經(jīng)過充分暗順應(yīng)的光合機(jī)構(gòu)光系統(tǒng)過充分暗順應(yīng)的光合機(jī)構(gòu)光系統(tǒng)IIPSII反響中反響中心全部開放時的葉綠素心全部開放時的葉綠素Chl熒光發(fā)射強度。熒光發(fā)射強度。Fm：最大熒光。指經(jīng)過充分暗順應(yīng)的光合機(jī)構(gòu)：最大熒光。指經(jīng)過充分暗順應(yīng)的光合機(jī)構(gòu)PSII反響中心完全封鎖時的反響中心完全封鎖時的Chl熒光發(fā)射強度。熒光發(fā)射強度。LI 6400光合熒光儀測定的參數(shù)直接光合熒光儀測定的參數(shù)直接測定熒

4、光參數(shù)二測定熒光參數(shù)二F0：光下最小熒光。在光順應(yīng)形狀下：光下最小熒光。在光順應(yīng)形狀下PSII反響中心反響中心完全開放時的完全開放時的Chl熒光發(fā)射強度。為了使照光后一熒光發(fā)射強度。為了使照光后一切的切的PSII反響中心迅速到達(dá)最大開放程度，在測反響中心迅速到達(dá)最大開放程度，在測定前先用遠(yuǎn)紅光進(jìn)展照射。定前先用遠(yuǎn)紅光進(jìn)展照射。Fm：光下最大熒光。在光順應(yīng)形狀下：光下最大熒光。在光順應(yīng)形狀下PSII反響中反響中心完全封鎖時的熒光發(fā)射強度。心完全封鎖時的熒光發(fā)射強度。Fs：穩(wěn)態(tài)熒光。又稱：穩(wěn)態(tài)熒光。又稱Ft。 LI 6400光合熒光儀測定的參數(shù)間接光合熒光儀測定的參數(shù)間接計算熒光參數(shù)一計算熒光參數(shù)

5、一Fv/Fm：光化學(xué)量子效率，指沒有蒙受任何環(huán)境脅迫：光化學(xué)量子效率，指沒有蒙受任何環(huán)境脅迫并經(jīng)過充分暗順應(yīng)葉片，其并經(jīng)過充分暗順應(yīng)葉片，其PSII最大的潛在最大的潛在光化學(xué)量子效率。普通植物恒定在光化學(xué)量子效率。普通植物恒定在0.75 0.85。 也被稱為開放的也被稱為開放的PSII反響中心的能量捕獲效率。反響中心的能量捕獲效率。Fv / Fm = Fm F0/FmFv/Fm：光下開放的：光下開放的PSII反響中心的激發(fā)能捕獲效反響中心的激發(fā)能捕獲效率。率。Fv/Fm =Fm - F0/FmFv/FmLI 6400光合熒光儀測定的參數(shù)間接光合熒光儀測定的參數(shù)間接計算熒光參數(shù)二計算熒光參數(shù)二P

6、SII：作用光存在時：作用光存在時PSII實踐的光化學(xué)量子效實踐的光化學(xué)量子效率，即率，即PSII反響中心電荷分別實踐量子效率，反響中心電荷分別實踐量子效率，反映了被用于光化學(xué)途徑激發(fā)能占進(jìn)入反映了被用于光化學(xué)途徑激發(fā)能占進(jìn)入PSII總總激發(fā)能的比例，植物光合才干的一個重要目的。激發(fā)能的比例，植物光合才干的一個重要目的。 PSII =Fm - Fs/FmETR：電子傳送速率。：電子傳送速率。ETR = PPFD PSII 0.85 0.5LI 6400光合熒光儀測定的參數(shù)間接光合熒光儀測定的參數(shù)間接計算熒光參數(shù)三計算熒光參數(shù)三qP：光化學(xué)淬滅系數(shù)。反映了：光化學(xué)淬滅系數(shù)。反映了PSII反響中心

7、中開放反響中心中開放 程程 度，度，1 qP那么反映了反響中心封鎖程度，反映了那么反映了反響中心封鎖程度，反映了QA的復(fù)的復(fù)原程度。原程度。 qP =Fm - Fs/Fm - F0NPQ：非光化學(xué)淬滅系數(shù)。反映了植物熱耗散的才干的變：非光化學(xué)淬滅系數(shù)。反映了植物熱耗散的才干的變化化,數(shù)值范圍在數(shù)值范圍在 0 n (1,2,3,4,5 )。 NPQ =Fm Fm/Fm = Fm/Fm - 1 qN：非光化學(xué)淬滅系數(shù)。與：非光化學(xué)淬滅系數(shù)。與NPQ一樣，如今運用較少。一樣，如今運用較少。數(shù)值范圍為數(shù)值范圍為0 1。 qN = (Fm Fm) / (Fm F0)熒光葉室的安裝熒光葉室的安裝運用鑷子取

8、下內(nèi)置光量子傳感器銜接線。運用鑷子取下內(nèi)置光量子傳感器銜接線。排氣管和熱偶電極。排氣管和熱偶電極。卸下四個螺絲，六個卸下四個螺絲，六個O形密封圈。形密封圈。改換上下蓋。改換上下蓋。銜接熒光葉室與分析器之間的電源銜接線。銜接熒光葉室與分析器之間的電源銜接線。銜接輔助連線。銜接輔助連線。白色密封圈的改換。白色密封圈的改換。暗順應(yīng)夾子的運用方法。暗順應(yīng)夾子的運用方法。配置軟件的安裝。配置軟件的安裝。軟件引見軟件引見標(biāo)志標(biāo)志含含 義義g行行Prss_KPa ParIn_m %Blue ParOutm%Blue藍(lán)色光化學(xué)光在內(nèi)部藍(lán)色光化學(xué)光在內(nèi)部ParIn_m中所占的百分比中所占的百分比m行行F dF/

9、dt FlrCV_% FlrEvent F熒光強度熒光強度dF/dt熒光強度變化率熒光強度變化率FlrCV_%熒光強度變異系數(shù)熒光強度變異系數(shù)FlrEvent熒光事件熒光事件n行行F0 Fm Fv/FmF0充分暗順應(yīng)條件下的最小熒光充分暗順應(yīng)條件下的最小熒光Fm充分暗順應(yīng)條件下的最大熒光充分暗順應(yīng)條件下的最大熒光Fv/Fm充分暗順應(yīng)條件下光化學(xué)量子效率充分暗順應(yīng)條件下光化學(xué)量子效率o行行Fo Fm Fv/Fm FsFo光照下的最小熒光光照下的最小熒光Fm光照下的最大熒光光照下的最大熒光Fv/Fm開放的開放的PSIIPSII反響中心的激發(fā)能捕獲效率反響中心的激發(fā)能捕獲效率Fs穩(wěn)態(tài)熒光穩(wěn)態(tài)熒光p行

10、行PhiPS2 ETR qP qNPhiPS2PSII作用光存在時作用光存在時PSIIPSII實踐的光化學(xué)量子效率實踐的光化學(xué)量子效率ETR電子傳送速率電子傳送速率qP光化學(xué)猝滅系數(shù)光化學(xué)猝滅系數(shù)qN非光化學(xué)猝滅系數(shù)非光化學(xué)猝滅系數(shù)新新增增參參數(shù)數(shù)行行介介紹紹功能行功能行F1F2F3F4F58Flr QuikPik選擇熒光設(shè)選擇熒光設(shè)置文件置文件Flr Editor編輯熒光設(shè)編輯熒光設(shè)置置Define Actinic定義作用光定義作用光Flr Adjust設(shè)置熒光設(shè)置熒光Rcrding ON/OFF記錄熒光記錄熒光9Meas is ON/OFF丈量光開丈量光開/關(guān)關(guān)Flash飽和閃光飽和閃光D

11、ark Pulse暗脈沖暗脈沖Actinic光化學(xué)光光化學(xué)光開開/關(guān)關(guān)Far Red Is ON/OFF遠(yuǎn)紅光開遠(yuǎn)紅光開/關(guān)關(guān)0Do Fo丈量最小熒丈量最小熒光光Do Fm丈量最大熒丈量最大熒光光Do Fo Fm丈量最小熒丈量最小熒光和最大熒光和最大熒光光View Fsh/Drk查看強閃光查看強閃光或暗脈沖或暗脈沖0Do Fo測定測定FoDo Fs測定測定FsDo Fs Fm測定測定Fs和和FmDoFs FmFo測定測定Fs，F(xiàn)m和和FoView Fsh/Drk查看強閃光查看強閃光或暗脈沖或暗脈沖新增功能行引見新增功能行引見根本實驗根本實驗1、丈量、丈量F0 & Fm。2、丈量、丈量F

12、0 、Fm & Fs 。3、丈量、丈量PSII、qP & qN& NPQ。4、熒光和氣體交換參數(shù)同時丈量。、熒光和氣體交換參數(shù)同時丈量。熒光丈量的根本步驟熒光丈量的根本步驟實實驗驗1實實驗驗2實驗實驗3實驗實驗1： 植物暗順應(yīng)形狀的植物暗順應(yīng)形狀的F0、Fm 、 Fv/Fm翻開一個文件翻開一個文件1 1，f1f1，輸入文件名，添加備注。，輸入文件名，添加備注。設(shè)置丈量光、飽和閃光設(shè)置丈量光、飽和閃光8 8，f2f2，保管設(shè)置。，保管設(shè)置。夾好葉片。夾好葉片。等待等待dF/dt dF/dt 絕對值絕對值 5 5或或FlrCV% 1FlrCV% 1。記錄數(shù)據(jù)按記錄數(shù)據(jù)按0

13、0，f1/f2/f3/f4f1/f2/f3/f4。查看數(shù)據(jù)查看數(shù)據(jù)1 1，f2f2。封鎖文件封鎖文件1 1，f3f3。傳輸文件同光合操作。傳輸文件同光合操作。實驗實驗2： 植物光順應(yīng)形狀的植物光順應(yīng)形狀的F0、Fm 、Fs、 Fv/Fm翻開一個文件翻開一個文件1 1，f1f1，輸入文件名，添加備注。，輸入文件名，添加備注。設(shè)置丈量光、飽和閃光和遠(yuǎn)紅光設(shè)置丈量光、飽和閃光和遠(yuǎn)紅光8 8，f2f2，保管設(shè)置。，保管設(shè)置。設(shè)置活化光強度設(shè)置活化光強度8 8，f3f3。翻開活化光翻開活化光9 9，f4f4夾好葉片。夾好葉片。等待等待dF/dt dF/dt 絕對值絕對值 5 5或或FlrCV% 1Flr

14、CV% 1。記錄數(shù)據(jù)按記錄數(shù)據(jù)按0 0，f1/f2/f3/f4f1/f2/f3/f4。查看數(shù)據(jù)查看數(shù)據(jù)1 1，f2f2。封鎖文件封鎖文件1 1，f3f3。傳輸文件同光合操作。傳輸文件同光合操作。實驗實驗3： 猝滅研討，丈量猝滅研討，丈量PSII、qP & qN& NPQ1、翻開一個文件、翻開一個文件1，f1，輸入文件名，添加備注。，輸入文件名，添加備注。2、設(shè)置丈量光、飽和閃光和遠(yuǎn)紅光、設(shè)置丈量光、飽和閃光和遠(yuǎn)紅光8，f2，保管設(shè)置。，保管設(shè)置。3、設(shè)置活化光強度、設(shè)置活化光強度8，f3。4、夾好暗順應(yīng)好的葉片。、夾好暗順應(yīng)好的葉片。5、等待、等待dF/dt 絕對值絕對值 5或

15、或FlrCV% 1。記錄數(shù)據(jù)按。記錄數(shù)據(jù)按0，f1/f2/f3/f4。6、翻開活化光、翻開活化光9，f4，等待植物順應(yīng)光環(huán)境。，等待植物順應(yīng)光環(huán)境。7、等待、等待dF/dt 絕對值絕對值 5或或FlrCV% 1。記錄數(shù)據(jù)按。記錄數(shù)據(jù)按0，f1/f2/f3/f4。8、查看數(shù)據(jù)、查看數(shù)據(jù)1，f2，封鎖文件，封鎖文件1，f3。9、傳輸文件同光合操作。、傳輸文件同光合操作。丈量光的設(shè)置丈量光的設(shè)置8，f2Intensity：1/0.8; Modulation:0.25; Filter: 1;Gain:10.飽和閃光的設(shè)置飽和閃光的設(shè)置8，f2Duration:0.8; Intensity: 7/8;

16、Blu: Nochange; Modulation: 20; Filter: 50. 遠(yuǎn)紅光的設(shè)置遠(yuǎn)紅光的設(shè)置8，f2丈量光、光化光和遠(yuǎn)紅光的設(shè)置丈量光、光化光和遠(yuǎn)紅光的設(shè)置Flr Editor 與與Flr Adjust的區(qū)別的區(qū)別 按按8,f2，進(jìn)入，進(jìn)入Flr Editor編輯熒光設(shè)置編輯熒光設(shè)置按按8,f4，進(jìn)入，進(jìn)入Flr Adjust設(shè)置熒光設(shè)置熒光區(qū)別和聯(lián)絡(luò)：區(qū)別和聯(lián)絡(luò)：第一種，修正完后，執(zhí)行；第二種，邊修正邊執(zhí)行。第一種，修正完后，執(zhí)行；第二種，邊修正邊執(zhí)行。第一種設(shè)置可以設(shè)定小數(shù)點后的數(shù)值，第二種只能第一種設(shè)置可以設(shè)定小數(shù)點后的數(shù)值，第二種只能設(shè)置設(shè)置1的倍數(shù)。的倍數(shù)。都可以設(shè)置上述三種光。都可以設(shè)置上述三種光。留意：留意： l可以先將暗順應(yīng)和光順應(yīng)的丈量程序設(shè)置好可以先將暗順應(yīng)和光順應(yīng)的丈量程序設(shè)置好8，f2，分別用獨立的名字保管；然后根據(jù)測定對